蛹虫草菌丝体液体发酵培养条件的优化研究

以蛹虫草菌丝体发酵液中的菌丝体干重和粗多糖产量为指标,筛选出液体培养基的最适碳源为蔗糖,最适氮源为黄豆粉。通过四因素三水平的正交试验,优化出液体发酵培养基的最佳配方为马铃薯20%,蔗糖5%,黄豆粉2%,磷酸二氢钾0.1%,硫酸镁0.1%,维生素B10.01%。并确定了摇瓶最优发酵工艺条件为装液量100 mL·250mL-1三角瓶,菌龄为72 h,接种量为15%,起始pH 6.0,温度24℃,摇床转速150 r·min-1,最适发酵周期为120 h。     

不同基础培养基对漏斗形马勃菌丝体生长的影响

[目的]研究漏斗形马勃在7种不同基础培养基上的生长情况。[方法]采用7种基础培养基进行试验,通过液体和固体培养,以菌丝体生物量及菌落直径为指标,确定漏斗形马勃的最佳基础培养基。[结果]最适合漏斗形马勃生长的基础培养基配方为玉米渣4%、蛋白胨0.3%、蔗糖2%、KH2PO41%、Mg SO40.05%。在28℃和摇床转速150 r/min条件下,液体培养5 d后的菌丝体干重为16.56 g/L。在28℃固体培养7 d,菌丝体鲜重和干重分别为16.47和2.27 g/L,菌落直径为4.49 cm。[结论]该研究为漏斗形马勃培养条件的进一步优化奠定了基础。     

蛹虫草发酵菌丝体培养条件研究

[目的]对蛹虫草菌丝生长条件进行优化,为发酵工业中液体深层发酵生产蛹虫草的药用有效成分提供参考。[方法]通过单因素试验,改变碳源、氮源、接种菌龄、培养基起始pH、培养周期、培养温度、摇床速度、接种量和装液量来确定蛹虫草菌丝生长最佳条件。[结果]最佳发酵条件为：碳源为蔗糖,浓度为2％,氮源为蛋白胨,浓度为1％,接种菌龄为36h,培养基起始pH值为6．5,培养周期为6d,培养温度为24℃,摇床速度为200r／min,在250ml锥形瓶中的装液量为150ml;在此条件下,菌丝体干重最大。[结论]该方法获得了蛹虫草C-7发酵菌丝体的最佳培养条件,为蛹虫草的进一步开发利用提供依据。     

以芦苇为碳源进行灵芝液体菌种发酵条件的优化

以芦苇秸秆为培养基碳源，以灵芝菌丝体产量为指标，采用单因素试验和正交试验确定了最佳培养基配方及培养条件。结果表明：培养基配方为芦苇秸秆0.5%、酵母浸粉1.5%、KH2PO4 0.15%、MgSO4 0.075%、p H为6，培养条件为转速150 r/min、温度25℃时，灵芝菌丝体产量最高，菌丝干重为12.20 g/L，较优化前提高了1.51倍。     

长根奥德蘑液体培养基筛选试验

对长根奥德蘑进行了4种不同液体培养基筛选试验。结果表明:长根奥德蘑在培养基M3(玉米麦麸粉培养基)中的菌丝体生长势好、菌丝球大小适中(平均直径3 5mm)、菌丝球数量较多(30 3个/mL)、菌丝体干重最高(1 72g/100mL)。玉米麦麸粉培养基(M3)是长根奥德蘑菌丝体培养的最佳液体培养基,可作为长根奥德蘑菌丝体繁殖的首选液体培养基。     

蛹虫草母种培养基配方优化研究

采用6种不同配方的固体培养基对蛹虫草菌株的菌丝体进行培养,以菌种初萌发时间、菌丝长速、菌丝长势、菌丝长满斜面所需时间为指标,筛选出蛹虫草母种最佳培养基。结果表明:母种培养基的最佳配方为:20%马铃薯提取液中加入1%葡萄糖、1%蛋白胨、2%琼脂、0.5%KH2PO4、0.3%MgSO4、VB1(10 mg·L-1),pH值5.8。在该培养基上,菌种的初萌发时间最短,为2 d;菌丝长速最快,为6.3 mm·d-1;长势最强;菌丝满管时间最短,为10 d。     

蛹虫草固体培养产子实体条件的优化及其虫草素含量测定

本研究采用大米米饭固体培养基培养出蛹虫草子实体,在菌株、培养基、接种方式三个因素中筛选出高产蛹虫草子实体的最优组合,并与工业液体发酵蛹虫草菌丝体作比较,用高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)测定了子实体和采后培养基中的虫草素含量,结果表明,子实体中的虫草素含量(10.22 mg/g)是采后培养基中虫草素含量(2.04 mg/g)的5倍,是工业液体发酵蛹虫草菌丝体中虫草素含量(7.06 mg/g)的1.45倍。     

金顶侧耳液体培养基的优化筛选

采用正交设计的方法,以金顶侧耳菌丝体的生物量及其多糖含量为测量指标,对金顶侧耳液体发酵培养基进行了优化研究。结果表明：当发酵培养基的配方为：马铃薯20％,蛋白胨0．3％,葡萄糖2．5％,KH_2PO_4和MgSO_4·7H_2O各为0．15％时,其菌丝体的生物量最高：而当培养基的配方为：马铃薯20％,蛋白胨0．1％,葡萄糖3．0％,H_2PO_4和MgSO_4·7H_2O各为0．15％时,其菌丝体胞内多糖含量最高。结果表明生物量最高的培养基中其菌丝体的胞内多糖的产量并非最高。     

蛹虫草原生质体的制备与再生

为了建立原生质体介导的蛹虫草遗传转化系统,考察了各种细胞壁裂解酶和渗透压稳定剂等对蛹虫草原生质体形成和再生的影响.蛹虫革菌丝体形成和释放原生质体最适裂解酶和酶解时间分别为:1%Cellulase,30℃作用2 h;最适渗透压稳定剂是0.8mol·L-1MgSO4;最适合原生质体再生的培养基为含0.6mol·L-1蔗糖的PDA培养基.原生质体液涂布双层再生培养基的方法再生率最高,为4.38%.     

优化培养基对桑黄菌丝体生长的影响

以菌丝体干物重为基础,对野生桑黄菌丝体液体发酵培养基营养元素进行筛选,通过正交实验优化菌丝体生长发育的常规培养基配方为麦芽糖3%,酵母粉2%,MgSO4 0.15%,KH2PO40.10%,柠檬酸三铵0.10%,复合维生素B 0.01%,其菌丝体干物重达20.23 g·L^-1。在此基础上研究发现,常规培养基中添加0.3%桑枝水提物可促进菌丝体生物量的增加,菌丝体干物重高达24.78 g·L^-1。