福建柏组织培养体系的建立及优化

【目的】探究福建柏不同外植体再生过程中最适激素配比，为建立福建柏组织培养体系提供技术支持。【方法】以福建柏鳞叶和茎段作为外植体，在饱和洗衣粉液浸泡20 min和体积分数75%酒精浸泡30 s条件下，研究体积分数0.1% HgCl₂浸泡不同时间(5,8,10,12,15 min)后的消毒效果；以福建柏鳞叶和茎段为材料，通过单因素试验,研究生长素（NAA和2,4-D）对不同外植体愈伤组织诱导的影响，再通过正交试验研究NAA、2,4-D、6-BA不同配比对外植体愈伤组织诱导的影响；以福建柏愈伤组织为材料，采用正交试验研究NAA、2,4-D、6-BA、KT对愈伤组织继代增殖的影响；以福建柏带芽茎段为材料，研究细胞分裂素6-BA对芽诱导和萌发的影响；以福建柏分化苗为材料，采用正交试验研究6-BA、2,4-D、KT对分化苗继代生长的影响；以福建柏无根苗为材料，研究无根苗扩增繁殖的效果。【结果】（1）福建柏鳞叶最适消毒配方为体积分数75%酒精30 s+体积分数0.1% HgCl₂ 10 min，污染率为16.67%；茎段为体积分数75%酒精30 s+体积分数0.1% HgCl₂ 15 min，污染率为23.33%。（2）鳞叶愈伤组织诱导最适配方为MS培养基+NAA 2.0 mg/L+2,4-D 1.0 mg/L+6-BA 1.0 mg/L，诱导率为81.67%；诱导出的愈伤组织白色近透明，长势良好。而茎段为MS培养基+NAA 0.5 mg/L+2,4-D 0.5 mg/L，诱导率为78.33%，诱导出的愈伤组织淡绿色，长势良好。（3）愈伤组织最适增殖配方为MS基本培养基+2,4-D 1.0 mg/L+6-BA 2.0 mg/L+KT 0.5 mg/L，增殖质量为1.984 g，褐化率23.33%。（4）芽诱导萌发最适配方为MS基本培养基+6-BA 2.0 mg/L，平均诱导芽数2.05个，平均萌动数1.70个，分化率100%。（5）分化苗生长和扩繁的最适配方为1/2MS基本培养基+2,4-D 0.5 mg/L+KT 1.0 mg/L，平均生长长度为2.241 cm，无褐化，扩繁成活率为95.50%，扩繁系数为3.18。【结论】福建柏以带芽茎段作为芽增殖再生途径外植体，鳞叶作为愈伤组织再生途径的外植体进行组织培养效果最佳，长势好且稳定。     

微型月季组培快繁关键技术研究

以微型月季带腋芽的幼嫩茎段为试材,对微型月季组培快繁中外植体消毒、愈伤组织诱导、丛芽增殖培养以及植株生根等关键技术进行研究。结果表明,用75%酒精消毒2 min后,再用HgCl_2消毒10~15 min时,外植体存活率最高;培养基MS+2 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA的愈伤组织诱导率可达95%;愈伤组织增殖最适培养基为MS+1 mg/L 6-BA+0.5 mg/L KT+0.2 mg/L NAA;丛芽分化增殖最适培养基为MS+3 mg/L 6-BA+0.2 mg/L KT+0.2 mg/L NAA;生根最适培养基为1/2 MS+0.1 mg/L NAA。     

羊角槭愈伤组织诱导、增殖与分化

以羊角槭Acer yangjuechi幼嫩茎段和叶片为外植体,研究基本培养基和植物生长调节剂6-苄氨基腺嘌呤（6-BA）,萘乙酸（NAA）,激动素（KT）和N-苯基-N'-1,2,3-噻二唑-5-脲（TDZ）对愈伤组织诱导、增殖与分化的影响。试验通过植物组织培养技术诱导外植体产生愈伤组织,并对愈伤组织进行增殖与分化。结果表明:最适宜愈伤组织诱导的外植体为茎段,基本培养基和适当的植物生长调节剂配比均能促进愈伤组织的诱导增殖与分化;诱导效果最好的基本培养基为木本植物培养基（WPM培养基）。在诱导中,6-BA的效果显著高于NAA和KT。羊角槭愈伤组织诱导最佳培养基为WPM+0.3 mg·L-1 NAA+0.5 mg·L-1 KT+0.5 mg·L-1 6-BA,诱导率达62.9%;愈伤组织增殖最佳培养基为WPM+1.0 mg·L-1 6-BA+0.1 mg·L-1 NAA,增殖倍数达2.4倍。TDZ对分化有重要作用,WPM+1.0 mg·L-16-BA+0.1 mg·L-1 NAA+1.5 mg·L-1 TDZ能促进愈伤组织产生最多不定芽芽点。     

