半蒴苣苔的叶片组织培养及植株再生

为了建立半蒴苣苔Hemiboea subcapitata的组培快繁技术体系,保护和开发利用半蒴苣苔这一民间植物药资源,以MS(Murashige and Skoog)为基本培养基,研究植物生长调节物质6-苄基腺嘌呤(6-BA)和萘乙酸(NAA)组合对叶片愈合组织诱导、不定芽分化,增殖和壮苗生根的影响,筛选出适合半蒴苣苔快繁的最适培养基。结果表明:叶片诱导愈合组织困难,但在叶片基部或切口处可直接诱导分化出不定芽,且随着6-BA 和NAA质量浓度的升高,芽的分化率先上升后降低,以MS+0.5 mg·L-1 6-BA+1.0 mg·L-1 NAA+1.5 g·L-1活性炭(AC)分化率最高,达到67.8%;但平均每外植体诱导芽数以MS+1.0 mg·L-1 6-BA +0.5 mg·L-1 NAA +1.5 g·L-1 AC最多,达到6.69个;不定芽增殖以MS+0.5 mg·L-1 6-BA+0.5 mg·L-1 NAA处理增殖倍数最高,达到23.43;在添加不同质量浓度吲哚丁酸(IBA)的培养基中生根率均超过90%。     

黄精的组织培养与植株再生

研究离体条件下黄精不同外植体的愈伤组织诱导及其植株再生。结果表明,黄精的根茎、嫩茎及幼嫩的组培叶片在MS+6-BA 2.0 mg.L-1+2,4-D 1.0 mg.L-1和MS+6-BA 2.0 mg.L-1+NAA 1.0mg.L-1的培养基中均诱导产生愈伤组织,并在MS+6-BA2.0 mg.L-1+2,4-D2.0 mg.L-1和MS+6-BA2.0 mg.L-1+NAA2.0 mg.L-1的培养基上继代增殖良好。黄精愈伤组织在MS+6-BA3.0 mg.L-1+IAA1.0 mg.L-1的培养基上可诱导出不定芽,出芽率达66.33%,平均每块愈伤组织可分化出5.2个芽。试管苗在MS附加IAA0.5 mg.L-1培养基上诱导生根,生根率达86.67%。     

良种沙棘"实优1号"组织培养研究

以良种沙棘“实优1号”的水培茎尖和叶片为外植体进行了不定芽及愈伤组织诱导试验。结果表明,水培茎尖在1/2M S 6-BA 1.0 m g.L-1 IAA 0.5 m g.L-1上可诱导出大量愈伤组织及不定芽,继代转接可获得丛生芽。幼苗茎段在1/2 M S 6-BA 2.5 m g.-L 1 IAA 0.2 m g.L-1上可诱导腋芽增殖,但倍数较低;水培叶在1/2 M S 6-BA 0.5 m g.L-1 KT 0.2 m g.L-1 NAA 0.02 m g.L-1上诱导效果好,不定芽多,分化速度快,30 d平均分化不定芽9.1个,分化率达94.1%。继代苗在1/2 B5 6-BA 0.3 m g.L-1 IBA 0.4 m g.L-1上有较高的生根率,达到87.5%。     

菜头肾离体快繁技术探讨

菜头肾组织培养的外植体可选择茎段、嫩叶、嫩芽。菜头肾叶片愈伤组织诱导和茎段丛生芽诱导的最佳培养基配方是1/2 MS＋6-BA 1.0 mg.L-1＋NAA 0.2~0.5 mg.L-1。继代壮苗培养时仍采用1/2 MS＋6-BA 1.0mg.L-1＋NAA 0.2~0.5 mg.L-1培养基。最适的生根培养基为1/2 MS＋NAA 0.2 mg.L-1。     

