白花油茶胚性愈伤诱导及植株再生

本研究以白花油茶未成熟胚为外植体，对其消毒方式及胚性愈伤组织培养进行研究。结果表明，未剥果皮的外植体先用75%乙醇浸泡60 s后转入0.1%HgCl₂浸泡8 min,再转入2%NaClO中浸泡8 min,成活率最高，达86.67%。未成熟胚切块接种于MS+0.5 mg·L^-1 2,4-D+2.0 mg·L^-1 6-BA中，胚性愈伤组织诱导最好，诱导率最高，达89.63%;将绿色愈伤组织转接至MS+0.2 mg·L^-1 NAA+1.0 mg·L^-1 6-BA时，愈伤组织表面及其周围产生大量体细胞胚，呈球形、心形、鱼雷状和子叶状等多种形状，且多种相互重叠生长，胚状体诱导率最高，达68.89%;不同配比的6-BA和NAA诱导体细胞胚产生不定芽的效率差异明显，其中2.25 mg·L^-1 6-BA+0.5 mg·L^-1 NAA和3.0 mg·L^-1 6-BA+1.0 mg·L^-1 IBA不定芽分化效果...     

番木瓜胚性愈伤组织的诱导及体胚发生

以番木瓜的幼胚、下胚轴、叶片和子叶作为外植体,研究不同的激素配比、附加物以及培养方式和条件对胚性愈伤组织和体胚的诱导效果.结果表明,幼胚是胚性愈伤组织和体胚发生的好材料.幼胚最佳诱导培养基为:改良MS+10 mg·L-12,4-D+5 mg·L-1NAA+2 mg·L-1KT+0.5 mg·L-1 BA;最适合的增殖培...     

雪莲果叶片愈伤组织的诱导

[目的]研究雪莲果叶片愈伤组织诱导的最佳灭菌方法和最佳培养基。[方法]以雪莲果叶片为外植体,用浓度0.1%升汞浸泡不同时间,筛选最佳灭菌方法;以MS为基本培养基,比较不同浓度生长调节物质对愈伤组织诱导的影响。[结果]用浓度0.1%升汞溶液灭菌8 min,外植体污染率为54.55%,死亡率为3.64%;最佳诱导培养基为MS+6-BA 1.0~1.5 mg/L+NAA 0.5~1.0 mg/L。[结论]最佳灭菌方法为浓度0.1%升汞对叶片灭菌8 min;诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+6-BA 1.0~1.5 mg/L+NAA 0.5~1.0 mg/L。     

蟆叶秋海棠离体培养的研究

以蟆叶秋海棠(Begonia rex)的幼嫩叶片为外植体,采用L25(55)正交设计,研究了不同生长调节剂和培养基对愈伤组织诱导的影响.结果表明,培养基的类型对愈伤组织诱导的影响极大,生长调节荆对愈伤组织诱导有一定的影响,愈伤组织在不添加任何生长调节剂的培养基上即可进行分化.蟆叶秋海棠最佳愈伤组织诱导培养基组合为1/2 MS+0.5～1.5 mg·L-1 KT+0.5 mg·L-16-BA+0.5～2.0 mg·L-1α-NAA+0.8%琼脂+3%蔗糖,愈伤组织诱导率可高达100%.生根培养基为1/2 MS+0.2 mg·L-1α-NAA+0.8%琼脂+3%蔗糖,生根率高达100%.     

黄瓜胚状体途径再生体系的建立

【目的】建立黄瓜高频胚状体再生体系,为黄瓜遗传转化体系的完善奠定基础。【方法】以黄瓜品种津研四号、长春密刺、Q8和14-1为材料,研究不同基因型材料愈伤组织的诱导情况;分别取14-1的子叶、子叶节、下胚轴和成熟胚为外植体,研究不同外植体类型的愈伤组织和胚状体产生情况;以14-1子叶节为外植体,研究不同激素及其质量浓度配比对黄瓜胚状体诱导的影响。【结果】4个不同基因型中,欧洲温室型黄瓜种质14-1可诱导出胚状体。在4种外植体类型中,14-1的子叶节可以高效诱导出愈伤组织和胚状体,其诱导率分别为100.0%和34.1%。激素及其质量浓度组合也会影响胚状体的诱导,在愈伤组织诱导阶段,以MS+1.5mg/L 2,4-D为培养基对胚性愈伤组织的诱导效果最好,其对14-1子叶节的诱导率为100%;在分化培养阶段,MS+0.1mg/L 2,4-D+0.5mg/L KT+0.2mg/L IAA有利于体细胞胚的发生,14-1的出胚率为62.5%。显微形态观察发现,黄瓜体细胞胚发育过程包括球形胚、心形胚、鱼雷胚和子叶期胚等时期,这些胚可以发育成正常小植株。【结论】14-1的子叶节经诱导培养基MS+1.5mg/L 2,4-D和分化培养基MS+0.1mg/L 2,4-D+0.5mg/L KT+0.2mg/L IAA培养后,可高效产生胚状体,并可萌发成正常植株。     

