新疆紫草秋水仙素诱变及倍性鉴定研究

[目的]探索秋水仙素诱变及倍性鉴定的技术条件.[方法]采用不同浓度的秋水仙素分别对新疆紫草幼苗茎尖和无菌苗茎尖进行点涂、振荡浸泡处理,采用形态学、气孔及染色体计数法对变异株进行鉴定.[结果]对新疆紫草幼苗采用点涂法,秋水仙素浓度为500 mg/L时,幼苗的成活率和变异率分别为67.44;、40.59;.其变异株叶片宽度明显大于对照株,变异株的气孔长度和宽度显著大于对照株,变异株叶片下表皮每个视野平均气孔数目(9个)较对照株(19个)明显减少;对新疆紫草无菌苗采用振荡浸泡法,秋水仙素浓度为700 mg/L、处理时间为4h时,成活率和变异率分别为68.18;、86.67;;秋水仙素浓度在200 ～500 mg/L范围内,茎尖细胞染色体数目为28条的比例最高达68.4;;诱变后茎尖成活率还受培养基中激素组合的影响;秋水仙素诱变后产生大量形态变异.[结论]影响染色体加倍效果的因素是秋水仙素浓度和处理时间.     

秋水仙素诱导美洲商陆四倍体的研究

利用改良L.D.Cua法对美洲商陆进行多倍体诱变,在秋水仙碱浓度为0.2%条件下,设置24h、48h和72 h三个诱变时间,并对所得到的变异株和对照株进行形态学、细胞学等方面的比较研究,结果表明:诱变48 h效果最好;与对照相比,变异株的叶片厚度增加43.75%;叶形指数减少37.95%;气孔纵横径分别增加52.94%和73.01%;保卫细胞内叶绿体数目增加20.91%;花直径增加22.96%;花粉粒直径增加22.47%;果实直径增加23.66%.对变异株进行花粉母细胞减数分裂染色体鉴定.小孢子细胞的染色体数为n=2x=36,而对照小孢子细胞的染色体数为n=x=18,证明变异株为四倍体.     

越橘“Legacy”离体培养及秋水仙素诱变研究初报

以越橘栽培品种"Legacy"茎段为外植体建立离体快繁体系后,研究了秋水仙素处理对"Legacy"组培苗的诱变影响.结果表明:4℃低温冷藏茎段24h后,用0.15%HgCl2消毒8min,可获得越橘"Legacy"无菌材料.0.10%秋水仙素浸泡茎尖24h诱变效果最佳,变异率达到10%,变异株均为嵌合体.0.05%秋水仙素处理茎尖24h后,继代后代增殖率与对照植株呈极显著差异,继代后代之间无显著性差异,其他越橘品种并没有表现出此现象.     

半支莲多倍体诱导的初步研究及鉴定

采用不同浓度的秋水仙素溶液对半支莲植株不同部位组织进行诱变处理,并采用不同的方法对变异株进行鉴定。结果表明,对半支莲萌动种子,0.05%秋水仙素处理12h的变异率最大、为11%;对茎尖生长点,0.10%秋水仙素处理48h的变异率最大、为75%;对根尖,采用4%二甲亚砜与0.05%秋水仙素混合溶液处理8h和16h的变异率最大、为16.7%。可见,秋水仙素诱导半支莲茎尖的效果最好,其次为改良浸根法,萌动种子效果较差。形态学鉴定结果发现,变异株叶片明显变短、变宽,叶色浓绿,花径变大;解剖学鉴定结果表明,变异株气孔长度和宽度明显大于对照株,气孔数少于对照株,花粉直径也明显增大;分子生物学鉴定结果表明,采用流式细胞仪对初选的13株拟多倍体进行DNA含量分析,有11株产生了多倍体变异,总变异率达84.6%,其中四倍体7株、八倍体3株、嵌合体1株。     

博罗福田菜心空间诱变效应研究初报

利用空间诱变处理福田菜心种子的试验结果表明,其在SP2代群体中出现了广谱性变异,变异幅度大,频率高,其性状变异频率达6.7%;通过调查植株的株高、株幅、叶长、叶宽、叶形指数,发现在株系间、单株间均有较大的差异;福田菜心在SP3代群体中出现性状变异频率相对下降,为1.7%,群体性状表现趋于稳定。     

亚洲棉同源四倍体种质创新初探

采用秋水仙碱琼脂糖凝胶涂抹法,处理亚洲棉（Gossy pium arboreum）幼苗茎尖生长点,研究亚洲棉同源四倍体种质创新的诱变浓度与诱变时间,得出最佳诱变参数：浓度0.1％,时间1d.与对照株相比,获得的诱变株矮壮,节间缩短;子叶变大、肥厚,且脱落时间延迟;真叶出现晚,叶裂数不一,叶形不对称,叶面凹凸不平,出现卷曲叶、勺状叶,铲形叶等变异;着生子叶的茎杆处和子叶柄处出现瘤状;叶色浓绿.实验还发现19：00～20：00在温室进行处理,有助于提高诱变率.     

