红酵母发酵产类胡萝卜素的研究

研究了红酵母菌株AS2.2241液态发酵产类胡萝卜素的最佳培养基配方和工艺条件,分析了碳源、氮源、无机盐的质量浓度,以及反应温度、初始pH值、菌种种龄、发酵时间、转速等因素对类胡萝卜素产量的影响,确定了小规模发酵生产的最适培养基和发酵条件。红酵母AS2.2241菌株在5L发酵罐中产类胡萝卜素的最佳发酵条件为:葡萄糖40g/L,酵母粉10g/L,蛋白胨10g/L,MgSO41g/L,K2HPO40.5g/L,发酵温度28℃,pH值6.0,接种量10%,接种龄48h,培养时间145h,发酵液体积2L,转速280r/min,空气流速量3.00L/min,罐压0.01MPa。在此条件下,获得生物量的质量浓度达35.12g/L,类胡萝卜素的质量浓度达301.78μg/g。     

海洋解淀粉芽孢杆菌GM-1培养基及摇瓶发酵条件优化

GM-1菌株为分离自海洋对油菜菌核病菌(Sclerotinia sclerotiorum)有强烈抑制作用的解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。以菌体密度和无菌滤液对油菜菌核病菌的抑制作用为检测指标,采用单因素试验筛选GM-1菌株生长及产抗菌物质培养的最佳碳源、氮源和无机盐,通过正交试验设计对该菌株生长和产抗菌物质的发酵培养基配方和摇瓶发酵条件进行优化。研究结果表明,GM-1菌株生长及产抗菌物质最佳培养基配方为:蔗糖10g/L,牛肉膏16g/L,酵母膏3g/L,FeSO40.4g/L。最佳发酵条件为:28℃,pH7.0,200r/min摇床培养60h,种子液浓度108cfu/mL接种量为10%,装液量为70mL/250mL。     

低温脂肪酶产生菌的筛选及发酵条件研究

通过使用RodamineB平板筛选法,从新疆具有典型低温环境地区的近200份土样中筛选分离到11株产低温脂肪酶的菌株。其中1株酶活较高的菌株L22,根据形态观察初步断定为假丝酵母,该酶的最适反应温度为30℃,属低温脂肪酶。摇瓶发酵确定该菌株产脂肪酶的最适发酵培养条件为:葡萄糖0.5%,豆饼粉2%,玉米浆2%,KB2BHPOB4B0.5%,NaNOB3B0.5%,橄榄油0.25%,初始pH值为7,发酵温度为20℃,摇床培养48h,酶活最高可达7.17U/mL,添加适量的油脂对产脂肪酶有诱导作用。     

富硒酿酒酵母的选育及优化培养

选育高富硒酵母菌株,优化发酵培养条件,以提高酵母生物富集、转化有机硒的能力,为富硒农牧业生产提供一种安全的有机硒源。通过紫外线诱变、抗性筛选试验,获得富硒能力强的酵母菌株,采用单因素及正交试验设计,优化培养基及发酵培养条件。研究结果表明：试验分离筛选得到一株可抗亚硒酸钠5 mg/mL、抗乙硫氨酸10 mg/kg的双抗菌株,经鉴定为酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)。最佳发酵配方以葡萄糖、蛋白胨、酵母膏为主,添加少量无机盐。确定最优培养条件起始pH 4.0,装液量50 mL/500 mL,摇床转速160 r/min,种子液接种量为10% (V/V),30℃培养28 h,在最优发酵培养条件下菌株富硒能力可达26.75 mg/g干菌体。     

以农业原料为碳源发酵产类胡萝卜素的研究

以不同农业原料为碳源,研究了红酵母RM-1在不同碳源中的发酵情况,同时探索几种不同发酵助剂对粘性红原酵母产类胡萝卜素的影响。结果表明,最适碳源为浓缩菠萝废料提取物(CPWE),同时添加浓度为20mmol/L的柠檬酸、体积分数为0.7%的乙醇,以及质量浓度为1.5mg/L的核黄素、240mg/L的谷氨酰胺、20mg/L的酪氨酸和240mg/L的色氨酸,类胡萝卜素产量最高达到10.98mg/L。     

