不同因子对翅果油树愈伤组织诱导及分化的影响

翅果油树的繁殖和保存是目前急需解决的问题。本试验选用试管芽苗上的叶片作为外植体, 研究不同因子对愈伤组织诱导及其分化的影响。结果表明: MS+BA1mg/L+2 .4 D1 5mg/L为最佳愈伤组织诱导培养基; 在愈伤组织诱导时, 光照条件以前期暗培养、后期光培养为宜, 温度以24℃~26℃为宜; 在诱导愈伤组织芽分化时,芽分化的培养基以MS+BA1mg/L+IBA0. 05mg/L最为合适, 温度以26℃左右为宜。     

苜蓿愈伤组织的诱导和再生体系的建立

以改良SH为基本培养基,研究了不同激素配比和不同外植体对苜蓿愈伤组织诱导的影响,筛选出诱导愈伤组织的最佳外植体是下胚轴、最佳培养基为SH+2,4-D 2mg/L+KT 0.2mg/L;继代增殖后对愈伤组织进行分化再生培养,研究了附加不同浓度外源激素的MS和改良SH培养基对愈伤组织分化的影响,确定最佳分化培养基为改良SH+NAA0.1mg/L+KT 0.5mg/L。     

珍稀濒危植物掌叶木愈伤组织诱导与褐化抑制研究

以掌叶木[Handeliodendron bodinieri (Lévl.) Rehd.]的叶片、茎段为外植体,在含有不同植物激素的培养基上诱导愈伤组织。结果表明,最佳诱导培养基为MS+2,4-D1.0mg/L+NAA0.5mg/L+6-BA0.5mg/L,最佳增殖培养基为3/4B5+NAA0.5mg/L+6-BA1.0mg/L+VC0.1%。2,4-D与NAA联合使用利于诱导率的提高;适量的6-BA、KT利于愈伤组织质量的改善;6-BA加KT的双因子组合没有单因子的诱导效果显著;采用B5培养基代替MS培养基,且将大量元素降为3/4,外加VC0.1%,并进行暗培养,能有效抑制愈伤组织的褐化。     

凹叶厚朴用于细胞悬浮培养的愈伤组织的制备研究

目的 研究凹叶厚朴适用于细胞悬浮培养的愈伤组织。方法 通过对基本培养基（B₅、MS和1/2MS）、外植体（茎段、顶芽和叶片）、激素浓度及组合进行筛选的方法进行厚朴愈伤组织诱导和继代研究。结果 B₅ 为最适合厚朴愈伤组织诱导的基本培养基;顶芽是最佳诱导愈伤组织的材料;最适合厚朴愈伤组织诱导的培养基为B₅+2.0 mg/L 2,4-D+1.0 mg/L 6-BA;最佳继代培养基为B₅+2.0 mg/L NAA+1.0 mg/L 6-BA,愈伤组织生长倍数达到2.87倍。结论 初步筛选出凹叶厚朴用于细胞悬浮培养的愈伤组织,为凹叶厚朴细胞培养奠定基础。     

葡萄松散型愈伤组织的培养及其白藜芦醇含量的测定

【目的】获得葡萄(Vitisvini fera L.)松散型愈伤组织,并了解其白藜芦醇含量的变化。【方法】以葡萄的叶、叶柄和茎分别作为外植体,在不同激素组合(6-卞氨基嘌呤(6-BA)、激动素(KT)、吲哚丁酸(IBA)、2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D))的培养基(以B5培养基为基本培养基,含30g/L蔗糖和6g/L琼脂)上,进行愈伤组织的诱导和继代培养,并利用高效液相色谱法(HPLC)对不同来源愈伤组织中的白藜芦醇含量进行测定。【结果】以葡萄叶为外植体时,诱导的愈伤组织出愈率很低;以叶柄和茎为外植体时,愈伤组织的出愈率均较高。利用叶柄和茎获得松散愈伤组织时,其诱导培养基组成分别是:B5培养基+6-BA0.5mg/L+IBA0.1mg/L和B5培养基+6-BA1.0mg/L+IBA0.2mg/L,其继代培养基均为B5培养基+6-BA1.0mg/L+2,4-D0.1mg/L。在诱导培养基产生的愈伤组织中,白藜芦醇含量由高到低的顺序为叶柄>叶>茎。以叶、叶柄和茎为外植体诱导愈伤组织时,其白藜芦醇含量最高的培养基分别为B5培养基+6-BA0.5mg/L+IBA0.2mg/L、B5培养基+6-BA1.0mg/L+IBA0.2mg/L和B5培养基+6-BA0.5mg/L+IBA0.2mg/L。【结论】葡萄叶柄和茎易被诱导产生松散的愈伤组织,且经多次继代可以用于建立悬浮培养体系;葡萄愈伤组织中的白藜芦醇含量随外植体及培养基组成的不同而有所差异。     

