水产品中弧菌的PCR技术检测研究进展

水产品中副溶血性弧菌、溶藻弧菌、创伤弧菌均是食源性致病菌,对这些菌种灵敏、快速的检测方法对水产品安全以及保护人类健康极为重要.主要综述了水产品中副溶血性弧菌、溶藻弧菌、创伤弧菌的分子生物学检测研究进展.     

复合探针实时荧光PCR技术快速检测海产品中 副溶血性弧菌方法的建立

副溶血性弧菌是一种食源性致病菌,海产品和其制品海鲜酱油等最容易被副溶血性弧菌污染,而副溶血性弧菌寄生于鲜虾、海鲜酱油等复杂的食品基质中有时却很难被检测出。以快速检测食品中的副溶血性弧菌为目的,针对副溶血性弧菌的tlh基因,设计引物和复合探针,采用实时荧光PCR方法检测鲜虾和海鲜酱油中的副溶血性弧菌,得出以下结论,该方法检测副溶血性弧菌具有较强的特异性和灵敏度,当鲜虾(固体)中的样品菌含量为10~3cfu·g~(-1)或海鲜酱油中的样品菌含量为10~3cfu·m L~(-1)时,无需增菌培养,即可快速检出。增菌6~8 h即可检出鲜虾(固体)或海鲜酱油(液体)的1cfu的副溶血性弧菌。     

福州市售水产品中副溶血性弧菌污染状况调查

调查福州市售水产品中副溶血性弧菌的污染状况,预防由水产品引起的食源性疾病的发生,并为食品安全监管部门提供参考。随机采集360份市售水产品,按照国家标准(GB 4789.7-2013 《食品微生物学检验》)进行副溶血性弧菌的分离培养,采用全自动微生物鉴定仪VITEK 2Compact鉴定,并用多重荧光PCR方法进行毒力基因检测。360份样品中共检出115株副溶血性弧菌,阳性检出率为31.94%。其中鱼类检出率31.67%,贝类检出率42.50%,甲壳类检出率21.67%。农贸市场采集的水产品副溶血性弧菌检出率显著高于超市(P=0.0030.01,χ2=8.637)。7月份至9月份副溶血性弧菌的阳性检出率处于高峰,12月份、1月份至3月份阳性检出率处于低谷。毒力基因tlh携带率为100%,tdh携带率为29.57%。福州市售水产品都不同程度地受到副溶血性弧菌污染,建议食用时进行彻底加热烹煮,同时避免不同种类水产品间的交叉污染,降低感染的可能性。     

实时定量PCR法快速检测水产品中的副溶血性弧菌

副溶血性弧菌是一种广泛存在于水产品中的食源性致病菌,可污染食物,引起严重的食物中毒。利用实时定量PCR方法建立一种快速检测水产品中副溶血性弧菌的方法,根据随机扩增多态性分析(RAPD)鉴定特异性片段,设计特异性引物。采用建立的实时定量PCR方法检测市售水产品20份,检出阳性食品6份,最小检测灵敏度为50 fg DNA,与传统微生物检测结果相比无显著差异。该检测方法特异性强,灵敏度高。     

创伤弧菌快速检测法的建立

[目的]针对创伤弧菌(Vibrio vulnificus)采用杂交瘤技术制备单克隆抗体,基于单克隆斑点杂交技术进行改良,建立一种创伤弧菌快速检测方法。[方法]由水产品牡蛎中分离获得一株创伤弧菌FD-1,以其灭活全菌为抗原免疫小鼠,采用杂交瘤技术制备单克隆抗体。在此基础上,对传统斑点杂交技术进行优化改进,以化学发光试剂ECL替代传统TMB底物,进一步提高其灵敏度、缩短检测时间和简化操作步骤。[结果]与传统斑点杂交法相比,改良斑点杂交法的检测时间可缩短至2 h,检测限可达1×10~5CFU/m L。[结论]改良斑点杂交法比传统TMB底物斑点杂交法(1×10~7CFU/m L)灵敏度提高了100倍,操作过程简单,在水产品检验和医疗诊断方面具有良好的开发应用前景。     

