鱼类基因转移研究中存在的问题与对策

转基因动物技术是20世纪80年代初发展起来的一项生物领域高新技术[1]。转基因鱼模型的构建为鱼类基因工程育种奠定了理论基础,基因导入方法的成熟、胚胎干细胞技术的发展以及基因组学理论的应用为鱼类基因工程育种提供了操作平台。目前,转基因技术在外源基因片段长度、外源基因定点整合率、外源基因表达率、转基因动物存活率等技术方面都有了很大提高。转基因动物的研究内容也非常广泛,从基础理论到应用技术,从实验室到生产也都有了较大发展,如基因表达的调控、基因产品的制备、动物品种的培育等[2]。以下就鱼类基因转移研究中转基因技…     

鱼类基因转移研究中存在的问题与对策

转基因动物技术是20世纪80年代初发展起来的一项生物领域高新技术[1]。转基因鱼模型的构建为鱼类基因工程育种奠定了理论基础,基因导入方法的成熟、胚胎干细胞技术的发展以及基因组学理论的应用为鱼类基因工程育种提供了操作平台。目前,转基因技术在外源基因片段长度、外源基因定点整合率、外源基因表达率、转基因动物存活率等技术方面都有了很大提高。转基因动物的研究内容也非常广泛,从基础理论到应用技术,从实验室到生产也都有了较大发展,如基因表达的调控、基因产品的制备、动物品种的培育等[2]。以下就鱼类基因转移研究中转基因技…     

论转基因动物

生物科学发展到二十世纪七十年代时,出现了将外源基因(DNA 片段)插入动物染色体的一门新兴科学——基因转移学,由此而产生了转基因技术和它的产物一转基因动物。1980年首次把外源基因转移给小白鼠的实验获得成功,以后给猪、羊、牛、鱼、兔子等动物转移基因实验也获得了成功,从而转基因动物问世了。转基因动物是生物工程技术的产物,生物工移技术;遗传工程.细胞工程,酶工程和发酵工程所组成,其中的核心是遗传工程,也就是对基因进行剪裁,拼接,改造和加工,按照人们预先设计的蓝图产生特定的性状、品种、物种和产品。     

中国转基因鱼研究的进展

转基因动物是指用实验方法导入的外源基因在染色体基因组内稳定整合并能遗传给后代的一类动物。自从1982年Palmiter等首次将大鼠生长激素基因导入小鼠受精卵雄性原核中，获得了个体比对照组大一倍的转基因“超级小鼠”以来［Palmiter等，1982］，这项高新技术受到各国重视，发展迅速，取得不少突破，全世界已申请的工程动物专利达到八十多项。转基因猪、兔、牛、羊和鱼等相继问世，为培养生产性状优良的超级种群、制备高增值的蛋白和激素类特效药物以及按人的需求提供理想的实验动物等方面开辟了新途径。因此，转基因动物的研究无论对于基…     

中国转基因鱼研究的进展

转基因动物是指用实验方法导入的外源基因在染色体基因组内稳定整合并能遗传给后代的一类动物。自从1982年Palmiter等首次将大鼠生长激素基因导入小鼠受精卵雄性原核中，获得了个体比对照组大一倍的转基因“超级小鼠”以来［Palmiter等，1982］，这项高新技术受到各国重视，发展迅速，取得不少突破，全世界已申请的工程动物专利达到八十多项。转基因猪、兔、牛、羊和鱼等相继问世，为培养生产性状优良的超级种群、制备高增值的蛋白和激素类特效药物以及按人的需求提供理想的实验动物等方面开辟了新途径。因此，转基因动物的研究无论对于基…     

转基因家畜的研究及进展

1980年,Gordon应用显微注射法首次成功地将重组的外源DNA直接注入小鼠受精卵的雄原核中获得了携带外源基因的小鼠。Gordon和Ruddle1981年将带有外源基因的小鼠称为转基因小鼠(tansgenicmice)。“转基因动物”一词也应运而生。动物转基因技术克服了物种之间的生殖隔离,实现了动物物种之间遗传物质的变换和重组。因此,研究转基因家畜在理论和生产应用上都有广阔而诱人的前景,本文就转基家畜研究的方法、现状以及存在的问题和展望进行了综述。     

