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普通小麦和黑麦草原生质体电融合的适宜条件 总被引:2,自引:0,他引:2
研究了普通小麦(Triticum aestivum L.)、多花黑麦草(Lolium muiriflorum Lam.)和多年生黑麦草(Lolium perenne L.)原生质体电融合的适宜条件。结果表明:在同一电场条件下,不同物种原生质体的电融合反应有差异,在500kHz、100V/cm交流脉冲和1.5kV/cm、40μs直流脉冲下,原生质体排列成串,小麦、多花黑麦草和多年生黑麦草原生质体融合频率分别为80%,60%,30%;电场参数中的场强和直流脉冲幅宽对原生质体融合频率影响较大;融合液中CaCl_2浓度以0.5~1mmol/L为宜;渗透压较低的融合液有利于原生质体融合;在适宜的电脉冲处理后,原生质体存活率与对照相似,经融合处理的原生质体培养一个月后,其植板率有所提高。 相似文献
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双亚5号亚麻与罗布麻原生质体解离及体细胞杂交 总被引:1,自引:0,他引:1
[目的]探索双亚5号亚麻与罗布麻原生质体制备、电融合和培养的适宜条件,为进一步深入进行亚麻与罗布麻体细胞杂交育种研究奠定基础.[方法]以已建立的双亚5号亚麻和罗布麻胚性细胞悬浮系为材料,制备原生质体并进行电融合,培养.[结果]制备亚麻和罗布麻原生质体的最佳渗透剂分别是5.6;蔗糖和0.7 mol/L甘露醇;游离亚麻和罗布麻原生质体的最适酶组合都是0.5; Cellulase Onozuka R-10+1.0; Cellulase Onozuka RS+0.2; Pectolyase Y-23;最佳酶解时间分别是4和3 h;亚麻细胞最佳继代时间是转瓶后的第3 d,在此条件下原生质体存活率均为92.0;,产量分别达到1.24×106和22.4×106个/mL;2种原生质体电融合的最佳参数依次为:AC 8 v/cm,持续25 s-DC 1 500 v/cm,脉冲宽度为60 μs,脉冲次数1次-交流电时间为9 s,重复次数2次.在此条件下融合率达到20.5;.[结论]亚麻与罗布麻原生质体在一定的条件下可实现体细胞杂交. 相似文献
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以荔枝转基因原生质体再生的胚性愈伤组织(TPEC)细胞系和龙眼‘红核子’品种的松散型胚性愈伤组织(EC)为材料,采用PA-4000电融合仪进行原生质体电融合参数的研究.结果表明:荔枝TPEC与龙眼EC原生质体融合的适宜电融合参数为原生质体密度5×105个·mL-1,交流电场频率1.0 MHz、交变电场场强50 V·cm-1,作用时间60 s,直流脉冲强度600 V·cm-1、脉冲持续时间10 ms,脉冲2-3次.在此条件下,融合率可达30%以上. 相似文献
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马铃薯原生质体融合技术的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
采用聚乙二醇(PEG)、电融合和PEG-电融合三种诱导融合的方法,对马铃薯双单倍体品系82-36和二倍体野生种Solanummicrodontum无菌苗叶肉原生质体的融合技术进行了研究,建立了三种融合方法的适宜条件。结果表明,使用镀金平行多电极的电融合法融合效果最好,在交流场强150V/cm、正弦波频率1.0MHZ和直流脉冲场强1.2KV/cm、宽幅637.5μs下,施加1次脉冲,原生质体的融合频率可达30%。在对融合细胞的培养中发现:经过异质融合处理后的原生质体形成的愈伤组织具有较强的分化能力,其中有少数愈伤组织再生出了绿色植株。 相似文献
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猪2—细胞胚胎电融合 总被引:1,自引:1,他引:0
以湖北白猪为试验动物,研究了不同处理对猪2-细胞胚胎电融合的影响,结果表明;融合液的离子强度,电场强度,脉冲时程和交流电处理等均影响电融合的效率,以非电解质的甘露醇溶液为融合液,融合前交流脉冲处理,直流电场强度为1500-2000V/cm和脉冲时程为40-60μs时可获得较高的融合效率。 相似文献
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二倍体马铃薯体细胞电融合的研究 总被引:3,自引:0,他引:3
对3种双单倍体马铃薯叶肉原生质体进行自体和异体融合及对二倍体野生种S.phureja实生苗子叶下胚轴原生质体自体融合的实验结果表明:不同基因型马铃薯叶肉原生质体在交变电场中的转动电压、成串电压及细胞拉长电压无明显差异;在1 800 v/ cm的直流脉冲电压、100μs脉冲幅度下,2~3细胞的融合频率最高(24.16 %);实生苗子叶下胚轴原生质体在2 000 v/ cm、100μs的电场作用下融合频率明显高于叶肉组织,其融合频率为43.50 %;实验还显示出,马铃薯叶肉原生质体自体融合频率明显高于异体融合频率。 相似文献
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晚稻测土配方施肥“3414”肥效试验 总被引:3,自引:0,他引:3
为了探索广西田东县晚稻生产的最佳经济施肥量和最高产量施肥量2,009年在该县祥周镇百渡村那中屯开展晚稻测土配方施肥"3414"肥效试验。结果表明,N是影响水稻分蘖数量及产量的主要养分因子;供试田块土壤中有效养分丰缺程度表现为低N、高P、高K;田东县晚稻生产每公顷最佳经济施肥量为:N 174.4 kg、P2O5 70.4 kg、K2O 114.9kg,最高产量施肥量为:N 177.4 kg、P2O5 70.9 kg、K2O 119.6 kg。 相似文献
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