桦褐孔菌碱溶多糖提取工艺条件优化研究

[目的]优化桦褐孔菌碱溶多糖的提取工艺。[方法]以桦褐孔菌为原料,通过稀碱法提取碱溶多糖,以多糖得率为指标,采用单因素分析和正交试验测定碱溶多糖的最佳提取工艺条件。[结果]试验得出,桦褐孔菌碱溶多糖的最佳提取工艺为碱液浓度0.5mol/L、料液比1∶30 g/ml、提取温度80℃,在此条件下,桦褐孔菌多糖得率可达3.83%。[结论]研究可为桦褐孔菌的开发利用提供理论依据。     

超声-微波辅助提取桦褐孔菌多糖的工艺研究

[目的]探讨超声-微波辅助技术提取桦褐孔菌多糖的最佳工艺条件。[方法]以水作为提取溶剂,用超声-微波辅助提取桦褐孔菌多糖,通过响应面分析法考察微波功率、微波处理时间和料水比对桦褐孔菌多糖得率和纯度的影响,优化超声-微波提取桦褐孔菌多糖的工艺参数,并和传统水浴浸提法进行比较。[结果]超声-微波辅助技术提取桦褐孔菌多糖的最佳工艺条件为:提取时间18.45～24.50 min,料液比1∶20,微波功率88.3～96.7 W。与传统的水浴浸提法相比,超声-微波提取法可大大缩短提取时间,得率由2.12%增加到3.25%,纯度由64.03%增加到73.16%。[结论]与传统的水浴浸提法相比,超声-微波提取法不仅缩短了提取时间,而且提高了桦褐孔菌多糖的得率和纯度。     

桦褐孔菌多糖的提取工艺优化 及对人肝癌细胞HepG2脂肪堆积的影响

通过L_9(3~4)正交试验,通过MTT法选取桦褐孔菌多糖对HepG2细胞的安全浓度,检测不同浓度的桦褐孔菌多糖对胞内TG蛋白的影响,及桦褐孔菌多糖减轻细胞内脂质堆积的作用。结果表明,桦褐孔菌多糖最佳条件为1 g∶15 mL的料液比,在温度30℃下提取30 min,超声功率为480 W。桦褐孔菌多糖可明显减轻HepG2细胞内脂质堆积,显著降低细胞中TG的含量,其中600 mg/L桦褐孔菌多糖对TG的清除率达24.57%,脂滴数量明显减少。说明桦褐孔菌多糖具有良好的体外降脂活性,对脂肪肝有较好的预防效果。     

不同提取方法对桦褐孔菌多糖抗氧化活性的影响

[目的]研究不同提取方法对桦褐孔菌多糖抗氧化活性的影响。[方法]采用水煮醇沉法和碱液醇沉法提取粗多糖;采用三氯乙酸法纯化水溶和碱溶粗多糖;采用羟基自由基清除试验和超氧阴离子自由基清除试验进行抗氧化活性对比研究。[结果]水溶粗多糖、碱溶粗多糖、水溶纯多糖、碱溶纯多糖的多糖得率分别为14.0%、27.7%、7.0%、6.2%。对羟基自由基的清除,水溶粗多糖在0.9 mg/ml时有最大清除率,为54.3%,碱溶纯多糖在0.06 mg/ml时有最大清除率,为10.9%;对超氧阴离子自由基的清除,水溶粗多糖在0.1mg/ml时有最大清除率,为24.2%,水溶纯多糖在0.07 mg/ml时有最大清除率,为27.2%。[结论]水溶多糖比碱溶多糖抗氧化能力强,桦褐孔菌可成为一种新的高效天然抗氧化药用真菌。     

桦褐孔菌发酵条件的优化及体外降糖作用的研究

[目的]研究桦褐孔菌的潜在应用价值,并分析其菌丝体多糖的降糖作用.[方法]以生物量和粗多糖含量为指标,通过单因素试验与正交试验设计方法对其发酵条件进行优化.将桦褐孔菌菌丝多糖对糖尿病模型小鼠进行灌胃,测定小鼠血糖变化.[结果]促进该菌株发酵生长的最佳碳源、氮源分别为葡萄糖和牛肉膏;最佳培养基组成为葡萄糖30 g/L,蛋白胨4 g/L,牛肉膏8 g/L.摇床培养条件为pH 7.0,装液量90 mL/250 mL,接种量15％,发酵时间12 d.与模型组相比,桦褐孔菌菌丝多糖能显著降低糖尿病小鼠血糖.[结论]该研究可为工业化生产桦褐孔菌多糖及实际应用提供参考.     

