20份甜高粱遗传多态性的RAPD和SSR分析

利用RAPD和SSR分子标记技术,旨在探讨来自不同地区的20份甜高粱杂交种和品种资源遗传多态性及亲缘关系.试验结果表明,筛选出31条RAPD引物在20份甜高粱的DNA中产生稳定清晰条带数为202条,其中多态性片段167条,多态率为82.67％,品种间的遗传相似系数(GS)为0.613～0.870,平均值为0.744;筛选出91对SSR引物在20份品种资源的DNA中扩增片段数为297条,其中多态性片段267条,多态率为89.90％,品种间的遗传相似系数(GS)为0.555 ～0.837,平均值为0.695;20份甜高粱的2种分子标记的单独聚类分析结果表现出一定差异,但2种趋势大致相近;结合RAPD和SSR这2种标记联合数据的品种聚类分析结果,更能全面客观地反映品种间的遗传多态性及亲缘关系.     

蝴蝶兰NaN_3离体化学诱变及再生植株RAPD检测

采用NaN3对离体培养的蝴蝶兰类原球茎薄切片进行诱变处理,研究不同浓度和不同处理时间对类原球茎薄切片生长的影响,并对再生苗DNA进行了RAPD检测。结果表明,NaN3对类原球茎薄切片生长产生重要影响,部分薄切片白化或褐化死亡,再生类原球茎生长受到抑制,再生苗数量减少,部分再生苗畸变,叶片皱缩、变厚。10条RAPD引物的PCR检测发现,再生苗DNA序列发生了一定程度的变异,产生RAPD图谱带型多态性。根据以上结果认为,本体系合适的NaN3诱变剂量为6mmol/L,处理2d。     

文心兰EMS离体诱变及再生苗RAPD检测

采用3种浓度的EMS对离体培养的文心兰类原球茎薄切片进行不同时间的诱变处理研究.发现EMS使部分薄切片褐化死亡,再生类原球茎的生长受到抑制,再生苗数量减少;EMS的伤害作用随诱变剂浓度的提高和处理时间的延长而加重,但对试管苗的生长影响并不大.采用10条RAPD引物进行的PCR检测结果表明,经EMS处理的再生苗DNA序列...     

4种黑麦草的产草量及品质比较研究

在中等肥力土壤条件下,采用随机区组试验设计,对引进的一年生、多年生和种间杂交黑麦草3类型共4个品种的生物学性状、产草量和品质进行比较研究。结果表明:二次刈割的株高、叶宽在品种间存在极显著差异,其中一年生黑麦草蓝天堂和特高显著高于多年生黑麦草卓越和种间杂交黑麦草春绿;叶长和分蘖数在4品种间差异不显著;第1次鲜草产量在品种间差异达极显著水平,并以一年生黑麦草蓝天堂最高;第2次刈割鲜重和干重在品种间无显著差异;二次刈割的总鲜重和总干重在品种间差异达显著水平,也以一年生黑麦草蓝天堂最高,并显著超过多年生和种间杂交黑麦草品种。品质分析表明:二次刈割的粗蛋白、粗脂肪和灰分在4品种间差异均不显著,只有第1次刈割的粗纤维和无N浸出物在品种间有显著差异。     

高粱DNA提取方法筛选及其在叶色性状基因定位中的应用

获得高质量的DNA是分子试验的一个先决条件,常用的植物DNA提取过程及步骤繁杂,需要进行多次离心操作,所需时间较长,并且在DNA提取过程中会用到三氯甲烷和其他一些有毒试剂,对操作人员有一定危害。为了筛选出高粱DNA的最优提取方法,进行基因定位等方面的研究,采用十二烷基硫酸钠(SDS)法、SDS+2%聚乙烯吡咯烷酮(PVP)法、十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法、CTAB+2%PVP法和磁珠法,提取高粱不同部位(嫩叶、老叶、根、茎、种子)的DNA,然后对其提取步骤、DNA浓度、吸光度、PCR扩增效果等进行比较。结果表明,磁珠法步骤简单、无毒、低成本,所需时间仅为其他几种方法的1/3,D_{260 nm}/D_{280 nm}为1.8～2.0,DNA的质量、纯度、浓度优于其他方法。各试验数据表明,磁珠法提取的DNA最适于分子生物学验,将其应用于高粱叶色性状基因的定位,可将紫色叶片基因PL1初步定位到4号染色体上,白条纹叶基因WSL10初步定位到10号染色体上。     

