米尔贝霉素对山楂叶螨室内活性及田间防效的影响

利用叶片浸渍法评价了1%米尔贝霉素ME对山楂叶螨卵和雌成螨生物活性的影响,并采用常规喷雾法比较了1%米尔贝霉素ME、3%伊维菌素ME和5%阿维菌素EC对山楂叶螨的温室及田间防治效果。结果表明,米尔贝霉素对山楂叶螨卵和雌成螨的LC50,LC95值分别为0.231 8,7.913 9 mg/L和0.008 7,0.120 5 mg/L,对雌成螨的活性高于卵。温室及田间防治效果表明,3种药剂对山楂叶螨速效性差异较小,药后2 d的防治效果均高于91%;但1%米尔贝霉素ME和3%伊维菌素ME对山楂叶螨持效期比5%阿维菌素EC短。就速效性、持效期和防治效果而言,1%米尔贝霉素ME是防治山楂叶螨的优选杀螨剂。     

河蒴荛花提取物杀螨活性的初步研究

实验用4种不同的方法和甲醇、氯仿和石油醚3种不同溶剂,对河蒴荛花进行了提取,并对提取物分别采用玻片浸渍法和叶片残毒法对山楂叶螨进行生物活性测定。结果表明,甲醇提取物的提取率和24 h对山楂叶螨的校正死亡率都高于其它两种溶剂的提取物,其中提取方法以温浸法的提取率最高为14.79%,杀卵、杀若螨和杀成螨的校正死亡率分别为66.85%、100%和100%。可以看出若螨和成螨对甲醇提取物非常敏感,对卵、若螨和成螨的LC50为2.2346 g/L、1.0097 g/L和2.185 5 g/L。     

牵牛子种子提取物对朱砂叶螨触杀活性的测定

 【目的】研究牵牛子石油醚提取物中流分8对朱砂叶螨生物活性的作用机理。【方法】采用玻片浸渍法和叶片残毒法测定了流分8对朱砂叶螨成螨和卵的室内毒力,并采用生化方法测定了谷胱甘肽-S-转移酶、乙酰胆碱酯酶、单胺氧化酶、Ca2+-ATP酶活性的影响,通过透射电镜观察流分8对螨体内亚显微结构的破坏。【结果】流分8对朱砂叶螨成螨和卵均有很强的生物活性,对成螨和卵的LC50分别是0.4686 mg?ml-1和1.2212 mg?ml-1,LC90分别是2.5935 mg?ml-1和3.1234 mg?ml-1。牵牛子流分8处理朱砂叶螨后,螨体内解毒酶谷胱甘肽-S-转移酶被激活,这说明流分8中存在对朱砂叶螨有毒的物质;而乙酰胆碱酯酶、单胺氧化酶、Ca2+-ATP酶均受到不同程度的抑制,这可能引起神经传递的阻断,从而导致螨体的死亡。透射电镜下可见,流分8对螨体内表皮结构、肌纤维、细胞核膜、线粒体、内质网等均有不同程度的破坏。【结论】牵牛子可以有效杀死朱砂叶螨,作为新型植物源农药具有一定的开发价值。     

桔全爪螨田间种群对双甲脒的敏感性及其两种酶的生化特性

分别对采自重庆市北碚、忠县、万州和长寿四个地区的桔全爪螨雌成螨对双甲脒的敏感性进行了生物测定,其LD50分别为0.014、0.031、0.111和0.007mg/L。同时测定了四个地区桔全爪螨成螨体内羧酸酯酶和乙酰胆碱酯酶的活性,其中羧酸酯酶活性依次为7.78、3.15、6.56和6.00nmol/(min·insect),乙酰胆碱酯酶比活力依次为1.07、0.49、0.50和0.37nmol/(min·mg)。四个地区桔全爪螨体内羧酸酯酶和乙酰胆碱酯酶的动力学常数也存在不同程度的差异。离体抑制作用表明,双甲脒对四个地区桔全爪螨羧酸酯酶和乙酰胆碱酯酶具有明显的抑制作用,当双甲脒浓度达到14.67mmol/L时,抑制作用最强,对北碚、忠县、万州和长寿四个地区桔全爪螨羧酸酯酶的抑制率分别为65.27%、73.84%、81.44%和88.36%,对乙酰胆碱酯酶的抑制率分别为86.84%、84.36%、73.32%和70.85%。     

