乳铁蛋白及其活性肽抗菌活性的研究进展

乳铁蛋白（Lactoferrin,LF）是转铁蛋白家族中一种天然的铁结合糖蛋白,主要包括血清转铁蛋白和卵转铁蛋白。乳铁蛋白活性肽（Lactoferricin,Lfcin）是乳铁蛋白在胃蛋白酶作用下水解下来的由25个氨基酸残基组成的小肽。乳铁蛋白及其活性肽具有多种生物学功能,这些功能大都和它的铁离子结合特性有关。文章就近年来乳铁蛋白及其活性肽抗菌活性的研究进展作一综述。     

乳肽的开发和利用

母乳对婴儿来说,在营养及生理功能方面是最理想的。它具有以下优点:含有双歧乳杆菌繁殖因子和乳铁蛋白抗感染因子;所含的各种营养成份在质与量上能均衡地提供给婴儿,又不能加重婴儿未成熟的消化代谢功能的负担;不含异种蛋白质,吸乳婴儿不会发生过敏症;还可成为母子之间情感的纽带。考虑到营养及抗感染因素,在最近的婴儿奶粉中加了些DHA和双歧杆菌繁殖因子及乳铁蛋白等,除此以外,一些添加乳肽的奶粉也已上市。 从婴儿营养学的角度看,将乳肽加入到奶粉中可以提高消化吸收能力,并且降低过敏性。就生理功能方面具有母乳优点的肽奶和用于治疗低过敏性的乳肽食品的开发利用做如下介绍。     

猪乳铁蛋白肽LFcinP基因在巴斯德毕赤酵母中组成型表达及其抑菌活性检测

为获得具有生物活性作用的猪乳铁蛋白肽LFcinP基因在巴斯德毕赤酵母中进行组成型表达,检索NCBI数据库公布的牛、羊、猪、骆驼等动物的乳铁蛋白及其抗菌肽的氨基酸序列,运用ExPASY在线网站,对猪乳铁蛋白保守区域所编码的蛋白进行理化性质分析,参照巴斯德毕赤酵母使用密码子偏好性,优化设计合成138 bp编码猪乳铁蛋白肽LFcinP基因,通过pGAPHαM酵母组成型分泌表达载体将其整合到巴斯德毕赤酵母GS115菌株,获得表达猪乳铁蛋白肽LFcinP基因重组酵母菌株GS115p/GAPHαM-LFcinP。SDS-PAGE和Westernblot分析表明,获得5.4 ku乳铁蛋白肽;分析96 h的蛋白电泳带结果表明,重组蛋白占酵母菌上清蛋白35.9%,表达量为48.5μg.mL-1;动态生长曲线法抑菌试验结果表明,重组猪乳铁蛋白肽具有一定的抑菌作用。     

发酵鸭肌肉蛋白质的降解

发酵鸭加工过程中肌肉蛋白质降解和小肽的变化对其特殊风味的形成具有重要意义.该研究以发酵鸭的腿肌为参试对象,在鸭坯中添加植物乳杆菌、戊糖乳杆菌、变异微球菌与汉逊德巴利氏酵母菌.通过SDSPAGE电泳、HPLC分析,探讨了加工过程中肌肉蛋白质降解和小肽的变化规律.结果表明:与对照组相比,发酵剂促进了肌肉蛋白质的降解,且在后熟的过程中蛋白质分解量增多,小肽总量增加.     

酶凝与酸凝牦牛乳硬质干酪成熟期间质量特性的比较

【目的】比较酶凝和酸凝两种凝乳方式制作的牦牛乳硬质干酪成熟期间质量特性的差异.【方法】以牦牛乳为原料,制作酶凝和酸凝牦牛乳硬质干酪,对其感官品质、质构特性、理化特性以及苦味肽分子量分布进行比较.【结果】酶凝干酪出品率高于酸凝干酪,在成熟过程中质构特性各指标也优于酸凝干酪,而水分含量低于酸凝干酪;成熟90 d时,酸凝干酪感官品质达到最佳,具有均匀色泽、适宜乳香味和乳酸味,但其组织状态较差,总体感官评分低于酶凝干酪;在整个成熟期酸凝干酪苦味值低于酶凝干酪,成熟120 d时,酶凝与酸凝干酪苦味肽分子量范围分别在428～3 908 u和1 127～9 375 u之间,酸凝干酪苦味肽分子量范围大于酶凝干酪分子量范围;酶凝干酪苦味肽分子量在663～1 352 u时苦味值达到最大,酸凝干酪苦味肽分子量在2 249～3 564 u时苦味值最大.【结论】酸凝牦牛乳硬质干酪组织状态松散,质构欠佳,但色泽均匀,滋气味清淡,苦味值低;酶凝牦牛乳硬质干酪出品率高,水分含量较低,质构品质较好,但苦味值较高.     