羊踯躅嫩叶离体培养和植株高效再生技术研究

【目的】建立羊踯躅嫩叶离体培养及植株高效再生体系。【方法】以羊踯躅新生嫩叶为外植体,筛选嫩叶愈伤组织诱导、再分化及生根培养基,并以再生植株茎节为试材,建立高效植株再生体系。【结果】最适合羊踯躅嫩叶愈伤组织诱导的培养基为1/2 DR+2.40 mg/L 2ip+0.80 mg/L NAA,诱导率为99.5%;愈伤组织再分化的最佳培养基为1/2 DR+2.90 mg/L 2ip+0.01 mg/L NAA+1.75 mg/L KT,分化率为99.7%;适宜生根的培养基为1/4 DR+0.06 mg/L ZT+0.02 mg/L NAA,生根率达99.0%。利用再生植株茎节的快繁结果表明,在28 d的培养周期内,每节段平均增殖达5倍以上。【结论】成功建立了羊踯躅嫩叶愈伤组织诱导、再分化芽苗和植株高效再生体系,可以满足羊踯躅工厂化育苗的需要。     

药用植物青牛胆组培快繁研究

以青牛胆幼嫩茎段和嫩叶为外植体,研究不同消毒时间、不同培养基对其试管苗诱导、增殖和生根的影响。结果显示,外植体采用75%酒精消毒30 s、0.1%HgCl_2浸泡7 min,消毒效果最佳,茎存活率为43.3%,叶存活率为40%。诱导嫩茎愈伤组织以培养基MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L的效果最好,诱导率可达45%,诱导嫩叶愈伤组织以MS+6-BA 0.2 mg/L+KT 1.0 mg/L+NAA 1.0 mg/L效果较好,诱导率可达40%;适宜腋芽诱导的培养基为MS+6-BA0.2 mg/L+KT 0.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L+GA_3 0.5 mg/L,腋芽诱导率达45%;适宜生根的培养基为1/2 MS+IBA 0.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L,60 d时生根率为70%。     

豌豆离体再生体系建立及遗传稳定性研究

【目的】提高速豌豆诱伤组织和不定芽的诱导率,建立豌豆高效离体再生体系.【方法】以半无叶型豌豆品种‘陇豌1号’和蔓生型豌豆品种‘S3008’的茎段为外植体,研究不同基因型、培养基激素配比对愈伤组织诱导、分化的影响.【结果】‘陇豌1号’茎段愈伤组织诱导率和分化率较高,分别达到88.7%和76.7%,‘S3008’茎段最高愈伤组织诱导率和分化率分别为86.7%和74.7%.诱导愈伤组织最适培养基是MS+2mg/L TDZ+0.2mg/L 2,4-D;诱导不定芽形成的最适培养基为MS+2mg/L TDZ+1mg/L 6-BA,平均不定芽数为4.3;在不定芽诱导生根培养基(1/2MS+20g/L蔗糖+1.5mg/L ABT)上,生根率为74.0%,移栽后再生植株成活率达86.0%.两个豌豆品种都能得到再生植株且繁殖系数高.【结论】本培养体系适宜豌豆离体再生.通过染色体分析,再生植株染色体数和供体亲本材料一致,初步表明再生植株遗传稳定.     

火龙果离体培养茎段灭菌及芽诱导增殖研究

【目的】探讨火龙果茎段灭菌及芽诱导增殖技术,为研发火龙果组织培养技术提供支撑。【方法】以桂红龙1号火龙果茎段为外植体,研究不同因素对火龙果茎段灭菌及芽诱导增殖过程的影响。【结果】茎段大小是影响灭菌效果的主要因素,其次是灭菌时间,茎段老熟程度的影响相对较小。灭菌时间对芽诱导的影响最大,6-BA浓度次之,茎段老熟程度和茎段大小对芽诱导影响较小,且差别不大。6-BA 4.0 mg/L时芽诱导效果最佳。6-BA浓度越高,芽增殖倍数越高,但当6-BA达到4.0 mg/L时,芽出现玻璃化现象。IAA的芽增殖效果优于NAA,IAA为0.1 mg/L时芽增殖效果较好。在培养基中添加PP333对抑制玻璃化促进火龙果组培苗继代增殖的效果优于AC。【结论】适宜茎段灭菌及芽诱导的方案为:选取生长1个月左右的健康茎段,切成含1个芽眼的小段,用0.1%Hg Cl_2溶液灭菌10 min,将灭菌的茎段接种至MS+6-BA 4.0 mg/L培养基。适宜芽继代增殖的培养基配方为:MS+6-BA 3.0 mg/L+IAA 0.1 mg/L+PP333 1.0 mg/L。     