大戟狼毒提取物对朱砂叶螨生物活性的研究

采用玻片浸渍法和叶片残毒法,选用大戟狼毒3种不同溶剂氯仿、甲醇和石油醚的提取物对朱砂叶螨的不同虫态进行生物活性测定。结果表明,大戟狼毒石油醚提取物对朱砂叶螨各虫态有很强的生物活性,而其它两种溶剂的提取物效果不明显,24h成螨死亡率仅为15．61％和14．64％。石油醚提取物1mg／ml对朱砂叶螨成螨24h死亡率和校正死亡率分别为56．78％和53．73％,LC50达到了1．2442rag／ml,而石油醚萃取物的LC50为0．6736mg／ml。石油醚提取物的杀卵效果最好,明显高于石油醚提取物和萃取物的杀成螨作用,LC50达到了0．1709mg／ml     

棕榈油酸甲酯对朱砂叶螨生物活性的影响

为了研究棕榈油酸甲酯对朱砂叶螨生物活性的影响,采用玻片浸渍法和叶片残毒法测定棕榈油酸甲酯对害螨的生物活性,并采用生化方法对其体内几种酶的生物活性进行测定。结果表明,棕榈油酸甲酯具有较强的触杀和产卵抑制作用,质量浓度为5mg／mL时,对朱砂叶螨的雌成螨和卵24h后的校正死亡率分别达到79．82％,76．34％,LC50分别为1．8534mg／mL和2．2136mg／mL;雌成螨24h后产卵抑制率为79．45％,驱避率为95．85％。棕榈油酸甲酯处理朱砂叶螨后,螨体内解毒酶谷胱甘肽-S-转移酶被激活,说明棕榈油酸甲酯存在对朱砂叶螨有毒的物质;而乙酰胆碱酯酶、Na＋,K＋-ATPase均受到不同程度的抑制,可能引起神经传递的阻断,从而导致螨体的死亡。研究表明棕榈油酸甲酯可以有效杀死朱砂叶螨,作为新型农药具有良好的开发前景。     

葎草不同溶剂提取物对朱砂叶螨的毒力分析

在温度(28±1)℃、相对湿度(75±10)%、光暗周期16h-8h的条件下,研究了葎草不同溶剂(正己烷、乙醇、乙酸乙酯)提取物对朱砂叶螨成螨和卵存活的影响.结果表明:正己烷、乙醇、乙酸乙酯提取物对朱砂叶螨成螨的致死中浓度(LC<,50>)分别是6.746、17.007 1、190.424 6 mg/mL.正己烷提取物20 mg/mL对成螨48 h校正死亡率达100%,高于乙醇(51.7%)和乙酸乙酯(3.6%)提取物.正己烷、乙酸乙酯对朱砂叶螨卵的致死中量(LC<,50>)分别是4.838 5、11.745 3 mg/mL,乙醇提取物对朱砂叶螨卵的死亡率和对照组没有显著差异.表明正己烷是能有效提取出葎草中杀螨活性成分的有机溶剂.     

