啤酒用β-葡聚糖酶高产菌株的选育及发酵条件优化

对产β-葡聚糖酶的地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)A302菌株进行紫外线和硫酸二乙酯(DES)复合诱变和选育，获得产β-葡聚糖酶达27．3U／mL的突变株H302。采用均匀实验设计对H302菌株产β-葡聚糖酶的液体培养基组成及发酵条件进行优化实验，所获优化配方(W／V)为麦麸1．41％，鱼粉0．80％，硝酸钾0．34％，硫酸镁0．11％，起始pH6．0；用含孢量10^8个／mL的种子菌液按体积比3．3％接种上述液体培养基，在36℃下发酵52h，菌株H302的产酶活力达到115．1U／mL，是原出发菌株及培养条件下产酶活力的9．4倍。对突变株H302所产β-葡聚糖酶性质的研究表明，该酶最适作用温度为60℃，最适作用pH为5．5，适用于啤酒生产中的麦芽糖化。     

一株产高温蛋白酶耐热菌BY25的产酶条件与酶学性质研究

对菌株BY25的生长条件、产酶条件及其产生的蛋白酶的酶学性质进行了研究。结果发现,BY25的最高生长温度为55℃,最适生长温度为50℃,最佳产酶温度为30℃,最佳培养起始pH为8.0,最佳C源为葡萄糖,高通气量明显提高菌株产酶能力。在以上条件下培养52 h,上清液蛋白酶活力达4 170 U/ml。酶学性质研究表明：该蛋白酶为高温中性金属蛋白酶,最适反应pH为7.0,最适反应温度为55℃,具有良好的pH耐受性和较好的热稳定性;EDTA能强烈抑制酶活力,而Fe2+、Cu2+对酶活力也具有一定抑制作用。     

一株高活性纤维素降解细菌的筛选鉴定及酶学特性

利用小麦/玉米秸秆还田土壤样品,通过富集培养和刚果红平板染色法筛选分离出纤维素降解细菌XWS-12;对分离的菌株进行16S rRNA基因序列系统发育分析,初步鉴定为伯克氏菌属(Burkholderia),定名为Burkholderia sp.XWS-12。以玉米秸秆和麸皮为碳源,研究了氮源、发酵时间、初始发酵温度、培养基初始pH等条件对该伯克氏菌产纤维素酶的影响。结果显示,该菌株产纤维素酶最适氮源为硝酸钠,培养时间为60 h,培养温度为37℃,培养基初始pH为4,该菌株的CMC酶活力最高,可达25 U/ml。其粗酶液的最适反应温度为50℃,最适反应pH为5,在pH 4~8的范围内酶活力较稳定。粗酶液的热稳定较差,当温度超过50℃时,该酶活力显著下降;当温度为50℃时,保温1 h,该酶活力损失53%。     

β-葡聚糖酶的热稳定性改造及酶学性质分析

为了获得热稳定性有所提高的β-葡聚糖酶，本研究利用定向进化技术对β-葡聚糖酶基因进行改造，并对野生酶和突变酶的酶学性质进行研究。结果获得了两株热稳定性有所提高的突变体，分别命名为EGs1和EGs2；酶学性质分析结果显示：与野生酶相比，EGs1和EGs2突变酶的Tm值分别提高了3℃和5℃，达到了65.5℃和67.5℃；突变酶的最适反应温度也提高了5℃，达到了60℃；两个突变酶对地衣多糖的水解能力分别被提高28％和降低21.6％；对地衣多糖的亲和力未见改变；野生酶和EGs1突变酶的最适pH值为6.5，而EGs2突变酶的最适pH值为7.0；野生型和突变型-葡聚糖酶都有较宽的pH稳定范围，在pH 6.0-8.5的范围内放置48小时，仍保持80％以上的酶活力；遗传稳定性检验结果表明突变株的遗传稳定性良好。这一结果说明了定向进化在改善酶性质方面是比较有效的策略。     

Bacillus subtilis γ-DES36纤溶酶发酵条件的优化研究

以高活性纤溶酶突变株Bacillus subtilis γ-DES36为发酵菌株，研究其纤溶酶液体发酵的最佳工艺条件。通过对不同接种量、碳源、氮源、碳氮比、表面活性剂、金属离子等单因素研究，使用麦芽糖和胰胨时纤溶酶活性达2900IU／mL左右。为了降低成本，使用廉价的碳氮源麸皮和豆粕粉。正交试验得到该菌株产纤溶酶的优化液体发酵条件为：麸皮1％，麦芽糖1％，胰胨0．25％，豆粕粉1．5％，吐温400．15％，酵母膏0．1％，K2HPO4 0．25％，KH2PO4 0．1％，复合无机盐0．2mL／（100mL），接种量1％，发酵液纤溶酶酶活达到2300IU／mL。     

黑曲霉固体发酵生产纤维素酶培养基构成优化研究

研究结果表明应用双温度培养法进行黑曲霉固体发酵生产纤维素酶时 ,在自然补给氧气、培养基 pH值约6 .5并保持环境湿度约 6 0 %条件下 ,葡萄糖对滤纸酶活力有促进作用 ;葡萄糖、麸皮、(NH4 ) 2 SO4 、水分适宜作为固体培养基基本成分 ;表面活性剂吐温 80对纤维素酶活力促进效果并不明显     

