植物体细胞杂交

植物体细胞杂交,是用酶系统处理,使植物细胞分离、细胞壁解体,从而得到大量无细胞壁的植物细胞即原生质体,并通过化学、物理方法的诱导,使不同植物的原生质体相互融合而成一种为异核体的共同体,乃至异核体内不同的细胞核进一步融合而成共核体,经再生细胞壁后即成为杂种细胞,用人工培养的方法诱导杂种细胞长成杂种植株。实验证明,植物原生质体具有摄取携带遗传信息的DNA、RNA大分子以及细胞核、细胞器、     

原生质体融合技术在果树品种改良上的应用

原生质体融合技术在果树品种改良上的应用福建农业大学亚热带果树研究所赖钟雄，何碧珠，潘良镇植物原生质体不但没有细胞壁的物理障碍，而且保持植物细胞的全能性，可以与同种或异种原生质体融合，实现体细胞杂交，获得多倍体或体细胞杂种。植物原生质体融合可以打破物种...     

碘乙酰胺和紫外线对烟草原生质体的钝化作用

【目的】探索烟草原生质体钝化的临界处理剂量,为不对称体细胞杂交技术改良和创新烟草种质奠定基础。【方法】以不同碘乙酰胺(IOA)浓度(0.1,0.25,0.5,0.75,1.0mmol/L)和3种处理方法(不静置直接700r/min离心5min,静置5min后700r/min离心5min,静置3min后700r/min离心2min),以及紫外线(UV)照射(2根15W紫外灯,距灯管25cm处照射0.5,1,4,5,7,10,15min)处理烟草原生质体,并进行融合培养,研究烟草原生质体钝化的临界处理条件。【结果】烟草原生质体对IOA十分敏感,以0.1mmol/L IOA静置3min后700r/min离心2min可使烟草原生质体钝化停止分裂,临界状态原生质体比例最高为92.9%;UV连续照射15min的烟草叶肉原生质体失活,但大多数原生质体处于临界状态,比例为91.4%;2种临界处理后的原生质体融合后形成杂种细胞,能进行正常的细胞分裂。【结论】0.1mmol/L IOA静置3min后700r/min离心2min或2根15W紫外灯连续照射25cm处的烟草原生质体15min,是烟草原生质体钝化的临界处理,2种临界处理后的原生质体融合体由于生理代谢上得到互补形成杂种细胞,恢复了分裂能力。     

烟草种间体细胞杂交育成杂种植株

近十年来,伴随着植物原生质体游离和培养技术的迅速提高,植物体细胞杂交研究也进展很快,不仅在原生质体融合及其筛选技术上有显著改进,而且从1972年开始,国外已先后在烟草、矮牵牛、胡萝卜、蕃茄等几个属的植物上获得种间甚至属间的体细胞杂种植株。在国内,植物原生质体融合的研究也取得了较大进展。我们以烟草为材料,在几次培养出普通烟草原生质体植株的基础上,进行了烟草细胞杂交的研     

栽培番茄叶肉原生质体再生植株

从植物原生质体再生植株的技术是研究遗传育种重要方法之一,在有性杂交不可能的情况下,通过体细胞杂交技术可以将外源遗传物质引入到某些栽培品种中去。Melchers等(1978)进行番茄和马铃薯体细胞杂交获得杂种植株,他的工作促使我们去研究栽培番茄原生质体再生植株的技术。Mühlbach(1980)从秘鲁番茄叶肉原生质体获得再生植株,但是三个     

通过细胞融合育成卷心菜和白菜的体细胞杂种植株

为了培育卷心菜和白菜的体细胞杂种,分别从各自的叶肉细胞分离出原生质体,用葡聚糖融合理处。培养的原生质体密度为3×10~5个。在10周后选择出生长旺盛的两个细胞团块转移到再分化培养基上,经过三周后,分化出5根植株。这些植株的形态为两亲本的中间型,     

细胞融合技术

细胞融合(即细胞杂交) 是二十世纪五十年代细胞学中出现的一种新技术。我国从1970年以后,也开展了这方面的研究。细胞融合由广义而言,就是两个或两个以上细胞合并形成一个细胞的过程。从狭义来讲,是在离体的条件下,用人工的方法把两个或两个以上的细胞合并,使体细胞杂交而形成一个新的杂种细胞。这就是我们通常所指的细胞融合。细胞融合的方法有两种:     

柑桔不对称体细胞杂交的初步研究

通过对柑桔不对称体细胞杂交进行初步研究后，发现０．１－０．５ｍｍｏｌ／Ｌ碘中抑制墨科特桔橙和诺瓦桔柚在生质体分裂，１２．９－２１．５Ｃ／ｋｇＸ－射线呆抑制朋娜脐橙和纽荷尔脐橙原生质体分裂。通过“供－受体”融合方式进行了墨科特桔橙＋朋娜脐橙、诺瓦桔柚＋纽荷尔脐橙２个组合的不对称体细胞杂交，增减获得了再生细胞系及胚状体。     

