风信子软腐病病原的鉴定和杀菌剂试验

在上海生长的风信子发生软腐病的球茎中分离了菌株EP,对纯化的菌株EP进行传统方法鉴定;并进行16S rDNA序列同源性分析,结果表明EP与Erwinia carotovora subsp.carotovora 同源性达到97％,确定风信子软腐病病原为Erwinia carotovora subsp.carotovora...     

不同土样中软腐欧氏杆菌的种类和存活

从18个省、区收集的52份土样,分离到软腐欧氏杆菌(Erwinia spp.)的土样有28份。对不同地区分离到的108个菌株鉴定的结果,95个菌株是E.carotovoravar.carotovora,13个菌株是E.chrysanthemi,未发现E.Carotovora var.atroseptica。1982年田间作物收获后,选6个不同类型田块,对土壤中的软腐欧氏杆菌的数量变动进行了研究。除一块小麦—大豆两熟田未测到外,其他几块土壤中软腐欧氏杆菌的存活时间都在2个月以上。在人工接种的灭菌土中,室外自然条件下,无论是病残体或细菌悬浮液接种都可以存活4个月以上:在温室条件下(20℃左右),细菌悬浮液和病残体接种分别可以存活1和3个月以上。本文并讨论了土壤中湿度和其他微生物对于软腐欧氏杆菌存活影响的可能性。     

拮抗胡萝卜软腐欧文氏杆菌的放线菌的分离和筛选

采用平板稀释法进行了土壤中放线菌的分离,以胡萝卜软腐欧文氏杆菌(Erwinia carotovora var. carotovora)为拮抗对象,筛选拮抗放线菌。根据抑菌圈的大小,初步筛选出F10、F4、F5、F11等有较强的拮抗作用的12株放线菌。分别对这12个菌株进行发酵,根据发酵液和菌丝破碎稀释液的拮抗活性复筛。复筛结果表明,12个菌株中,发酵液的拮抗活性F11最强,F1、F9次之;菌丝体破碎稀释液的拮抗活性F12最强,F3、F11、F1、F10次之。不同菌株产生的拮抗物质在细胞内外的分布不同。     

山东莘县甜瓜细菌性软腐病病原研究

在山东省聊城市莘县采集的甜瓜病果上分离获得7个细菌菌株,接种甜瓜48 h果实发生明显腐烂,症状同田间发病果。经室内对菌体形态、染色反应、培养性状、生理生化特性以及致病性测定等项目鉴定,确认该病菌为胡萝卜软腐欧氏杆菌胡萝卜软腐致病亚种[Erwinia carotovora subsp.carotovora（Jones）Bergey et al.]。     

魔芋软腐病菌的分离鉴定及其 GFP 标记

为了解贵州魔芋软腐病的致病病原,对取自贵州台江县的魔芋软腐病病原菌进行了分离、回接和鉴定。结果表明：在分离到的16个菌株中发现1株病原菌能引起魔芋软腐病,通过16S rDNA 序列分析发现该病原菌为菊欧文氏杆菌（Erwinia chrysanthemi ）;通过化学转化法,成功获得了病原菌绿色荧光蛋白标记的工程菌株。     

君子兰细菌性软腐病病原细菌的研究

31株君子兰软腐细菌的鉴定结果,其中7株为菊欧氏杆菌(Erwinia chrysanthemi Burkholder et al.简称Ech),其表型性状与玉米致病变种(pv.zeae)相似;另外14株为胡萝卜软腐欧氏杆菌胡萝卜致病变种(Erwinia carotovora pv.carotouora Dye简称Ecc)。血清学研究表明,君子兰上的E.chrysanthem与典型的pv.zeae不起反应。人工接种试验也表明君子兰上的E.chrysatnhem与典型的pv.zeae的致病性有明显差异。     

