运用RAPD分析菊花辐射变异后代遗传差异

以不同辐射剂量的^60Co-γ射线处理菊花愈伤组织，获得变异后代，从分子水平上检测不同辐射剂量对植物遗传物质的影响，运用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术对5种变异株和对照进行分子标记和遗传突变的研究，建立了适合RAPD的反应体系，优化其反应条件，从25种引物中筛选出的6种引物表现出明显的多态性差异，共扩增出72条带。结果表明，经过不同辐射剂量处理获得的变异菊花在DNA水平上存在多态性差异，分析了多态性产生的机理和变异株间遗传物质的差异，并讨论了RAPD的可靠性和辐射变异的机理。     

紫色马铃薯“黑美人”辐射处理表型及DNA变异鉴定

利用60 Coγ射线对紫色马铃薯品种黑美人萌芽薯块进行诱变处理。诱变材料表型鉴定结果表明,辐照剂量与出苗率呈显著负相关,其半致死剂量为70Gy,致死剂量为80Gy。辐照处理能显著延缓出苗时间,导致叶片减少、茎杆变细、植株变矮。高剂量处理可提高分枝数。与CK相比,各处理结薯数差异不显著。单株产量随辐照剂量增加而降低,CK处理显著高于其他处理。在表型鉴定的基础上,利用SSR分子标记对辐射材料进行DNA检测。10对引物集团选择结果表明,6对具有多态性,共获得10条多态性条带,平均每对引物有1.7条。单株检测共获得扩增条带28条,其中8条有多态性,多态性比率为28.9%。说明,辐射可引起紫色马铃薯黑美人表型和DNA水平的变异。     

唐菖蒲“江山美人”经60Co-γ射线辐射后基因变异的RAPD检测

唐菖蒲"江山美人"经过0GY、25GY、50GY、75GY、100GY、150GY剂量60Co-γ射线照射后,对主要观赏性状变异进行观测并利用RAPD技术检测基因变异。建立了适用于唐菖蒲RAPD分子标记的反应体系,从12条随机引物中筛选出9条可扩增出多态性条带的引物。对扩增产物进行数据分析,结果表明RAPD技术能够检测出辐射后唐菖蒲基因组变异情况,可用于对唐菖蒲辐射后基因变异的分析。     

60Coγ辐射诱导马铃薯(Solanum tuberosum)基因组变异的SRAP标记分析

[目的]探讨60Coγ射线对马铃薯(Solanum tuberosum)染色体的诱变效应.[方法]采用不同辐照剂量的γ射线对费乌瑞它微型薯进行辐射处理,利用SRAP分子标记,对不同处理的VM1代及VM2代基因组变异进行分析.[结果]VM1代分析结果表明,88对引物有30对表现多态性,引物多态性比率为34.1％,共获得225条扩增条带,其中64条为多态性条带,条带多态性比率为28.4％.多态性表现形式有条带增加和缺失.选择25对有多态性的引物对VM2代进行扫描,5对显带不良,20对中有9对表现多态性,获得多态性条带9条,其中仅4条在VM1中检测到,其余5条是新增的缺失条带.VM1代的多态性条带在VM2代中的检出率仅为9.8％.选择表现稳定、清晰的9条多态性条带进行回收、克隆、测序,获得6个片段的DNA序列.经比对分析,5个片段序列与马铃薯染色体组部分片段的相似性为77％～89％,其中3个序列位于抗性基因簇中;另1个片段序列与番茄第5染色体的部分序列相似性为93％.[结论]γ辐照可以导致马铃薯基因组DNA发生变异,多态性条带数与辐照剂量之间没有明显的相关性,变异的多态性条带缺失数高于条带增加数.     

60Coγ辐射诱导马铃薯（Solanum tuberosum）基因组变异的SRAP标记分析（英文）

[目的]探讨60Coγ射线对马铃薯(Solanum tuberosum)染色体的诱变效应。[方法]采用不同辐照剂量的γ射线对费乌瑞它微型薯进行辐射处理,利用SRAP分子标记,对不同处理的VM1代及VM2代基因组变异进行分析。[结果]VM1代分析结果表明,88对引物有30对表现多态性,引物多态性比率为34.1%,共获得225条扩增条带,其中64条为多态性条带,条带多态性比率为28.4%。多态性表现形式有条带增加和缺失。选择25对有多态性的引物对VM2代进行扫描,5对显带不良,20对中有9对表现多态性,获得多态性条带9条,其中仅4条在VM1中检测到,其余5条是新增的缺失条带。VM1代的多态性条带在VM2代中的检出率仅为9.8%。选择表现稳定、清晰的9条多态性条带进行回收、克隆、测序,获得6个片段的DNA序列。经比对分析,5个片段序列与马铃薯染色体组部分片段的相似性为77%~89%,其中3个序列位于抗性基因簇中;另1个片段序列与番茄第5染色体的部分序列相似性为93%。[结论]γ辐照可以导致马铃薯基因组DNA发生变异,多态性条带数与辐照剂量之间没有明显的相关性,变异的多态性条带缺失数高于条带增加数。     