醋糟发酵红酵母产类胡萝卜素的研究

以醋糟为原料,用酶解法和酸解法对醋糟进行水解产生还原糖,用单因素试验和L_9(3~4)正交试验优化了酶解条件和酸解条件,最终得到酶解还原糖产率为33.89%,酸解还原糖产率为39.46%;用范氏法对其纤维素进行测定,用水解后的醋糟培养红酵母,以醋糟直接培养红酵母为对照;得到醋糟酶解后发酵红酵母产类胡萝卜素达到19.94 mg/g,酸解醋糟后培养红酵母产类胡萝卜素达到17.61 mg/g。经分析及数据处理得出,相对于酸解和直接在醋糟上培养红酵母,酶解法较好些。     

高产木糖醇酵母菌的筛选与鉴定

为了获得1株高效转化木糖为木糖醇的酵母菌株,利用从土壤中筛选的酵母菌株转化玉米芯水解液生产木糖醇,经HPLC测得木糖醇产量,对筛选的具有产木糖醇能力的酵母菌株DQ11进行形态学的初步鉴定及26S rDNA序列分析,并以序列同源性为基础构建相关属种的系统发育树。结果表明,该菌株发酵48 h后木糖醇产量为3.34 g/L。同源性分析结果表明,分离株DQ11与季也蒙毕赤酵母菌处于同一进化分支中,相似性达99%以上,因此将筛选的高产木糖醇分离株DQ11鉴定为季也蒙毕赤酵母菌。     

高产木糖醇酵母菌的筛选与鉴定

为了获得1株高效转化木糖为木糖醇的酵母菌株,利用从土壤中筛选的酵母菌株转化玉米芯水解液生产木糖醇,经HPLC测得木糖醇产量,对筛选的具有产木糖醇能力的酵母菌株DQ11进行形态学的初步鉴定及26S rDNA序列分析,并以序列同源性为基础构建相关属种的系统发育树。结果表明,该菌株发酵48 h后木糖醇产量为3.34 g/L。同源性分析结果表明,分离株DQ11与季也蒙毕赤酵母菌处于同一进化分支中,相似性达99%以上,因此将筛选的高产木糖醇分离株DQ11鉴定为季也蒙毕赤酵母菌。     

一株产胶原酶海洋微生物发酵条件的研究

于海洋污泥中筛选得到的Aeromonas sp.F3所产的胞外酶对胶原蛋白有水解作用,采用单因素试验法对Aeromonas sp.F3的发酵条件及培养基组分进行全面优化,提高该胶原酶生产菌的产酶效率。经优化试验结果表明,该菌株最佳发酵条件为：培养时间24 h,温度40℃,初始pH为8,装瓶量80~100 mL/250 mL;培养基组分为：葡萄糖3 g/L,酵母浸粉9 g/L,NaCl 5 g/L,MnSO4 10 mg/L。经优化试验明显提升了该菌株的产酶能力。     

好食脉孢菌和红酵母协同发酵秸秆产类胡萝卜素的研究

以好食脉孢菌和红酵母为发酵菌种,通过固态发酵玉米秸秆生产类胡萝卜素。将类胡萝卜素产量作为发酵指标,通过对培养基含水量、培养基初始pH值、氮源添加量、碳源添加量、无机盐添加量、培养基装量的单因素试验和正交试验确定最优培养基条件:秸秆用量10 g,干豆渣(氮源)用量3 g,麸皮(碳源)用量4 g,MgSO4添加量0.4%(与秸秆量比W/W),pH值约为5.5,培养基含水量为60%,培养基装量为12.5 g/250 mL,最佳发酵条件为接种量20%(好食脉孢菌∶红酵母=1∶1),培养温度28℃,培养时间96 h。通过优化后的类胡萝卜素产量为224.75μg/g。     