黑龙江省水飞蓟软腐病病原菌研究初探

水飞蓟软腐病是近年流行的一种毁灭性的病害,目前对该病研究的报导不多。通过对黑龙江省水飞蓟种植区的水飞蓟病害进行调查,发现该病发生普遍,危害严重。经对水飞蓟软腐病的病原菌进行分离、纯化及初步鉴定工作,并对分离得到的菌株按照柯赫式法则进行了致病性的测定,结果表明该病原菌与白菜软腐病的病原菌标准菌株胡萝卜欧文氏菌（Erwinia carotovora subsp. Carotovora（Jones1901）Borgey etal 1923）生长特性及致病特点基本一致。     

颉颃细菌GXG-2-2的菌株鉴定及其对植物病原菌的颉颃作用

从枯草中分离筛选获得的颉颃细菌GXG-2-2被鉴定为枯草芽孢杆菌。该菌有很强的分泌胞外蛋白酶的能力。于发酵液中加入60%饱和度的（NH4）2SO4沉淀所得的蛋白粗液对多种植物病原菌有强烈的抑制作用。例如稻瘟病菌（Pyricularia grisea）、小麦赤霉病菌（Fusarium graminearum）、烟草赤星病菌（Alter-naria alternata）、大白菜软腐病菌（Erwinia carotovora subsp.carotovora）等。     

云南香蕉细菌性软腐病病原鉴定

为了明确引起云南香蕉细菌性软腐病的病原菌,为该病害防控提供基础,在植蕉区采集香蕉细菌性软腐病病害标样,对病原菌进行分离、致病性测定、寄主范围测定、形态学观察、生理生化反应及16S r DNA序列分析。结果表明:分离获得的菌株均有致病性,病原菌形态特征、寄主范围、生理生化测定结果与Erwinia chrysanthemi相符。16S r DNA序列分析表明:代表性菌株的测序结果与E.chrysanthemi(序列登录号:GU811708)的同源性达到99%以上,系统发育树分析结果与之一致,表明引起云南香蕉细菌性软腐病的病原菌为菊欧氏杆菌(E.chrysanthemi),该病害是近年来发生在云南植蕉区的一种新病害。     

云南省马蹄莲细菌性软腐病原鉴定

2005年在云南省花卉公司种植的马蹄莲上发现有软腐症状,马蹄莲最初在受害部位出现水浸状坏死,病部很快扩大,病组织开始软化、变色,病斑边缘初有明显界限,随着病势的发展界限逐渐模糊不清,然后软腐.从病株上分离得到20株菌,菌株接种于马蹄莲上,发病症状与田间自然症状一致,并从回接病株上重新分离得到此病原细菌.经16S-23S rDNA转录间隔区PCR（ITS-PCR）分析、测序及BIOLOG生理生化测定,确定该病原菌为胡萝卜软腐果胶杆菌胡萝卜亚种（Pectobacterium carotovorasubsp.carotovora,p.c.c.）和菊果胶杆菌（Pectobacterium chrysanthemi,p.ch.）两种,而主要是Pectobacterium carotovorasubsp.carotovora,p.c.c..     

郁金香软腐病病原细菌研究初报

对郁金香软腐病病原细菌进行了形态观察、致病性测定、染色反应、培养性状观察和生理生化反应。结果表明,该菌与大白菜软腐细菌的性状、特征完全相同,并能侵染大白菜、辣椒、马铃薯、洋葱等寄主。因此,引起郁金香软腐病的病原细菌是胡萝卜软腐欧文氏胡萝卜软腐致病型（Ｅｒｗｉｎｉａｃａｒｏｔｏｖｏｒａｖａｒ．ｃａｒｏｔｏｖｏｒａＤｙｅ．）。     

铁棍山药内生菌的分离及对白菜软腐菌拮抗菌的筛选

用涂布平板法从铁棍山药(Dioscoreaopposita Thunb. CV. Tiegun)中分离得到32株内生菌菌株。用抑菌圈法测定其对白菜软腐菌(Erwiniacarotovora var. carotovora)的拮抗作用,共得到11株对该病原菌有拮抗作用的菌株,占菌株总数的34.4%。其中抑菌圈直径大于或等于10mm的菌株有4株,分别是B-2、B-5、B-6和F-8,占菌株总数的12.5%,抑菌圈直径最大的可达15mm。对具有拮抗作用的菌株进行革兰氏染色和芽孢染色,结果表明:这11株菌株全为细菌,均无芽孢;革兰氏染色阳性(G+)的有4株,革兰氏染色阴性(G-)的有7株;有3株菌株为球菌,其余为杆菌。     

