鸡爪黄连组培繁殖技术研究初探

利用组织培养技术对黄连进行快繁育苗研究,首先必须解决外植体容易污染、褐化、诱导分化难易等关键问题。系列的比较筛选试验结果表明:用0.1%的高锰酸钾先浸泡花梗、嫩叶、叶柄和种子后再用0.1%的升汞进行常规消毒,能明显抑制外植体产生污染的机率;种子、花梗较嫩叶、叶柄接种成活率高,达90%以上,但种子接种后休眠期较长,花梗、嫩叶接种15d后开始产生分化,嫩叶较花梗取材容易。培养基中添加活性炭、PVP等抗褐化物质后,能显著抑制外植体接种后继续褐化的机率;培养基pH值对外植体接种成活影响较大,培养基pH值5.0时,接种效果最好;花梗、嫩叶初诱导最佳培养基:1/2MS+琼脂10 g/L+蔗糖25 g/L+活性炭1 g/L+PVP 1 g/L+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1～0.2 mg/L。     

东北地区珍贵阔叶树种裂叶榆离体快繁初步研究

为建立裂叶榆组织培养体系,选取裂叶榆木质化和水培萌发幼嫩茎段进行离体培养,探讨不同消毒时间、激素种类和浓度对裂叶榆离体快繁的影响。表明:木质化茎段在0.1%升汞消毒14 min时,污染率稍低,褐化率低,成活率高;幼嫩茎段在0.1%升汞消毒3 min时幼嫩茎段污染率最低,褐化率较低;在对休眠芽和幼嫩茎段进行离体培养时筛选出MS+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA为最佳培养基激素组合,且在BA:NAA浓度比为20:1时,培养15 d后,裂叶榆的腋芽萌发率最高(80%),而且萌发芽的腋芽绿色,长势良好。     

茶树腋芽初代培养过程中外植体褐化的控制措施研究

有效控制外植体褐变是茶树组织培养的关键技术。本文研究了外植体取材季节、切取方法、培养温度和不同抗氧化剂对外植体褐变率的影响。结果表明:春季材料的外植体污染率、褐变率比秋季的低,腋芽萌发率比秋季的高;外植体留部分叶柄、接种前用2.0 g?L-1 PVP溶液浸泡30 min、接种后在8℃避光培养16h可以有效降低外植体褐化率。春季材料、合适的外植体类型、培养温度及抗氧化剂的良好组合,有助于提高茶树腋芽初代培养的成功率。     

大花朱顶红鳞茎不定芽的诱导

以大花朱顶红‘Red Lion’鳞茎作外植体,研究其不定芽诱导的最佳培养条件。结果表明,最佳外植体消毒方法为0.1 %升汞浸泡8 min,污染率仅为5 %,外植体正常生长;最适不定芽诱导培养基为MS + 6-BA 2.0 mg/L + NAA 1.0 mg/L + 3 %蔗糖+Vc 0.2 g/L,可直接诱导成完整植株;Vc对外植体褐变的抑制效果好于AC;将培养60 d左右的试管苗移栽于草炭、珍珠岩和蛭石体积比为1：1：1的混合栽培基质中,成活率达100%。     

菝葜丛生芽诱导初探

以不同季节的菝葜带芽茎段、茎尖及带芽根状茎为材料,以MS为基本培养基,对外植体进行不同消毒方法和防褐变处理,附加不同种类和浓度的植物生长调节物质诱导丛生芽,探寻菝葜丛生芽的最佳诱导方法。结果表明,菝葜带芽茎段是最佳外植体、取材的适宜季节是春季,最佳消毒方式是75%酒精浸泡30 s,用0.1%升汞处理7 min。菝葜丛生芽诱导的最佳培养基是:MS+6-BA(2 mg·L~(-1))+NAA(0.1 mg·L~(-1))。用PVP(2 g·L~(-1))浸泡20 min能有效控制外植体的褐化。     

不同消毒处理对高寨贡茶快速繁殖的影响

目的:本实验通过不同的消毒处理,探讨消毒处理对高寨贡荼组培过程中的污染率和外植体成活率的影响.方法:通过多茵灵和青霉素处理后,再经75%酒精和0.1%升汞处理外植体,统计培养基的污染率和外植体的成活率.结果:顶芽作为外植体进行茶树的快繁研究,经多菌灵和青霉素处理后,用75%酒精处理25 s,0.1%升汞处理8 min,组培效果为最佳,存活率可达70%,颜色为嫩绿色.幼茎作为外植体经多菌灵和青霉素处理后,用75%酒精处理40 s,0.1%升汞处理10min,效果最佳,存活率可达65%,颜色为嫩绿色.     