离体茎尖诱变筛选油菜耐草酸变异体

试验以油菜茎尖的供试材料，分别以叠氮化钠（SA）、甲基磺酸乙酯（EMS）及叠氢化钠与Co^60γ射线复合诱变处理等方法对其进行诱变处理，比较了三种诱变处理方法对油菜茎尖的诱变效果，确定了SA、EMS处理油菜茎尖适宜衣物变剂量。发现经诱变处理，一部分茎尖分生组织再生植株在形态和生理生化上发生了变异。在高浓度的草酸压力下，筛选出耐草酸变异体。     

秋水仙素对‘根茎型清水紫花苜蓿’幼苗变异率和成活率的影响

通过秋水仙素诱变对‘清水紫花苜蓿’萌动种子诱变后幼苗变异率的测定,并观察其幼苗成活率及部分生长指标的变化情况,结果表明:采用秋水仙素不同质量浓度(0.05%、0.10%、0.20%)溶液对清水紫花苜蓿萌动种子分别处理4、8、12h,0.10%的秋水仙素溶液处理幼苗变异率较高,8h处理时间产生较大变异.总体上幼苗变异率随着秋水仙素质量浓度的提高和时间的延长呈现增加趋势,质量浓度与时间互作处理0.1%+8h苜蓿幼苗变异率最大为35.73%;其次0.2%+4h处理,为30.6%;再次0.1%+12h处理,为28.80%.而苜蓿幼苗成活率与处理质量浓度及处理时间呈负相关关系.秋水仙素处理后苜蓿幼苗的生长速度、叶宽、叶厚、茎粗与真叶数出现不同程度增加;苗长、根长、叶长、叶型指数、节间距与节间数则出现不同程度减小;处理苗第30d的株高在0.05%、0.1%质量浓度处理4h时较对照苗增加.苜蓿幼苗变异的秋水仙素最适剂量为0.1%+8h.     

水稻空间诱变与重离子诱变生物学效应及突变体定向筛选

目的 从不同诱变世代比较空间诱变和重离子诱变对水稻生物学效应及后代变异频率的差异,为水稻诱变育种提供一定的方法和理论指导。方法 对水稻纯系品种‘华航31号’干种子进行空间诱变和不同剂量重离子诱变处理,以未诱变处理的种子为对照,对诱变一代进行表型及细胞学诱变效应的分析;对诱变二代直链淀粉含量及粒型性状进行表型和基因型定向筛选,比较2种诱变处理的性状变异频率。结果 空间诱变一代的种子活力指数比对照下降了14.62%;重离子诱变一代的种子活力指数随辐射剂量增加呈现马鞍型效应曲线,其中10 Gy重离子辐射剂量下种子活力指数比对照下降了14.92%,与空间诱变的诱变效应相近。空间诱变二代粒型和直链淀粉含量的突变频率分别为4.14%和1.61%,80 Gy重离子辐射诱变二代粒型和直链淀粉含量的突变频率分别为4.88%和1.55%。利用HRM技术扫描了水稻直链淀粉含量Wx基因的4个位点共673 bp序列,在空间诱变的4 736份样本中发现3个SNP变异,突变密度为1/1063.83 kb;在重离子诱变4 848份样本中发现4个SNP变异,突变密度为1/815.68 kb。结论 2种诱变处理均可诱发水稻产生性状变异。空间诱变的生理损伤类似于低剂量重离子辐射,而诱发变异的频率与高剂量重离子辐射相近。     

平阳霉素对盆栽小菊意大利红的诱变效应

利用1、2、4、8 mg·L-1平阳霉素(PYM)对小菊品种意大利红离体培养的叶片和茎段进行诱变处理.结果表明,PYM对叶片和茎段愈伤组织的诱导和分化具有明显的抑制作用,随着PYM质量浓度的增加,愈伤组织的诱导和分化均呈明显的下降趋势.对茎段外植体经不同质量浓度PYM处理后的M1代,进行田间主要观赏性状观察和统计分析,发现诱变后代与对照相比,平均株高、冠幅、节间长度和叶片长/宽均减小,花径增大,管状花数目和舌状花数目增加.诱变后代中还出现了叶色、叶型、花色以及花型变异的植株.随着PYM质量浓度由低到高,花型的变异率分别为0、2.5%、3.3%和1.2%,花型多为舌状花向下翻卷,或舌状花前端变尖;花色的变异率分别为0、4.9%、8.2%和1.2%,花色均往浅色方向变异.PYM最适的诱变质量浓度为2～4 mg·L-1.     