N-己酰高丝氨酸内酯对马铃薯生长及抗软腐病能力的影响(摘要)(英文)

[目的]研究细菌个体间通讯信号C6-HSL是否可以影响植物的生长和抗病能力。[方法]以马铃薯脱毒苗为试验材料,N-己酰高丝氨酸内酯(C6-HSL)为诱导剂研究了分别经50、100nmol/LC6-HSL处理后,马铃薯生长(包括出根率、株高、茎节数、生根数及叶片大小等的测定)、抵抗胡萝卜软腐欧文氏菌侵染(采用人工摩擦法接种)的情况,特别研究了C6-HSL对植株标志性防御酶(POD、SOD、PAL和PPO)活性和H2O2含量的影响。[结果]不同浓度的C6-HSL均能抑制马铃薯的出根率和生根数,其中50nmol/LC6-HSL抑制作用显著,经其处理过的马铃薯出根率仅为9.09%(对照为25.00%),出根数仅为4.01(对照为6.06)。但50和100nmol/LC6-HSL对株高、茎节数及叶片大小没有影响;50或100nmol/L的C6-HSL处理马铃薯茎段外植体28d后的组培苗中POD和SOD的活性显著升高,与未处理的对照相比分别高约65%和75%。C6-HSL处理马铃薯也可使其体内H2O2含量显著升高,然而,C6-HSL处理对马铃薯体内PAL和PPO的活性无显著影响。这可能是因为不同植物对AHL处理的应激反应不同。抗病试验中,用50和100nmol/LC6-HSL处理马铃薯植株后其发病率分别为41.39%和67.22%,而对照组发病率达到88.24%。接菌后马铃薯发病表型也不同,经50nmol/LC6-HSL处理后马铃薯叶片在接菌处出现坏死斑,叶片没有卷曲,整个叶片保持完整;100nmol/LC6-HSL处理后马铃薯叶片部分卷曲,叶片不完整;对照组马铃薯叶片腐烂严重并且明显萎蔫,不能保持叶片原有的形状。[结论]C6-HSL处理能够提高马铃薯叶片中POD、SOD的活性和H2O2的含量,50nmol/L的C6-HSL处理能显著增加马铃薯对软腐病菌的抗性。因此,AHL有可能成为一种新的植物抗病激活剂。     

N-己酰高丝氨酸内酯对马铃薯生长及抗软腐病能力的影响

[目的]研究细菌个体间通讯信号N-己酰高丝氨酸内酯（C6-HSL）是否可以影响植物的生长和抗病能力。[方法]以马铃薯脱毒苗为试验材料,C6-HSL为诱导剂研究了经不同浓度C6-HSL处理后,马铃薯生长、抵抗胡萝卜软腐欧文氏菌浸染的情况,特别研究了C6-HSL对植株标志性防御酶活性和H2O2含量的影响。[结果]不同浓度的C6-HSL能明显抑制马铃薯的出根率和生根数。而对株高、茎节数及叶片大小没有影响;植物标志性防御酶类中POD和SOD的活性以及H2O2的产生量经C6-HSL诱导后显著提高,而PAL和PPO的活性则没有明显变化;抗痛试验中,经C6-HSL诱导的马铃薯植株能有效抑制胡萝卜软腐欧文氏菌的侵染,发病率明显低于对照组。[结论]细菌AHL有可能成为一种新的植物抗病激活剂。     