~(60)Coγ辐射诱导马铃薯(Solanum tuberosum)基因组变异的SRAP标记分析(英文)

[目的]探讨60Coγ射线对马铃薯(Solanum tuberosum)染色体的诱变效应。[方法]采用不同辐照剂量的γ射线对费乌瑞它微型薯进行辐射处理,利用SRAP分子标记,对不同处理的VM1代及VM2代基因组变异进行分析。[结果]VM1代分析结果表明,88对引物有30对表现多态性,引物多态性比率为34.1%,共获得225条扩增条带,其中64条为多态性条带,条带多态性比率为28.4%。多态性表现形式有条带增加和缺失。选择25对有多态性的引物对VM2代进行扫描,5对显带不良,20对中有9对表现多态性,获得多态性条带9条,其中仅4条在VM1中检测到,其余5条是新增的缺失条带。VM1代的多态性条带在VM2代中的检出率仅为9.8%。选择表现稳定、清晰的9条多态性条带进行回收、克隆、测序,获得6个片段的DNA序列。经比对分析,5个片段序列与马铃薯染色体组部分片段的相似性为77%⁸9%,其中3个序列位于抗性基因簇中;另1个片段序列与番茄第5染色体的部分序列相似性为93%。[结论]γ辐照可以导致马铃薯基因组DNA发生变异,多态性条带数与辐照剂量之间没有明显的相关性,变异的多态性条带缺失数高于条带增加数。     

砀山酥梨60Coγ射线辐射诱变效应及其RAPD标记检测

为探索辐射对砀山酥梨新梢生长和诱变效应的影响,探讨分子标记辅助辐射诱变育种新技术,利用砀山酥梨休眠枝条进行60Coγ射线辐照处理,枝条高接后分别对萌芽率、新梢生长量进行统计.提取不同处理叶片基因组DNA,利用RAPD分子标记分析处理剂量对基因组DNA变异的影响.结果表明,30 Gy、40 Gy和50 Gy处理的萌芽率分别为0.7257、0.5427和0.1940,新梢生长量分别为48.21、35.47和25.67 cm.从42个随机引物中筛选出10条适宜引物对材料变异进行分析,发现随辐射剂量的增加,萌芽率、新梢生长量随之降低,分子检测变异程度随之增大.     

蝴蝶兰60Coγ射线辐照材料的RAPD分子标记研究

为获得V31蝴蝶兰的最佳辐射诱变剂量,利用60Coγ射线对其组培盆栽苗进行不同剂量的辐照处理,取辐射处理苗新叶提取g-DNA,应用RAPD-PCR技术进行扩增。试验结果表明,利用从40个随机中筛选出的13条引物,共扩增出60条谱带,其中特异性条带26条。对不同处理及对照扩增的谱带进行聚类分析发现,15Gy处理整体变异程度最大,1Gy变异最小。因此,认为V31蝴蝶兰的最佳辐射诱变剂量为15Gy。     

猕猴桃~(60)Co-γ射线辐射诱变植株变异的ISSR分子标记研究

分析不同辐射处理后"长果"猕猴桃(Actinidia longicarpa)样本的变异性,为猕猴桃诱变育种及加快猕猴桃育种进程提供理论基础。采用0(CK)、40、60、80和100 Gy~(60)Co-γ射线辐射处理"长果"猕猴桃接穗后,用ISSR分子标记技术对5种处理后的55个样品的多态性进行研究。结果表明:从100条寡聚核苷酸引物中筛选出7条引物进行标记,平均每条引物扩增出14.3条带,其中6.7条多态性带,多态性比率为46.85%;遗传相似系数为0.79~1.00,聚类分析表明,第V类为60Gy 6~8号植株,与对照的遗传距离最远,变异程度最大。因此,辐射诱变可导致猕猴桃发生显著的遗传变异,利用ISSR分析方法,可准确测定辐照样本是否为突变体。     