东北红豆杉(Taxus cuspidata)多倍体诱变初探

红豆杉(Taxus cuspidata)是一种天然珍稀抗癌药用植物,以东北红豆杉为材料,进行多倍体诱变研究,以期获得营养器官增大、药效成分提高的多倍体植株,改善因红豆杉资源有限造成紫杉醇稀缺的现状。采用改良初生分生组织处理法在0.2%秋水仙碱浓度下,不同处理时间(4d、6d、8d)处理东北红豆杉茎尖顶芽,对其进行多倍体诱变,并对诱变结果进行统计分析。结果表明,东北红豆杉的最佳诱变时间为6d和8d,诱变效果较好。与对照组相比,试验组生长受阻,叶形指数变小,叶色浓绿,叶片变厚且皱缩卷曲,具有明显的多倍体特征。     

阔叶风铃草多倍体诱导与鉴定

培养的倍体能显著提高园林植物的观赏和利用价值。在离体培养条件下,比较了不同浓度、不同处理时间的秋水仙素对阔叶风铃草进行染色体加倍的诱导效果。结果表明,当秋水仙素浓度为0.10%,处理24h后变异率达到最高,为30%,诱导效果最好。从形态变异苗中鉴定出1株四倍体,四倍体植株与原二倍体植株比较,在形态上表现为：生长缓慢,生长期延长,叶片气孔变大,叶绿体数目增多,叶片变厚,叶色变深,茎变粗且节距长。     

秋水仙素对蝴蝶兰试管苗叶切片胚状体发生期的化学诱变

 【目的】以蝴蝶兰试管苗叶片为材料诱导多倍体。【方法】用不同浓度的秋水仙素,对蝴蝶兰试管苗离体叶片进行诱变处理,考察不同处理时间类原球茎形成及苗再生的效应,比较二倍体和多倍体试管苗的形态特征、叶片下表皮组织细胞结构特征,并对多倍体根尖细胞染色体数进行鉴定。【结论】秋水仙素对蝴蝶兰离体叶片类原球茎的形成及其再生苗产生较大影响,较高浓度的秋水仙素处理时间较长,形成类原球茎的叶片比率及再生苗数减少明显,但多倍体形成的比率相对较高。多倍体苗叶片表面粗糙、叶片厚实、植株较矮,生根数少而粗短。叶片下表皮组织细胞、气孔结构与二倍体差异大,细胞核明显较大,染色体加倍。     

秋水仙碱离体诱导薄皮甜瓜四倍体的研究初报

以甜瓜组培苗茎尖为材料，研究了秋水仙碱诱导染色体倍性变异的最佳浓度、最适处理时间以及离体茎尖的最佳苗龄。结果表明：以8d苗龄的茎尖，在含有0．1mg／L秋水仙碱和较低浓度细胞分裂素的液体培养基中处理24-48h的诱导方法最有利于四倍体的产生，诱导染色体加倍的频率达30％～40％。变异株在田间表现出生长缓慢、叶片变宽加厚、茎增粗、节间变短、果皮变厚、种子变大增重的现象，显微镜观察变异后代根尖的染色体数目为2n=4x=48条。     

