蓝猪耳胚囊结构观察方法的比较

采用不同显微镜和染料对蓝猪耳(Torenia fournieri Lind.)胚囊结构进行了比较观察。结果表明,Leica DM5000B显微镜和Leica DMI4000B荧光显微镜不适合观察、拍摄胚囊超微结构,Leica DMRXA显微镜基本符合要求,激光共聚焦显微镜效果最好。普通显微镜下即可观察到未染色材料的胚囊,染色后效果更佳。爱氏苏木精染色,胚囊着色浅且不均匀;曙红Y染色,需在荧光显微镜下观察、拍照。荧光染料(DAPI、鬼笔环肽、碘化丙啶和罗丹明)染色后,采用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜观察胚囊结构特征,效果良好。     

鮰爱德华氏菌的红色荧光蛋白标记及其应用

为研究鮰爱德华氏菌与宿主的相互作用关系,本研究构建带有红色荧光蛋白基因的pM DmC herry表达载体,通过电击转化法将载体成功导入鮰爱德华氏菌zbl141菌株中,获得了红色荧光蛋白标记的鮰爱德华氏菌菌株。在倒置荧光显微镜下观察,重组鮰爱德华氏菌显示特异性红色荧光。稳定性检测结果表明,标记菌株传至28代,重组质粒稳定率仍为100%。用标记菌株感染斑马鱼仔鱼后,能在激光共聚焦显微镜下实时观察到细菌在鱼体内的分布情况;标记菌株体外感染小鼠巨噬细胞后,也能观察到病原菌与巨噬细胞的相互作用情况。说明标记菌株具有良好的特异性和可视性,为鮰爱德华氏菌对宿主的致病性研究提供了一种良好的生物材料。     

猪附红细胞体生物学特性的研究

采取新鲜血液压片相衬观察和末梢血液涂片染色镜检法,对河南省新乡地区3000头猪附红细胞体病发病情况进行了调查;并且对体温升高、镜检附红细胞体感染强度为 病猪的血液,分别用光学显微镜、扫描电子显微镜进行形态观察和血液生化指标检测.结果表明:猪附红细胞体病的发病率为46.33%,死亡率为13.88%,隐性感染率为55.93%(755/1350).在光学显微镜下观察,红细胞呈现菠萝样;染色血片观察附红体在红细胞表面及边缘呈各种形式排列,可见强折光性发亮的圆形小体;扫描电子显微镜观察.附红体寄生的红细胞凹陷区,有大、小球体,有的小球体与大球体相连.血清胆红素、白蛋白、尿素氮、谷丙转氨酶、谷草转氨酶增加,血糖、血清总蛋白、超氧化物歧化酶活性下降.     

河南省猪附红细胞体病流行病学调查

采用新鲜血液压片相衬观察和末梢血液涂片瑞氏染色镜检法,调查了河南省5个县3 000头猪附红细胞体病发病情况,结果表明,猪附红细胞体病的发病率为46.33%,死亡率为13.88%,隐性感染率为55.93%.     

马立克氏病肿瘤表面抗原的免疫荧光测定及其应用

用马立克氏病(MD)肿瘤细胞系 MDCC-MSB-1免疫家兔制成的高免血清,经正常的来杭鸡淋巴细胞完全吸收后,获得针对 MD 肿瘤表面抗原(MASTA)的特异性抗血清,它与 MSB-1反应的间接免疫荧光效价为1∶32。以MD 京-1强毒株接种1日龄雏鸡诱发的实验性肿瘤和某鸡场疑似马立克氏病的内脏肿瘤制成细胞悬液,用 MASTA 特异性抗血清进行间接免疫荧光染色,测得内脏肿瘤细胞的 MASTA 阳性率分别为2%和15%,并从疑似 MD 的病鸡血液内分离出 MD Ⅰ型病毒。羽囊和血清琼扩 MD 阳性,但无肿瘤病变的鸡未能测出MASTA 阳性的肿瘤细胞。用荧光抗体染色检查 MASTA 抗原的 MD 诊断方法切实可行。     