一种84K杨再生体系的建立

将脱分化与再分化过程分开,探讨不同培养基和激素配比对黑暗条件下84K杨叶片及茎段外植体产生愈伤组织及愈伤组织诱导出芽的影响.结果表明,84K杨叶片产生愈伤组织的高效培养基为MS+KT 0.5 mg/L+2,4-D 0.2 mg/L;茎段为WPM+KT0.5 mg/L+2,4-D 0.1 mg/L.愈伤组织诱导出芽的高效培养基为WPM+TDZ 0.05 mg/L+6-BA 0.5 mg/L.为下一步获得高效的84K杨转基因体系提供一个高效受体系统.     

金艳猕猴桃组织培养适宜条件筛选

以金艳猕猴桃嫩叶、茎段作为外植体材料,研究不同消毒体系灭菌效果及不同激素组合对愈伤组织、不定芽、生根等诱导的影响。结果表明,叶片消毒相对最优方法为70%乙醇30 s+0.1%HgCl_2 3 min,茎段消毒相对最优方法为70%乙醇30 s+0.1%HgCl_2 4 min;茎段比叶片更容易染菌,而叶片比茎段更容易褐化;愈伤组织诱导时,叶片最优激素组合为6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L,茎段为6-BA 0.1 mg/L+NAA 0.1 mg/L;不定芽诱导最优激素组合为6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L,在此条件下不定芽长势较快,含单芽或多芽,有少量愈伤组织;最适生根培养基为1/2MS+IBA 0.8 mg/L,生根率达到87.78%,植株生长健壮,根密、多。     

不同植物生长调节剂对大苞白山茶叶片愈伤组织诱导的影响

以大苞白山茶叶片为外植体,研究不同生长调节剂6-BA、TDZ、KT、2,4-D和NAA对其愈伤组织诱导的影响.结果表明:MS+3.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA愈伤诱导率最高,但以MS+2.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA愈伤组织分化最好;在6-BA 2.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L培养基中分别加入2,4-D (0.5～2.5 mg/L)、KT(0.5～2.5 mg/L)和TDZ(0.1～0.5 mg/L)后,2,4-D和TDZ均可提高愈伤组织的诱导率,最高可达100％和94.8％,KT的加入反而降低了愈伤组织的形成;适宜的分化培养基为MS+ 2.5 mg/L 6-BA+ 0.02 mg/LTDZ+ 0.05 mg/L NAA.     

无患子优选树茎段离体培养体系的建立

【目的】筛选无患子茎段离体快繁最佳培养基,建立无患子优良种苗快速繁育体系。【方法】以野外选优获得的无患子树带腋芽茎段为外植体,采用L9(33)正交试验对影响外植体灭菌的HgCl2浓度、HgCl2与酒精的作用时间,不定芽诱导萌发中的6-BA、NAA及蔗糖用量,继代增殖中6-BA与KT用量和芽苗生根中的MS培养基无机盐水平、6-BA和2,4-D用量进行优化。【结果】75%酒精浸泡1 min,再用0.2% HgCl2处理7 min是无患子茎段灭菌的最佳方法,其外植体成活率高达83.33%;MS+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+20.0 g/L蔗糖是无患子茎段腋芽萌发的适宜培养基,诱导率高达96.67%;MS+0.7 mg/L 6-BA+0.1 mg/L KT是无患子茎段腋芽增殖的适宜培养基,30 d可增殖4.13倍;1/3 MS+0.5 mg/L 6-BA+0.7 mg/L 2,4-D是诱导芽苗生根的适宜培养基,平均生根率为41.50%。【结论】建立的无患子离体培养体系为:外植体茎段用75%酒精浸泡1 min,再用0.2% HgCl2灭菌7 min,在MS+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+20.0 g/L蔗糖培养基中诱导腋芽萌发,在MS+0.7 mg/L 6-BA+0.1 mg/L KT培养基中进行增殖培养,在1/3MS+0.5 mg/L 6-BA+0.7 mg/L 2,4-D培养基中进行生根培养。     

