胎衣不下奶牛胎盘中孕酮和雌激素含量变化的研究

通过研究胎衣不下奶牛胎盘组织中孕酮和雌激素的含量变化,探讨了奶牛发生胎衣不下的内分泌学机制.将20头奶牛分为健康对照组和胎衣不下组,分别采集健康奶牛和胎衣不下奶牛的胎儿胎盘,制备胎盘组织匀浆液,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测其中的孕酮和雌激素的含量.结果发现,胎衣不下组奶牛胎盘组织中的孕酮含量高于健康对照组奶牛,差异极显著(P<0.01);而雌激素含量低于健康对照组,差异极显著(P<0.01).表明胎盘组织中孕酮和雌激素的含量与奶牛胎衣不下的发生密切相关.     

胎衣不下奶牛胎盘中TNF-α和IL-10含量变化的研究

[目的]通过研究胎衣不下奶牛胎盘组织中TNF-α和IL-10含量的变化,探讨奶牛发生胎衣不下的免疫学机制。[方法]采集健康奶牛和胎衣不下奶牛的胎儿胎盘,制备胎盘组织匀浆液,用酶联免疫吸附法（ELISA）检测其中的TNF-α和IL-10含量。[结果]胎衣不下组奶牛胎盘组织中的TNF-α含量高于健康组奶牛,差异极显著（P〈0．01）;IL-10含量低于健康组奶牛,差异显著（P〈0．05）。[结论]胎盘组织中TNF-α和IL-10的含量与奶牛胎衣不下的发生有着密切关系。     

胎衣不下奶牛母体胎盘差异表达bta-miR-31分析及验证

通过分析及验证胎衣不下奶牛母体胎盘组织中差异bta-miR-31,探讨奶牛胎衣不下的发病机理。选取年龄胎次体重等因素无明显差异并且排除其他疾病影响的胎衣正常排出奶牛(N)和胎衣不下奶牛(F)各3头作为我们的研究对象,利用Hi Seq高通量测序技术,分析两组奶牛的母体胎盘组织间bta-miR-31的差异表达变化,并运用q RT-PCR对其进行验证。胎衣不下奶牛母体胎盘中bta-miR-31与正常排出组奶牛相比表达量明显偏高,经Spss19.0分析结果为P0.01,两组数据表现出极显著的差异。发生胎衣不下的奶牛母体胎盘中bta-miR-31异常表达,提示bta-miR-31可能参与胎衣不下的发生。     

奶牛产后胎盘组织中RhoA/Rho激酶的表达与胎衣不下的关系探讨

通过检测胎衣不下组与对照组奶牛子宫肉阜组织中RhoA及Rho的mRNA表达量,探讨RhoA/Rho激酶与胎衣不下的关系。选择自然分娩未患其他疾病的胎衣不下(RFM)与健康奶牛(NFM)各6头为研究对象并分两组,采集两组奶牛的子宫肉阜组织。用Q-PCR方法检测两组奶牛肉阜组织中RhoA及Rho的m RNA表达量。结果显示:胎衣不下奶牛胎盘中的Rho、RhoA的m RNA表达量显著低于对照组,经SPSS19.0分析P0.05,两组数据表现出显著差异。胎衣不下发生时母体胎盘中的Rho、RhoA表达异常,说明RhoA及Rho表达量下调与胎衣不下有统计学联系。     

浅析奶牛胎衣不下的治疗措施

1胎衣不下的病因能影响胎盘正常分离的所有因素都能导致胎衣不下。据调查,造成胎衣不下的病因主要与胎盘正常分离障碍,子宫收缩无力以及机械性妨碍胎衣排出有关。1．1胎盘分离障碍1．1．1胎盘未成熟这是造成非传染性流产或早期分娩的母牛胎衣不下的重要原因。奶牛的妊娠期长短决定与品种,也可受特殊公牛的影响。胎衣不下的发生率取决于排出胎儿时的妊娠时间的长短。胎儿胎盘和母体胎盘之间的松动和分离过程取决于胎盘的组织学变化,而分娩前及分娩时母畜体内某些内分泌激素和酶含量的变化是促使胎盘组织成熟的重要因素。特别是雌激素、孕酮和前列腺素（PGF）的含量变化以及雌激素和孕酮二者含量之间的比例关系,可直接影响到胎盘成熟及产后子宫收缩活动,影响胎衣的正常排出。而早产时,无论是自然因素造成还是人为的促成,将导致机体内某此内分泌激素的含量不能像怀孕期满那样,发生协调而正常的变化,最终影响胎盘的成熟及产后子宫的正常收缩活动,致使胎衣不下。     