副溶血性弧菌分子检测与分型研究进展

副溶血性弧菌是一种革兰氏阴性嗜盐菌,常通过食用被该菌污染的食品导致食物中毒。该文综述了副溶血性弧菌的分子检测技术如PCR、环介导等温扩增、免疫捕获等,及分型技术如RAPD-PCR、ERIC-PCR、PFGE、核糖体分型、RFLP等,这些方法将为副溶血性弧菌食物中毒提供重要的检测与分型手段,对预防与控制副溶血性弧菌食物中毒具有重要意义。     

副溶血弧菌检测方法研究进展

副溶血弧菌是一种嗜盐的革兰氏阴性菌,它广泛分布于温暖海域的海产品中,如鱼、虾、贝类等,食用被其感染的海鲜可导致食用者出现腹泻、肠痉挛、恶心、呕吐等典型胃肠炎症状,严重时可引起败血症,肾功能衰竭等临床反应。近年来,由副溶血弧菌引发的食物中毒事件的发生比例呈猛烈的上升趋势,并且领先于其他食源性致病菌,居于首位。鉴于其污染范围广,致病力强,对副溶血弧菌实现快速、灵敏、经济、有效的检测是减少其污染海洋产品,保障人体健康的关键,也是当代研究的热门。目前,基于其毒力致病机理的检测方法得到了很大的发展,主要包括分子生物学范畴的PCR法、环介导等温扩增技术、核酸探针技术、基因芯片技术等与免疫学范畴的ELISA,胶体金技术等。本文综述了在免疫学、分子生物学等方面的检测方法的研究进展及其优缺点,以期为同类研究提供参考和理论依据。     

广州市售水产品副溶血弧菌和溶藻弧菌的耐药性评估

[目的]研究广州市售水产品中副溶血弧菌和溶藻弧菌的耐药性情况。[方法]采用Kirby-Bauer纸片扩散法检测从水产品中分离的87株副溶血弧菌和118株溶藻弧菌对水产养殖业中常用的18种抗生素的耐药情况。[结果]水产品中的副溶血弧菌和溶藻弧菌均对万古霉素、克林霉素以及青霉素类抗生素有明显抗性,多重耐药比例达100%,溶藻弧菌的多重耐受现象较为突出。[结论]广州市售水产品中的副溶血弧菌和溶藻弧菌具有多种抗生素抗性,且多重耐药情况突出。     

基于VMI模式的海鲜产品电商营运策略研究

基于一种新型的供应商管理库存(VMI)模式,在这种模式下,可随时根据水产品市场供给需求变化,提高适应水产品企业竞争力与市场应变能力,打破了以往各自为营的海鲜库存传统管理模式。在分析当前海鲜产品电商营运管理现状及存在问题的基础上,探究了海鲜电商实施VMI模式的可行性与必要性,重点对海鲜电商实施VMI模式方案进行论证,并提出VMI模式的策略,力求打造VMI模式下的海鲜产品电商营运新业态。     

水产品中孔雀石绿的危害及控制措施

当前,随着人们生活水平的极大提高,水产品海鲜已经成为人们餐桌上的常用食材,可是,当在享用这些美味的时候,大家是否会想到一种化学物质也随之进入我们的身体并残留下来,这就是孔雀石绿,它是一种有毒的三苯甲烷类化学物,在染料制作和杀菌消毒上被广泛应用。在鱼类运输过程中,渔民为了防治鱼类感染真菌,延长鱼的存活时间,有时也用来给活鱼消毒,而孔雀石绿随着生物体代谢会生成一种无色的孔雀石绿,孔雀石绿和无色的孔雀石绿都存在致癌、致畸形、致突变的危害性,在许多国家已经严令禁止作为人类食用水产品的药物来使用,为此,加强对水产品中的孔雀石绿的检测和控制,就显得尤为重要。