基因工程菌EGs2产β-葡聚糖酶条件优化及产酶特性

摘要：用乳清粉作为主要培养基组成，采用正交试验对重组菌EGs2的发酵条件进行了优化，并对粗酶液的酶学性质进行了研究。重组菌EGs2的最佳发酵条件为：摇床转速170 r•min-1，接种量1 ％，发酵培养基初始pH值6.0，种龄12 h。重组菌EGs2β－葡聚糖酶的表达与菌体生长呈正相关，发酵14h后，菌体生物量最高可达1.71 g•L -1，β－葡聚糖酶活力最高可达321.56 U•ml-1。所得粗酶液的最适反应温度和pH值分别为60 ℃和6.0，在70 ℃以下保温20 min后，残余酶活力均在80 %以上。在pH 5.0-9.0 放置48 h后仍能保持均90 %以上的残余酶活力。     

纤维素降解菌CMC-4的分离鉴定、诱变和酶学特性研究

从秸秆还田土壤中初筛获得一株高效纤维素降解菌CMC-4,根据菌株形态、理化性质及16S rDNA序列分析,初步鉴定为地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)。以此为出发菌株,经亚硝酸钠诱变获得一株稳定高产纤维素酶突变株CMC-4-3。对CMC-4和CMC-4-3的产酶条件和酶学性质进行比较分析,结果表明:CMC-4-3纤维素酶活力较CMC-4提高67.5%;其最适产酶条件是:37℃、pH 6.0、葡萄糖为碳源、蛋白胨为氮源、接种量2.0%、装液量60 ml/250 ml。该菌株所产纤维素酶的最适反应pH为6.0,且在4.0~7.0酶活力较稳定;最适反应温度为50℃,在20~80℃范围内均保持稳定;金属离子Fe~(2+)、Mg~(2+)、Co~(2+)、K~+对酶有激活作用,其余离子均有不同程度抑制作用,而Cu~(2+)和Ca~(2+)抑制作用最强,酶活力减弱近50%,是该酶的强效抑制因子。诱变前后菌株产酶条件和酶学性质等部分表型发生了变化,而突变菌株显示出了更宽泛的环境适应范围。据此,获得一株高效产纤维素酶、耐受范围广的具纤维素降解能力的地衣芽孢杆菌,而CMC-4-3和CMC-4的表型可作为深入探讨基因型变化的线索。     

秸秆纤维素降解真菌QSH3-3的筛选及其特性研究

为了获得高效降解秸秆纤维素的微生物菌株,采用滤纸降解法和刚果红染色法从含纤维素类物质的土壤中筛选到一株产纤维素酶菌株QSH3-3,通过形态观察和ITS序列分析,鉴定为草酸青霉Penicillium oxalicum QSH3-3。摇瓶产酶试验结果表明,该菌株的最佳产酶条件为:碳源为0.5%的碱处理过的玉米秸秆粉,氮源为0.2% 硫酸铵,起始pH为7,接种量为5%,产酶温度为30℃,培养时间为4 d。最佳产酶条件下,滤纸酶（FPase）、内切酶（CMCase）和木聚糖酶（Xylanase）分别为12 U、33 U、605 U（U为酶活性单位）;在15℃,其残余酶活力可达70%～80%;在pH 4～9 范围内,其残余酶活力可达70%以上。酶学稳定性研究表明,FPase、CMCase和Xylanase在pH 4～9范围残余酶活力达85%以上,具有较强的酸碱适应能力;FPase、CMCase和Xylanase在45℃以上酶活力迅速下降,耐热性较差。该菌株具有较高的木聚糖酶活力以及较强的低温、pH的耐受力,因而该菌株在田间温差大、土壤偏碱性等复杂条件下对秸秆纤维素类物质的降解具有较高的应用潜力。     

纤维素酶高产菌株的诱变选育及产酶条件研究

本研究通过γ射线照射和亚硝基胍交替处理 ,诱变出一株纤维素酶高产菌株T80 1 ,与出发菌株相比 ,其产酶能力提高 1 77倍。通过对诱变菌株产纤维素酶条件研究发现 ,以稻草粉为碳源、蛋白胨为氮源时 ,菌株产酶最高。该菌株产酶最适培养温度为 2 8℃～ 30℃ ,最适培养 pH为 4 8～ 5 0 ,在此条件下发酵五天达到产酶高峰。该诱变株产酶能力高于国内外一些已知的纤维素酶高产菌株如QM941 4等 ,具有重大的实用价值。     

有机肥料与绿色食品生产

本文阐述了使用有机肥料生产绿色食品的优越性，认为有机肥料是生产绿色食品的主要肥源，并根据我国的有机肥资源和使用状况，提出在生产绿色食品中，积制和使用有机肥的一些建议。     