拉萨市蔡公堂乡大棚果蔬酵母菌的分离与鉴定

蔡公堂乡为拉萨市主要果蔬生产基地,开展该地区大棚果蔬酵母菌多样性的研究,能够为青藏高原酵母菌资源的开发与利用提供理论依据。采用研磨和稀释相结合的方法,从蔡公堂大棚果蔬中分离到140株酵母菌,结合经典分类法及26S rDNA D1/D2区域序列分析,对获得的酵母菌菌株进行分类。结果显示:供试酵母菌最终被归为13个属27个种,其中,Ustilentyloma graminis、Rhodotorula babjevae以及Rhodotorula diobovata这3个种是拉萨市蔡公堂乡大棚果蔬酵母菌优势种;2个属(3个种)的酵母菌为子囊菌纲,相对丰度为2.14%,11个属(24个种)的酵母菌为担子菌纲酵母菌,相对丰度高达97.86%,供试果蔬分离的酵母菌菌株绝大多数为担子菌纲酵母菌;酵母菌种数和属数最多的为红椒,青椒中分离到的酵母菌种类则最少;酵母菌总丰度数据显示,圣女果中酵母菌数量最多;多样性指数表明,玉米、苦瓜、红椒和草莓酵母菌较为丰富和多样。总体而言,拉萨市大棚果蔬酵母菌资源较为丰富,另外不同品种果蔬间酵母菌种群分布差异较大。     

湖北襄阳白车轴草根瘤菌耐盐性和耐酸碱性的初步研究

为了获得高耐逆性的根瘤菌菌株,对来自湖北省襄阳市湖北文理学院4 个不同位置与白车轴草共生的根瘤菌,分别采用划线法和液体培养法进行耐盐性和耐酸碱性研究。结果表明：其中3 株根瘤菌在盐浓度最高为50 g/L 的TY培养基上生长,有一株根瘤菌对于NaCl具有很高的耐性,可以在80 g/L 的NaCl 的TY培养基上正常生长。酸碱性试验表明,除其中一株在pH 9 以上的固体培养基上不能生长外,其余3 个根瘤菌株系在不同pH值的TY培养基上均生长良好。由此可见,与白车轴草共生的根瘤菌具有很强的耐盐和耐酸碱能力,为研发高耐逆的菌肥奠定了基础。     

棉酚降解菌株的分离、筛选及鉴定

以醋酸棉酚为唯一碳源,从土壤中筛选到2株棉酚降解菌,命名为MM-2及RP-3。经形态学及分子生物学鉴定:MM-2与基因登录号为AF219122.1(Fusarium oxysporum)的同源性达93%,推测MM-2属于镰刀菌属;RP-3与EU294522.1(Rhodotorula mucilaginosa)的同源性达92%,故此推测RP-3属于红酵母属。棉酚降解菌在不同碳源及温度条件下生长试验表明:MM-2在葡萄糖中生长好于在棉酚中,葡萄糖中最适取种时间为48～72 h,棉酚中最适取种时间为60～84 h,最适生长温度均为30℃;RP-3在葡萄糖中的最适取种时间为24～48h,最适生长温度在25～30℃之间。RP-3在棉酚中生长时,由于醋酸棉酚本身为黄色晶体,影响了OD值的结果,但仍能显示出对棉酚具有降解作用。     

红酵母产类胡萝卜素促进因子的选择

研究了5种添加物对红酵母细胞生长及其类胡萝卜素含量的影响。结果表明,5种添加物都可提高色素产量和生物量,其中对色素质量分数影响显著的依次是花生油、核黄素(VB2)、番茄汁,分别增产77.15%,46.5%,34%。对生物量影响显著的依次是花生油、核黄素,分别增产20.21%,14%。确定了最佳添加量为:核黄素3.5 mg/L,花生油4 mg/L,番茄汁6 mg/L。     

耐高糖酵母的筛选及其在黄酒中的应用研究

从蜂蜜、葡萄、面包3种原料中提取天然酵母进行梯度驯化,再通过紫外诱变育种,筛选出具有耐高糖性质的酵母并对其相关特性进行研究,将筛选出的菌株应用于黄酒酿造过程。结果表明,筛选出的酵母可耐受的糖度、pH值、酒精度分别为40%,1.5和10%Vol,将其应用于黄酒发酵中,经过7 d发酵后,菌株降糖能力较传统菌株提高了20 g/L,酒精度提高了0.4%Vol,糖类物质转化率达到11%。采用自然驯化和紫外诱变育种相结合,得到适用于黄酒酿造生产的耐高糖酵母菌株。