生防菌菌株A的摇瓶培养条件及发酵工艺

[目的]优化生防菌菌株A的培养条件与液体发酵工艺。[方法]采用均匀试验设计方法、回归分析方法和分批补料发酵工艺,研究生防菌菌株A的培养条件与液体发酵工艺的优化。[结果]结果表明,适合菌株A摇瓶培养的最佳条件为：培养温度35℃,摇瓶装量12％,接种量3．0％,初始pH值7．2。20L发酵罐分批补料发酵参数为：种子培养基为YDC培养基,培养时间24h,接种量3．0％;发酵培养基：葡萄糖1．0％,酵母膏1．0％,CaCO3 1．0％,pH值7．2;流加培养基：葡萄糖1．5％,酵母膏0．5％,制成混合液一起流加,发酵8h开始流加;发酵周期（34±2）h,在以上发酵条件下,发酵液芽孢浓度达（3．410±0．151）×10^9cfu／ml。[结论]该试验条件下所获得发酵液芽孢数浓度较高,可用于进一步制备生防菌剂。     

丽格海棠继代增殖培养研究

对丽格海棠进行增殖培养，结果发现丽格海棠在继代增殖培养过程中的最佳培养基为：MS＋6-BA1．0mg／L＋NAA0．1mg／L＋IBA0．10mg／L＋食糖30g/L＋琼脂8g／L，pH值为5．8～6．0。     

培养基组分及操作参数对抗体多聚体形成的影响

近年来,国家食品药品监督管理局基于药物安全性的考虑对于治疗性蛋白的质量提出了更高的要求,而蛋白多聚体能引起人体免疫反应,被认为是关键质量属性(critical quality attributes,CQA)。采用培养基组分添加试验和操作参数控制试验的方法,系统研究了培养基中氧化还原物质和培养过程参数(温度和p H值)对抗体多聚体形成的影响。结果表明,半胱氨酸的添加能显著抑制多聚体的形成,培养基中半胱氨酸添加浓度增至30 mmol/L,多聚体含量下降40%。而铜离子的添加浓度从500μmol/L降至0μmol/L,多聚体含量则降低了43%。培养温度从35℃降低至32℃,重链结合蛋白(Bi P)和蛋白二硫键异构酶(PDI)的表达水平均提高了89%,细胞翻译后修饰能力显著加强,分泌至上清液中的抗体多聚体含量相应下降了38%。研究结果明确了生产工艺和产品关键属性之间的关系,为后续设计优化以质量为先导的培养过程,生产质量可控、安全、有效抗体药物奠定了基础。     

海南粗榧细胞悬浮培养体系的建立

以海南粗榧愈伤组织进行悬浮培养,考察了培养基、维生素、蔗糖浓度、pH值、接种量对海南粗榧细胞悬浮培养体系建立的影响,并利用HPLC技术检测海南粗榧悬浮细胞和培养基中生物碱的含量.结果表明:海南粗榧悬浮细胞系培养的最适条件:MS为基本液体培养基、添加蔗糖35 g/L+VB1 10 mg/L、接种量6％、初始pH值5.5～7.0;发酵过程中每5d调节pH值至6.0,有利于细胞的生长和产物的合成;细胞的生长呈“S”型曲线,细胞生长周期为30 d,产物含量在培养25 d时达到最大;细胞活力呈先急剧上升后缓慢下降的趋势.     

白背三七悬浮细胞培养体系的建立

目的:建立稳定的白背三七悬浮细胞培养体系。方法:采用植物组织培养技术,探讨初始接种密度、装液量、初始pH值、激素种类及浓度4个因素对白背三七细胞悬浮培养的影响。结果:白背三七细胞悬浮培养的适宜条件为:B5基本培养基+0.5mg/L NAA+2.0 mg/L 6-BA+30g/L蔗糖,pH 7.0,装液量为40%,初始接种密度为90g/L(鲜质量),弱光培养。在此优化条件下,细胞生长呈"S"形曲线;培养过程中,培养基的pH呈先下降后缓慢升高的变化趋势;细胞活力的变化稍滞后于生长曲线,逐渐降低。     

碱性蛋白酶提取米糠蛋白的研究

为建立高效的米糠蛋白提取工艺,对碱性蛋白酶提取米糠蛋白的工艺条件进行了研究。以蛋白提取率为考察指标,在单因素试验的基础上,通过正交试验进一步优化米糠蛋白提取工艺条件。结果表明,料液比对米糠蛋白提取率的影响最大,其次为pH值,温度、时间和加酶量影响较小。优化后的工艺条件为:温度60℃,时间3.0h,料液比1∶20,加酶量2.5%,pH值9.5。在此条件下,蛋白提取率可达75.42%,同时测得米糠蛋白的等电点为4.5。影响米糠蛋白提取率的主次因素顺序为:料液比>pH值>温度>时间>加酶量。     

沙芥叶片愈伤组织诱导研究初报

以MS为基本培养基，确定5种组合对沙芥叶片进行愈伤组织诱导，结果显示：MS＋6-BA0．5mg／L＋NAA0．1mg／L＋3．0％蔗糖＋0．5％琼脂（pH值5．8）可诱导出愈伤组织；以MS＋6-BA0．5mg／L＋NAA2mg／L＋3．0％蔗糖＋0．5％琼脂（pH值5．8）作为愈伤组织增殖培养较理想。     

肌注手足口病(EV71型)人免疫球蛋白层析工艺研究

[目的]优化手足口病（EV71型）人免疫球蛋白的层析工艺条件,为制备治疗手足口病（Ev71型）的人免疫球蛋白提供依据。[方法]采用单因素试验和响应面分析法,研究样品pH值、蛋白质浓度和电导率对层析后流穿液中免疫球蛋白纯度的影响。[结果]影响层析流穿液中免疫球蛋白纯度的主要因素为电导率,其次是蛋白质浓度,pH值对层析流穿液中免疫球蛋白蛋白纯度影响最小。手足口病（EV71型）人免疫球蛋白的最佳层析工艺参数为：pH5．28、蛋白质浓度41．62g／L、电导率为0．24m／s。[结论]层析优化后的流穿液中手足口病（EV71型）人免疫球蛋白纯度可达到99．60％,可用于制备高纯度的手足口病（EV71型）人免疫球蛋白。     

甜瓜的组织培养及快繁试验

材料与培养条件：1．1材料。甜瓜的茎段、种子。1．2培养条件。种子发芽培养基：(1)l／2MS；茎段生长培养基：(2)MS 6-BA0．5mg／L IAA1mg／L；(3)MS 6-BA 2mg／L PP3333．0mg／L NAA0．05mg／L。所有培养基均附加0．75％琼脂和2％的蔗糖，pH5．8～6．0，培养温度为23～27C，光照12h／d，光照度2000Lx左右。     

青稞淀粉酶法提取工艺研究

本文对用碱性蛋白酶酶法提取青稞淀粉的工艺进行优化,从而达到降低青稞淀粉中蛋白残留的问题,为青稞的精深加工提供理论依据。以青稞面粉为原料,以碱性蛋白酶水解蛋白提取青裸淀粉,在单因素试验的基础上,采用4因素4水平正交试验设计优化提取工艺。结果表明4个因素对提取淀粉中的蛋白残留量都有极显著的影响,其影响的主次顺序是pH值〉加酶量〉水解温度〉水解时间。对提取的青稞淀粉蛋白残留量最低的组合为：料液比1：4,pH值9．0,加酶量80U／g,水解温度50℃,水解时间60min。在此试验条件下提取的青稞淀粉的蛋白残留为0．37％。