奶牛胎衣不下的防治

奶牛胎衣不下又称胎衣滞留或胎盘停滞,母牛产后一般12小时排出胎衣,若12小时后还未见胎衣排出便可诊断为胎衣不下。胎衣不下的原因有很多,子宫收缩无力是最为常见的原因,由于钙、磷等元素缺乏、运动量不足、缺硒和缺维生素E等造成子宫收缩无力,使奶牛产后胎衣不下的发病率居高不下;频繁更换饲草饲料且饲料单一,也会导致奶牛产后胎衣不下。由于布氏杆菌病、胎儿弧菌症、毛滴虫或其它微生物感染引起子宫和胎盘炎,使母体胎盘与胎儿胎盘发生炎性粘连,也可引起胎衣不下。     

奶牛胎衣不下的防治约

奶牛胎衣不下又称胎衣滞留或胎盘停滞,母牛产后一般12小时排出胎衣,若12小时后还未见胎衣排出便可诊断为胎衣不下。胎衣不下的原因有很多,子宫收缩无力是最为常见的原因,由于钙、磷等元素缺乏、运动量不足、缺硒和缺维生素E等造成子宫收缩无力,使奶牛产后胎衣不下的发病率居高不下;频繁更换饲草饲料且饲料单一,也会导致奶牛产后胎衣不下。由于布氏杆菌病、胎儿弧菌症、毛滴虫或其它微生物感染引起子宫和胎盘炎,使母体胎盘与胎儿胎盘发生炎性粘连,也可引起胎衣不下。     

奶牛胎衣不下的诊治

奶牛胎衣不下又称胎衣滞留或胎盘停滞,母牛产后12小时胎衣仍未排出就是胎衣不下,是母牛产后的一种常见病。一、发病原因1.产后子宫收缩乏力,导致胎儿胎盘与母体胎盘部分或完全不能分离而发生滞留。2.妊娠后期运动不足,营养不良或其他疾病等因素造成的体虚;胎水过多、双胎、子宫损伤、难产或过早助产也会造成胎衣不下。     

奶牛胎衣不下的手术疗法

兽医临床表明,奶牛胎衣不下的发生率远远大于其他家畜。奶牛分娩后出现胎衣不下占键康分娩奶牛的8%～30%不等。引起奶牛分娩后胎衣不下的原因很多,主要与奶牛特殊的胎盘构造、怀孕期间胎盘发炎、产后子宫收缩无力等有关。奶牛发生胎衣不下后,会引发子宫内膜炎、不孕症,甚至死亡     

“胎衣顺畅Ⅱ”治疗奶牛胎衣不下的研究

选用胎衣不下奶牛9例(试验组),产后健康奶牛9例(对照组),试验组产犊后8h服用中西兽药合剂"胎衣顺畅",并分别在产后8h、12h、16h采血分离血浆,测定血浆中一氧化氮(NO)含量、谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)含量、丙二醛(MDA)含量,探讨胎衣不下的发病机制和"胎衣顺畅"治疗胎衣不下的作用。实验结果表明:"胎衣顺畅"具有显著降低NO含量、清除氧自由基和治疗胎衣不下的作用。     