杉木不同器官愈伤组织和再生芽的诱导效率

以杉木未成熟胚、种子发芽的下胚轴、子叶以及组培苗茎段为外植体,研究基本培养基、不同激素组合及浓度对杉木愈伤组织的诱导及再生芽发生的影响。结果表明:不同激素组合及浓度对不同外植体的愈伤组织诱导率有显著影响,对未成熟胚愈伤组织诱导最佳的培养基为MS+2,4-D 2 mg·L~(-1)+6-BA 1 mg·L~(-1)+KT 1 mg·L~(-1),诱导率为92.7%;对子叶、下胚轴愈伤组织诱导最佳的培养基为MS+6-BA 2 mg·L~(-1)+NAA 2 mg·L~(-1)+TDZ 0.01 mg·L~(-1),诱导率分别为97.4%和95.2%;对组培苗茎段愈伤组织诱导最佳的培养基为MS+2,4-D 1 mg·L~(-1)+NAA 2 mg·L~(-1)+TDZ 0.01 mg·L~(-1),诱导率为86.7%;MS+6-BA 0.5 mg·L~(-1)+KT 1.5 mg·L~(-1)是愈伤组织诱导再生芽的最佳培养基,诱导率为80%。质地疏松的愈伤组织其再生芽率最高(65%),单个质地均匀的愈伤组织其再生芽数可达6个;基本培养基对愈伤组织质地形态有较大影响,1/2MS培养基诱导出愈伤组织质地较疏松,MS培养基诱导出的愈伤组织质地均匀且表面可见颗粒状细胞团,DCR培养基诱导出的愈伤组织质地较密。     

外源激素对桃儿七愈伤组织诱导的影响

为了探讨外源激素对桃儿七愈伤组织诱导的影响,以桃儿七的胚及无菌苗的子叶和胚轴为材料,以MS为基本培养基,研究了3种不同激素配比对不同外植体愈伤组织诱导的影响。结果表明,以胚为外植体,在3.0 mg/L 2,4-D、0.5 mg/L KT和0.5 mg/L IAA组合处理的培养基中,诱导率达到39.5%;诱导子叶和胚轴形成愈伤组织的最佳激素配比为4.0 mg/L 2,4-D+0.5 mg/L KT+0.2 mg/L IAA;成熟胚比子叶和胚轴更易诱导愈伤组织的形成,诱导率分别提高了43.64%和315.79%,诱导效果最显著(P0.001);在接种前,用5mg/L 2,4-D溶液浸蘸子叶和胚轴可有效提高其出愈率。     

攸县油茶胚状体发生及其组织学观察

[目的]研究以攸县油茶(Camellia yuhsienensis Hu)成熟子叶为外植体的胚状体发生情况。[方法]以子叶为外植体,接种于MS+2.0mg/L2,4-D+1.0mg/LKT培养基上,诱导胚性愈伤组织。胚性愈伤组织块转接至以MS为基本培养基,添加不同浓度6-BA和NAA的激素组合的培养基上诱导产生胚状体。取不同发育阶段的组织块制作石蜡切片,进行组织学观察。[结果]成熟子叶块接种于诱导培养基MS+2.0mg/L2,4-D+1.0mg/LKT,15d左右开始出现胚性愈伤组织。胚性愈伤组织转接至培养基为MS+2.0mg/L6-BA+0.6mg/LNAA时胚状体诱导率最高,为87.78%;无激素培养基也能诱导胚性愈伤组织产生胚状体,但诱导率极低,仅为6.67%。组织学观察表明,胚性细胞由愈伤组织表面及其内部邻近的若干细胞分化而来,经过球形胚、心形胚、子叶形胚等不同发育阶段直至成熟胚状体。[结论]诱导胚性愈伤组织分化为胚状体的最佳培养基为MS+2.0mg/L6-BA+0.6mg/LNAA。     