SbER10＿X1调控饲用高粱光合作用和生物产量的功能特性分析

为了分析SbER10＿X1调控高粱光合作用和生物产量的功能特性,本研究以高粱SbER10＿X1基因过表达株系（SbERex）、目的基因沉默株系（SbERin）和野生型对照株系（WT）为材料,鉴定转基因株系的阳性和目的基因表达水平,挑选SbERex 5和SbERin 6株系,切片观察茎秆细胞大小,测定主茎秆内植物激素含量,分析光合作用相关参数,并连续两年调查生物量相关指标。结果表明：与WT株系相比,SbERex 5茎秆中赤霉素含量显著增加,脱落酸含量显著降低,导致过表达株系茎秆细胞显著增大,株高显著增加,而SbERin 6株系的赤霉素含量显著减少,脱落酸含量显著升高,但主茎秆细胞大小变化不显著。SbERex 5株系的光合速率和水分利用效率显著增加,引起SbERex 5的株高、分蘖数、叶面积、单株产量和单株生物量显著高于WT,而SbERin 6仅存在减小趋势。结果表明SbER10＿X1可以影响植物激素合成,导致高粱细胞体积增大,光合能力增强,有效提升饲用高粱生物产量。     

2个黑麦草品种SPAD值和叶绿素及粗蛋白含量的相关性研究

通过测定黑麦草(Loliumperenne)"长江2号"和"蓝天堂"2个品种间叶片的SPAD值、叶绿素含量和粗蛋白质含量,比较分析了这2个品种的SPAD值、叶绿素含量、粗蛋白质含量的差异以及三者之间的关系。研究结果表明,"长江2号"无论是SPAD值、叶绿素含量还是蛋白质含量都比"蓝天堂"高;这2个黑麦草品种的第1叶SPAD值、叶绿素含量和粗蛋白质含量都高于第2叶,但这2个品种的这3个性状差异不显著;"蓝天堂"和"长江2号"的SPAD值与叶绿素含量、粗蛋白质含量均呈显著正相关。     

42份高梁与苏丹草及其2个杂交种DNA指纹图谱的构建

选用100个RAPD引物和95对SSR引物进行PCR扩增,旨在构建42份高粱和苏丹草品种资源及2份国审品种高粱苏丹草杂交种的DNA指纹图谱。结果表明,从100个RAPD引物中筛选到9个多态性高、重复性好的引物,多态性条带比率为64．06％,利用4个核心RAPD引物可以为每份品种构建1张特定的数字指纹,并通过其中1个引物F-01构建了1张能鉴别2个杂交种的RAPD指纹图谱,不过该图谱不能区别皖草3号与其父本Sa。从95对SSR引物中筛选出多态性丰富的引物73对,多态性条带比率为86．06％,通过3对核心SSR引物就可以构建42份高梁和苏丹草的SSR数字指纹,同时利用其中1对SSR引物txp18,寻找到2个杂交种的互补带,从而构建了2个高粱-苏丹草杂交种的SSR指纹图谱,这张SSR指纹图谱不仅能鉴别皖草2号和3号,还可以把杂交种与其亲本区别开来。     

高粱EST-SSR标记的建立及其在苏丹草中的应用初探

从NCBI中下载了202 325条高粱Sorghumbicolor EST序列。去除低质量和冗余的序列后,在5 661条高粱EST中共发掘出了6 663个SSR位点,出现频率是20.19%,平均分布频率是1/3.93 kb。在5 197条EST序列中,共有3 446条序列能够设计引物,占总数的66.3%。在高粱EST-SSR中,三核苷酸重复是主要的重复类型,出现最多的重复基元是GGC/GCC。在3 446对高粱EST-SSR引物中,随机选择了20对引物进行了合成。以苏丹草Sorghumsudanense722和高粱Sorghumbicolor TX623A为模板,用这20对引物进行PCR扩增,结果全部可以扩增出条带,可用率为100%,有差异的有4对,多态性比率为20%。研究结果证明了根据高粱EST建立SSR标记是有效、可行的。     

应用RAPD标记对高粱属两物种之间遗传差异的研究(简报)

本研究选用了32个栽培高粱品种、10个苏丹草品种及2个高粱近缘种进行了RAPD分析。结果表明,1)12对引物产生的68条DNA扩增片段中,52条(76.5%)具有多态性。2)高粱之间的相似系数从55%到95%;苏丹草之间的相似系数从52%到84%,因此选择的品种之间的多态性高,具有代表意义。高粱不育系和保持系之间的相似度很大,为89%以上,但通过RAPD标记能够将其区分。3)以0.66为阈值将44个品种分为10个类群。第1类群中全部为苏丹草;在2,3,4群中既有苏丹草也有高粱;5,6,7,8群中则全部为高粱。因此,使用RAPD分子标记进行聚类不能将高粱和苏丹草区分开来。