酶膜耦联反应降解酪蛋白制备抗菌肽

利用木瓜蛋白酶降解分离酪蛋白,采用间歇式酶解反应、间歇式膜分离反应、酶膜耦联反应3种不同的模式制备抗菌肽,以金黄色葡萄球菌为指示菌,用比浊法测定抑菌率。结果表明,间歇式酶解反应所得的抑菌肽抑菌效果最差;间歇式膜分离反应组酶解时间7 min的透过液抑菌效果最好,抑菌率达23.60%;酶膜耦联反应分离后分子量<4 kDa的组分抑菌效果最佳,透过液抑菌率最高达24.10%。将酶解反应与膜分离耦合来水解酪蛋白,发现水解物的不同分子量成分与抑菌效果有关,证明此方法可用来工业化生产抗菌肽。     

酶膜耦联反应降解酪蛋白制备抗菌肽

利用木瓜蛋白酶降解分离酪蛋白,采用间歇式酶解反应、间歇式膜分离反应、酶膜耦联反应3种不同的模式制备抗菌肽,以金黄色葡萄球菌为指示菌,用比浊法测定抑菌率。结果表明,间歇式酶解反应所得的抑菌肽抑菌效果最差;间歇式膜分离反应组酶解时间7 min的透过液抑菌效果最好,抑菌率达23.60%;酶膜耦联反应分离后分子量4 k Da的组分抑菌效果最佳,透过液抑菌率最高达24.10%。将酶解反应与膜分离耦合来水解酪蛋白,发现水解物的不同分子量成分与抑菌效果有关,证明此方法可用来工业化生产抗菌肽。     

蚕蛹蛋白抗氧化肽的制备及其纯化

以DPPH自由基清除率为指标,采用正交试验,优化Alcalase酶解蚕蛹蛋白制备抗氧化肽的工艺条件;采用超滤、DEAE-52纤维素柱层析,以及Sephadex G-50柱层析分离纯化蚕蛹蛋白抗氧化肽。试验结果表明,酶解液制备蚕蛹蛋白抗氧化肽的最优工艺条件为:酶解温度30℃,pH值7.5,时间20min,底物质量分数3%,加酶量3.5%。Mr≤5ku时,组分有很强的体外抗氧化活性,从Mr≤5ku组分中获得了5个抗氧化肽组分,它们的体外抗氧化活性大小依次为:组分Ⅱ>组分Ⅲ>组分Ⅰ>组分Ⅴ>组分Ⅳ。     

海马抗氧化活性肽制备工艺研究

旨在建立海马寡肽的制备工艺,探究寡肽的抗氧化活性。采用酶解法将海马原料制备成海马蛋白酶解肽,将游离氨基酸含量、DPPH·清除率及还原力作为考核指标,在获得制备海马酶解寡肽的最佳蛋白酶的基础上,选取酶添加量、pH、酶解温度及时间为因素,通过单因素和正交试验设计制备海马蛋白酶解肽,对其酶解工艺进行优化。最终获得海马抗氧化活性肽的最佳工艺条件为:风味蛋白酶添加量6000 U/g,酶解温度45℃,酶解时间9 h;在此工艺条件下,酶解产物的游离氨基酸含量为4.198 mg/m L,DPPH·清除率为92.758%,还原力为1.091。试验获得制备海马抗氧化活性肽最优酶解工艺,为进一步研发成保健食品提供坚实的基础。     

小麦蛋白酶解物的分离及其体外抗菌作用的研究

采用碱性蛋白酶水解小麦面筋蛋白制备抗菌肽,再依次采用超滤处理、Sephadex G-25凝胶层析和反相高效液相色谱,从小麦面筋蛋白酶解产物中分离抗菌肽,并研究其体外抑菌作用。结果表明,经过超滤处理后,相对分子量在5 kDa以下的酶解物抑菌活性较好,随后其经过SephadexG-25凝胶层析得到4种组分,抑菌试验表明,其中相对分子量为2 036 Da的峰Ⅱ组分的抑菌效果最好,对大肠杆菌的抑菌率为20.6%,对金黄色葡萄球菌的抑菌率为20.1%。峰Ⅱ组分经过反相高效液相色谱鉴定,得到4个多肽组分。     