DNA甲基化调节转基因动物外源基因表达的研究进展

近20年来,动物转基因技术取得了迅猛发展,利用多种转基因手段已经获得了不同的转基因动物。然而,在转基因动物制备过程中,各种转基因方法仍然存在不同的优缺点,需要进一步研究的关键内容之一就是如何提高转基因效率以及目的基因的表达。目前,随着转基因技术研究的深入和表观遗传学的发展,人们开始对转基因动物外源基因表达的表观调控机制产生了兴趣。本文对DNA甲基化修饰与转基因动物外源基因表达调控的有关机制进行了综述,并就其未来的发展趋势进行了展望。     

动物转基因新技术研究进展

 动物转基因技术是将外源基因导入动物体内,外源基因随机整合或定点整合（打靶）在染色体基因组上并得到表达和遗传的生物技术。该技术自发现以来,在畜牧业、医药产业、环境保护以及新型生物材料等领域已得到了广泛应用。本文主要就近年来迅速发展起来的慢病毒载体导入法、精原干细胞法、锌指核酸酶介导的基因打靶、RNA干扰介导的基因沉默等新的高效转基因技术进行了概述。     

转基因大豆进口对我国资源环境和食品安全的可能风险

我国进口转基因大豆的基本情况 转基因大豆,是指利用转基因技术,通过基因工程方法导入外源基因所培育的具有特定性状的大豆品种,转基因大豆可能同时具有高产、优质、抗病毒、抗虫、抗寒、抗旱、抗涝、抗盐碱、抗除草剂等多重优点.     

转基因技术在动物遗传改良上的应用进展

简要介绍了几种比较常用的转基因方法.包括显微注射法、脂质体介导法、电转染法、胚胎干细胞法、病毒载体法、精子载体法、卵巢直接注射法.传统的转基因方法与基因打靶、体细胞核移植、RNA干扰以及线粒体转移技术相结合,在基因功能研究和疾病治疗中发挥越来越重要的作用.特别是近年来在植物上出现的外源基因清除技术,为我们在动物上彻底去除外源基因的影响提供了新思路.     

以精子作载体的基因转移

培育转基因动物的方法有多种,其中最普遍的方法有原核微注射法;反转录病毒感染分裂球法;DNA转化胚胎干细胞,然后注射到胚泡内法等。以精子作载体的基因转移是培育转基因动物的又一新方法。     

转基因的“前世今生”

<正>转基因食品是指利用转基因技术引入了特定的外源基因的食品,包括转基因植物食品、转基因动物食品和转基因微生物食品。转基因技术作为一种新兴的生物技术手段,正逐渐融入我们的环境、生产和生活当中,成为关系到国家命运的关键技术和创新产业的经济新增长点。转基因技术转基因技术是利用现代生物技术,将人们期望的目标基因,经过人工分离、重组后,导     

外源SacB基因在银腺杂种杨基因组中的表达及抗旱性分析

利用转基因技术培育抗旱杨树新品种是改善干旱地区生态环境的有效途径之一.该研究对已整合外源SacB基因的银腺杂种杨株系进行半定量RT-PCR和温室水分胁迫试验.研究结果表明,在所测定的7个转基因株系中,外源SacB基因均成功转录mRNA;转基因株系叶片中积累了SacB基因表达产物（果聚糖）;在干旱胁迫条件下,转基因株系的生长量、生物量和叶片含水量明显高于对照.相关分析表明转基因株系生长量、生物量和叶片含水量与果聚糖积累量呈极显著正相关,说明SacB基因的导入提高了转基因杨树对水分胁迫的抗性.      