奶牛胎盘还原性多肽不同蛋白酶酶解方法建立与优化

为高效制备奶牛胎盘还原性多肽,试验选择自然分娩脱落健康中国荷斯坦奶牛新鲜胎盘,冰浴条件下12000 r·min-1匀浆化,分别采用木瓜蛋白酶和胃蛋白酶酶解,以奶牛胎盘组织匀浆为底物,基于Box-Behenken中心响应法,在底物浓度10％、30％、50％,酶底比1％、3％、5％,酶解时间3、5、7 h条件下制备胎盘多肽,使用普鲁士蓝法以维生素C为标准曲线检测其还原力.分析各因素对提取率和还原力影响及二者间相关性,采用响应面回归分析具有最高提取率和还原力提取方法,并加以验证.基于结果,以每克胎盘提取多肽具有的还原能力作为综合提取率(μg·g-1)通过响应面法进一步优化酶解条件.结果表明,①木瓜蛋白酶和胃蛋白酶分别在反应时间为6.18、6.22 h,底物浓度34.78％、30.71％,酶底比5.00％、3.18％时理论提取率最高,分别为6.97％和6.14％.在反应时间为3.95、4.83 h,底物浓度22.04％、35.82％,酶底比3.64％、3.57％时理论VitC当量最高,分别为70.54和58.59μg·mg-1.两种酶制备的奶牛胎盘多肽提取率与还原力均无显著相关性(P>0.05);②经综合提取率优化,最佳反应条件分别为反应时间4.70、5.49 h,底物浓度34.03％、35.74％,酶底比3.66％、3.92％,此时理论综合提取率分别为4414.09、3490.41μg·g-1.综上所述,奶牛胎盘组织蛋白可被木瓜蛋白酶和胃蛋白酶水解为还原性多肽;木瓜蛋白酶酶解效果优于胃蛋白酶;最佳反应条件分别为反应时间4.70、5.49 h,底物浓度34.03％、35.74％,酶底比3.66％、3.92％.     

人胎盘TRAIL基因的cDNA克隆及序列测定

根据GeneBank(U37518)中TRAIL(肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体)的cDNA序列,设计扩增引物。采用RT-PCR从人胎盘中扩增出TRAIL基因的全长cDNA。产物纯化后连至pGEM-TEasy载体,转化大肠杆菌DH5α。筛选阳性克隆菌,酶切鉴定并进行序列测定。结果表明,本试验成功地克隆了TRAIL基因的1039bp全长cDNA。     

基于LC-MS/MS分析不同蛋白酶酶解奶牛胎盘产物差异及其抗氧化活性预测

为探究胰蛋白酶、胃蛋白酶和木瓜蛋白酶酶解奶牛胎盘产物间差异,用此3种酶在最优条件下酶解奶牛胎盘获得胎盘酶解产物,每种酶重复3次,利用LC-MS/M技术鉴定产物中蛋白和肽段,BIO-PEP数据库匹配和测算十肽及以下的抗氧化活性多肽。结果显示:胰蛋白酶、胃蛋白酶和木瓜蛋白酶酶解产物分别鉴定出541、137和86种蛋白,2 766、1 170和128个肽段,胰蛋白酶鉴定蛋白和肽段数极显著高于其余2种酶(P<0.01),木瓜蛋白酶鉴定蛋白和肽段数均显著低于其余2种酶(P<0.05);3种酶酶解产物十肽及以下具有潜在抗氧化能力肽段分别占十肽及以下肽段总量的39.14%(256/654)、32.80%(81/247)和53.33%(16/30),木瓜蛋白酶占比显著高于其余2种酶(P<0.05);胰蛋白酶、胃蛋白酶和木瓜蛋白酶3种酶酶解产物抗氧化多肽共同特征是分别含有EL、LY、MM、LK、IR、MY、VY残基,HL、LK、TY、HH、EL残基和LK、IR、EL等残基。综上,通过LC-MS/M技术对酶解产物定性和定量分析,胰蛋白酶酶解奶牛胎盘的产物生物学信息最丰富,在蛋白组学中可靠性和准确性最高;木瓜蛋白酶酶解奶牛胎盘最彻底,其产物潜在抗氧化活性最强,本研究为使用蛋白组学研究奶牛胎盘时酶的选择和奶牛胎盘抗氧化活性多肽的开发利用提供理论依据。     

黄花棘豆生物碱对体外大鼠卵黄囊胎盘结构及功能的影响

结合电镜技术 ,应用体外全胚胎培养 (WEC)方法 ,观察了黄花棘豆生物碱对大鼠卵黄囊 (YS)胎盘及胚胎的影响。结果表明 ,黄花棘豆生物碱质量浓度在 5 0 μg/ m L 以上时 ,YS血管分化程度明显减低 ,对胚胎器官形态学分化的影响有剂量反应关系 ;质量浓度在 2 0 0 μg/ m L 时 ,YS直径和畸胎数与对照组有显著差异。电镜观察发现 ,剂量在 5 0 μg/ m L 以上时 ,YS上皮细胞微绒毛稀疏变短 ,胞质中贮液泡减少 ,线粒体、内质网等内膜系统发生多种细胞病理学改变 ,细胞间隙增宽 ,连接复合体破坏。表明 YS血管分化及其超微结构对棘豆生物碱反应敏感 ,其分化程度与对胚胎发育程度的影响一致 ,可以认为 YS结构与功能受损是黄花棘豆生物碱导致胚胎发育毒性所致     