特色马铃薯品种红宝石再生系统的筛选

采用3因素3水平L9(34)正交试验设计,以特色马铃薯品种红宝石试管苗茎段为试材,分别选用3种植物激素(诱导愈伤用NAA,2,4-D,6-BA;诱导分化用NAA,GA3,6-BA)的3个水平对其茎段的离体再生进行研究,筛选适合红宝石的愈伤和芽分化诱导培养基。结果表明,不同培养基表现出不同的诱导效果,愈伤组织诱导的最佳培养基是MS+NAA 0.5 mg·L-1+2,4-D 1.0mg·L-1+6-BA 0.5 mg·L-1,愈伤率达100%;植株再生最佳培养基是MS+NAA 0.5 mg·L-1+GA31.0 mg·L-1+6-BA 1.0 mg·L-1,再生率为80.3%,分化后再生苗健壮。     

豆蔻天竺葵的组织培养

以豆蔻天竺葵的叶片、茎段为外植体进行试管培养.结果表明,培养基MS+6-BA 1.0 mg·L-1+NAA 0.2 mg·L-1最适于叶片愈伤组织的诱导.茎段丛生芽诱导的最适培养基为MS+6-BA 1.0 mg·L-1+NAA 0.2mg·L-1,最佳芽增殖及继代培养基为MS+6-BA 1.0 mg·L-1+NAA 0.1 mg·L-1,最佳生根培养基为MS+NAA 0.2mg·L-1.快繁途径可选择以茎段作为外植体,诱导获得丛生芽并进行增殖,最后获得大量再生植株.     

抗生素对豫杂一号泡桐丛枝病苗体外植株再生的影响

以豫杂一号泡桐丛枝病组培苗叶片、茎段为外植体,研究了利福平和土霉素对其体外植株再生系统的影响.结果表明,利福平和抗生素对泡桐丛枝病苗的芽诱导率和根诱导有抑制作用.当利福平和土霉素质量浓度分别为20 mg·L-1时,在MS NAA 0.3 mg·L-1 6-BA 12 mg·L-1和MS NAA 0.1 mg·L-1 6-BA 12mg·L-1的培养基上,丛枝病苗叶片最高芽诱导率分别可迭67.6%和48.4%;在MS NAA 0.2 mg·L-1 6-BA 12 mg·L-1和Ms NAA 0.3 mg·L-1 6-BA 12 mg·L-1的培养基上,茎段最高芽诱导率分别可迭32.5%和50.8%.     

宿根婆婆纳‘达尔文之蓝’的组培脱毒和快繁技术

将供试品种的带茎尖和腋芽的茎段,用70%酒精浸泡30 s,然后用20%的次氯酸钠溶液浸泡30 min,无菌水冲洗4次,消毒处理后剥取0.1~0.3 mm的茎尖,接种于以MS为基本培养基添加6-BA、IAA、NAA等外源激素的培养基中,研究了不同条件对愈伤组织诱导芽形成和芽继代增殖、生根和移栽效果的影响。结果表明,以MS为基本培养基,添加6-BA 1.0 mg·L-1和IAA0.5 mg·L-1为较适宜的外植体诱导愈伤组织和愈伤组织诱导芽的培养基。最佳继代增殖培养基为6-BA2.0 mg·L-1和NAA0.1 mg·L-1。最佳生根培养基为1/2MS添加NAA0.2 mg·L-1和IAA1.0 mg·L-1。25 d后,组培苗移栽成活率达到98%以上。     

三尖杉愈伤组织诱导及其分化的初步研究

以三尖杉茎尖、嫩叶为外植体,应用正交设计法对愈伤组织诱导及其继代分化进行了研究。结果表明,不同外植体灭菌的难易程度相差较大,叶片较茎尖容易;叶片用体积分数为75%的酒精浸泡30-45 s,经体积分数为0.1%HgCl2溶液灭菌12 min,效果最好;茎尖则用体积分数为75%酒精浸泡1 min,经体积分数为0.1%HgCl2溶液灭菌12 min,效果较好;诱导叶片、茎尖愈伤组织的最佳培养基配方为MS+NAA 1.0 mg.L-1+2,4-D 1.0 mg.L-1;愈伤组织在继代培养基上均能进行分化,其中结构紧密的茎尖愈伤组织在MS+6-BA3.0 mg.L-1培养基上继代培养能诱导分化形成不定芽。     