β-谷甾醇对朱砂叶螨的触杀活性及杀螨机理初探

本研究旨在探究β-谷甾醇对朱砂叶螨的触杀活性及其对叶螨体态、内部结构的破坏。通过玻片浸渍法和叶片药膜法确定β-谷甾醇对朱砂叶螨杀螨的毒力,通过扫描电镜和透射电镜观察β-谷甾醇对螨亚显微结构的破坏,通过酶活检测方法,检测β-谷甾醇对乙酰胆碱酯酶和羧酸酯酶酶活的作用,通过荧光定量PCR方法测定β-谷甾醇对乙酰胆碱酯酶基因和羧酸酯酶基因相对表达量的影响。测定β-谷甾醇对朱砂叶螨雌成螨的LC30为1.0mg/mL。由扫描电镜和透射电镜观察可见,β-谷甾醇处理后朱砂叶螨表皮、肌纤维、线粒体、内质网、高尔基体等均受到不同程度的破坏。β-谷甾醇对朱砂叶螨乙酰胆碱酯酶基因表达量和酶活都没有影响。β-谷甾醇对解毒酶羧酸酯酶酶活没有直接影响,但诱导羧酸酯酶基因的表达。研究结果表明了β-谷甾醇可以有效杀死朱砂叶螨,并且对螨体造成不同程度的破坏,作为新型植物源农药具有一定的开发价值。证实乙酰胆碱酯酶不是β-谷甾醇的作用靶标,但β-谷甾醇处理会诱导螨体内解毒酶的表达。     

青岛科技大学合成新杀螨活性化合物螺甲丁酯

正近年来,青岛科技大学化学与分子工程学院研究人员参照螺甲螨酯的合成方法,合成了新杀螨活性化合物螺甲丁酯(AC-118),并分别测试了AC-118对朱砂叶螨螨卵和雌成螨的毒力,考察了其对山楂叶螨的田间防效。经试验结果表明:AC-118的结构经1HNMR确认。初步活性试验显示:其对朱砂叶螨螨卵和雌成螨的LC50分别为2.4 mg/L和6.7 mg/L;田间施药后14 d,2 000倍和3 000倍剂量下,24%     

5种杀螨剂对二斑叶螨不同发育阶段的室内毒力测定

室内采用玻片浸渍法和浸叶碟法分别测定了5种杀螨剂对二斑叶螨雌成螨和卵的毒力。结果表明,乙唑螨腈和阿维·螺螨酯对雌成螨具有较强的毒杀作用,处理后24h的LC50分别为0. 248mg/L和3. 975mg/L,联苯肼酯对雌成螨的毒力较差,处理后24h的LC50为173. 780mg/L;阿维·螺螨酯、乙螨唑、螺螨酯及乙唑螨腈对卵具有较强的毒力,处理后7d的LC50分别为0. 0295mg/L、0. 0347mg/L、0. 0450 mg/L及0. 6310mg/L,联苯肼酯对卵的毒力最差,处理后7d的LC50为143. 8800mg/L。联苯肼酯和乙唑螨腈对二斑叶螨雌成螨毒力相差700. 7倍,联苯肼酯和阿维·螺螨酯对卵的毒力相差4877. 3倍。     

河蒴荛花对山楂叶螨活性的研究

为了寻找河蒴荛花对山楂叶螨的作用方式及其活性成分,试验对其活性流分WCME 11进行了扩散作用的研究,并测试了其总生物碱的生物活性。结果表明:WCME 11的刺激扩散率在浓度为0 125mg/ml时最高,累计扩散率为44 26%。0 125mg/ml和0 06mg/ml的扩散高峰在2～24h;0 03mg/ml、0 015mg/ml和0 007mg/ml的扩散高峰在24～48h。即WCME 11使用浓度在0 06mg/ml以上时,由于扩散高峰在杀伤力很大的时间范围内,不会因为扩散作用而引起再猖獗现象,显示了植物源农药的多方位作用的优势。而总生物碱对山楂叶螨各虫态无明显作用,初步证明其活性成分不属于生物碱类。本试验为河蒴荛花活性成分的寻找和作用机理的探索提供了一定的理论基础。     

地肤子活性成分对山楂叶螨酯酶同工酶的影响

实验研究了地肤子活性成分KFCE-2处理后,山楂叶螨体内的酯酶同工酶的影响。从聚丙烯酰胺凝胶电泳结果来看,在处理组中,没有检测到新的其它酶带。并且其酯酶酶带E1、E2比对照组的颜色要浅,而且图谱面积小;而E3在处理的12h后完全消失。酯酶同工酶电泳图谱经UVP2凝胶成像系统扫描分析,从强度变化上可以看出,E2、E3带的活性从处理的4h(LANE-a')开始活性就在逐渐减弱,尤其是E3带的活性在处理的12h后(LANE-c')就完全被抑制。此外,在迁移率的变化上,处理组E1、E2带的迁移率有逐渐增大的趋势;E3带的迁移率在能观察到的两个时间内,有减小的趋势。这表明KFCE-2可能通过抑制山楂叶螨体内的酯酶同工酶的活性,并且通过特异性的结合,改变部分酯酶的活性结构,来降低其解毒代谢。这也表明了地肤子作为新型植物源农药具有良好的开发前景。     