橡胶树热研8—79原生质体培养再生植株

【目的】优化橡胶树热研8-79原生质体分离和培养条件,建立橡胶树原生质体培养植株高效再生体系,为橡胶树体细胞杂交育种奠定基础。【方法】以橡胶树热研8-79花药愈伤组织建立的胚性细胞悬浮系为试验材料,设计不同酶组合、酶解时间和悬浮细胞继代时间进行原生质体分离,采用不同培养基、看护细胞浓度和接种密度进行原生质体培养,对原生质体分裂发育的小愈伤组织进行体细胞胚诱导及植株再生培养,统计原生质体的产量、分裂频率、体胚数及体胚萌发率。【结果】酶组合为纤维素酶1.50%＋果胶酶0.15%＋离析酶0.50%、酶解时间为12 h时,继代培养第5 d的胚性悬浮细胞达最高产量（3.6 ×107个/mL PCV）;用酶解细胞和看护细胞继代培养基分别作为原生质体液体培养基和看护培养基,比使用KPR培养基更有利于原生质体的分裂,当看护细胞浓度为5%、接种密度为5 ×105个/mL时原生质体的分裂频率最高,达54%。原生质体持续分裂形成肉眼可见的小愈伤组织增殖后经体胚发生途径发育成完整的小植株。【结论】通过优化橡胶树热研8-79胚性悬浮细胞原生质体分离的酶组合、酶解时间、继代培养时间及看护培养过程中培养基组成、看护细胞浓度和接种密度等影响因素,可以建立橡胶树原生质体培养植株高效再生体系。     

橡胶树热研8-79原生质体培养再生植株

[目的]优化橡胶树热研8-79原生质体分离和培养条件,建立橡胶树原生质体培养植株高效再生体系,为橡胶树体细胞杂交育种奠定基础.[方法]以橡胶树热研8-79花药愈伤组织建立的胚性细胞悬浮系为试验材料,设计不同酶组合、酶解时间和悬浮细胞继代时间进行原生质体分离,采用不同培养基、看护细胞浓度和接种密度进行原生质体培养,对原生质体分裂发育的小愈伤组织进行体细胞胚诱导及植株再生培养,统计原生质体的产量、分裂频率、体胚数及体胚萌发率.[结果]酶组合为纤维素酶1.50%+果胶酶0.15%+离析酶0.50%、酶解时间为12h时,继代培养第5d的胚性悬浮细胞达最高产量(3.6 ×107个/mL PCV);用酶解细胞和看护细胞继代培养基分别作为原生质体液体培养基和看护培养基,比使用KPR培养基更有利于原生质体的分裂,当看护细胞浓度为5%、接种密度为5×105个/mL时原生质体的分裂频率最高,达54%.原生质体持续分裂形成肉眼可见的小愈伤组织增殖后经体胚发生途径发育成完整的小植株.[结论]通过优化橡胶树热研8-79胚性悬浮细胞原生质体分离的酶组合、酶解时间、继代培养时间及看护培养过程中培养基组成、看护细胞浓度和接种密度等影响因素,可以建立橡胶树原生质体培养植株高效再生体系.     

植物原生质体技术及其应用

原生质体技术是在原生质体分离基础上,进行一系列技术操作,包括原生质体融合、遗传转化、植株再生等.原生质体技术为细胞杂交,新品种培育,及其与有关的细胞、分子和遗传等学科的交叉渗透,提供一种使用范围广、可行性强的技术体系.阐述了植物原生质体的分离培养、遗传转化等关键技术及其应用,认为原生质体技术在高等植物遗传性状的改良及生产实践中有着广阔的应用前景.     

作物原生质体电融合技术的新进展

本文对作物原生质体电融合技术在作物体细胞杂交中的应用及最新发展进行了综述,并对电融合的原理、方法及优点进行了描述。本文引用了国内外近期报道的具有良好农艺性状的体细胞杂种或胞质杂种的许多例证,并重点介绍了禾谷类粮食作物方面的研究进展及存在问题。这些例证不仅具有育种应用价值,而且对于研究如何选择适宜的融合一脉冲参数、实现高频率异种融合的条件以及对杂种细胞有效的筛选方法等亦有重要的理论意义。     

植物细胞融合研究的现状及问题

通过原生质体融合,1972年首次获得体细胞杂种植物,1978年获得了番茄与马铃薯不同属间的体细胞杂种植物。 依靠细胞融合来改变植物的遗传性质,包括以下五个工程:(1)原生质体分离;(2)原生质体融合;(3)融合细胞的选择;(4)融合细胞的培养;(5)融合细胞向植物体的再分化。     

从绿色革命到基因革命(下)

