金线莲组织培养增殖培养基的筛选

[目的]筛选最佳的金线莲增殖培养基。,[方法]以金线莲组培苗的茎段和顶芽为外植体进行增殖培养,在光照时间12h／d,光照强度1200lx,温度（25±2）℃,pH值为5．8培养条件下比较不同基本培养基、细胞分裂素、生长素、添加物等因素对金线莲生长状况的影响。[结果]通过对不同培养基的培养效果进行对比分析后筛选出适宜的培养基分别是：生芽增殖最佳配方为MS＋琼脂7g/L＋蔗糖25g／L＋NAA0．2mg／L＋6-BA2mg／L;壮苗培养基为MS＋琼脂7g/L＋蔗糖25g/L＋蛋白胨2g／L＋花宝1号3g/L＋香蕉100g／L＋活性炭1g／L和1／2MS＋琼脂7g／L＋蔗糖25g／L＋蛋白胨2g／L＋香蕉100g／L＋活性炭1g／L。[结论]添加马铃薯、香蕉、蛋白胨、花宝一号、活性炭等添加物能显著地促进金线莲外植体的分化与生长。     

不同添加物对白及组培壮苗培养的影响

为筛选适宜白及组培壮苗的培养基添加物,以无菌播种取得的白及组培苗进行转接培养成组培壮苗,采用单因素试验设计,在壮苗培养基中分别添加香蕉泥、马铃薯泥、胡萝卜泥、番茄泥等不同添加物,分析其对白及组培壮苗生长的影响,筛选出较为适宜添加物后,再进行添加物适宜浓度筛选试验。结果表明:不同添加物对白及组培苗生长均有一定影响,以香蕉泥对白及组培苗的生长影响最显著,该条件下白及平均球茎1.9mm、株高3cm、4个须根、干鲜重比86.75%、叶绿素含量1.219mg/g香蕉泥,浓度为30g/L和60g/L时组培苗生长快速,苗整齐且粗壮,叶色嫩绿。结论:白及组培壮苗适宜培养条件为MS+1.0mg/L NAA+30g/L白砂糖+7.0g/L琼脂+30g/L香蕉。     

不同激素及添加物对马铃薯组培苗生长的影响

以马铃薯宾杰(Bintje)品种为试验材料,研究在马铃薯基础培养基中添加不同外源激素及添加物对马铃薯组培苗生长的影响。结果表明,最适于组培苗增殖的激素配比为2.00 mg/L 6-BA+0.01 mg/L NAA,最适于其结薯和生根的激素配比为2.00 mg/L 6-BA+1.00 mg/L NAA。在培养基中添加马铃薯比添加香蕉更有利于马铃薯组培苗叶片的生长,最适添加浓度为100 g/L;在培养基中添加香蕉比添加马铃薯更可以促进马铃薯组培苗植株的横向生长,最适添加浓度为50 g/L。     

灰岩金线莲种子萌发与组培快繁技术研究

【目的】利用灰岩金线莲种子无菌播种进行组培苗生产,为其工厂化组培育苗提供参考。【方法】采用灰岩金线莲种子为外植体,以MS或1/2MS为基本培养基,探讨不同激素组合对外植体进行无菌播种、原球茎增殖、丛生芽分化及生根壮苗的影响。【结果】采用0.1%升汞处理灰岩金线莲蒴果20 min,灭菌率可达100%,且种子萌发不受影响。在种子萌发培养基中添加香蕉泥有利于种子萌发,最适合种子萌发的培养基为1/2MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+60 g/L香蕉泥;在原球茎增殖培养中,低浓度的6-BA和NAA有利于灰岩金线莲原球茎增殖,最适合原球茎增殖的培养基为1/2MS+0.2 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+60 g/L香蕉泥;丛生芽分化的最适培养为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+60 g/L香蕉泥+0.1%活性炭,原球茎分化丛生芽较多,生长势最佳;最适合灰岩金线莲生根壮苗的培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+2.0 mg/L NAA+60 g/L香蕉泥+0.1%活性炭。【结论】利用灰岩金线莲种子进行无菌播种,通过原球茎增殖和分化,可获得大量优质组培苗,是实现工厂化育苗的理想途径。     