东莨菪素对朱砂叶螨的毒力及杀螨机理初探

采用玻片浸渍法测定东莨菪素对朱砂叶螨的触杀毒力,观察东莨菪素对朱砂叶螨的致毒症状,并测定其对朱砂叶螨神经系统靶标酶(乙酰胆碱酯酶、单胺氧化酶、Na+-K+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶)活性的影响。结果表明,东莨菪素对朱砂叶螨24 h的触杀LC50值为1.24 mg/mL;中毒试螨表现出神经毒剂的致毒症状,如兴奋、痉挛等。在活体和离体试验中,东莨菪素均显著抑制试螨乙酰胆碱酯酶、单胺氧化酶、Na+-K+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶的活性。研究还发现东莨菪素会引起试螨乙酰胆碱含量增加,可能是东莨菪素显著抑制试螨乙酰胆碱酯酶活性引起。据此推测东莨菪素对朱砂叶螨可能有神经毒性。     

正交方法萃取花椒油优化工艺研究

采用超临界CO2法,以花椒为原料,通过单因素试验和正交试验设计,探讨了花椒粉粒度、萃取压力、时间和温度等因素对花椒油萃取率的影响。结果表明最佳工艺参数为:花椒粉粒度为60目,萃取压力30 MPa,萃取时间2.0 h,萃取温度40℃,CO2流量40 L/h。在此条件下,油脂萃取率可达7.68%以上。     

百部根中提取物对朱砂叶螨触杀活性的测定

摘 要：[研究目的]研究中药材百部根石油醚提取物中最佳流分9对朱砂叶螨生物活性的作用机理。[方法]运用玻片浸渍法测定了流分9对朱砂叶螨成螨的室内毒力,并运用生化方法对乙酰胆碱酯酶、单胺氧化酶、Ca2+-ATP酶、超氧化物歧化酶(SOD)活性的影响进行了测定。[结果]表明百部流分9 对朱砂叶螨成螨有很强的生物活性,对成螨的LC50是0.6339 mg/mL。百部流分9 处理朱砂叶螨后,螨体内超氧化物歧化酶(SOD)被激活,而单胺氧化酶、Ca2+-ATP酶、乙酰胆碱酯酶均受到明显的抑制,这一系列变化可能会引起螨类神经系统传递的阻断,因此导致害螨的死亡。[结论]由此可见百部可以有效杀死朱砂叶螨,作为新型植物源农药具有很大的开发潜力。     

蛇床子素对小菜蛾幼虫的胃毒作用及对虫体内两种酶活性的影响

采用生物测定和酶活力测定方法,研究了蛇床子素对敏感品系小菜蛾Plutella xylostellaL.的胃毒作用及其对小菜蛾幼虫体内谷胱甘肽-S-转移酶、乙酰胆碱酯酶活性的影响。结果表明：蛇床子素对小菜蛾幼虫具有一定的胃毒作用。2 mg/mL的蛇床子素处理萝卜苗叶片后饲喂小菜蛾幼虫12 h校正死亡率为37%,72 h时后小菜蛾幼虫的校正死亡率为93%。处理24 h时,LC50为1 521.25 mg/mL,处理48 h时,LC50为865.93 mg/mL。处理72 h时,LC50为515.5 mg/mL。不同浓度蛇床子素和不同时间处理小菜蛾幼虫后,幼虫体内的谷胱甘肽-S-转移酶和乙酰胆碱酯酶活力均产生了消长变化。经125×10-3mg/mL蛇床子素处理16 h时,小菜蛾体内的GSTs活力最高为209.15 U.mg-1prot.min-1。经125×10-3mg/mL蛇床子素处理4 h时,小菜蛾体内的AchE酶活力最高,为0.648 1 U.mg-1prot.min-1。各处理在24 h时,小菜蛾体内的GSTs活力和AchE酶活力均有明显的降低。说明蛇床子素对小菜蛾幼虫体内的谷胱甘肽-S-转移酶和乙酰胆碱酯酶活力重要的影响。     