多倍体诱导和~(60)Co γ射线辐射对彩色马蹄莲Parfait分子水平遗传变异的影响

采用RAPD分子标记,对彩色马蹄莲Parfait(Pr)及其秋水仙素诱导的四倍体(Pr-d)和20、40、60 Gy60Coγ射线辐射诱变后代(Pr-1、Pr-2和Pr-4)分子水平的变异进行研究。从40个寡聚核苷酸引物种筛选出14个合适的引物进行扩增,5个样品共扩增出位点90个,平均每个引物扩增出6.29个位点;其中,多态性位点39个,多态性位点的比率为43.33%。此外,还观察到的等位基因数(na)为1.4021个,有效等位基因数(ne)为1.2965个,Nei's基因多样性(h)为0.166 6,Shannon's多样性指数(I)为0.242 1。可见,多倍体诱导和辐射诱变使彩色马蹄莲Parfait在分子水平产生了一定的变异,丰富了彩色马蹄莲遗传多样性。通过聚类分析将5个样品可分为2支,其中Pr、Pr-2和Pr-d聚为一支,Pr-1和Pr-4聚为一支。     

~（60）Co-γ射线对百合鳞片辐射效应的研究

[目的]探讨60Co-γ射线对白狐狸、西伯利亚和索蚌3个百合品种的无菌鳞片再生不定芽及当代植株的影响,为进一步育种工作提供参考依据。[方法]用不同剂量的60Co-γ射线对白狐狸、西伯利亚和索蚌3个百合品种的无菌鳞片进行辐射,并观察辐射对其再生不定芽及当代植株的影响。[结果]随着辐射剂量的提高,百合不定芽再生频率、死亡率、平均不定芽数都趋于降低;白狐狸、索蚌、西伯利亚的鳞片适宜辐射剂量分别为6.0、4.0、6.0 Gy;3个百合品种对60Co-γ射线敏感性由强到弱依次为：索蚌〉白狐狸〉西伯利亚;试验中获得花粉败育植株。[结论]60Co-γ射线辐射对百合体细胞的伤害巨大,辐射时要注意辐射剂量的选择。     

GA对3类观赏百合继代培养中芽增殖的影响

在3类观赏百合东方百合马可、亚洲百合新中心、铁炮百合白狐进行继代培养的MS培养基中,分别添加不同浓度的赤霉素(GA)和添加不同浓度GA、细胞分裂素(KT)、生长素(NAA)互作配比组合的试验结果表明,GA与KT及NAA互作比单独使用GA和不添加激素(CK)对3类百合芽增殖的促进作用都比较明显.其中以添加GA 0.5 mg/L处理的诱导效果最好,其次为添加GA 0.1 mg/L的处理,在相同GA浓度下,以马可百合芽增殖效果最好,其次为白狐,新中心最差;在MS中添加GA 0.5 mg/L、KT 1.0 mg/L、NAA 0.5 mg/L时马可的芽增殖最多;在MS中添加GA 0.1 mg/L、KT 0.5 mg/L、NAA 1.0 mg/L时白狐的芽增殖最多,在MS中添加GA 1.0mg/L、KT 1.0 mg/L、NAA 0.5 mg/L时新中心的芽增殖最多.     

~(60)Co-γ射线对百合薄切片的诱变效应研究

用不同剂量的60Co-γ射线辐射白狐狸、西伯利亚和索蚌3个百合品种的中层鳞片薄切片,然后观察测定其不定芽再生频率、平均不定芽数、变异率及死亡率。结果表明:随着辐射剂量的提高,不定芽再生频率、平均不定芽数都随之降低或减少,并达到显著或极显著水平;白狐狸、西伯利亚、索蚌的鳞片薄切片的适宜辐射剂量分别为1.0、1.0、0.5Gy,3个百合品种对γ射线的敏感性由弱到强依次为:西伯利亚<白狐狸<索蚌。     

寄主植物对百合上桃蚜的影响研究

对广东百合种植区进行了系统调查,结果表明为害宜兴百合Lilium peciosum的蚜虫有桃蚜Myzus persicae和豆蚜Aphis craccivora,其中桃蚜发生的数量较多。在百合未出苗前,1-3月桃蚜主要在小白菜和芥菜为害,并在这些作物上越冬,转入春季后,当食料条件发生变化后,产生有翅蚜迁出,当年3—6月主要在百合上为害,当百合现蕾及成熟后,又产生有翅蚜迁出,在菊花和茄子等植物上为害,随后再转到小白菜和芥菜上为害。当地种植的小白菜Brassica campestris var．Chinensis、芥菜B．juncea等植物都属于桃蚜的嗜食寄主。通过组建不同寄主上实验种群生命表,表明桃蚜在百合和小白菜上种群趋势指数分别为28．512和27．027,最有利于桃蚜种群的增长。     

部分睡莲属植物形态性状的多样性分析

对睡莲属60份材料33个形态性状进行统计分析,结果表明:睡莲属植物具有丰富的形态多样性,平均多样性指数为1446,总体上是数值性状形态多样性指数大于非数值性状;平均变异系数3639%,变异系数和多样性指数的变化趋势相反.通过主成分分析,将33个性状综合为5个主成分,第一主成分的方差贡献率为2871%,第二主成分的方差贡献率为1885%;基于形态性状的聚类分析把60份材料聚为2类,第1类16份材料均为热带睡莲,其心皮离生、叶缘有锯齿,第2类44份材料均为耐寒睡莲,其心皮合生、叶缘无锯齿、无胎生现象.     