重瓣大岩桐离体培养的两种途径

以大岩桐的茎段、叶片、茎尖为外植体,以MS为基本培养基,附加不同浓度的激素组合进行离体培养研究。结果表明:适宜外植体灭菌的方法为先用75%的乙醇表面消毒10 s后再用0.1%Hg Cl2灭菌4⁵ min,或者先用75%的乙醇表面消毒5 s后再用0.1%Hg Cl2灭菌6 min。3种外植体均可获得组培苗,叶片通过愈伤组织诱导途径可获得组培小苗;茎段和茎尖通过不定芽途径可获得组培小苗。最适宜的愈伤分化培养基为MS+6-BA 0.50 mg/L+IBA 1.00 mg/L,适宜的不定芽增殖培养基为MS+6-BA 0.50 mg/L或者MS+6-BA 0.50 mg/L+IBA 1.00 mg/L,适宜的生根培养基为MS+IBA1.005 min,或者先用75%的乙醇表面消毒5 s后再用0.1%Hg Cl2灭菌6 min。3种外植体均可获得组培苗,叶片通过愈伤组织诱导途径可获得组培小苗;茎段和茎尖通过不定芽途径可获得组培小苗。最适宜的愈伤分化培养基为MS+6-BA 0.50 mg/L+IBA 1.00 mg/L,适宜的不定芽增殖培养基为MS+6-BA 0.50 mg/L或者MS+6-BA 0.50 mg/L+IBA 1.00 mg/L,适宜的生根培养基为MS+IBA1.00².00 mg/L,降低蔗糖含量有利于生根。MS+IBA 2.00 mg/L+AC 0.10 g/L有利于生根培养。     

生姜芽的组培快繁

[目的]寻找生姜芽组培快繁的最佳方案。[方法]以MS为基础培养基,设计生姜芽组培快繁的两条途径,选择生姜芽组培快繁的最佳培养基配方。[结果]结果表明,茎尖→芽最适培养基为:改良MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L;茎尖→愈伤组织→芽,茎尖诱导愈伤组织的最适培养基为:改良MS+2,4-D 2.0 mg/L+KT 1.0 mg/L,愈伤组织诱导芽分化的最适培养基为:改良MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L。采用超净工作台上用75.0%酒精30 s+10.0%NaClO 15 min+0.1%HgCl210 min+50 ug/L青霉素与台外消毒相结合对外植体进行表面消毒,去污效果最佳。[结论]对愈伤组织进行切割并继代培养后再诱导芽分化,可获得较大的增殖倍数。     

老虎须的组织培养与植株再生

以老虎须茎段为试验材料,采用不同激素组合对其进行愈伤组织诱导和分化、芽增殖与生根研究。结果表明:老虎须茎段愈伤组织诱导和分化的最适培养基分别为MS+6-BA 1.0 mg/L+KT 3.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L和MS+6-BA 1.0 mg/L+KT 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L;芽增殖的最适培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+IAA 0.2 mg/L;生根的最适培养基为1/2MS+IBA0.5mg/L。     

藜麦愈伤组织诱导体系优化研究（英文）

以9个藜麦(Chenopodium quinoa Willd.)品种为材料,对藜麦茎段、子叶不同外植体的愈伤组织诱导效果进行比较,同时对茎段的愈伤组织诱导以及愈伤组织增殖体系进行优化试验。结果表明:诱导愈伤组织最佳外植体为茎段,9个品种在培养基MS+0.5 mg/L2,4-D中用茎段诱导愈伤组织的平均诱导率达90%;在愈伤组织诱导优化试验中,处理Ⅵ(MS+0.5 mg/L 2,4-D+0.5 mg/L KT+0.5 mg/L NAA)和处理Ⅱ(MS+0.5 mg/L 2,4-D)对藜麦愈伤组织的诱导率相近,但是愈伤形态差别较大,后者诱导形成疏松、有光泽、黄白色愈伤组织,因此MS+0.5 mg/L 2,4-D培养基为最佳愈伤组织诱导培养基;2,4-D与KT、NAA搭配使用时,愈伤组织增殖速率明显上升。     

不同因素对魔芋愈伤组织诱导及增殖分化的影响

以清江花魔芋1号为试材,分析了不同因素对魔芋(A morphophallus)愈伤组织诱导与增殖分化的影响.结果表明,培养基中激素配比为MS+ 2.0 mg/L NAA+ 1.0 mg/L 6-BA或MS+2.0mg/L2,4-D+0.5 mg/L KT或MS+ 2.0 mg/L 2,4-D+ 1.0 mg/L KT时,均能获得较高的愈伤组织诱导率;4种外植体愈伤组织诱导率之间存在差异显著,诱导率大小依次为鳞片＞球茎＞叶片＞根段;添加活性炭(AC)可明显增强愈伤组织诱导效果;在MS+ 2.0 mg/L TDZ +0.1 mg/L NAA培养基上愈伤组织分化形成不定芽的效果相对较好,分化率达96.15％,分化系数达9.52.     

