黄花菜中过氧化物酶活性的测定及褐变控制

为了探索黄花菜预处理过程中合理抑制POD活力的方法，以鲜黄花菜为材料，研究其在采后及加工过程中POD的活性及变化情况．发现外花瓣和花梗的POD活力强，内花瓣的弱，并随着采收后贮藏时间的延长，活力缓慢下降，经贮藏2d以上的黄花菜不宜用来作为脱水黄花菜的原料．比较热(沸)水杀酶、蒸汽杀酶与非蒸汽(干燥空气，远红外线，微波)杀酶等方法发现，热(沸)水与非蒸汽不能有效的杀灭黄花菜中的POD，湿热空气(蒸汽)比干热空气灭酶效果好，蒸汽灭酶的工艺参数为漂烫温度98℃，漂烫时间70—80s．     

几丁质固定化菊粉酶的研究

以自制的几丁质作载体，戊二醛作交联剂，用吸附交联法对菊粉酶进行了固定化研究。优化了固定化反应条件，在最适条件下，菊粉酶活力最大收率为３２％。固定化菊粉酶的最适温度为６０－６５℃，比游离酶提高５℃。最适ｐＨ保持不变。固定化酶的热稳定性和对酸碱稳定性都有较明显的改善，将固定化酶装柱进行菊芋汁连续水解试验，操作半衰期达２２ｄ。     

西洋参不同器官在不同发育时期的过氧化物酶和过氧化氢酶比活力的研究

西洋参在开花后15天种子中已积累成熟种子一半左右的蛋白质,而到开花后25天已积累的种子蛋白达成熟种子的80%以上,以后积累减慢。到开花后45天达最大值,果肉蛋白在开花后25天达最大值,以后逐渐下降。种子发育中,过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CTS)比活力呈下降趋势,果肉的 POD 比活力下降速度更明显,而果肉CTS 比活力则呈上升趋势,果肉的两种酶比活力较种子的高出多倍。开花后35天西洋参不同器官的 POD 比活力高低的顺序为叶→茎→果肉→种子→根,CTS 顺序为茎→果肉→种子→根→叶。     

白腐菌（T.pubescens MB89）漆酶的固定化及其酶学性质研究

【目的】研究白腐菌T.pubescens MB89漆酶固定化处理的最佳条件及其酶学性质。【方法】采用壳聚糖、壳聚糖铜、海藻酸钠/壳聚糖和TEOS/PEG 4种载体对漆酶进行固定,测定固定化漆酶酶活性在不同温度、pH值和固定化条件处理下的变化。【结果】白腐菌漆酶的固定化方法和最佳固定条件为:①壳聚糖固定化漆酶(IE1)。戊二醛最佳浓度为0.4 mol/L,最适交联时间8 h,最佳给酶量1.5 mg/g;②壳聚糖铜固定化漆酶(IE2)。CuSO4.5 H2O最佳添加量为0.6 mg/g,最适络合时间10 h,最佳给酶量0.25 mg/g;③海藻酸钠/壳聚糖固定化漆酶(IE3)。0.2mol/L海藻酸钠,0.2 mol/L CaCl2,0.1 mol/L戊二醛,0.15 mol/L壳聚糖,最佳给酶量1.5 mg/g;④TEOS/PEG固定化漆酶(IE4)。最适PEG分子质量为600~800,最适添加量1.5 g/g,最佳给酶量1.5 mg/g。4种固定化漆酶的酶学性质:IE1和IE4的最适温度均为60℃,IE2和IE3为30℃;IE1、IE3和IE4的最适pH值为4.5,IE2为4.0;与游离漆酶(Lac)的最适pH值相比,固定化漆酶的最适pH值均向碱性方向偏移,且固定化漆酶的酸碱稳定性、热稳定性和贮存稳定性均优于游离漆酶。【结论】固定化酶的最适合温度、pH均受固定化载体和方法的影响,固定化漆酶的稳定性均优于游离漆酶。     

黑曲霉Uγ-2(Aspergillus niger Uγ-2)产菊粉酶的研究

研究了黑曲霉Uγ－2的产酶进程及其产酶条件，结果表明：在1g/mL^-1菊芋汁中添加30mg/mL^-1的牛肉膏，调节初始pH6.0，摇瓶转速为180r/min^-1,30度条件下发酵最高酶活力为180．33umol/min^-1,mL^-1。发酵初期产酶速率较快，pH下降速度快，在发酵进行到72－96h期间，出现产酶的迟缓期，此时发酵液的pH为4．62－4．38，以后菊粉酶活力明显上升，在192h时菊粉酶活力达到最高值，发酵液pH降到最低点，在发酵进程中，发酵液可溶性蛋白出现2个高峰，72h出现第一高峰，与菊粉酶活力比较表明此时主要是杂蛋白产生所致；在192h时出现的第二高峰与菊粉酶活力同步，说明主要是菊粉酶产生，与生物量的变化曲线比较，尽管在发酵初期产酶速率较快，但菊粉酶在发酵液中大量积累出现在120h后（对数增长期的后期）。γγγγγ     

黑曲霉乳糖酶固定化前后酶学性质比较研究

[目的]为低乳糖乳制品的工业化生产提供技术支持。[方法]以阳离子交换树脂D151为载体,采用吸附交联法对黑曲霉乳糖酶进行固定化,进而研究了固定化乳糖酶的酶学特性。[结果]固定化乳糖酶和游离酶的最适温度分别为60和70℃。在低于50℃的条件下对固定化乳糖酶和游离酶进行保温处理,酶活力没有损失;在高于50℃的条件下对固定化乳糖酶和游离酶进行保温处理,其酶活力呈现下降趋势,且固定化乳糖酶的活力下降更为迅速。固定化乳糖酶和游离酶的最适pH值分别为4．5和4．0,其pH值稳定范围分别为2．5—4．5和5．0～7．0。pH=6．5时,固定化乳糖酶和游离酶的活力分别为其最适pH值下的87．5％和3．8％。固定化乳糖酶和游离酶的半衰期分剐为24和9d。[结论]在牛奶的天然pH值下,固定化乳糖酶比游离酶更适用。     

胞壁质酶的性质研究

[目的]以提取的胞壁质酶为材料,研究胞壁质酶的性质。[方法]通过测定胞壁质酶在595nm处光吸收值的增量,测定该酶活力和蛋白质浓度。通过测定米氏常数Km,研究酶促反应的速度及影响速度的因素。在不同pH值缓冲液中测定胞壁质酶活力,同时测定该酶的最适pH值。酶促反应的速度在酶的最适温度时达到最大。利用SDS-PAGE电泳法,测定胞壁质酶的分子量及纯度。[结果]胞壁质酶在219.00g/L光吸收下降最快,活力最高。Km为0.57。脲对胞壁质酶为抑制作用,其抑制类型为竞争性抑制。胞壁质酶在pH值为8.0时酶活力最高,属于弱碱性,在40℃时酶活力最高,其Kd为13。[结论]该研究可为今后采用生物工程技术对胞壁质酶进行克隆、提取以及制取提供参考。