不同植物生长调节物质对芍药离体培养的影响

以芍药茎尖、叶片为外植体,研究了植物生长调节物质对芍药离体培养的影响.结果表明,芍药茎尖诱导培养的适宜培养基为1/2MS GA31 mg.L-1 6-BA1 mg.L-1,影响茎尖诱导的主要因素是GA3;适宜增殖培养基为1/2MS 6-BA1 mg.L-1 KT0.5 mg.L-1;诱导叶片愈伤组织的适宜培养基为改良MS 2,4-D 0.5 mg.L-1 6-BA0.5 mg.L-1.     

小麦幼胚愈伤组织的遗传转化

将从水稻中提取的抗性调节转录因子OsDREB2.2基因,通过农杆菌介导进入小麦组织细胞内的方法,培育筛选稳定遗传的植株,使小麦中的一系列抗性基因得以表达,从而培育出抗逆性强的小麦新品种。采用河北农业大学自主培育的小麦新品种河农825、河农827、河农831等为试验材料,以各自幼胚为外植体,诱导的愈伤侵染农杆菌后,获得的抗性愈伤组织数平均为170.44、分化愈伤数平均为24.56、抗性芽与转化幼胚总数的比例平均为0.96%。表明本研究中采用的愈伤组织诱导、农杆菌侵染和植株再生条件是适宜的。     

无籽西瓜种苗愈伤组织诱导研究

用不同基因型无籽西瓜进行了愈伤组织诱导研究.结果表明无籽西瓜种苗的最佳愈伤组织诱导培养基组合是MS+NAA 1.0 mg@L-1+6-BA 0.5mg@L-1(C5培养基);种苗下胚轴和子叶是适宜外植体;外植体愈伤组织的产生首先需要黑暗条件的启动,其扩增与生长分化则须在光照条件下进行;不同基因型外植体在C5培养基上的愈伤组织诱导率和诱导指数存在显著差异(P=0.05水平).     

肉桂酸和不同光质对葡萄愈伤组织增殖及白藜芦醇累积的效应

以葡萄品种"黑比诺"叶片诱导出的愈伤组织为材料,研究了不同浓度的肉桂酸和不同光质对葡萄愈伤组织增殖及对其中白藜芦醇合成的影响.结果表明:肉桂酸浓度为21mg·mL-1时,白光有最利于葡萄愈伤组织的增殖;在肉桂酸浓度为27mg·mL-1时,绿光最有利于葡萄愈伤组织的增殖;白藜芦醇含量在肉桂酸浓度为27mg·mL-1的白光下最高,但产量却在蓝光下最高;葡萄愈伤组织采收后经紫外强度8μmol.m-2.s-1处理10min可显著提高其中的白藜芦醇含量;而当肉桂酸与紫外两个因素共同作用时对白藜芦醇合成的促进作用不如两因素单独作用时的强.     

水稻成熟胚愈伤组织的诱导和分化因素的研究

采用水稻成熟胚的盾片诱导愈伤组织,通过优化培养基组合和调节培养时间,建立了适合水稻遗传转化的胚性愈伤体系,为水稻建立高效的转化体系提供了技术依据。试验结果表明:培养基组合NN(NMB+NB)有利于胚性愈伤组织的诱导和分化。     

不同基因型玉米幼胚愈伤组织的培养特性

为了研究不同基因型玉米自交系幼胚愈伤组织的培养特性,选取19个玉米自交系(属于5个杂种优势类群)为试验材料,以授粉后10～12 d的玉米幼胚为外植体,研究不同基因型和培养基对玉米幼胚愈伤组织诱导率的影响。结果表明,供试材料均能通过幼胚愈伤诱导培养形成愈伤组织,其中11个自交系的愈伤组织能分化获得再生植株。Reid、旅大红骨和其他种质3个杂种优势类群中的B73、黄C、478,综31,178、501、先早17、旱21等8个自交系具有较好的幼胚培养特性和植株再生特性,愈伤组织诱导率高,且愈伤整齐、大小适中、植株再生率高,适宜作为受体材料进行遗传转化。幼胚在附加4 mg／L 2,4-D且去掉水解酪蛋白和L-脯氨酸的N6改良培养基上,幼芽及根的数量少、出愈率高、愈伤组织质地好,并明显减少了幼胚自发性芽分化的趋势,有利于保持愈伤组织胚性、提高再生植株频率,为玉米自交系幼胚诱导的适宜培养基。     