超声波辅助提取桦褐孔菌子实体中三萜类化合物的研究

[目的]优化桦褐孔菌中三萜类物质的超声波辅助提取工艺。[方法]以异丙醇为提取溶剂,采用超声波辅助提取法提取桦褐孔菌中三萜类物质,以不同处理条件、超声功率、超声次数和超声处理时间为试验因素,以三萜的提取率为评价指标进行单因素试验,筛选最佳提取工艺。[结果]超声辅助技术提取桦褐孔菌子实体中三萜类化合物的最佳工艺条件为超声功率400 W、超声次数30次、超声时间15 min;在此条件下,三萜得率为1.06%。[结论]超声波辅助提取法是一种有效的桦褐孔菌三萜类物质提取方法。     

桦褐孔菌粗多糖对急性弓形虫感染雄性小鼠睾丸生精细胞凋亡的影响

[目的]探讨桦褐孔菌粗多糖对弓形虫感染小鼠睾丸生精细胞凋亡的影响。[方法]用3种剂量桦褐孔菌粗多糖治疗弓形虫感染所致的睾丸生精障碍小鼠,使用流式细胞仪检测生精细胞凋亡率,并设立空白对照组、阴性对照组和阳性对照组进行对比。[结果]与阴性对照组比较,桦褐孔菌粗多糖高剂量组的睾丸生精细胞凋亡率极显著降低（P〈0.01）中剂量组及阳性对照组的睾丸生精细胞凋亡率显著降低（P〈0.05）。[结论]桦褐孔菌粗多糖具有修复睾丸病理损伤并降低睾丸生精细胞凋亡率的作用。     

桦褐孔菌多糖的优化提取及对小鼠高糖高脂诱导的非酒精性脂肪肝的影响

通过正交试验优化桦褐孔菌(Phaeoporus obliquus J. Schroet)多糖的提取,并作用于高糖高脂诱导的非酒精性脂肪肝小鼠,来探讨桦褐孔菌多糖对小鼠高糖高脂诱导的非酒精性脂肪肝病的作用效果。通过正交试验优化桦褐孔菌多糖的提取,将多糖作用于高糖高脂诱导的非酒精性脂肪肝小鼠,用ELISA方法检测小鼠血清中的相关指标。结果表明,与正常组比较,模型组小鼠肝脏明显增大,肝指数明显升高(P0.01),与模型组比较,优化提取的不同浓度桦褐孔菌多糖提取物使小鼠肝脏指数明显下降,对肝脏有不同程度的改善,空腹血糖值下降明显(P0.01),高浓度给药组(120 mg/kg)使小鼠血清中TC、LDL-C、HDL-C及ALT水平下降较明显(P0.01),但TG水平变化不大。病理切片结果显示,桦褐孔菌多糖提取物给药组小鼠肝细胞破坏程度有明显改善,高浓度给药组小鼠肝细胞排列更紧密,中央静脉受累情况有明显改善,说明桦褐孔菌多糖提取物对高糖高脂诱导的小鼠非酒精性脂肪肝有一定的治疗效果,其机制可能是与降低血脂有关。     

新疆野生桦褐孔菌生物学特性及化学成分分析

【目的】分析新疆桦褐孔菌生物学特性及化学成分。【方法】由采自新疆阿勒泰的桦褐孔菌菌核组织分离获得纯培养菌株HS819,利用Biolog FF微孔板表征该菌株的碳源代谢特征；利用GC-MS分析菌核、菌丝体及发酵液的石油醚提取物化学成分。【结果】菌株HS819与桦褐孔菌菌株PAT29027(OP019327)的相似性为99.73%,结合菌核、菌落、菌丝形态及系统进化分析，确定该菌株为桦褐孔菌；该菌株的碳源代谢特征表明其对D-核糖、甘氨酰-L-谷氨酸、水杨苷、β-甲基-D-半乳糖苷、α-酮戊二酸、D-纤维二糖、L-谷氨酸等7种碳源的代谢能力最强；GC-MS在菌核、菌丝体及发酵液中分别检测出43种、39种和38种成分，烃类、酸类和酯类的相对含量明显高于醛类与醇类，其中酸类是菌核及菌丝体的主要成分，分别占总成分的66.07%和60.03%,在发酵液中，烃类为主要成分，占54.01%。【结论】桦褐孔菌可利用的碳源中纤维素与半纤维素占主要成分；该菌株在自然环境下和液态发酵过程中检测的化学成分种类和含量上差异明显，两者基因的差异性表达可能与生物胁迫、生长环境等因素有关。     

