植物铁蛋白的铁氧化沉淀与还原释放机理

铁蛋白(ferritin)是一类铁贮存蛋白,普遍存在于动物、植物和细菌体内,具有调节铁代谢平衡和解除亚铁离子毒性的双重功效。而且植物铁蛋白所贮存的铁是豆科植物早期萌发生长所必需的营养元素,同时,植物铁蛋白也代表着21世纪新型的补铁功能因子,所以对其铁氧化沉淀和还原释放的研究在生理学和营养学上具有重要意义。与动物铁蛋白相比,植物铁蛋白在结构上具有明显不同的特点,如成熟的植物铁蛋白在N末端含有其特有的EP(extension peptide)肽段,植物铁蛋白只含有H亚基,即H-1和H-2亚基,特殊的结构导致植物铁蛋白具有不同的活性及功能。本文对植物铁蛋白的结构与功能、铁氧化沉淀机理和铁还原释放机理等方面进行了综述,旨在为今后植物铁蛋白的深入研究提供参考资料。     

钼肥对农牧交错带豆科作物增产的重要意义

对农牧交错带典型地区内蒙古多伦不同类型土壤施钼试验表明,该地区绝大多数土壤有效态钼含量低,钼是豆科植物根瘤菌中固氮酶的重要组分,该区种植豆科作物面积大,施钼对豆科作物增产效果极为显著, 蚕豆增产率为30．2％－33．7％,芸豆增产率为9．4％－12．4％,现已大面积推广,这对我国大西北地区的经济发展具有重要意义。     

人乳铁蛋白转基因研究进展

人乳铁蛋白是一种具有多种生理功能的糖基化蛋白，可可逆性地结合两个铁离子。概述了人乳铁蛋白的结构和理化性质，以及乳铁蛋白基因的结构，并着重论述了人乳铁蛋白转基因研究的状况和主要研究成果。在此基础上，提出了尚未解决的问题，并展望了人乳铁蛋白转基因研究的前景。     

根际酶的研究概况

本文综述了植物根际固氮酶，硝酸还原（反硝化）酶，脲酶和磷酸酯酶的分布，活性，影响因素及其在养分有效性中的作用。     

降香黄檀根际固氮菌分离鉴定及菌群活性研究

利用Ashby培养基从不同林龄的降香黄檀根际土壤中分离高效固氮菌,为专用生物复合肥的研制提供理论基础。固氮酶活在75.30~432.76 nmol h-1 ml-1之间的菌株有21株,其中菌株JT-N305的固氮酶活最高。其中15株菌株具有分泌IAA的能力,其分泌量在9.76~41.21μg ml-1。结合形态学、生理生化特性及16S r DNA序列分析,初步鉴定JT-N301属于Burkholderia anthina、JT-N304属于Enterobacter ludwigii、JT-N305属于Burkholderia seminalis。菌群的研究表明:3株菌株混菌培养,其固氮酶活高达498.66 nmol h-1 ml-1;相对于其它氮源而言,菌群更易于吸收铵盐;而菌群的最佳碳源为葡萄糖。     

不同保藏年代的大豆根瘤菌冻干菌种的生物学活性研究

对实验室保藏的4～25年的冷冻干燥管大豆根瘤菌菌种进行了生物学活性测定。结果表明，供试4种大豆根瘤菌都有结瘤能力和固氮能力，它们之间的单株结瘤数和固氮酶活没有显著差异。同时证明冷冻干燥法是保藏根瘤菌的良好方法。     

不同保藏年代的大豆根瘤菌冻干菌种的生物学活性研究

对实验室保藏的4～25年的冷冻干燥管大豆根瘤菌菌种进行了生物学活性测定。结果表明,供试4种大豆根瘤菌都有结瘤能力和固氮能力,它们之间的单株结瘤数和固氮酶活没有显著差异。同时证明冷冻干燥法是保藏根瘤菌的良好方法。     

水稻低植酸突变基因和外源铁蛋白基因的聚合

对所获得的2份低植酸突变系和2份铁蛋白(Fer)转基因富铁系稻米进行了无机磷、种子GUS、叶片PCR、稻米矿质元素含量检测和简单的遗传分析,表明这些材料作为低植酸突变种质和Fer富铁种质具有良好的实用价值。对所配杂种F1进行了花药培养,并对愈伤组织诱导、分化、生根和花培苗倍数性、成活率、结实性等性状进行考察,认为低植酸基因和铁蛋白外源基因对花培过程影响不明显。在大量的花培后代中筛选到31份低植酸基因和外源铁蛋白基因双重表达的花培纯系,经检测,该批材料富铁效果极为显著,是难得的低植酸富铁转基因优良新种质。     

