人凝血酶原复合物提取及纯化工艺的研究

[目的]确定血浆中人凝血酶原复合物提取及纯化的最佳工艺条件。[方法]以人血浆为原料,凝血酶原复合物的吸附率和回收率为评价指标,采用单因素试验及正交试验对提取和纯化条件进行优选。[结果]最佳工艺为:选用pH值为7.0的DEAE-Sephadex A50凝胶从人血浆中提取人凝血酶原复合物,吸附50 min时,凝胶对凝血因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ的吸附率可达84.0%、86.5%、85.7%和78.0%;采用NaCl浓度为0.1 mol/L、pH值为7.2的洗涤液洗涤吸附后的凝胶5次,然后用NaCl浓度为2.0 mol/L的洗脱液洗脱3次,对凝血因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ的回收率可达84.9%、76.4%、82.8%和78.7%。[结论]该工艺合理、可行,适合人凝血酶原复合物的工业化生产。     

鼠李糖乳杆菌CLRI发酵虾壳脱钙的条件及培养基优化

为减少环境污染,寻求一种新的虾壳脱钙方法替代甲壳素传统生产中的化学脱钙法,对鼠李糖乳杆菌CLRI发酵虾壳脱钙的条件和培养基进行了优化试验.结果表明,最优发酵条件:发酵温度为41℃,发酵周期为50h,初始pH值为6.6,接种量为6％,固液比为3 g/20mL,装液量为20 mL/100 mL.最优培养基:葡萄糖110.6...     

肌注手足口病(EV71型)人免疫球蛋白的研制

[目的]研制肌注手足口病(EV71型)人免疫球蛋白,用以治疗重症手足口病。[方法]以特异性血浆为原料,采用低温乙醇法结合离子交换层析制备手足口病(EV71型)人免疫球蛋白,对其层析条件进行优化,制定了手足口病(EV71型)人免疫球蛋白检测的质量标准,并对手足口病(EV71型)人免疫球蛋白相关指标进行检测。[结果]血浆内EV71型中和抗体效价大于1∶60的血浆份数占30%以上,制品各项检测指标符合制定的质量标准。[结论]可直接从自然感染的手足口病的供血浆员中筛选出抗EV71型高效价血浆,制备手足口病(EV71型)人免疫球蛋白。     

肌注手足口病(EV71型)人免疫球蛋白层析工艺研究

[目的]优化手足口病（EV71型）人免疫球蛋白的层析工艺条件,为制备治疗手足口病（Ev71型）的人免疫球蛋白提供依据。[方法]采用单因素试验和响应面分析法,研究样品pH值、蛋白质浓度和电导率对层析后流穿液中免疫球蛋白纯度的影响。[结果]影响层析流穿液中免疫球蛋白纯度的主要因素为电导率,其次是蛋白质浓度,pH值对层析流穿液中免疫球蛋白蛋白纯度影响最小。手足口病（EV71型）人免疫球蛋白的最佳层析工艺参数为：pH5．28、蛋白质浓度41．62g／L、电导率为0．24m／s。[结论]层析优化后的流穿液中手足口病（EV71型）人免疫球蛋白纯度可达到99．60％,可用于制备高纯度的手足口病（EV71型）人免疫球蛋白。     

人凝血因子Ⅷ的提取工艺研究

[目的]考察制备过程中工艺优化对人凝血因子Ⅷ制备的影响。[方法]以人冰冻血浆经过融解,0~4℃离心,收集的冷沉淀为原始材料,通过调整不同倍数的溶解液、选择不同的抗凝剂、调节不同的酸沉pH,观察蛋白液的稳定性,检测蛋白液中蛋白质含量及凝血因子Ⅷ的活性。结果:加入冷沉淀重量5倍的溶解液,用4 IU/ml肝素钠抗凝,调节酸沉的pH在6.2~6.4范围内,蛋白液的稳定性最佳,人凝血因子Ⅷ的活性最高。[结论]通过优化人凝血因子Ⅷ提取过程的参数,可以显著提高人凝血因子Ⅷ的稳定性,降低杂蛋白浓度,保护Ⅷ因子的活性。     

枯草芽孢杆菌产中性蛋白酶的发酵条件优化

文章对一株枯草芽孢杆菌产中性蛋白酶的发酵条件进行了优化,采用单因素试验和正交试验确定了最优发酵条件为装液量60 ml/250 ml,转速200 r/min,初始pH值6.9,发酵周期60 h,接种量4%,发酵温度37℃。通过发酵条件的优化,酶活提高了311.7%。