花多多对金线莲组培苗和移栽成活率的影响

以金线莲品种"泰宁一号"为试验材料,用MS与B5作为基础培养基,添加不同种类不同用量的花多多肥料,筛选出有利于金线莲组培苗培育壮苗和提高移栽成活率的最优培养基。结果表明:不同组合培养基对金线莲根茎和叶生长影响存在着明显差异,MS+添加物更有利于根、茎生长;而B5+添加物更有利于叶片生长;同时,与空白MS和B5培养基相比,适当增添不同量花多多可以显著地改善金线莲组培苗的长势、增加内含物和提高移栽成活率。其中,尤以MS+2 g花多多1号的处理更利于培育壮苗、提高移栽成活率。     

花多多对金线莲组培苗和移栽成活率的影响

以金线莲品种"泰宁一号"为试验材料,用MS与B5作为基础培养基,添加不同种类不同用量的花多多肥料,筛选出有利于金线莲组培苗培育壮苗和提高移栽成活率的最优培养基。结果表明:不同组合培养基对金线莲根茎和叶生长影响存在着明显差异,MS+添加物更有利于根、茎生长;而B5+添加物更有利于叶片生长;同时,与空白MS和B5培养基相比,适当增添不同量花多多可以显著地改善金线莲组培苗的长势、增加内含物和提高移栽成活率。其中,尤以MS+2 g花多多1号的处理更利于培育壮苗、提高移栽成活率。     

不同培养基组分对金线莲组培苗生长及生根的影响

以金线莲组培苗为试验材料,以MS为基本培养基,开展了不同培养基成分、不同香蕉粉用量对金线莲组培苗生长及生根的影响研究。结果表明:增殖阶段,采用大量元素加倍,最有利于金线莲增殖苗的生长,增殖苗生长快,芽粗,而且比较整齐,叶片舒展、叶色深绿;在生根时,最佳的香蕉粉用量为100 g/L,高生长快,根较粗,叶色深。     

猫须草的组织培养及添加物研究

采用组织培养技术使用四种培养基和两种添加物对猫须草进行组培试验。MS培养基+6-BA 1.0mg/L+香蕉、MS培养基+6-BA 1.0mg/L+活性炭、N6培养基+6-BA 1.0mg/L+香蕉、N6培养基+6-BA 1.0mg/L+活性炭。试验表明:使用上述四种培养基对猫须草进行组织培养,都能够形成愈伤组织,并最终形成组培苗,但是MS培养基+6-BA 1.0mg/L+活性炭培养基表现最好,使用MS培养基+6-BA 1.0mg/L+活性炭培养基是试验的四种培养基中最适合猫须草组培的培养基质,在以后的组培苗繁育试验中可以根据该培养基进行激素方面的细微调节来达到最优目的。在培养基中加入香蕉和活性炭成分,目的是对比在猫须草培养基中加入这两种添加物后各个时期的表现。结果表明,加入活性炭的培养基要优于加香蕉的培养基。     

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为筛选适宜白及组培壮苗的培养基添加物,以无菌播种取得的白及组培苗进行转接培养成组培壮苗,采用单因素试验设计,在壮苗培养基中分别添加香蕉泥、马铃薯泥、胡萝卜泥、番茄泥等不同添加物,分析其对白及组培壮苗生长的影响,筛选出较为适宜添加物后,再进行添加物适宜浓度筛选试验.结果表明:不同添加物对白及组培苗生长均有一定影响,以香蕉泥对白及组培苗的生长影响最显著,该条件下白及平均球茎1.9 mm、株高3 cm、4个须根、干鲜重比86.75％、叶绿素含量1.219 mg/g香蕉泥,浓度为30 g/L和60 g/L时组培苗生长快速,苗整齐且粗壮,叶色嫩绿.结论:白及组培壮苗适宜培养条件为MS+1.0 mg/L NAA+30 g/L白砂糖+7.0 g/L琼脂+30 g/L香蕉.     