鲅鱼加工副产物水解液中ACE抑制肽分离纯化研究

以鲅鱼加工副产物为原料,经脱脂后进行碱性蛋白酶酶解,分离纯化具有ACE抑制活性的小肽。水解液经超滤、离子交换层析、凝胶过滤层析和反相高效液相色谱等逐级纯化,得到较纯的ACE抑制肽。结果表明,分子量小于3 kDa的超滤组分IV具有最高的ACE抑制活性,达45.6%;超滤高活性组分进一步经DEAE-Sepharodse FF阴离子交换层析分离,得到3个组分,其中组分A2活性最高,ACE的抑制率达50.3%;A2组分继而经Sephacryl S-100HR凝胶过滤层析分离,得到2个组分,其中B2组分ACE抑制率达83.4%;最后,B2组分经反相高效液相色谱进行分离,得到活性更高的C2组分,为下一步氨基酸序列测定提供了基础。     

酪蛋白结构及其酶解特性研究进展

酪蛋白是牛奶中的主要蛋白成分,因其酶解产物中可分离出多种生物活性肽而广受关注。综述了酪蛋白的结构及其酶解特性的研究进展。酪蛋白由α_(s1)-酪蛋白、α_(s2)-酪蛋白、β-酪蛋白与κ-酪蛋白4种组分组成,在溶液中以胶团形式存在,其稳定性除与κ-酪蛋白有关外,还受到外界环境的影响,然而对于酪蛋白胶团内部结构的推断仍存在争议。此外,全酪蛋白及其组分的酶解特性也得到了较深的研究,包括推断酶解反应历程、酶解产物分子量分布变化、蛋白结构功能特性的变化及生物活性肽段序列的确定等。     

黄粉虫不同生长阶段诱导抗菌肽的效果分析

摘 要：目的 分析黄粉虫不同生长阶段所提取的抗菌肽抗菌活性及抗菌肽组分差异。方法 通过针刺使黄粉虫各虫态感染大肠杆菌产生抗菌肽,经过研磨、离心等步骤提取抗菌肽,用药敏试验检测这些抗菌肽的抗菌效果,并用聚丙烯酰胺凝胶电泳试验分离其蛋白及多肽条带。结果 药敏试验的结果表明处于蛹期和成虫期的黄粉虫所产生抗菌肽的抑菌效果不如处于幼虫期所产生抗菌肽的抑菌效果明显,但差异不显著;电泳图谱显示黄粉虫幼虫有8条带,成虫有5条,蛹有5条,说明黄粉虫蛹期和成虫的抗菌肽种类较幼虫期的少,但是它们都还有更多的小肽段未被分离开。     

鲶鱼骨蛋白酶解产物与其他防腐剂抑菌效果的比较

试验用胃蛋白酶酶解鲶鱼头、鱼骨,酶解得到抑菌活性较高的鲶鱼骨酶解液,冷冻干燥后配成不同浓度,与常用食品防腐剂进行抑菌活性的比较。确定了鲶鱼骨蛋白酶解液对大肠杆菌、藤黄微球菌,以及枯草杆菌的最低抑菌浓度。结果表明,质量分数为1%的酶解液对大肠杆菌的抑制作用,是质量分数为0.025%Nisin的5～6倍,是0.1%SDA的2～3倍,是1%大蒜汁的1～2倍;对藤黄微球菌的抑制作用与0.025%的Nisin作用相当,是0.1%SDA的4倍,是1%大蒜汁的1～2倍;对枯草杆菌的抑制作用与0.025%的Nisin作用相当,是0.1%SDA的2倍。可见,酶解液粗品具有很强的抑菌活性。鲶鱼骨酶解液对大肠杆菌、藤黄微球菌以及枯草杆菌的最低抑菌质量分数分别为0.04%,0.04%和0.08%。     

河北省又取得一批农药植保类科研成果

<正>(接上期)4.高活性昆虫抗菌肽的筛选及其对植物致病菌抑菌活性的研究单位名称:河北农业大学评价单位名称:河北省科技成果转化服务中心评价日期:2011.05.04明确了4个目7种昆虫在刺激诱导下抗菌肽产生规律及其对植物病原菌的抑菌活性和抑菌谱,揭示了抗菌肽产生的     