转化棉花胚性愈伤可以有效缩短转基因周期

棉花的生长季节长 ,生长期温度较高 ,生长季节遭受的病虫害也较多。采用杂交育种方法可以培育抗性品种 ,但受抗性资源本身的抗性强弱限制。分子生物学的发展促进了各种生物之间的基因交流 ,可以将动物、微生物中分离出的有用基因转入植物中 ,获得全新的性状。转基因抗虫棉的大面积推广是生物技术育种的典型例证。尽管可以使用花粉管通道法将外源基因导入棉花[1 ] ,但农杆菌介导仍然是最有效的一种转基因方法 ,而且转入的基因多是单拷贝插入 ,便于育种利用。可是目前采用的农杆菌介导转化棉花的方法多是以下胚轴为起始材料[2 ] ,需要周期长 ,…     

人α干扰素转基因小鼠模型的建立

[目的]建立人α干扰素（interferon-α,IFN-α）转基因小鼠,为研究IFN-α在抗病毒中的作用提供模型动物。[方法]将人IFN-α基因插入CMV启动子下游,构建转基因表达载体,通过原核显微注射法建立IFN-α转基因小鼠。[结果]通过特异性引物PCR法和South-ern杂交法检测出4只阳性转基因小鼠。分离4个转基因鼠系F1代PCR阳性小鼠血液中的淋巴细胞进行RT-PCR检测,其中3个鼠系为阳性。收集阳性小鼠血清,用ELISA方法和微量板染色测定法检测出3个转基因鼠系均有IFN-α表达。[结论]成功建立了CMV启动子启动的表达人IFN-α基因转基因小鼠,为研究干扰素抗病毒机制及对其他动物进行抗病毒感染基因工程育种研究奠定了基础。     

转基因植物的筛选与检测

近年来,转基因的研究进展很快,对转基因植株进行筛选检测是基因转移的必须环节。本文综述了转基因中选择试剂的种类和应用范围;转基因植株的检测方法。Ｋａｎ抗性基因、Ｇｕｓ基因、Ｂａｒ基因是可安全使用的选择标记基因,其它选择基因的安全性尚待进一步评价。Ｇｕｓ基因可检测外源基因的表达部位,可作为首选的报告基因。ＰＣＲ是早期检测的较好方法。Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交特异性强,可以研究外源基因的整和状态、位置数及外源基因的完整性和稳定性,因而应用最多。Ｗｅｓｔｅｒｍ杂交结果与性状表现有直接关系。     

外源基因在转基因植物中表达量的优化研究进展

转基因植物作为一种生物反应器将在生物工艺学上得到应用,其目的是为了生产和传输外源蛋白。但是外源基因在转基因植物中表达量低,为此,从几个方面介绍了提高外源基因在植物中表达量的方法。     

转基因抗草甘膦油菜的实用PCR检测方法

 利用定性PCR技术 ,建立了检测孟山都公司培育的转基因抗草甘膦油菜中的epsps、gox和fmv35s的方法 ,同时设立了阳性内对照napin。该方法的检测灵敏度为 0 .0 5 %。利用复合PCR可以在一个PCR反应中同时检测出epsps、gox、fmv35s和napin基因。这种方法可以有效地用于转基因抗草甘膦油菜中的外源基因的检测。     

转基因技术在家畜育种及其生产中的应用研究

本文主要概述了转基因动物技术的应用进展。采用该技术成功地将外源基因导入了家畜的受精卵并得以整合和表达,而且能稳定地遗传给后代。采用这项新技术不仅能产生转基因家畜,而且能改变家畜的某些可遗传性状和提高生产能力。对于创造新的基因工程个体,进而培育转基因家畜新品系或新群体,具有重要的价值。该技术的发展对于家畜育种及其生产上的应用具有广阔的前景。     

转基因烟草中外源基因实时荧光定量PCR检测方法的建立

[目的]建立SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测转基因烟草中外源基因拷贝数的方法,为转基因植物中外源基因拷贝数的检测提供参考.[方法]采用SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR方法,检测转基因烟草中外源绿色荧光蛋白基因(GFP)的拷贝数,以烟草单拷贝的内源核糖核酸还原酶基因(RNR2)作为内参基因,建立相对定量的双标准曲线法检测转基因烟草中外源基因拷贝数的方法.[结果]构建RNR2基因、GFP基因实时荧光定量PCR的标准曲线,分别为y=-0.2858x+5.6695和y=0.2826x+2.1048,R2分别为0.9994和0.9989,相关性较高.在检测的5株转基因烟草中GFP基因的拷贝数分别为5、8、19、28和45,非转基因烟草植株的GFP基因拷贝数为0.[结论]建立的转基因烟草中外源基因SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法具有简单、快速、准确等优点,可用于基因工程中对优良转化植株的筛选及外源基因表达量的快速检测和定量分析.