黄瓜胚状体途径再生体系的建立

【目的】建立黄瓜高频胚状体再生体系，为黄瓜遗传转化体系的完善奠定基础。【方法】以黄瓜品种津研四号、长春密刺、Q8和14-1为材料，研究不同基因型材料愈伤组织的诱导情况；取14-1品种的子叶、子叶节、下胚轴和成熟胚为外植体，研究不同外植体类型的愈伤组织和胚状体产生情况；以14-1子叶节为外植体，研究不同激素及其质量浓度配比对黄瓜胚状体诱导的影响。【结果】4个不同基因型中，欧洲温室型黄瓜种质14-1可诱导出胚状体。在4种外植体类型中，14-1的子叶节可以高效诱导出愈伤组织和胚状体，其诱导率分别为100.0%和34.1%。激素及其质量浓度组合也会影响胚状体的诱导，在愈伤组织诱导阶段，以MS+1.5 mg/L 2,4-D为培养基对胚性愈伤组织的诱导效果最好，其对14-1子叶节的诱导率为100%；在分化培养阶段，MS+0.1 mg/L 2,4 D+0.5 mg/L KT+0.2 mg/L IAA有利于体细胞胚的发生，14-1的出胚率为62.5%。显微形态观察发现，黄瓜体细胞胚发育过程包括球形胚、心形胚、鱼雷胚和子叶期胚等时期，这些胚可以发育成正常小植株。【结论】14-1的子叶节经诱导培养基MS+1.5 mg/L 2,4-D和分化培养基MS+0.1 mg/L 2,4-D+0.5 mg/L KT+0.2 mg/L IAA培养后，可高效产生胚状体，并可萌发成正常植株。     

黑芝麻不同外植体离体培养研究

以黑芝麻无菌苗的下胚轴、幼根、子叶为外植体,以MS+2,4-D1.5mg/L+ZT0.5mg/L为愈伤组织诱导培养基;MS+6-BA2mg/L-IAA0.5mg/L为分化培养基;1/2MS+0.5mg/LNAA+IAA0.25mg/L为生根培养基进行培养.结果表明,幼根能产生少量愈伤组织,尚未分化出苗;子叶愈伤组织能分化出苗,但分化率低;下胚轴愈伤组织不仅可分化出苗(分化率为36%),而且可形成大量具有分化潜力的胚性愈伤组织,分化绿苗的频率可达67%.     

月季萨蔓莎不定芽的直接诱导和植株再生的研究

 以月季品种萨蔓莎为试材研究不同外植体、叶片位置、暗培养时间和激素组合对月季不定芽诱导和植株再生的影响。结果表明，月季萨蔓莎在含1.5 mg·L－1TDZ和0.05 mg·L－1NAA的MS培养基上黑暗培养8 d后转入含0.5 mg·L－1 BA和0.01 mg·L－1NAA的MS培养基光下培养，再生效果最好，小叶外植体和复叶柄的再生率分别为51.8%和10%。小叶的叶位对植株再生无显著影响，暗培养时间过长，外植体易形成愈伤组织而不利于不定芽的分化，植物生长调节剂中生长素浓度升高易导致愈伤组织形成而影响植株再生。本研究所建立的不定芽直接再生系统可用于该品种的转基因遗传改良研究。     

香竹愈伤组织诱导研究

以香竹种子为培养材料进行愈伤组织的诱导和增殖,分析了不同激素组合对愈伤组织诱导和增殖的影响,并比较了香竹的种子、无菌幼根、无菌幼茎和无菌幼叶4种不同外植体诱导愈伤组织生成的效果。结果表明:香竹种子诱导愈伤组织较合适的培养基为MS+3.0 mg.L-12,4-D+0.5 mg.L-16-BA;香竹增殖愈伤组织较适合的培养基为MS+1.0 mg.L-12,4-D+1.0 mg.L-16-BA+0.5 mg.L-1KT;无菌幼根的根冠部位比幼茎和幼叶更易产生愈伤组织,而种子作为外植体效果最佳。     

水牡丹的组织培养与快速繁殖

研究了水牡丹幼嫩花序离体培养中愈伤组织和芽诱导的适宜培养基和6-BA与2,4-D浓度,诱导培养基中6-BA和2,4-D的最佳组合。结果表明:水牡丹幼嫩花序离体培养中愈伤组织和芽诱导以MS为基本培养基,加入2．0 mg·L-16-BA,配合1．0 mg·L-1KT和0．2 mg·L-1NAA效果最好,继代增殖培养以MS为基本培养基,激素以0．5 mg·L-16-BA和1．0 mg·L-1KT, 0．1 mg·L-1NAA时效果较佳。水牡丹离体培养和快繁中无需另作生根培养。但移栽成活率只有60％左右。     