Determination of Lantadene A Contents in the Crude Extracts from Stems,Leaves and Fruits of Lantana camara L. and Their Antibacterial Activities

[Objective] To find new plant source having antibacterial activities to Staphylococcus aureus. [Methods]Lantadene A( LA) was isolated and identified from Lantana camara L.; the structure of LA was identified by1 H NMR spectrum. With LA as the standard substance,the LA contents in the stems,leaves and fruits of L. camara were detected by UV spectrophotometry; and antibacterial test was carried out by disc agar diffusion. [Results]LA contents in the dry powders of L. camara stems,leaves and fruits were 1. 49,3. 43 and 2. 74 mg / g,respectively. Results of antibacterial test showed that the crude extracts from L. camara stems,leaves and fruits had certain bacteriostatic activitives to S. aureus. And bacteriostatic activities had positive correlation with the LA content. [Conclusions] Lantadene A isolated from L. camara had certain inhibitory effects on S. aureus,which was worthy of further research.     

苦瓜抑菌作用的研究进展

随着食品添加剂的发展,苦瓜因自身独特的天然抑菌作用备受人们青睐。介绍了苦瓜的有效成分,阐述了苦瓜活性成分与抑菌作用机制的关系,为苦瓜功能食品开发和技术应用提供了理论支撑,为在食品工业中提升产品抑菌防腐性能提供了新的方法途径。     

精油制剂中油水混溶剂对精油抑菌效果的影响

为探讨基于油水混溶剂的复方精油对空气中沉降菌的抑制作用,本研究测定了复方精油A的抑菌效果、精油型抑菌制剂的抑菌效果和油水混溶剂对精油抑菌效果的影响。通过平板沉降法测定复方精油A的抑菌效果,并选取PEG-40氢化蓖麻油(PEG-40)、吐温80、二甲基亚砜(DMSO)、司盘85、双脱乙醇5种油水混溶剂,在复方精油A和油水混溶剂比例分别介于1:1~1:6时配制精油抑菌制剂,并验证该均匀水溶液的抑菌效果,同时采用棋盘稀释法测定油水混溶剂对复方精油A抑菌效果的影响。结果表明,复方精油A的抑菌率达到80%以上,精油抑菌制剂在平板暴露6 h的抑菌率最佳,为48.92%。油水混溶剂中PEG-40的增溶效果最佳,复方精油浓度为1%时,精油、PEG-40、双脱乙醇的最佳比例为1:2:2;浓度为3%时,精油、PEG-40、双脱乙醇的最佳比例为1:3:3。PEG-40对空气中沉降菌无抑制效果,双脱乙醇和复方精油对空气中沉降菌的抑菌效果表现为相加作用。研究对植物精油应用于产业化生产时,油水混溶剂的种类和比例对精油类产品实际效果的影响有一定的参考价值。     

荷斯坦牛红细胞抗菌肽的纯化及活性鉴定

以荷斯坦奶牛血液为原料,制备红细胞粗提物,通过离子交换层析和反相高效液相色谱法纯化抗菌肽,用琼脂糖弥散法测定其抗菌活性。结果表明：通过离子交换层析获得的阳离子峰具有抗菌活性,通过反相高效液相色谱对阳离子峰活性分布区域进行分离,获得了8个峰,8个峰对大肠杆菌均具有活性,F1、F3、F4、F5、F6和F8对金黄色葡萄球菌具有活性,F2、F4、F5、F6和F8对白色念珠菌具有活性。因此,试验成功地从牛红细胞中分离纯化到了抗菌肽,其中,F6的抗菌谱较广和抗菌活性较好。     

食用蒲公英种子萌发对PEG-6000模拟干旱胁迫的响应

采用浓度分别为0％、5％、10％、15％、20％和25％的PEG-6000溶液模拟干旱条件,测定蒲公英种子在不同干旱胁迫条件下的日相对萌发率、发芽势、发芽指数、活力指数及上下胚轴长度等指标,研究了蒲公英种子萌发及幼苗生长对PEG-6000模拟干旱胁迫的响应,探讨了经20％、25％ PEG-6000浸种预处理后种子的萌发恢复能力.结果表明:5％PEG-6000胁迫下提前了萌发高峰、提高了发芽率,促进了种子的萌发;10％PEG-6000胁迫显著降低了种子发芽势,但未对其发芽率产生显著影响;高度水分胁迫(15％ PEG-6000浓度)显著抑制了蒲公英种子的萌发,并延长其萌发时间,但是,其种子萌发率仍是对照的73.35％,说明蒲公英具有很强的抗旱性.当重度胁迫时(20％、25％ PEG-6000浓度)蒲公英种子未见萌发,解除胁迫后遇充足水分,蒲公英种子即立刻快速整齐的萌发,表现为蒲公英种子对较强干旱环境的适应性,也是野生植物的生存策略之一.     