“蚕保一号”的研制

“蚕保一号”以氯霉素为主药,添加适当的营养物质及能与之良好配伍的助溶剂和稳定剂复配制成,它能增强蚕体质,并能防治蚕细菌病,效果优于氯霉素,而且稳定性好,使用安全。     

Production and stability of ethylene in soil

Summary One of the major factors affecting the production and stability of ethylene (C₂H₄) in soil is its water content. This study was conducted to determine the effect of unsaturated vs. saturated conditions on the production and stability of C₂H₄ in soil. L-Methionine and D-glucose were added alone and in combination at 1.0 and 5.0 g kg^-1 soil, respectively. The addition of l-methionine significantly promoted C₂H₄ production at field capacity to a much greater extent than under waterlogged conditions. Glucose was equally effective under both moisture regimes, while the combined application of both amendments (l-methionine and d-glucose) led to the release of significantly higher amounts of C₂H₄ under saturated conditions. Antibiotic experiments revealed that under aerobic conditions, l-methionine may be more efficiently converted to C₂H₄ by soil fungi, while in glucose-amended soil, both bacteria and fungi are active in generating C₂H₄. C₂H₄ was more stable under saturated conditions. The magnitude of C₂H₄ removal from the headspace after 3 days of incubation under unsaturated conditions (25.7%) was comparable to that after 6 days under saturated conditions (24.1%). The loss of C₂H₄ was approximately 10-fold greater in non-sterilized soil than in sterilized (autoclaved) soil, both maintained at field capacity, indicating that a biotic component has a major influence on C₂H₄ stability. Kinetic analysis revealed that the C₂H₄ loss/degradation in nonautoclaved soil under aerobic conditions followed a firstorder reaction, with a rate constant (k) of 0.115 day^-1 and a half-life (t _1/2) of 6.0 days.     

生物质致密成型产品的生产及应用

生物质是光能循环转化的载体。这里所指的是广义生物质能,包括植物种子、秸秆、树木、牧草、畜禽粪便以及生活有机垃圾等。狭义的生物质能是指各种作物秸秆、树叶、锯屑、蔗渣及农业、林业废弃物等。生物质具有资源丰富、分布比较均匀的特点,加之在其生长过程中吸收大气中的CO2,因此用工业技术开发利用生物质能,不仅有助于减轻温室效应和促进生态良性循环,而且可替代部分石油、煤炭等化石燃料,成为解决能源与环境问题的重要途径。但是生物质的松散性、易燃性、低含碳量、不均匀性又成为工业化大规模利用以及储存和运输时所必须解决的技术问题。     

Production of sterigmatocystin.

A procedure for the isolation of pure sterigmatocystin is described. It involves cultivation of an appropriate fungus on sterile maize, and extraction and column chromatographic purification of the crude extract. With this method sterigmatocystin may be obtained at a fraction of its commercial cost. Aspergillus versicolor seemed to be the best producer (5-12 g/kg) in 250 ml Erlenmeyer flasks. The yield dropped markedly with increasing flask size.     

中微量元素肥料的生产与应用

本文阐述了中微量元素肥料在农业生产中所发挥的重要作用 ,分析了我国中、微量元素的发展前景 ,概述了中、微量元素生产的原料来源及工艺技术 ,对发展我国中、微量元素的生产和应用提出了合理建议     

饲料生产技术急待信息化、产业化

建立饲料企业计算机局域网络，将总经理室、原料部、成品部、生产加工部、销售部、财务部、技术部和信息部等部门通过网络连接成一个整体，各部门既分工明确，又协同合作。该系统工程的设计和建成，不但能随时分析企业内部的信息，而且通过与其他网络的连接，及时了解到饲料行业最新科研动态和全国各地区各种原料及成品饲料的市场价格行情，使饲料生产技术实现信息化、工程化、产业化，增强饲料企业在市场中的竞争能力。     

饲料生产技术急待信息化、产业化

建立饲料企业计算机局域网络，将总经理室、原料部、成品部、生产加工部、销售部、财务部、技术部和信息部等部门通过网络连接成一个整体，各部门既分工明确，又协同合作。该系统工程的设计和建成，不但能随时分析企业内部的信息，而且通过与其他网络的连接，及时了解到饲料行业最新科研动态和全国各地区各种原料及成品饲料的市场价格行情，使饲料生产技术实现信息化、工程化、产业化，增强饲料企业在市场中的竞争能力。     

干旱对农业生产的影响及应对策略

分析了我国干旱发展趋势及对农业生产造成的影响,认为干旱趋势不可逆转,全国年均受旱面积占各种气象灾害受灾面积的55.7%,其中旱灾成灾率40%,占全国总成灾面积的51.68%,占全国粮食损失总量的50%.因此,应从环境、生物、技术等方面,建立适雨型抗逆减灾耕作制,积极应对干旱威胁。     

长效尿素的研制生产与应用

长效尿素为添加抑制剂的尿素新产品,抑制剂包括脲酶抑制剂和硝化抑制剂,它们可有效地减缓尿素水解进程,延长肥效期,提高氮素利用率,使农业达到增产、节肥和省工的综合效益。本文介绍了长效尿素的研制、生产、农业应用效果和施用技术。