不同基因型孔雀草高效植株再生体系的建立

 将孔雀草品种T. patula'Little Hero Golden'的叶片、子叶和下胚轴接种于4种含有不同浓度IAA、NAA和BA的MS培养基上，比较不同外植体的再生植株的能力。结果表明，叶片再生植株能力较子叶和下胚轴强。随后，进一步将其叶片接种于9种添加不同浓度NAA和BA的MS培养基上，分化结果显示，在MS+NAA 1.5 mg·L-1+BA 1.0 mg·L-1的培养基上植株再生率最高，达75%。5份材料的叶片分别接种在该培养基上，再生率均达70%以上，其中T. patula21614的再生率达85%。所有再生植株均能成苗并表现出正常的形态特征。从而建立了适合于５种基因型孔雀草的离体高效再生体系。     

三个南方紫花苜蓿品种的耐盐性及其再生体系的建立

采用不同浓度的NaCl单盐系列溶液,以MS培养基为基本成分,附加不同浓度和组合的2,4-D、6-BA、KT、NAA和蔗糖,对我国南方广泛种植的‘Victoria’‘CW787’和‘Millennium’3个紫花苜蓿品种的耐盐性和再生体系进行研究.结果表明:3个紫花苜蓿品种随着NaCl溶液浓度的升高,发芽率均逐渐降低;下胚轴作为外植体的诱导效果较好;愈伤诱导以2.0 mg.L-12,4-D+0.2 mg.L-16-BA的配比最佳;0.5 mg.L-1KT+0.05 mg.L-1NAA的激素组合对体细胞胚的发育和幼苗的形成效果最好;适宜的生根培养基为1/2 MS+0.5 mg.L-1NAA+20g.L-1蔗糖+7.5 g.L-1琼脂;‘Millennium’的耐盐性和植株愈伤再生能力较好.     

丰花月季再生体系的建立

分别以丰花月季叶片、叶柄和茎段为外植体,进行了愈伤组织的诱导及植株再生的研究。结果表明,丰花月季诱导愈伤组织最佳激素浓度配比是1/2MS+2,4D 5 mg.L-1+BA 1 mg.L-1;所得到的愈伤组织在MS+6-BA1 mg.L-1+2,4D 2.5 mg.L-1+GA3 1 mg.L-1的培养基上继代保存两个月后于MS+NAA 0.02 mg.L-1+TDZ 1.8 mg.L-1+KT1 mg.L-1上分化出不定芽;不定芽在1/2MS+IBA 0.5 mg.L-1上的生根率为91.25%。     

冬小麦遗传再生体系及根癌农杆菌介导的转化研究

以临优145的幼胚为外植体诱导植株再生,并进行农杆菌转化研究.以冬小麦品种临优145的幼胚为外植体,消毒后用解剖刀挑取幼胚,盾片朝上接种于MS+2,4-D 2 mg/L+肌醇100 mg/L+MES 400 mg/L+CH 100 mg/L+40 g/L麦芽糖+8 g/L琼脂的培养基中诱导愈伤组织,每2周继代一次,将诱导出的淡黄色、颗粒状Ⅱ型胚性愈伤组织接种于分化培养基(MS+ZT 1 mg/L+IAA 1mg/L+MES 400 mg/L+CH 100 mg/L+麦芽糖40 g/L+gelrite 2.6 g/L,pH 5.8)上培养2-3周,然后转接到再生培养基(1/10 MS+NAA 0.5mg/L+KT0.5 mg/L+蔗糖30 g/L+gelrite 2.6 g/L,pH 5.8)中进行再生成苗.接种1229块幼胚,得到987块愈伤组织,Hyg抗性愈伤组织123块,抗性再生植株34株.在建立了再生体系的基础上,用根癌农杆菌介导法将GUS基因导入幼胚愈伤组织,抗性植株的PCR检测呈阳性.X-gluc染色表明,少部分愈伤组织出现肉眼可见的蓝色晕斑,说明GUS基因已经在小麦幼胚愈伤组织中表达.     

马铃薯花药培养再生植株的诱导与鉴定

文章采用讷16、克新13、克新17、克新18、花525和波C共6个马铃薯品种为试验材料,研究了不同的基因型、不同浓度的植物生长调节剂和蔗糖对马铃薯花药培养的影响,并对马铃薯花药再生植株进行了细胞学、形态学和农艺性状的观察与鉴定。结果表明,基因型中波C和讷16具有较强的再生能力;MS+NAA0.5 mg.L-1+2,4-D0.5mg·L-1+KT0.5 mg·L-1适合愈伤组织的形成;分化培养基为MS+NAA0.2 mg·L-1+6-BA2.0 mg.L-1+ZT1.0 mg·L-1;蔗糖浓度为6%时愈伤组织的诱导率最高;移栽的双单倍体植株在生长势、叶色、薯型等性状与对照相比存在差异。