白芨工厂化育苗组培快繁技术体系的构建

白芨的野生资源濒临匮乏,其种子自然萌发比较困难,因此传统的白芨种植方法已不适于市场需求。以白芨种子为材料,探究白芨种子萌发、生根及组培苗移栽驯化的最佳方法。白芨种子萌发最佳培养基为MS+蔗糖30 g/L+琼脂8 g/L+马铃薯10 g/L,增殖培养基为MS+蔗糖30 g/L+琼脂9 g/L+KT 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L,最佳生根培养基为MS+NAA 0.2 mg/L+IAA 1.0 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂9 g/L+马铃薯25 g/L,马铃薯可促进白芨组培苗根的生长,组培苗驯化的最佳处理为预先将培养瓶开瓶进行适应性锻炼,2～3 d后把组培苗移至炼苗基质中,这样可提高白芨组培苗的成活率。白芨工厂化育苗体系的建立可有效地扩大白芨的种植规模,缩短育苗时间,从而更好地利用和保护白芨野生资源。     

不同培养基组分对带叶兜兰离体培养效果的影响

【目的】探讨适宜带叶兜兰(Paphiopedilumhirsutissimum)离体培养的培养基组分,为规模化生产带叶兜兰组培苗提供技术支持。【方法】以带叶兜兰组培苗为外植体,筛选适合其丛生芽诱导、增殖和壮苗生长的基本培养基、附加物种类和生长激素组合。【结果】初步筛选出较适宜带叶兜兰丛生芽诱导的培养基为1/2MS+3.0 mg/L BA+0.1 mg/L NAA+80.0 g/L香蕉汁+2.0 g/L活性炭,其诱导率较高,为36.1%,且丛生芽诱导出芽较多;丛生芽增殖培养基为1/2MS+0.1 mg/L TDZ+3.0 mg/L 2,4-D+80.0 g/L香蕉汁+2.0 g/L活性炭,其增殖系数为2.02,芽生长较快;壮苗生长最适宜培养基为1.0 g/L花宝1号+1.0 g/L花宝2号+MS培养基的有机、微量成分+1.0 mg/L NAA+2.0 g/L活性炭+80.0 g/L香蕉汁+1.5 g/L蛋白胨,其幼苗生长较好,生物量大,生根率达75.5%。【结论】在1/2MS+3.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+2.0 g/L活性炭培养基中添加香蕉汁较适宜带叶兜兰丛生芽诱导和增殖培养;在1/2MS+80.0 g/L香蕉汁培养基中添加0.1 mg/L TDZ+3.0 mg/L 2,4-D对带叶兜兰的增殖效果较佳;花宝改良培养基适宜带叶兜兰壮苗培养,结合添加NAA和活性炭培养效果更佳,但活性炭浓度不宜过高。     

铵态氮和硝态氮浓度对金线莲丛生芽中活性物质积累的影响

为高效培养金线莲丛生芽,并生产大量有效物质,本研究探明了培养基中硝态氮和铵态氮浓度比对悬浮培养金线莲丛生芽有效物质积累的影响。结果表明:在MS培养基中,NO_3~-和NH_4~+浓度为30/15m mol/L时,最有利于金线莲丛生芽生物量的积累,丛生芽的鲜重和干重分别达到17.52和1.91g;有效物质的积累也最高,多糖和金线莲苷生产量分别达到7.42和1.33g/L。同时初步探究了金线莲提取物对酪氨酸酶活性的抑制效果,结果表明:金线莲丛生芽甲醇、乙醇提取物对酪氨酸酶具有较好的抑制效果,分别为54%和59%。因此,通过金线莲悬浮培养生产有效物质时,可将MS培养基中的硝态氮的浓度调节为15m mol/L,而铵态氮调节为30m mol/L,并采用金线莲丛生芽乙醇提取物可更好的抑制黑色素。     