桦褐孔菌内切葡聚糖酶基因的克隆与表达分析

利用RACE技术首次从药用真菌桦褐孔菌中克隆得到了与菌核形态发育相关的内切葡聚糖编码(EG)基因。结果表明:桦褐孔菌内切葡聚糖酶基因(IO-EG)的cDNA全长为1 315 bp,其中编码区占1 233 bp,具有13个内含子和14个外显子,共编码410个氨基酸。系统进化树分析表明,桦褐孔菌EG与嗜蓝孢孔菌EG在分子进化关系上最相近。实时荧光定量PCR分析表明,随着菌核的生长发育,IO-EG基因的表达量不断升高,初步证明内切葡聚糖酶基因的表达量与桦褐孔菌菌核的产量相关。     

微波-超声波提取与常规法提取红芪多糖的比较研究

[目的]比较常规法和微波-超声波提取红芪多糖的差异。[方法]以红芪药材为试材,利用常规法和微波-超声波法提取红芪多糖,通过苯酚-硫酸比色法测定多糖含量,比较两种提取方法的差异。[结果]两种提取方法得到的多糖含量差别较大,常规法得多糖含量为4.19%,微波-超声波法得多糖含量为8.98%。微波-超声波法提取红芪多糖有较大的优势:提取时间大大缩短,可避免红芪多糖的分解;所用仪器简单,操作方便。[结论]微波-超声波法提取中药成分的效率高于常规提取法。     

正交优化石榴花多糖提取工艺

采用水提醇沉法提取石榴花中多糖。为优化石榴花多糖提取条件,选取单因素试验中影响差异显著的提取温度、固液比、提取时间和乙醇沉淀最终浓度4个因素,并运用正交试验法优化提取工艺。结果显示,石榴花多糖最佳水提醇沉工艺条件为:提取温度95℃、提取时间3 h、固液比1∶20(g∶m L)、乙醇浓度80%醇沉。其中提取温度、固液比、提取时间及醇沉终浓度对多糖得率影响依次减小。     

金顶侧耳多糖体内免疫活性的初步研究

[目的]探究金顶侧耳多糖提取方法及对动物机体免疫功能的影响。[方法]通过液体培养金顶侧耳,以乙醇沉淀法从发酵液中提取金顶侧耳多糖,并采用蒽酮比色法和3,5-二硝基水杨酸法相结合测定多糖的得率。通过称量胸腺、脾脏的重量,计算胸腺指数和脾脏指数来探讨不同剂量的金顶侧耳多糖对小鼠免疫功能的影响。[结果]该法提取的金顶侧耳多糖得率为14.35%,随金顶侧耳多糖的剂量的增加,小鼠脾脏重量增加,注射多糖的小鼠免疫力明显高于环磷酰胺（CY）对照组,低于生理盐水对照组。[结论]金顶侧耳多糖能对CY有减毒作用,能够增强小鼠免疫功能。     

桦褐孔菌研究综述

概述了国内外桦褐孔菌的生物学情况,介绍了桦褐孔菌的人工栽培及其在抗癌、预防艾滋病、治疗糖尿病、抗衰老、增强免疫力等方面的研究现状,对其今后的研究发展方向进行了展望。     

刺五加多糖提取纯化工艺的优化

[目的]优化刺五加多糖的提取纯化工艺。[方法]以药用植物刺五加为材料,采用单因素试验和正交试验法对多糖提取、纯化的工艺进行优化。[结果]结果表明,热水浸提的最佳温度为90℃,浸提时间为150min,水料比为18：1,提取次数2次;醇沉温度为-20℃,时间36h,乙醇与浸提液比例为4：1,pH值为7时多糖产率最高。采用树脂动态吸附法筛选不同树脂去除多糖色素和蛋白的效果,结果显示,D941树脂最好。经树脂处理的多糖采用DEAE-Sepharose阴离子交换柱和Sepharose-G200层析柱进一步纯化,得到了纯度较高的As-1和As-2 2个多糖组分。[结论]该研究结果为进一步确定刺五加多糖的生化特性、生理功能奠定基础。