南方红豆杉愈伤组织诱导的研究

以南方红豆杉的嫩茎和针叶为外植体诱导愈伤组织,比较了不同种类基本培养基及不同激素水平诱导愈伤组织的能力。结果表明,嫩茎作为外植体较针叶有利于南方红豆杉愈伤组织诱导;B5培养基较MS培养基有利于愈伤组织诱导。嫩茎诱导愈伤组织的最适培养基为B5+2,4-D 2.0 mg/L+6-BA 0.5 mg/L。     

地黄愈伤组织诱导条件的研究

为寻求诱导地黄愈伤组织的最佳培养条件和激素配比,研究了地黄不同外植体、激素浓度及其组合、培养基种类等条件下暗培养对地黄愈伤组织诱导的影响。结果表明:以地黄叶片、叶柄、茎段作为外植体在MS+1.0~1.5 mg/LNAA条件下诱导率均能达到100%,其中叶片诱导的愈伤生长势较好;单独使用NAA和2,4-D均能高频率诱导出愈伤,加入0.5 mg/L6-BA后明显提高生长速度;MS、LS培养基诱导率高,但B5培养基中愈伤生长势较好。     

洋葱胚性愈伤组织的诱导及增殖条件的研究

[目的]探讨洋葱离体培养的最佳条件,为建立其高频再生体系及转基因研究奠定技术基础。[方法]以洋葱(Allium cepa L.)种子为外植体,对洋葱愈伤组织的诱导、胚性愈伤组织获得及增殖的培养条件进行了初步研究。[结果]不同培养基种类对愈伤组织的诱导有影响,BDS优于MS和B5培养基;当培养基中24,-D浓度为0.5 mg/L时种子出愈率最高;适当降低生长素浓度,添加分裂素BA能够促进胚性愈伤组织的发生,且无分化现象产生,胚性愈伤组织诱导最佳培养基为BDS+24,-D 0.25 mg/L+BA 2.0 mg/L,增殖最佳培养基为BDS+24,-D 0.25 mg/L+BA 1.0 mg/L。[结论]该试验建立的基因转化受体系统为洋葱基因转化奠定了良好基础。     

喜树愈伤组织诱导与抑制褐化的研究

[目的]筛选喜树外植体的最佳诱导培养基,研究抑制外植体及继代愈伤组织褐化的方法。[方法]以喜树的幼叶和种胚作为外植体,通过测定过氧化物酶和多酚氧化酶的活性,从外植体选择、培养基种类、激素配比、添加物的处理等方面进行愈伤组织的诱导和抑制外植体及继代愈伤组织褐化的研究。[结果]幼叶外植体的最佳诱导培养基为:SH+NAA2.5mg/L+2,4-D0.5mg/L+6-BA0.25mg/L;种胚外植体的最佳诱导培养基为:MS+2,4-D1.0mg/L+6-BA0.5mg/L。抑制幼叶外植体褐化的方法为:增加外植体大小,吹干培养基表面水分。抑制愈伤组织继代培养褐化的方法为:最佳诱导培养基附加30mg/L抗坏血酸和5g/L活性碳;1次继代后,将质地致密的愈伤组织转移到MS培养基上培养。[结论]该研究为喜树的遗传转化和植株再生提供理论基础。     

贝母愈伤组织的诱导及植株再生

通过对三种野生贝母的离体培养,研究了贝母基因型、温光条件、激素配比对贝母愈伤及不定芽的影响.结果表明,在对贝母鳞茎外植体适当的低温暗处理后,再转入光下培养,可明显减轻外植体的褐化;不同基因型对贝母愈伤组织所诱导差异不大,进一步证明贝母愈伤组织的诱导,不依赖于基因型;贝母愈伤组织和不定芽的诱导需要不同的激素配比,诱导贝母愈伤组织的最佳培养基为(MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L),诱导不定芽的最佳培养基为(MS+6-BA 1.0 mg/L+2,4-D 0.1 mg/L),平均每个外植体均产生2～3个不定芽,且粗壮、移栽成活率高.建立了完整的不依赖于基因型的贝母植株再生体系.