3种植物次生代谢物质对舞毒蛾的杀虫活性分析

为探究苦参碱、氧化苦参碱和山奈酚对舞毒蛾3龄幼虫的杀虫活性以及杀虫机理,本研究通过生物测定、离体和体内酶活性实验,分析了上述3种植物次生代谢物质对舞毒蛾的杀虫效果及对其谷胱甘肽S-转移酶(GST)、乙酰胆碱酯酶(AChE)和羧酸酯酶(CarE)活性的影响。实验结果表明:苦参碱、氧化苦参碱和山奈酚均对舞毒蛾3龄幼虫有良好的杀虫效果,其中苦参碱杀虫效果最强,致死中质量浓度(LC₅₀)为0.420 mg/mL;离体酶活性实验发现,3种植物次生代谢物质对舞毒蛾离体GST、AChE和CarE活性均有抑制效果,其中氧化苦参碱对GST和AChE抑制作用最强,抑制中质量浓度(IC₅₀)分别为0.928和0.717 mg/mL,而苦参碱对CarE抑制作用最强,IC₅₀为0.436 mg/mL;而体内酶活性实验结果显示,苦参碱对GST抑制作用最强,在处理后48 h,GST活性达到最低,仅为同时期对照组的39%;而氧化苦参碱对AChE和CarE抑制作用最强,在处理后72 h,AChE和CarE活性最低,分别为对照组的44%和40%。以上结果表明苦参碱、氧化苦参碱和山奈酚对舞毒蛾幼虫GST、AChE和CarE活性的抑制作用是其具有杀虫活性的原因之一。      

罗非鱼肝脏乙酰胆碱酯酶的双水相萃取

乙酰胆碱酯酶是监测环境中有机磷和氨基甲酸酯类农药的重要靶标物质.应用聚乙二醇(PEG)/磷酸氢二钾(K2HPO4)双水相体系对罗非鱼肝脏乙酰胆碱酯酶的萃取分离进行了研究.采用单因素试验,探讨了PEG1000的质量分数、K2HPO4的质量分数、pH值及NaCl的质量分数对酶萃取的影响,并通过正交试验进一步优化萃取条件.结果表明:K2HPO4质量分数、PEG质量分数、pH值对酶的萃取影响最大.室温下在K2HPO4质量分数为15.0％、PEG1000质量分数为22.0％、pH值为7.0的双水相体系中,酶的分配系数最大、可达5.65,萃取率为72％.放大试验结果表明,该双水相体系对乙酰胆碱酯酶的萃取效果比较稳定,是提取分离乙酰胆碱酯酶的一种新方法.     

花椒不同部位提取物抑菌活性及果蔬发病率研究

以花椒壳、籽、叶三个部位提取物为供试材料,研究其抑菌活性及对果蔬发病率的影响。采用滤纸片法检测花椒不同部位提取液对大肠埃希菌、沙门氏菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌的抑菌活性,通过组织分离法从常见果蔬中分离得到4株病原菌,初步鉴定为曲霉属、青霉属和链格孢属,对分离所得病原菌进行花椒提取物抑菌活性检测。花椒壳提取液的抑菌效果明显高于花椒籽和叶,其中花椒壳提取液对沙门氏菌和金黄色葡萄球菌有良好的抑菌活性,MIC分别为125 mg/mL、62.5 mg/mL。花椒壳、籽、叶对曲霉属、青霉属和链格孢属均有明显的抑菌作用,花椒壳抑菌效果最强,平均抑菌率在90%以上,经过花椒壳提取液处理后,果蔬发病率显著降低。结果表明花椒三个部位提取物具有良好的抑菌作用,可作为候选天然植物抗菌剂资源。