体细胞杂交植物体细胞杂交是一种新的植物育种途径,它的发展是以植物细胞特性为基础的。从定义上讲,体细胞杂交植物是指由体细胞融合获得的杂种。理沦上不论相互之间亲缘关系远近如何,所有细胞间的融合部是可能的,因此这种育种方法为基因互换提供了无限的可能性。本世纪70年代,在培育体细胞杂种方面所取得的巨大成功使人们极度兴奋,并     

一个新的柑桔属间体细胞杂种

通过ＰＥＧ诱导原生质体融合，进行了伏令夏橙＋枳橙的体细胞杂交，培养获得了５０株再生植株，经细胞学检查和同工酶分析鉴定，确认为６株为伏令夏橙和枳橙和枳橙的体细胞杂种，它们均为四倍体，具有双亲综合的ＧＯＴ和ＳＫＤＨ同工酶带型，融合后原生质体经３种培养方式比较结果表明，以ＬＭＴ软包埋培养效果最好。     

海岛棉胚性细胞团的原生质体游离和培养

以海岛棉无菌苗下胚轴为外植体诱导产生愈伤组织，挑选胚性愈伤组织建立悬浮培养胚性细胞系。用含有纤维素酶、半纤维素酶和离析酶的混合酶液从新海３号、新海７号和２８２这３个品种的胚性细胞悬浮培养物中游离出原生质体。原生质体用液体浅层法培养仅见再生细胞的１次分裂；用含有低融点琼脂糖的ＫＭ８Ｐ培养基进行琼脂糖珠悬浮法培养，原生质体再生细胞经几次分裂后产生再生细胞团     

二倍体马铃薯原生质体培养与植株再生

原生质体培养是体细胞杂交的基础,同时也是获得变异材料的重要手段。以引进的4个二倍体马铃薯为材料,研究了渗透浓度、酶液组成、酶解时间及材料预处理对原生质体产量和活力的影响。结果表明:预处理是原生质体成活、分裂及后期发育的重要条件,处理D预处理效果最好,原生质产量和活力最高,且有较多细胞分裂;马铃薯原生质体适宜的渗透浓度为0.35~0.40mol·L-1;RH2和RH3酶解时间以4h为宜,RH1和RH4酶解时间以4.5h为宜;酶解液为2.0%纤维素酶和0.2%果胶酶的混合液。基因型对原生质体培养影响较大。经过培养,有2个二倍体材料获得了再生植株。     

影响植物原生质体分裂的生理生化因素

以烟草试管苗幼叶,美味猕猴桃、毛花猕猴桃子叶愈伤组织和玉米幼叶为材料,进行了原生质体培养和一些生理生化指标的测定,结果表明,美味猕猴桃及毛花猕猴桃子叶愈伤组织原生质体在培养２０ｄ后,原生质体再生细胞分裂率为１７．８％和２０．５％,前者可继续分裂形成小细胞团,而后者仅分裂１～２次。对照材料烟草叶肉原生质体培养２周后,再生细胞分裂率高达７０．１％。玉米幼叶原生质体极难分裂。烟草叶中ＰＯＸ、ＳＯＤ活性以及可溶性蛋白质和氨基酸含量均高于其它３种材料。因此较低水平的ＰＯＸ、ＳＯＤ活性以及可溶性蛋白质和氨基酸含量是两种猕猴桃子叶愈伤组织原生质体分裂率低和玉米幼叶难以培养成功的影响因子。     

菜豆(Phaseolus vulgaris L.)叶肉原生质体培养(简报)

本实验以菜豆无菌苗叶片为材料,成功地游离了原生质体,并在改良 BSB 液体培养基上获得了大量具有连续分裂能力的愈伤组织。本实验发现,在原生质体培养初期,更换新鲜培养液并不是必须的;但在培养15天左右,形成了细胞团时,更换培养液却非常必要。这样可增强细胞分裂能力,防止细胞贴壁死亡。在培养液组成中,氮源的变化对原生质体分裂有重要影响。较大量的无机氮对原生质体分裂有     

藻类叶绿体DNA和基因图谱

叶绿体遗传学的研究最早可追溯到上世纪末,Ｓｔｒａｓｂｕｒｇｅｒ最早观察到藻类叶绿体能够分裂,并在细胞分裂过程中完成了分裂的叶绿体分别进入子代细胞。同时其他研究者也认为,叶绿体是已经存在的质体分裂形成的。随后,Ｂａｕｒ和Ｃｏｒｒｎｅ认为紫茉莉枝条三种不同颜色的花斑性状是由母本细胞质传递的,与核基因没有直接关系,从而产生了叶绿体自主性遗传概念［１］。现已逐步知道植物细胞的核基因组和叶绿体基因组之间存在复杂相互作用关系,叶绿体遗传应属于半自主系统（ Ｓｅｍｉａｕｔｏｎｏｍｏｕｓ ｓｙｓｔｅｍ）。在应用电…