奶牛静脉血、胎盘组织、脐静脉血及犊牛静脉血脂联素与犊牛初生重相关性研究

为探究奶牛静脉血、胎盘组织、脐静脉血和犊牛静脉血中脂联素之间及与犊牛初生重的相关性,选取规模化养殖场正常分娩奶牛54头,按犊牛初生重将奶牛分为3组:A组,≤40kg,9头;B组,40~45kg,25头;C组,≥45kg,20头。分别采集分娩奶牛颈静脉血、胎盘组织、脐静脉血及犊牛颈静脉血,ELISA法检测血液及胎盘组织脂联素水平,相关分析法分析各样品之间及与犊牛初生重的相关性。奶牛静脉血脂联素水平((29.15±4.02)mg/L)高于脐静脉血((13.79±1.14)mg/L)与犊牛静脉血((13.46±0.94)mg/L)脂联素水平,差异极显著(P0.01),脐静脉血脂联素水平高于犊牛静脉血脂联素水平,但差异性不显著(P0.05);奶牛静脉血脂联素水平与胎盘组织、脐静脉血、犊牛静脉血脂联素水平以及胎盘组织脂联素水平与脐静脉血、犊牛静脉血脂联素水平相关性均不显著(P0.05),脐静脉血脂联素水平与犊牛静脉血脂联素水平极显著正相关(P0.01);犊牛初生重与奶牛静脉血脂联素水平无显著相关性(P0.05),与脐静脉血、胎盘组织脂联素水平极显著正相关(P0.01),与犊牛静脉血脂联素水平显著正相关(P0.05);奶牛静脉血、胎盘组织、脐静脉血脂联素水平及犊牛静脉血脂联素水平在公、母犊间差异均不显著(P0.05)。脐静脉血、胎盘组织脂联素水平对犊牛初生重有非常显著的影响,犊牛静脉血脂联素水平对犊牛初生重具有一定影响,而奶牛静脉血脂联素水平对犊牛初生重的影响不显著;奶牛静脉血、脐静脉血、胎盘组织及犊牛静脉血脂联素水平在公、母犊间差异均不显著。     

胎盘及其提取物的化学成分、药理作用及临床应用研究进展

对人和动物胎盘及其提取物的化学成分、药理作用及临床应用方面的研究进展进行了综述。当前，对健康产妇的胎盘(紫河车)化学成分研究较深入，临床应用较多，主要应用于医药行业，但对其加工相对较原始，应用范围尚待拓宽；羊胎盘产品，主要用于营养保健品和化妆品行业；对鹿胎盘的研究仅有少量报道，在未来将有广阔的发展前景，而对其他动物如猪、牛等胎盘的研究仅有零星报道。因此，对已开发的胎盘产品应对其活性物质及其机理进行深入研究，同时对具有较大发展前景的鹿胎盘产品进行研究开发势在必行，而数量多，来源广的猪、牛等动物的胎盘亦有很大的开发价值。     

兽用天花粉蛋白胶囊对胎衣不下的奶牛降低不孕率和提高受胎率的研究

本试验的目的是应用兽用天花粉蛋白对胎衣不下的奶牛达到降低不孕率和提高受胎率。通过311头胎衣不下的奶牛试验表明,试验组比对照组平均提高受胎率13.87%,降低不孕率13.87%,一次受胎率比胎衣正常下落的奶牛提高15.44%。其机理有待进一步深入研究。     

大约克、杜洛克母猪胎盘效率的研究

研究分析了78窝杜洛克和83窝大约克母猪胎盘效率及其与产仔数和出生重间的关系,结果显示,杜洛克和大约克母猪的胎盘效率具有中等遗传力(0.29和0.36),但胎盘效率和产仔数之间相关系数差异很大(0.233和-0.056),在育种中的实际应用价值需进一步验证。     

高效液相色谱法分离鹿胎盘多肽的研究

试验采用高效液相色谱法对鹿胎盘多肽进行分离,考察了洗脱方式及TFA对分离效果的影响,最终确定最佳分离条件为：上样量10ul;检测波长228nm;流速1．0ml/min;流动相A液0．050%TFA／乙腈,B液0．05％TFA／水,30min内10％A～50％A,90％B～50％B线性梯度洗脱。