短小芽孢杆菌β-1,4-木聚糖酶基因在大肠杆菌中的高效表达

从短小芽孢杆菌(Bacillus purnilus)BP51中克隆得到木聚糖酶基因xynA。将其构建在大肠杆菌(Escherichia coli)表达载体pET21a上，转化Ecoli BL21，获得重组工程菌BLX5。经IPTG诱导，xynA基因的表达产物以胞内可溶性蛋白和包涵体形式存在。重组表达木聚糖酶的活力可达165．511U／mL培养物。重组表达的木聚糖酶最适温度为55℃，最适pH值为6．5，在碱性条件下具有良好的稳定性，降解产物以三糖、四糖和五糖为主。     

纤维素酶高产菌株的诱变选育及产酶条件研究

本研究通过γ射线照射和亚硝基胍交替处理 ,诱变出一株纤维素酶高产菌株T80 1 ,与出发菌株相比 ,其产酶能力提高 1 77倍。通过对诱变菌株产纤维素酶条件研究发现 ,以稻草粉为碳源、蛋白胨为氮源时 ,菌株产酶最高。该菌株产酶最适培养温度为 2 8℃～ 30℃ ,最适培养 pH为 4 8～ 5 0 ,在此条件下发酵五天达到产酶高峰。该诱变株产酶能力高于国内外一些已知的纤维素酶高产菌株如QM941 4等 ,具有重大的实用价值。     

一株纤维素降解菌的鉴定

采用16srDNA序列分析，形态鉴定和Biolog Microstation Identification System对一株强降解纤维素细菌Z215进行了鉴定。16srDNA序列分析表明，Z215与多株纤维单胞菌的16srDNA的同源性均在95％以上，在细菌系统分类学上应用属于纤维单胞菌属（Cellulomonas）。从构宾系统发育树中可以看出，Z215与C.gelida，及C.gelda共同构成一个分枝，该菌与C.gelida和C.gelda的16srDNA同源性分别为98．6％和98．5％。该菌的形态鉴定与凝胶纤维单胞菌（C.gelida)比较相近，而该菌的Biolog生理鉴定也表明，Z215与C.gelida的相似性最高。为0．555，但存在一些不同，因此初步确定Z215为凝胶纤维单胞菌的一个变种（C.gelida var)。