胡萝卜软腐欧氏杆菌菌落突变型生物学性状的研究

从腐烂马铃薯块上分离的221株Erwinia.carotouora pv.carotovora(以下简称ECC)中有91株为菌落突变型,在营养琼脂上生长不良,在TZC平板上菌落乳白色。与野生型菌株相比,它们的耐酸能力弱,存活时间短,对马铃薯块的致病力弱,其胞壁水解酶(果胶裂解酶和蛋白酶)活性低。从继代培养中分离的类似突变株可通过接种马铃薯块而得到恢复,而自然条件下分离的则不能。     

在苏云金芽胞杆菌中高效和稳定表达AiiA蛋白

 【目的】摸索提高AiiA蛋白对AHLs分子的降解活性和对胡萝卜软腐欧文氏菌感染马铃薯产生病害的抑制能力的方法。【方法】苏云金芽胞杆菌的AiiA蛋白是一种胞内蛋白，能降解参与诱导调控多种植物病原菌致病基因表达的N-乙酰高丝氨酸内酯信号分子。本文采用两种方式来提高AiiA蛋白的活性，即利用苏云金芽胞杆菌S-层蛋白在细胞表面表达该蛋白以及利用苏云金芽胞杆菌杀虫晶体蛋白基因cry3Aa启动子来提高aiiA基因的表达量。为此构建该蛋白基因与细胞表面S-层蛋白的锚定区结合而成的融合蛋白基因slh-aiiA以及带有基因cry3Aa启动子的融合基因pro3A-aiiA。为了提高表达的稳定性以及去掉重组菌中非苏云金芽胞杆菌片段，本文构建了解离载体pBMB5401，并将上述两个融合基因单独或同时装入解离载体pBMB5401，分别得到重组质粒pBMBcaiiA，pBMB3aiiA和pBMB3439。转化苏云金芽胞杆菌无晶体突变株BMB171，随后导入温度敏感型辅助质粒pEG922，重组质粒在整合酶的作用下发生体内重组，消除了抗性基因等非必需片段。【结果】得到3个重组菌BMBcaiiAR，BMB3aiiAR和BMB3439R，在无抗性选择压力下的稳定性均在90%以上。融合蛋白SLH-AiiA及pro3A-AiiA在解离后的重组菌中得到表达，具有对AHLs分子的降解活性和对胡萝卜软腐欧文氏菌感染马铃薯产生病害的抑制能力。【结论】在苏云金芽胞杆菌中高效和稳定表达AiiA蛋白,可增强其对AHLs分子的降解活性和对胡萝卜软腐欧文氏菌感染马铃薯产生病害的抑制能力，当同时结合两种方式来表达AiiA蛋白时效果最好。     

浙江省蝴蝶兰细菌性软腐病病原鉴定

对浙江杭州地区近年来新发生的蝴蝶兰Phaluenopsis软腐病病原细菌进行了分离、致病性测定、Biolog测定和脂肪酸甲基酯（FAME）脂肪酸测定,16S序列分析。结果表明,该菌与菊欧文氏菌Erwinia chrysanthemi性状、特征完全相同,在序列分析中能以较高的自举置信值与菊欧文氏菌标准菌株聚在一起。因此,可以确定,引起杭州地区蝴蝶兰细菌性软腐病的病原菌是菊欧文氏菌。     

表油菜素内酯诱导大白菜抗软腐病研究

试验采用叶面喷施的方法,研究了24-表油菜素内酯(24-Epibrassinolide,EBR)对大白菜软腐病的诱抗作用及其生理机制。结果表明,外源EBR处理大白菜幼苗病情指数明显比对照降低,下降了25.8%;喷施EBR提高了大白菜叶片中H2O2含量,使丙二醛(Malondialdehyde,MDA)含量下降,提高了过氧化氢酶(Catalase,CAT)活性,过氧化物酶(Peroxidase,POD)活性先缓慢升高然后下降;接种软腐病菌后,EBR使H2O2和MDA含量缓慢增加,但EBR处理MDA含量低于对照处理,显著提高了CAT活性,POD活性与对照相比下降,呈现缓慢升高趋势;EBR处理明显促进幼苗的生长,即使在接种软腐病菌期间,植株的长势也比对照强。说明EBR通过调节植物体内氧的代谢平衡,增强对软腐病的抗性。