宽筋藤组织培养的初步研究

为了研究宽筋藤快繁技术,以宽筋藤健壮无病虫害的嫩茎和嫩叶作为试验材料,研究其表面消毒方法和在添加不同浓度激素的培养基上培养,对宽筋藤进行组织培养研究。结果表明：茎段表面采用75%酒精消毒30 s,用0.1%升汞浸泡5 min,无菌水漂洗2次后,再用0.1%升汞浸泡5 min,无菌水漂洗4次的效果最佳,存活率为66.7%;而叶片直接用升汞处理12 min的消毒效果较好,存活率为53.3%;适宜侧芽诱导和增殖的培养基为MS+6-BA 0.05 mg/L+GA3 0.04 mg/L+NAA 0.02 mg/L,30天的增殖系数为3;诱导愈伤组织以培养基MS+2,4-D 1.5 mg/L+BA 0.5 mg/L的效果较好,对嫩茎的诱导率可达83.3%,对嫩叶的诱导率可达76.7%,但所诱导的愈伤组织分化能力低,均不能分化不定芽;适宜生根的培养基为MS+NAA 0.1 mg/L,生根率可达到100%,且移栽成活率96%。     

迷人杜鹃组培快繁技术的研究

以迷人杜鹃的种子为试验材料,筛选迷人杜鹃组织培养的最佳培养基配方及培养程序,建立迷人杜鹃快繁技术体系。结果表明:最佳消毒方法为消0.1%升汞3 min+无菌水清洗1 min+0.1%升汞3 min;最适丛芽增殖培养基为Anderson+1.2 mol/L 2-ip+0.1 mol/L NAA;壮苗培养采用培养基为Anderson+0.5 mol/L 2-ip+0.1 mol/L NAA;最佳生根培养基为Anderson+0.2 mol/L 2-ip+1.0 mol/L NAA+0.5 g/L AC;炼苗移栽基质以腐质土和蛭石混合效果最好。     

降低魔芋球茎组培褐变的技术研究

以魔芋球茎为外植体,研究组织培养过程中有效降低外植体褐变的方法。采用MS+6-BA 1 mg/L+NAA 1 mg/L为基本培养基,用正交实验方法研究不同琼脂浓度、吸附剂及光、暗2种不同培养条件下,对魔芋组织培养过程中褐变的影响。在MS+6-BA 1 mg/L+NAA 1 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂 6 g/L+AC 0.5 g/L+PVP 0.05 g/L及暗培养条件下,魔芋外植体的褐变率减低为38.3%,愈伤组织诱导率提高到78.3%。在培养基中加入一定量的活性炭(AC)和聚乙烯吡咯烷酮(PVP),并进行暗培养,可在一定程度上控制魔芋外植体的褐变,促进愈伤组织形成。     

毛叶木姜子组织培养中无菌苗建立的初探

为进一步开展毛叶木姜子组培再生研究,获得毛叶木姜子的无菌苗从外植体取材时间、不同消毒剂浓度与时间以及外植体抗褐变等多方面对无菌苗获得的前期条件进行分析。结果表明:于5月上旬采集当年生半木质化枝条剪取茎段,0.2%HgCl 2处理12 min为毛叶木姜子无菌体系建立时的最佳消毒方式,污染率为15.56%,但外植体的褐变率较高;进一步采用正交试验设计L 9(34)进行抗褐变试验,采用多指标综合平衡法进行分析,结果表明:外植体类型、冷藏时间、PVP为外植体抗褐变及腋芽萌动的主导因素,而AC对毛叶木姜子外植体抗褐变效果不明显,予以剔除,得出毛叶木姜子外植体抗褐变的最优水平组合为选用半木质化枝条作为外植体,接种前5℃低温冷藏5 h,培养基为MS+PVP 1.00 g·L^-1。     

重瓣长寿花叶片组织培养及植株再生的研究

摘要:以重瓣长寿花幼嫩叶片为试材,筛选各个培养阶段的培养基配方,研究重瓣长寿花的快速繁殖技术。结果表明: 0.1％升汞灭菌4min,外植体污染率为12.5％,死亡率2.5%,效果最佳;愈伤组织诱导培养基以MS+6-BA1.0 mg／L+NAA0.1～0.3 mg／L最佳,不定芽分化和增殖的最适培养基为MS+6-BA0.5 mg／L+NAA0.1 mg／L,生根培养基用1/2MS+NAA0.5mg／L最好,试管苗移栽成活率达99％。     