铁皮石斛不同外植体组培快繁技术比较

[目的]筛选适宜铁皮石斛繁殖的最佳方法。[方法]以铁皮石斛成熟蒴果和1年生植株茎段作为外植体,研究MS培养基中添加不同浓度激素对铁皮石斛种子和茎段诱导、增殖以及生根的影响,同时比较了传统玻璃兰花瓶与聚丙烯透明薄膜袋在铁皮石斛工厂化生产上的成本投入。[结果]适合铁皮石斛诱导的培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+120 g/L香蕉+35 g/L蔗糖+7.0 g/L卡拉胶;适合增殖的培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.05 mg/L NAA+120 g/L香蕉+35 g/L蔗糖+7.0 g/L卡拉胶;适合生根的培养基为1/2MS+0.80 mg/L NAA+120 g/L香蕉+20 g/L蔗糖+7.0 g/L卡拉胶。对于工厂化生产而言,选用蒴果作为外植体具有利于无菌体系建立、增殖倍数多和苗长势整齐一致等优点,聚丙烯透明薄膜袋可以代替传统的玻璃兰花瓶。[结论]该研究可为减少铁皮石斛组培苗的生产成本、缩短生长周期、获得大量优质组培苗提供一定的理论依据。     

野生鼓槌石斛的有性扩繁方法

[目的]采集野生鼓槌石斛的成熟蒴果,利用组培无菌快繁技术获得大量野生鼓槌石斛种苗。[方法]将野生鼓槌石斛成熟蒴果消毒灭菌,并将其种子播种于MS培养基上获得大量原球茎,然后分别转接到不同的培养基上,最后在不同阶段的培养基上筛选出适合野生鼓槌石斛分化和生长的培养基。[结果]将野生鼓槌种子在MS培养基上培养,种子萌发率达95%以上;最利于原球茎分化的培养基为3/4MS+NAA 0.8 mg/L+6-BA 0.2 mg/L+土豆泥4%+蔗糖30 g/L+琼脂5 g/L,成苗率高、出苗整齐;最适幼苗生长培养基为3/4MS+NAA 0.8 mg/L+6-BA 0.2 mg/L+香蕉汁7%+土豆泥2%+蔗糖30 g/L+琼脂5 g/L,小苗粗壮、叶片浓绿;最适生根壮苗培养基为3/4MS+NAA 0.8 mg/L+6-BA 0.2 mg/L+香蕉汁7%+土豆泥2%+AC 0.5 g/L+蔗糖30 g/L+琼脂5 g/L,瓶苗生根多而粗壮,叶片浓绿生长整齐。[结论]该研究为野生鼓槌石斛资源的收集与保存提供了参考。     

白芨瓶内假鳞茎诱导研究

[目的]研究白芨组培苗瓶内假鳞茎形成的影响因素,提高白芨组培苗炼苗成活率,为白芨组培苗在生产上的应用提供技术支持.[方法]以优质白芨组培苗为材料,探讨基本培养基、蔗糖用量、激素和添加物对白芨瓶内假鳞茎诱导的影响.[结果]在MS培养基中,假鳞茎诱导率和平均粒径达到最大值,最适宜白芨假鳞茎诱导.30.0g/L蔗糖较适宜诱导白芨假鳞茎,其诱导率较高,且有利于假鳞茎生长膨大.在6-BA、KT、NAA、IBA 4种激素不同组合中,以6-BA＋KT＋NAA组合的假鳞茎诱导率和平均粒径均显著高于其他组合,其最佳激素配比是6-BA 1.0 mg/L＋KT 0.5mg/L＋NAA 0.2 mg/L.在最佳激素配比培养基中添加40.0 g/L香蕉泥、40.0 g/L上豆泥和1.0 g/L花宝四号,其假鳞茎诱导率和平均粒径均最高,且植株长势较好.[结论]白芨组培苗瓶内假鳞茎诱导的最佳培养基配方是MS＋6-BA 1.0mg/L＋KT 0.5 mg/L＋NAA 0.2 mg/L＋香蕉40.0 g/L＋土豆40.0 g/L＋花宝四号1.0 g/L＋活性炭1.0 g/L＋蔗糖30.0 g/L.     

金线莲增殖和生根培养条件的优化

为了优化金线莲(Anoectochilus formosanus Hayata)增殖和生根培养条件,将金线莲无菌苗的顶芽和带节茎段接种到不同种类和浓度的激素以及添加物组合的培养基中进行增殖和生根培养,以筛选出最适合金线莲增殖和生根的培养基.结果表明,金线莲最佳增殖培养基为MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.6 mg/L+玉米素(Zeatin,ZT)0.8 mg/L+香蕉泥100 g/L,顶芽和腋芽的增值倍数分别为3.82和3.13;生根培养基以MS+NAA0.5 mg/L+IBA 0.5 mg/L最好,生根率达80%.     