崇明白山羊遗传多样性的ISSR分析

应用ISSR分子标记对崇明白山羊3个群体和黄淮山羊群体进行遗传多样性分析。用筛选出的12条引物对127个个体进行扩增,共扩增出147条谱带,其中多态性谱带67条。分析结果显示:崇明白山羊遗传多样性较为丰富,在物种水平上平均多态位点百分率(PPB)=42.18%,Shannon's信息指数(Ho)=0.2085;在群体水平上,PPB=38.55%,Ho=0.1946。崇明白山羊各群体间遗传差异较小,遗传稳定性较高。UPGMA聚类分析显示:崇明白山羊3个群体间亲缘关系较近,优先聚为1支,再与黄淮山羊相聚。     

应用分子标记探讨一种野生百合的分类地位

为了探讨采白辽宁省丹东市一种百合(Lilium)种质(简称丹东百合)的分类地位.应用RAPD(随机扩增多态性)分子标记方法对包括丹东百合在内的13种百合种质资源进行了亲缘关系分析.结果表明:丹东百合属于野百合种,与白天堂遗传距离最近,遗传距离为0.2667,与西伯利亚遗传距离最远,遗传距离为0.4286.     

基于灰色关联度分析的百合品种评价

以从荷兰引进的6个百合品种为试验材料,采用灰色关联度分析法,对各品种鳞茎、植株表型性状及鳞茎相关生理指标进行综合评价。结果表明,东方百合布里杨松关联度(0.8104)最接近参考品种,综合性状表现优良,其次是白天使(0.7962)、特里昂菲特(0.7129)、黄金城(0.6749)、白天堂(0.5937)和帕索里尼(0.5858)。可知,东方百合布里杨松较适宜进行推广种植或考虑作为杂交亲本。     

不同百合幼苗耐寒性研究

以百合3个野生种和8个商业品种组织培养苗为试验材料,通过低温胁迫,测定叶片相对电导率、丙二醛含量、抗氧化酶类(SOD,CAT,POD)活性,研究其耐寒性。结果表明,随着低温胁迫时间的延长,所有供试百合相对电导率和抗氧化酶类活性逐渐增强,丙二醛含量变化随不同百合品种而有所不同。综合分析表明,3个野生种和8个商业品种的耐寒性依次为玫红百合>兰州百合>淡黄花百合>查理>回归线>王室之夏>黄天霸>雷山1号>白狐狸>皇族>埃及。该研究为选择百合露地栽培品种,降低生产成本及筛选培育耐寒品种提供一定的理论依据。     

白黄侧耳子实体颜色遗传规律

【目的】研究白黄侧耳子实体颜色的遗传规律,为平菇的色泽定向育种提供遗传学依据。【方法】以白黄侧耳Pleurotus cornucopiae白色菌株CCMSSC00358（P-w）和深灰色菌株CCMSSC00406（P-d）为材料,构建自交系2个(P-w×P-w、P-d×P-d）,两亲本杂交一代（F1,P-w×P-d）,杂交一代中浅灰色和深灰色子实体与二亲本的回交系4个（F1浅×P-w、F1浅×P-d,F1深×P-w、F1深×P-d）,共7个家系群体。出菇期观测统计各家系群体不同颜色的个体数。【结果】菌株P-w的自交系出菇29个,子实体全部为白色。菌株P-d的自交系出菇17个,子实体浅灰色5个、深灰色12个,经卡方检验,浅灰色﹕深灰色＝1﹕3。杂交一代（F1,P-w×P-d）出菇82个,子实体颜色呈现由浅向深的连续分布,无白色子实体出现。按照深浅分为浅灰色和深灰色两大类,分别为47个和35个,经卡方检验,比例为1﹕1。在回交系中,F1代与白色亲本杂交,经卡方检验,出现深灰色﹕浅灰色﹕白色=1﹕4﹕3的分离;与深灰色亲本杂交,无白色子实体出现,经卡方检验深灰色﹕浅灰色=5﹕3。【结论】白黄侧耳子实体的颜色性状为数量性状,深灰色对白色呈不完全显性,由不同位点上的两对主基因控制。