青岛百合组织培养研究

以青岛百合叶片为外植体,研究了消毒时间、培养基、生长调节物质对青岛百合叶片不定芽发生、增殖和生根的影响。结果表明：用0.1%氯化汞对青岛百合叶片消毒5 min时效果最好,污染率为31%,萌动率为79%,诱导率为65.2%。青岛百合最佳叶片不定芽分化培养基为MS+6-BA2.0 mg/L+NAA 0.2mg/L;最佳不定芽增殖培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.2mg/L;最佳生根的培养基为1/2MS+NAA 0.2 mg/L,形成了较为完善的组织培养再生体系。     

药用植物红落藜组织培养研究

本试验以红落藜为试验材料,进行茎段组织培养及植株再生的研究。试验结果表明75%酒精5s+0.1%升汞8min既可进行彻底消毒,又保证具有较高的成活率;通过初代培养筛选出NAA为最适的生长激素,最适培养基为MS + 6-BA 1.5 mg?L-1 + NAA 0.2mg?L-1+琼脂0.8%+蔗糖2%+活性炭0.2%;通过继代培养筛选出最适培养基为MS + 6-BA 2.0 mg?L-1 + NAA 0.2mg?L-1+琼脂0.8%+蔗糖2%+活性炭0.2%;最适的生根培养基为1/2MS + IBA1.0 mg?L-1 + NAA 0.1mg?L-1+琼脂0.8% + 蔗糖2% + 活性炭0.2%,生根率为80%。当试管苗叶片数3～5片,苗高2cm～3cm,生根数3～4条时,移栽至蛭石和腐殖土(1∶2)混合的基质中,保湿遮阴,成活率可达90％以上。     

丰产接骨木茎段离体快繁的研究

为了加快接骨木良种的快繁,以接骨木优良株系的扦插苗为实验材料进行接骨木组织培养研究,建立其再生体系。结果表明：外植体的最佳消毒方法为75%酒精消毒30s加 0.1%Hgcl2消毒15min,成活率80%;诱导腋芽的最优培养基为MS NAA 0.05mg/L,诱导率98.7%,增殖培养基为MS 6-BA1mg/L TDZ0.01mg/L,增殖系数5.0;生根培养基1/2MS IBA0. 1mg/L,生根率100%;移栽时最佳基质,珍珠岩：草炭土=3:5,成活率95%。     

野漆树轻型基质育苗造林试验研究

为了系统研究野漆树轻型基质播种苗造林效果,在相同立地条件下,运用随机区组设计试验方法,对野漆树大田裸根苗和轻型基质苗进行造林对比试验,探讨2个类型苗木山地造林时,其造林保存率、林木生长量的差异。结果表明：野漆树2个类型苗木山地造林时在保存率、树高、地茎等方面都存在较大差异,且差异显著。轻型基质苗造林保存率平均达94.83%,大田裸根苗造林保存率达90.56%。轻型基质新造幼林1年生树高平均值为208.79 cm,地茎平均值为30.2820 mm。大田裸根苗新造幼林1年生树高平均值为124.39 cm,地茎平均值为21.677 mm。试验表明,用野漆树轻型基质苗造林,造林后的早期生长和保存率都优于常规的大田裸根苗。可以大力推广野漆树轻型基质育苗技术,特别是在石漠化、荒漠化土壤上,应积极提倡和推广应用野漆树轻型基质苗造林,具有重大的现实意义。     

高山羊齿孢子的组织培养

[目的]探讨不同灭菌方式对组织培养中高山羊齿孢子成活率的影响以及不同培养基对孢子萌发率的影响.[方法]利用NaClO、NaClO+酒精、升汞、升汞+酒精、升汞+NaClO、酒精这6种不同灭菌方式研究其对高山羊齿孢子成活率的影响;考虑4因素基本培养基、蔗糖、NAA、6-BA进行L16 (44)正交设计,研究其对高山羊齿孢子萌发率的影响.[结果]6种灭菌处理中,NaClO+酒精的灭菌效果最好;酒精的灭菌效果最差;在正交实验中,以1/2 MS+3％蔗糖+1 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA为高山羊齿孢子萌发的最佳培养基,萌发率达63.69％,以不加任何激素的MS培养基中萌发率最低.[结论]2种不同的灭菌剂混合使用比单独使用灭菌剂的效果好;基本培养基对高山羊齿孢子萌发率的影响最大,影响顺序为:基本培养基＞6-BA＞蔗糖＞NAA.     