露水草愈伤组织的诱导及分化研究

以露水草的种子为外植体,以10%次氯酸钠为消毒剂,以20~30 min为消毒时间建立无菌苗具有最好效果;MS培养基较适合露水草愈伤组织的形成和芽的分化;以MS 6-BA 1.0 mg/L NAA 1.0 mg/L的激素组合诱导露水草的种子和茎形成愈伤组织,并分化成芽具有较好效果,露水草的根、叶形成愈伤组织的能力较差;露水草的种子、茎段易于诱导形成不定芽;KT、6-BA对露水草不定芽的形成是必要的,其效果明显优于ZT和2-ip,以MS KT1.0 mg/L NAA0.1 mg/L或MS 6-BA1.0 mg/L NAA 0.1 mg/L的激素组合诱导露水草的种子、茎段形成不定芽具有较好效果。     

亚麻愈伤组织、不定根及不定芽的超微结构研究

试验通过扫描电镜对亚麻不同类型的愈伤组织、不定根和不定芽进行了超微结构观察。结果表明,以子叶或者下胚轴为外植体诱导的初始愈伤组织表面都较质密,细胞之间排列紧密没有空隙;胚性愈伤组织表面较光滑,细胞形状较规则,细胞形成团粒结构,形成团粒的细胞之间结合紧密,团粒与团粒之间结合松散,可观察到大的空隙。非胚性和褐化愈伤组织细胞形状不规则体积较大,表面形状不规则,有较多的覆盖物。不定根和不定芽表面有表皮毛。     

不同植物生长调节剂对莴苣愈伤组织的诱导与植株再生的影响

探讨了莴苣组织培养中不同植物生长调节剂对莴苣愈伤组织的诱导及植株再生的影响.试验结果表明,采用下胚轴为外植体进行愈伤组织诱导,MS 2,4-D 1.0 mg/L 6BA 0.5 mg/L NAA 0.1 mg/L有利于下胚轴愈伤组织的生成,诱导率达95%;MS 6BA 1.0 mg/L NAA 0.2 mg/L培养基有利于从愈伤组织上诱导出芽,诱导率可达100%;幼苗经1/2MS NAA 0.5 mg/L培养基诱导生根后成为完整的植株.     

猬实下胚轴愈伤组织的生长和器官分化研究

通过对猬实下胚轴离体培养的研究 ,结果表明 :在Ms培养基上 ,BA (1～ 3)mg/l和NAA (0 1～ 1 )mg/L配合能诱导愈伤组织生长良好。在BA (1～ 3)mg/L和NAA (0 1～ 0 2 )mg/L配合下能诱导愈伤组织芽分化。0 2mg/LNAA或IBA诱导无根苗生根效果明显。通过愈伤组织芽分化途径可以获得完整植株     

抗生素对高粱愈伤组织诱导和生长的影响

用羧苄青霉素等抗生素进行抑菌试验,以羧苄青霉素和头孢霉素的抑菌效果较好.头孢霉素对高梁愈伤组织的毒性表现出比羧苄青霉素大.浓度低于500 mg/L羧苄青霉素对高梁愈伤组织的生长起促进作用;而分化率随着羧苄青霉素浓度的提高而下降.在农杆菌介导高梁遗传转化时,选用羧苄青霉素是合适的,浓度以250 mg/L为宜.高梁愈伤组织对潮霉素的反应比卡那霉素更敏感,高梁不同基因型愈伤组织对卡那霉素和潮霉素的反应在褐化(死亡)率上表现不同.在以潮霉素作为抗性筛选标记时,选择压以50～75 mg/L为宜.