乳铁蛋白肽基因工程菌(E.col-ipED-LfcinB BL21)的发酵与诱导表达条件优化

乳铁蛋白肽是乳铁蛋白在酸性条件下经胃蛋白酶裂解,从N端释放的具有两亲性的阳离子多肽,具有广谱抗菌等诸多生理功能。目前,乳铁蛋白肽主要是通过水解乳铁蛋白来获得,成本昂贵,转基因技术是大规模生产乳铁蛋白肽的最佳途径,试验比较了常用碳源和氮源对已构建的基因工程菌的菌体生物量及蛋白表达量的影响,并采用正交试验对工程菌的发酵与诱导表达条件进行优化。结果表明:可溶性淀粉和牛肉膏可以提高菌体生物量,并且具有较高的融合蛋白表达量,所以分别采用淀粉和牛肉膏作为发酵培养基的碳源和氮源。正交试验结果表明可溶性淀粉7 g/L、牛肉膏30 g/L、氯化钠6.7 g/L,发酵温度37℃、诱导时间8h和转速200 r/min时可得到较高的菌体生物量和融合蛋白表达量。     

挑战集团又一高新产品——肠肽（Livintide）问世

肠肽是中国农业科学院饲料研究所根据最新动物肽营养理论，采用最大化肽链优化技术，并结合脂肪乳化工艺，生产出蛋白、脂肪含量高，氨基酸平衡，且蛋白、脂肪极易被吸收利用的最新一代动物蛋白肽，是挑战集团奉献给广大客户的又一高新产品。肠肽适合在猪料尤其在高档乳猪料中添加使用，能够显著减少断奶腹泻，及时修复肠道损伤，实现乳仔猪早期断奶，促进快速增重，改善料肉比等。     

“大通＂牦牛Lfcin基因克隆及生物信息学分析

乳铁蛋白素（Lactoferricin,Lfcin）是从乳铁蛋白（LF）上被胃蛋白酶水解下来的25个氨基酸残基的小肽,位于乳铁蛋白第二外显子,是乳铁蛋白的抗菌活性中心,其抗菌活性是LF的几百倍。Lfcin具有广谱抗菌活性,对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌均有效,同时具有抗真菌、抗病毒、抑制肿瘤细胞生长、参与免疫调节等多种生物学功能和维持动物肠道菌群正常生态稳定的功能,从而起到提高动物生产性能的作用。     

模拟消化体系中乳及发酵乳对铁化学状态及透析率的影响

本文通过体外消化来模拟消化系统以研究乳及发酵乳对FeCl3吉铁的化学状态及透析率影响，结果表明，在消化过程中乳及发酵乳可促进铁的溶解、以及Fe^3＋的还原和铁的透析，这一作用与样品的pH无关，认为是消化过程中产生的忱基酸和肽起了作用。研究还发现，原乳先加铁盐再进行发酵所产生的作用要较发酵后再加铁盐的作用大，认为发酵乳对铁化学状态及透析率的影响具有时间效应。此外，有乳存在的各试验组其Fe^3＋透析率较可溶性铁的透析率与对照组差异更大。     

猪乳中两种蛋白质的质谱鉴定

为鉴定猪乳中的蛋白质组分,研究采集了8头大白猪的全乳,经离心脱脂后,采用SDS-PAGE对脱脂乳中的蛋白质进行分离,然后切取凝胶上的3条蛋白质条带,经还原烷基化和胰蛋白酶解处理后,采用液相色谱-串联质谱分析产生的水解肽,以鉴定这3种低分子量蛋白质。结果表明,获得鉴定的2种蛋白质包括β-乳球蛋白(β-LG)和乳清酸蛋白(WAP),其中WAP可能对猪乳的生物学功能有重要价值。