吐烟花的组织培养

以吐烟花茎段为试验材料,研究其表面消毒方法和不同激素配比的培养基对吐烟花愈伤组织诱导、丛生芽扩繁以及幼苗生根的影响。研究结果表明,外植体表面消毒以70%酒精消毒15 s,无菌水漂洗1次,0.1%升汞浸泡6 min,无菌水漂洗1次后,再用0.1%升汞浸泡6 min,无菌水漂洗4次的效果最佳;同时筛选出吐烟花植株再生的较好激素浓度配比的培养基：MS+3.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA适合愈伤组织诱导,MS+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA对丛生芽诱导与扩繁效果较好,MS+0.3 mg/L NAA有利于生根,移栽成活率达91%,且植株生长良好。     

利用横向薄层培养技术建立番木瓜植株再生体系

建立一个高效稳定的植株再生系统是番木瓜生物技术育种和品种改良的关键。本研究通过横向薄层培养技术,以‘一尺瓜’番木瓜品种为材料,通过对田间成年结果树截干后萌生的侧芽进行消毒处理,经过初代培养和增殖培养后获得大量丛生分化芽。以健壮分化芽为材料横向切取1~2.5 mm厚度的薄层6~10片,经不定芽诱导和增殖培养后进行生根培养,成功获得植株再生。研究结果表明,采用300 mg/L利福平溶液浸泡并在摇床上140 r/min振荡处理1 h、75%酒精处理30 s、0.1%的氯化汞溶液(W/V)处理7~8 min的组合递进式消毒处理方法,可使侧芽接种培养成功率达到85%以上。分化芽薄层在MS培养基+30 mg/L蔗糖+0.1 mg/L6-BA+0.2 mg/L NAA+0.3 mg/L KT+0.1 mg/L IBA的条件下诱导培养20 d,单个分化芽切取的薄层平均可获得7.04个不定芽,其中第3号薄片出芽能力最强,平均出芽数可达到3.4个,最高5.0个。采用将叶尖代替分化芽茎基部插入培养基的茎段悬空植叶促根方法进行分化芽的促根培养,生根培养基组成为1/2MS培养基+3%蔗糖(W/V)+2 mg/L IBA,20~25 d后平均出根率可达到87.5%,根系无结构疏松和愈伤化现象,假植成活率可高达95%以上,有效改善了常规生根技术存在的根系质量差和假植成活率低的问题。本研究结果可提高番木瓜组培快繁效率,并为番木瓜诱变育种和分子育种提供技术支撑。     

马蹄金(Dichondra repens Forst.)组织培养和快速繁殖

为了探究马蹄金组织培养及快繁技术,本研究以马蹄金为材料,使用75%的酒精和10%NaClO对不同外植体(胚根,下胚轴,子叶)进行消毒处理,在不同激素浓度配比的MS培养基中进行丛生芽诱导、愈伤组织诱导及分化,成功建立了马蹄金的组培快繁体系。结果表明:利用马蹄金下胚轴为外植体直接诱导不定芽效果较好,其最适程序为:流水冲洗30 min+75%酒精30 s+10%NaClO 9 min,污染率为5%,成活率为75%;下胚轴不定芽诱导的最适培养基为MS+1 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA,诱导率为93.55%,出芽指数为8.86;胚根愈伤组织诱导的最适培养基为MS+1 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA,诱导率为100%,下胚轴愈伤组织诱导的最适培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+1 mg/L NAA,诱导率为95.24%,子叶愈伤组织诱导的最适培养基为MS+0.3 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA,诱导率为100%;愈伤组织不定芽分化的最适培养基为1/2MS+1.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA,芽诱导率为20%,平均芽数为12.83;组培苗诱导生根的最适培养基为不加激素的1/2MS培养基;生根苗以瓶盖全开的炼苗方式移栽到以河沙为基质的育苗盒中成活率为100%,且添加蒸馏水与自来水对植株生长并无明显影响。本研究成功建立了马蹄金组织培养与快繁体系,为马蹄金种质资源改良及优质种苗生产提供了技术参考。