绵羊成熟卵母细胞GMP玻璃化冷冻影响发育因素的研究

利用GMP法(毛细玻璃管法)冷冻成熟的绵羊卵母细胞,旨在探讨冷冻和解冻处理方法对绵羊成熟卵母细胞发育潜力的影响.对比在玻璃化冷冻液中添加0.3 mol/L蔗糖;卵母细胞冷冻前用7.5 μg/ml CB预处理;卵母细胞去掉颗粒细胞冷冻;以及四步法解冻和三步法解冻对卵母细胞形态完整率、孤雌激活胚发育率的影响.结果显示:玻璃化冷冻液中添加蔗糖孤雌激活卵裂率达到56.70%,极显著高于对照25.40%(P<0.01),桑葚胚率(16.49%)比对照(4.76%)有明显提高(P<0.05);冷冻前用CB进行预处理,解冻后形态正常率为78.78%,明显高于对照61.11%(P<0.05),孤雌激活卵裂率(39.39%)也高于对照组(21.11%);去掉颗粒细胞裸卵与保留颗粒细胞成熟卵母细胞解冻后形态正常率、孤雌激活卵裂率及桑葚胚率、囊胚率之间无显著性差异(P>0.05);四步法解冻和三步法解冻后卵母细胞形态恢复及孤雌激活后的发育率,两组之间差异不显著(P>0.05).在玻璃化冷冻液中添加蔗糖及卵母细胞冷冻前用CB预处理有利于卵母细胞冷冻解冻后形态恢复及孤雌激活后的胚胎发育.     

利用反义基因沉默策略构建水稻突变体库及突变体筛选

尝试利用鸟枪反义基因沉默策略构建水稻突变体库．利用水稻反义cDNA文库转化粳稻品种中花11,获得了来源于105块潮霉素(Hm)抗性愈伤组织的1486个转化植株．随机选择来源于11个独立转化系的335个T0植株进行Hm离体叶片筛选,结果表明所有植株均呈抗性,并且与PER检测结果相吻合,说明T0植株中不存在假转化体．Southern blot分析结果表明T0植株大部分为单位点整合．T0及T1代转化植株均呈现了一些形态变异,如矮化、无分蘖或多分蘖、结实率降低、粒型或穗型改变、小穗结构改变等．利用Hm离体叶片筛选法对部分T1群体进行筛选,得到了1个变异性状与Hm抗性共分离的突变体,该突变体的变异表型为结实率比非转化对照下降约50％,每穗颖花总数比对照减少约40％,二者的总效应导致突变体单穗产量比对照约下降70％．     

粳稻中花11 T-DNA插入突变体的分离和鉴定

通过农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导法,对中花11成熟胚愈伤组织进行T-DNA转化,构建了含1489个独立的再生转化株系的突变体库,不仅为水稻功能基因组提供了一个有效的研究平台,还创造了一些具有优良农艺性状的突变材料,为水稻育种提供新的基因资源。插入第1代单本移栽且单本收获,第2代播种1066个家系,在水稻各个生育阶段从中独立筛选得到各类外形突变体66个。经过第三代重复筛选获得包括茎、叶、花和穗变异等各类突变52份。结果表明,外观性状的突变频率为3.4%。     

Natural Variation of Leaf Thickness and Its Association to Yield Traits in indica Rice

Leaf thickness is an important morphological trait in rice. Its association to the yield potential, as of now has not been documented because of the shortage of the equipment which could conveniently measure the leaf thickness in rice. In this study, the thickness of top three leaves of 208 cultivars had been determined by a nondestructive rice leaf thickness instrument for the research of the natural variation of leaves thickness and its association to yield traits in indica rice. The results showed that the flag leaf was the thickest, and the 2nd leaf was thicker than the 3rd leaf. Analysis of variance indicated the existence of wide genetic diversity of leaf thickness among the investigated indica rice genotypes. The tight correlation among the thicknesses of the top three leaves means that the leaf thickness traits share one genetic control system. Leaf thickness had a significant positive correlation with leaf length and a positive correlation with leaf width, indicated that thicker leaf was beneficial to increasing the single leaf area. The results of correlation analysis revealed that thicker leaf should be profitable to the leaf erection, higher numbers of grains per panicle and higher grains weight per panicle. However, the significantly negative correlation between leaf thickness and number of panicles per plant counteracted the profitability from increased grains weight per panicle, so that the correlations of the thicknesses of the top three leaves to yield and biomass were positive but not significantly. It has made great progress in the genetic improvement of leaves thickness in inbred indica rice breeding in Guangdong Province, China, since the 1990s.     

秋水仙素诱导厚皮甜瓜倍性研究

为了成功获得厚皮甜瓜四倍体,研究其倍性特征,本试验用二倍体厚皮甜瓜M01-3为试材,用0.1%、0.3%、0.5%和0.7%的秋水仙素溶液通过涂抹法对子叶期和一叶一心期幼苗进行处理,并通过染色体计数法和细胞学鉴定法分析倍性。结果表明,已获得同源四倍体甜瓜,0.3%和0.5%的诱导率最高;与二倍体相比,四倍体植株长势好,叶形指数小,茎增粗,花冠大,花色艳,果肉变厚,可溶性固形物含量增加,气孔变大,叶绿体数目增多。