铁皮石斛原球茎悬浮培养及其多糖积累的研究

将利用铁皮石斛种子诱导的原球茎在液体条件下培养,研究植物激素和有机添加物对原球茎增殖以及多糖积累的影响。结果表明,在N6液体培养基中附加1.0mg/L NAA+1.0mg/LKT+5%香蕉汁提取物+5%土豆汁提取物,最有利于铁皮石斛原球茎增殖和多糖积累,培养30d时,原球茎鲜质量达到122.9g/L,多糖含量在25d时达到24.2%。结果提示,利用液体培养规模化生产铁皮石斛原球茎是可行的,是铁皮石斛大田传统栽培方式的重要替代途径。     

闽东野生金线莲无菌体系建立与优化研究

[目的]研究闽东野生金线莲无菌体系建立的最佳培养基配方。[方法]以闽东野生金线莲茎段为试材,通过正交试验得到无菌的诱导芽体,通过萌发的芽体增殖建立金线莲的无菌培养体系,筛选出闽东野生金线莲快繁的最佳培养基配方。[结果]闽东野生金线莲茎段诱导芽体萌发最适培养基配方为MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+KT 1.5 mg/L,与其他配方之间具有极显著差异;芽继代增殖培养基配方为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+KT 1.0 mg/L,且与其他处理间差异极显著。[结论]诱导芽时应适当提高一定范围内细胞分裂素类浓度;芽增殖时应适当降低细胞分裂素浓度,细胞分裂素与生长素比值为10倍时有利于芽增殖生长。     

不同有机附加物对铁皮石斛原球茎增殖和组培苗生根壮苗的影响

有机附加物在铁皮石斛组培过程中起着重要作用,扩大天然有机物种类的研究范围将有可能挖掘到更多促进生长的附加物。本研究在铁皮石斛原球茎增殖和组培苗生根壮苗过程中,将多种天然有机物进行组合添加,探索具促进作用的有机附加物新种类和新组合。在原球茎增殖培养基中添加100 g/L土豆汁与100 g/L其他有机物(香蕉汁、玉米汁、西瓜汁、荔枝汁及小麦面粉),以土豆汁与玉米汁对增殖的促进效果最佳(平均增殖5.66倍,鲜重提高4.12倍),而分化程度较低(分化率67.9%,排第3),适合作为原球茎继代培养前期的添加成分。添加土豆汁与小麦面粉,原球茎分化率(平均95.1%)和鲜重增加(平均5.35倍)最高,分化苗健壮度最高,适合作为原球茎继代培养后期的添加成分。在组培苗生根壮苗期间,添加100 g/L香蕉汁与100 g/L其他有机物(土豆汁、玉米汁、西瓜汁、荔枝汁及小麦面粉),以香蕉汁与小麦面粉为最佳有机附加物,平均生根率96.6%,平均根长4.82 cm,与其他组合差异极显著;组培苗健壮度、整齐度也最高。玉米汁和小麦面粉都是取材于种子,富含多种营养物质,其在石斛组培过程的促进作用尚未有人报道过。本研究结果将对提高铁皮石斛瓶苗质量,缩短培养周期具有一定现实意义。     

铁皮石斛茎段丛生芽的增殖培养研究

[目的]研究铁皮石斛茎段丛生芽的最适增殖培养方式。[方法]以铁皮石斛茎段为外植体,研究不同基本培养基、植物生长调节剂种类和浓度、有机添加物及培养时间对铁皮石斛丛生芽增殖的影响。[结果]MS培养基优于1/2MS、B5和N6;香蕉对丛生芽的分化有明显的促进作用;培养60 d时丛生芽的增殖倍数最高,生长势好。[结论]丛生芽的最佳增殖培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5mg/L+香蕉100 g/L+活性炭0.5 g/L,培养时间以60 d为宜。