藜麦愈伤组织诱导体系优化研究

以9个藜麦(Chenopodium quinoa Willd.)品种为材料,对藜麦茎段、子叶不同外植体的愈伤组织诱导效果进行比较,同时对茎段的愈伤组织诱导以及愈伤组织增殖体系进行优化试验。结果表明:诱导愈伤组织最佳外植体为茎段,9个品种在培养基MS+0.5mg/L 2,4-D中用茎段诱导愈伤组织的平均诱导率达90%;在愈伤组织诱导优化试验中,处理Ⅵ(MS+0.5 mg/L 2,4-D+0.5 mg/L KT+0.5mg/L NAA)和处理Ⅱ(MS+0.5 mg/L 2,4-D)对藜麦愈伤组织的诱导率相近,但是愈伤形态差别较大,后者诱导形成疏松、有光泽、黄白色愈伤组织,因此MS+0.5 mg/L 2,4-D培养基为最佳愈伤组织诱导培养基;2,4-D与KT、NAA搭配使用时,愈伤组织增殖速率明显上升。     

头花蓼愈伤组织诱导及分化

研究了2种外植体(叶片、茎段)、消毒方法、培养基种类、活性炭、植物生长调节剂等因素对头花蓼愈伤组织诱导及分化的影响。结果表明,最佳消毒方法为以0.15%HgCl2消毒叶片6min和10%NaClO消毒茎段9min;不同培养基诱导愈伤组织发生率依次为MS1/2MSB5;MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.3mg/L有利于愈伤组织形成;MS+6-BA 4mg/L+NAA 0.2mg/L有利于愈伤组织增殖;MS+6-BA 8mg/L+IBA 0.1mg/L有利分化,分化率为83.33%,产生不定芽平均数为5.1个。培养基中附加100mg/L活性炭,褐化率仅为6.80%,愈伤组织生长和分化效果较好。     

苎麻叶片组织培养再生植株的研究

摘要：以中苎一号叶片为外植体,研究了外植体消毒时间、培养基、生长调节物质对苎麻品种中苎一号叶片愈伤诱导、分化不定芽和生根的影响。其结果表明：先用75%酒精消毒10秒,再用0.1%升汞灭菌8分钟,同时滴入1-2滴1% HCL效果最好。中苎一号最佳叶片愈伤组织诱导基本培养基为1/2MS;最佳叶片愈伤组织诱导培养基组合为:1/2MS+0.05mg/L TDZ+0.01mg/L IAA+0.03mg/L 2,4-D;最佳愈伤分化培养基为: 1/2MS+0.5mg/L TDZ+0.02mg/L 2,4-D+0.03mg/L IAA;最佳生根培养基为:1/2MS+0.02mg/L TDZ+O.O5mg/L NAA+0.02mg/L IAA, 形成了较为完善的组织培养再生体系,再生率达到了26%以上     

朝鲜淫羊藿种胚组培研究

【目的】建立朝鲜淫羊藿（Epimedium koreanum Nakai）种胚组织培养快繁体系,筛选其适宜的组织培养条件。【方法】以朝鲜淫羊藿种胚为外植体,研究外植体最佳消毒方式;在1/2MS基础培养基上,采用L₉(3⁴)正交试验设计,探讨6-BA、NAA、IBA和蔗糖对种胚愈伤组织诱导的影响,筛选适宜培养基,并分析不同激素组合对愈伤组织增殖、丛生芽增殖及幼芽生根的影响。【结果】朝鲜淫羊藿的最佳消毒方式为：利用体积分数0.1% HgCl₂对种子表面消毒8 min,再对种胚消毒5 s,该条件下种子存活率为71.11%;诱导种胚愈伤组织的适宜培养基为1/2MS+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+0.5 mg/L IBA+30 g/L蔗糖,诱导率为47.78%;愈伤组织增殖的适宜培养基为1/2MS+0.5 mg/L KT+0.3 mg/L NAA,增长率为172.67%;丛生芽的适宜增殖培养基为1/2MS+2.0 mg/L 6-BA+0.4 mg/L NAA,增殖系数为2.78;0.5 mg/L NAA的生根效果最好,生根率为43.33%。【结论】建立了朝鲜淫羊藿种胚适宜的组织培养体系,在该体系下,组培苗长势良好,但生根效果需进一步研究。