水稻株系与亲本间灌浆期POD酶谱及遗传效应分析

通过复性电泳技术,对水稻子代与亲本在灌浆期的POD酶谱动态变化进行分析,结果表明：（1）灌浆期C的POD酶谱与亲本间表现出明显差异,C的POD带型偏A,总酶活变化规律与B相似。（2）灌浆中期C中检出1条52kD新酶带;灌浆后期仅C和A中检出53kD酶带,酶活C较A弱。（3）灌浆中期仅在A中检到的70~63kD弱酶活带区和灌浆中、后期仅B中检到的63~58kD弱酶活带区及42kD酶带,在C灌浆各时期均未检出。亲本间基因互作导致C的POD酶谱表达差异,这是育种希望得到的,对于新酶带和差异酶谱与C的新性状关系的进一步研究,将为水稻杂交育种提供重要的理论依据。     

河西走廊荒漠绿洲过渡带沙丘不同生境沙拐枣种群扩张特征研究

本研究以河西走廊荒漠绿洲边缘关键天然固沙植物沙拐枣为研究对象,对流动沙丘、固定沙丘不同生境的沙拐枣种群扩张特征进行调查,旨在更全面地认识其种群扩张特征和对干旱高温环境的适应对策。结果表明：（1）沙丘不同生境,沙拐枣种群扩张方式存在显著差异：在流动沙丘,丘间低地和过渡带以有性繁殖为主,无性繁殖为辅;迎风坡和背风坡以无性繁殖为主;而随着流动沙丘固定,种群以有性繁殖为主,无性繁殖数量和所占比重显著下降,并导致种群数量下降。（2）不同生境中沙拐枣种群密度与年龄均呈显著负相关,种群以幼龄苗为主,种群最大年龄出现在丘间低地,为36龄。（3）流动沙丘不同生境根状茎主要为2年生,多年生根状茎长度较短;而固定沙丘不同生境根状茎年龄结构较为均衡。     

拮抗酵母BS-316抑菌成分分离与应用的初步研究

以拮抗酵母菌BS-316为试材,研究酵母菌及其培养液对灰霉菌的抑菌性,用柱层析的方法对酵母培养液进一步分离纯化,并测定了粗提纯组分对灰霉菌的抑菌性。结果表明,酵母菌及其培养液对灰霉菌均有一定的抑制作用,酵母菌悬液对灰霉菌的抑菌性高于酵母培养液;酵母培养液经粗提取后,随着接种时间的延长,粗提纯组分对灰霉菌的抑制作用高于培养原液;活体试验中,粗提纯组分对番茄果实灰霉病的扩展有明显的抑制作用,其病斑直径显著小于酵母培养液处理(P0.05)。表明拮抗酵母菌BS-316除了细胞抑菌外,还可能产生了某些抑菌物质存在于培养液中,并且经纯化后可能用于果实灰霉病的防治保鲜。     

60Co-γ射线辐照处理对4种药用植物种子萌发的影响

用不同剂量60Co-γ射线对益母草、蒲公英、车前、紫苏种子进行辐照处理,测定这4种药用植物种子的发芽率、发芽势、发芽指数等指标,了解60Co-γ射线辐照对其种子萌发的影响,为这4种药用植物的新品种选育提供参考。结果表明,60Co-γ射线对4种药用植物种子具有较强的诱发突变能力,辐照剂量与种子发芽率、发芽势、发芽指数、活力指数、苗高、苗鲜重均呈负相关,其中与苗高的相关性达极显著水平。益母草和蒲公英种子的半致死剂量大于400 Gy,车前种子的半致死剂量在300~400 Gy之间,紫苏种子的半致死剂量在50~100 Gy之间。