吖啶橙标记大肠杆菌的用量问题

目的:观察吖啶橙标记大肠杆菌作指示菌的用量。方法:用大肠杆菌(ATCC 25922)接种于LB培养基后加入1×1-0 3、1×10-4、1×10-5g/mL的吖啶橙(培养基的最终质量浓度),在水浴恒温中振荡培养过夜;菌液含菌量采用B row n氏标准比浊管测定;最后用荧光显微镜检查标记效果。结果:培养基中吖啶橙终质量浓度:1×10-3g/mL时含菌量为1亿/mL,1×10-4g/mL时含菌量为6亿/mL,1×10-5g/mL时含菌量为40亿/mL。结论:用吖啶橙标记大肠杆菌做指示菌,LB培养基中的质量浓度以1×1-0 5g/mL为佳,菌液含菌量多(菌数达2×109/mL),细菌生长旺盛,且在荧光显微镜下呈绿色,易观察。     

吖啶橙简易免疫荧光术用于快速检出鸡白痢和禽伤寒沙门氏菌的方法研究

本文提出一种快速检出S.p.和S.g.的简易方法——吖啶橙免疫荧光菌团培养浓集法(AOIFBC法)。此法将吖啶橙高倍稀释后与少量沙门氏菌0:9单因子血清混合,配制成吖啶橙荧光抗体(AOFA),然后取少量加入经4小时增菌的液体标本中,再孵育1—4小时,可使与抗体结合的S.p.或S.g.凝集繁殖成亮绿色荧光菌团,低速离心沉淀后,在低倍荧光镜下容易检出。荧光菌团可取出培养进一步验证。试验表明,此法敏感度比无吖啶橙的显微沉淀凝集试验和玻片凝集试验分别高100倍和2500—5000倍。作AOIFBC法检查,特异性强:与鼠伤寒沙门氏菌等七种常见细菌无交叉荧光菌团形成;敏感度高:每毫升含S.p.活菌84×10~2个和S.g.活菌76×10~1个以上,可呈“++”→“++++”荧光菌团。本法对雏鸡粪液模拟标本检测,获得肯定的阳性结果。     

鱼病诊断技术

鱼病防治技术是水产养殖业的重要组成部分,鱼病诊断技术又是鱼病防治的基础,近年来国内随着鱼病防治工作的加强,人类医学上和动物医学上的一些技术用于鱼病的诊断。鱼病诊断技术正在向健康、快速、准确的方向发展。目前主要有以下几种诊断技术。1.荧光抗体技术(FAT、免疫荧光技术)在免疫学、生:是物化学和显微镜的基础上建立起来的一项技术。以荧光色素标记病鱼的抗原或抗体,与其相应的抗原或抗体相结合,在荧光显微镜下呈现一种特异性的荧光反应。该技术的优点是:特异性强,敏感性高,检出速度快。缺点是:非特异性染色尚未完全解决,结果判断…     

植物DNA的Feulgen染色法研究

通过染色法显示DNA是高校生物类专业常做实验之一,Feulgen染色是显示DNA的传统染色方法。在教学实践中由于取材不同,DNA的染色效果表现出较大差异。本研究以洋葱、玉米、蚕豆、豌豆为材料,对其不同组织进行Feulgen染色,通过比较染色效果及操作方法的难易,选择出最适合用Feulgen染色法显示DNA的实验材料。结果表明:(1)从观察结果来看,洋葱内表皮和洋葱根尖的染色效果最好;(2)从实验的操作过程来看,洋葱内表皮的取材及操作方法是最简单的一种。所以洋葱内表皮最适合用于实验教学中Feulgen染色法显示DNA。     

犬精液品质的荧光染色评价方法

为了探索荧光染色技术在犬精液品质检测中的应用,将犬精子标记相应的荧光染料,用荧光显微镜观察精子的质膜完整性、线粒体活性与顶体完整性.在荧光显微镜下,死精子经PI染色后,头部核区呈红色;具有活性线粒体的精子经Rh123染色后,尾部中端线粒体部分呈现绿色荧光;顶体完整的精子经FITC-PNA染色后,顶体区可见绿色强荧光.说明PI染色、Rh123染色及FITC-PNA染色分别用于评价精子质膜完整性、线粒体活性和顶体完整性,是评价犬精液质量的有效方法.