利用辐射诱变及分子标记辅助筛选进行苦瓜种质创新

[目的]对苦瓜不同材料干种子进行辐射诱变,并利用分子标记对突变植株进行筛选,建立一套苦瓜种质创新和遗传改良的快速高效技术体系,为苦瓜遗传育种提供参考.[方法]以3个苦瓜资源MC1、MC42、MC52干种子为材料,利用60Co-γ射线进行不同辐射剂量(0、600、700、800、900、1200、1500 Gy)处理,调查其发芽率、出苗率、成苗率,以确定适宜辐射剂量;利用SRAP分子标记对诱变植株M2代突变单株进行筛选,并根据雌花率、农艺性状、抗病性等指标对雌性系连续多代进行田间定向选育,培育苦瓜雌性系.[结果]与对照(0 Gy)相比,经600～1500 Gy辐射处理后,不同苦瓜材料干种子的发芽率、出苗率及成苗率整体呈下降变化趋势;MC1、MC42和MC52干种子的半致死剂量分别为900、700和600 Gy,适宜苦瓜的辐射剂量为600～700 Gy,成苗率为确定辐照剂量的可靠敏感性测定指标.在M2代利用SRAP分子标记对18571个单株进行筛选,获得突变单株508株,其中纯雌单株116株,雌花率≥50％的强雌性单株162株;对获得的突变单株连续进行3代田间定向筛选,成功筛选获得8个综合性状优良的突变雌性系,其中MC1-M52株、MC42-M53株、MC52-M53株,均存在多个位点的DNA变异.[结论]选择适合剂量的60Co-γ射线进行辐射诱变,结合“直接PCR试剂盒+SRAP分子标记”对苦瓜M2代进行高通量突变单株筛选,并连续进行田间多代定向筛选,是创新苦瓜种质的高效便捷手段.     

砀山酥梨60Coγ射线辐射诱变效应及其RAPD标记检测

为探索辐射对砀山酥梨新梢生长和诱变效应的影响,探讨分子标记辅助辐射诱变育种新技术,利用砀山酥梨休眠枝条进行60Coγ射线辐照处理,枝条高接后分别对萌芽率、新梢生长量进行统计.提取不同处理叶片基因组DNA,利用RAPD分子标记分析处理剂量对基因组DNA变异的影响.结果表明,30 Gy、40 Gy和50 Gy处理的萌芽率分别为0.7257、0.5427和0.1940,新梢生长量分别为48.21、35.47和25.67 cm.从42个随机引物中筛选出10条适宜引物对材料变异进行分析,发现随辐射剂量的增加,萌芽率、新梢生长量随之降低,分子检测变异程度随之增大.     

甜菜离子注入诱变早熟突变体的RAPD分子标记筛选

以离子注入诱变技术获得的甜菜早熟突变体W11和未做诱变处理的7208为对照材料,提取DNA并进行RAPD分析,选取800条RAPD随机引物对W11和7208进行扩增,结果表明,W11?208之间在DNA水平上存在差异.从800条随机引物中筛选到45条在W11和7208中存在差异, 存在差异的引物占所用引物数的5.6;,表明W11和7208种的相似性很高.该研究利用W11和 7208做亲本构建分子标记作图群体,进而定位早熟性状基因或QTL奠定了基础.     

EMS诱变技术及其在小麦研究中的应用进展

甲基磺酸乙酯(EMS)是一种常用的化学诱变剂,能诱发产生高频率的基因和染色体突变。近年来,依托突变体的创建为基础的基因定位、克隆和功能基因研究得以迅速拓展。从小麦EMS诱变、最佳处理剂量与表型、生理生化、分子标记鉴定,产量、品质、抗逆、抗感病等关键性状突变体筛选以及小麦异源易位系创制与诱导小麦条锈菌毒性突变、突变库的利用等多方面对我国在EMS诱变及其在小麦研究中的应用进展进行了综述,并对EMS技术的发展前景及趋势进行了展望,以期为今后的诱变育种提供研究参考。     

甜菜离子注入诱变高糖突变体的RAPD分子标记筛选

以离子注入诱变技术获得的甜菜高糖突变体S10和未做诱变处理的F104及F2代85株单株为研究材料,提取DNA并进行RAPD分析,选取800条RAPD随机引物对S10和F104进行扩增,结果表明,S10和F104之间在DNA水平上存在差异.从800条随机引物中筛选到19条引物在S10和F104中存在较稳定差异,存在差异的引物占所用引物数的2.3;,该研究利用S10和F104做亲本构建分子标记作图群体,进而为定位高糖性状基因或QTL奠定了基础.     

石刁柏辐射诱变的遗传学分析与RAPD研究

以60Co-γ作为辐射源,对石刁柏愈伤组织进行5个不同剂量的辐射诱变,经细胞学鉴定和RAPD分析,不同辐射剂量的辐射诱变效果有明显差异.采用细胞学鉴定染色体结构变异,辐射剂量为1、5、10、20Gy的材料变异率分别为9.4%、36.5%、31.2%、48.2%,在石刁柏辐射品种的RAPD鉴定中,从100个随机引物中筛选...     

运用RAPD分析菊花辐射变异后代遗传差异

以不同辐射剂量的^60Co-γ射线处理菊花愈伤组织，获得变异后代，从分子水平上检测不同辐射剂量对植物遗传物质的影响，运用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术对5种变异株和对照进行分子标记和遗传突变的研究，建立了适合RAPD的反应体系，优化其反应条件，从25种引物中筛选出的6种引物表现出明显的多态性差异，共扩增出72条带。结果表明，经过不同辐射剂量处理获得的变异菊花在DNA水平上存在多态性差异，分析了多态性产生的机理和变异株间遗传物质的差异，并讨论了RAPD的可靠性和辐射变异的机理。     

甜瓜RAPD反应体系的优化

以甜瓜单性花类型植株为材料,采用改良的CTAB法提取基因组,对影响RAPD反应的各种因子进行筛选。结果表明:在20μL反应体积中,RAPD优化反应体系为:模板DNA浓度2.5ng/μL,dNTP 0.25 mmol/L,随机引物0.8μmol/L,TaqDNA聚合酶1.0U。利用此优化的反应体系,采用BSA法筛选出一条长约550bp与甜瓜单性花相关基因连锁的分子标记。     

甘蓝型油菜细胞质雄性不育恢复基因的分子标记及定位

以甘蓝型油菜恢复系CP015和不育系77A构建的F2群体为供试材料,运用RAPD,SSR和AFLP 3种标记技术,对甘蓝型油菜恢复基因进行分子标记和图谱定位。在260条RAPD引物、185对SSR引物、58对AFLP引物中,在两亲本间筛选多态性高的RAPD引物121条,SSR引物128对,AFLP引物组合26对,进一步通过BSA法筛选,获得了与甘蓝型油菜恢复基因Rf连锁的1个RAPD标记S1009-750和1个AFLP标记E5M11-150,标记与基因Rf之间的遗传距离分别为4.9cM和8.6cM。     

空间诱变后的水稻SSR标记变异特征研究

对经过卫星搭栽的水稻品种抗倒丝苗种子及后代进行了微卫星标记分析和有关性状研究.随机选用151对分布于水稻12条染色体上的微卫星引物对抗倒丝苗及其21个突变株系进行分子标记检测.结果发现突变株系与原种相比都存在多个标记座位的突变.突变标记座位的多少随突变系与原种间差异大小而变化.试验结果表明,空间诱变可使水稻的DNA分子在多个区段发生重复或缺失等结构性变异,从而使水稻的表型及生理指标发生变异.