小鼠乳汁中重组人乳铁蛋白的提取与抗菌活性的研究

本研究从人乳铁蛋白（hLF）cDNA转基因小鼠乳汁中提取重组人乳铁蛋白（rhLF）,并用提取的rhLF进行抗菌活性分析。收集了2个基因和2个品系的（PCL25和AP基因）转基因小鼠乳汁,采用凝胶过滤层析法从转基因小鼠乳汗中提取rhLF,提取物通过SDS-PAGE电泳及Western-blotting分析,ELISA检测提取物中rhLF含量;按不同浓度rhLF作琼脂扩散抑制大肠杆菌、沙门氏菌试验。结果表明,通过凝胶过滤层析获得的PCl25和AP转基因小鼠乳汁中的rhLF分子量为78KDa,与天然人乳铁蛋白一致,rhLF对大肠杆菌、沙门氏菌均具有明显的抑菌作用。     

重金属对土壤微生物酶活性的影响

本文通过含有不同浓度的铜、铅、砷、镉 4种重金属的大豆、小麦盆栽试验 ,采用气相色谱方法测定土壤微生物酶活性 .结果表明 :低浓度的重金属能够提高固氮酶和反硝化酶的活性 ,而高浓度的重金属对上述二种酶有强烈的抑制作用     

小鼠乳铁蛋白基因克隆和大肠杆菌表达

从泌乳期小鼠乳腺组织中提取总RNA，经RT-PCR扩增得到了小鼠乳铁蛋白全长cDNA，并将其进行了克隆和大肠杆菌(Escherichia coli)表达。表达产物经SDS-PAGE和Westem blot分析结果表明，小鼠乳铁蛋白在大肠杆菌中得到了表达．但是表达量不高，这可能是由于重组表达产物对大肠杆菌有抑制效果。     

转人乳铁蛋白基因番茄的表达及其生物活性

乳铁蛋白是转铁蛋白家族中的成员之一,主要分布在哺乳动物的乳汁、血液、泪液、小肠液等分泌物中.是人体非特异性免疫系统中重要成员之一,具有能促进人体对Fe的吸收和利用、抵御病菌侵染、免疫调节等（Bhimani et al.,1999）多种生物功能.把人乳铁蛋白基因转入番茄,不仅可提高了番茄的营养保健品质,还可提高转化植株抗菌和抗病性.……     

钼、锰营养对大豆碳氮代谢的影响

钼、锰是植物生长所必需的微量元素,对作物的生长发育、产量和品质都有明显影响。钼在植物氮代谢中起着关键作用,主要与钼是硝酸还原酶和固氮酶等含钼酶类的重要组成成分有关[1]。同时钼对维持叶绿体的正常结构也是必不可少的,缺钼会导致植物叶绿素含量减少,光合强度降低[2]。锰对作物的光合作用、氮、碳和脂类代谢有密切关系,并是多种酶的组分与活化剂,锰营养的丰缺对大豆的生长发育、产量及抗逆性有显著影响[3]。在钼或锰营养方面,目前研究较多是钼或锰对大豆的产量、品质和生理活性的影响,例如施钼能提高豆科植物根瘤菌数量,促进植株生长,增加生物量和产量[4~6]。锰浸种会影响大豆种子萌发和幼苗的生理特性[7],施锰     

大豆根瘤菌与合细菌混合接种效果

通过盆栽与田间试验，对大豆根瘤菌与光合细菌混合接种进行了研究。结果表明，混合接种提高了大豆根瘤的固氮酶性和土壤固氮强度；增加了土壤好细菌，真菌放线菌，固氮菌的数量；减了大豆胞囊线虫危害。纯光合细菌接衙的比较，盆栽试验分别达到显著与极显著水平，田间试验均达显著水平。     

无载体框架结构的大豆铁蛋白线性表达盒提高小麦籽粒铁含量的研究

培育和推广铁强化型小麦品种对于经济有效地解决贫困人口的铁营养不良问题具有重要意义。本研究通过 RT-PCR 得到了大豆(Glycine max)铁蛋白基因,构建了无载体框架的大豆铁蛋白线性表达盒(即小麦籽粒特异的高分子量谷蛋白亚基 1Dx5 的启动子 - 大豆铁蛋白基因 -NOS 终止子酶切片段);用基因枪法转化"京花 1 号"小麦(Triticum aestivum)幼胚愈伤组织,经草胺膦筛选和分化后,得到 276 株转基因T0植株,通过 PCR 筛选出阳性植株 65 株;RT-PCR 检测发现 29 个株系的大豆铁蛋白基因在灌浆期籽粒中表达;与对照相比,对 8031 个 T1代株系所结的 T2代籽粒进行了铁含量测定,有 265 个株系成熟籽粒的铁含量均比对照有不同幅度提高,增幅在 4.93%~64.03%之间,其中 22 个株系的籽粒铁含量显著或极显著提高。结果提示,利用无载体框架的大豆铁蛋白线性表达盒可以有效地培育出籽粒铁含量显著提高的转基因小麦。     

转基因小鼠乳汁中重组人乳铁蛋白的提取与抗菌活性分析

从人乳铁蛋白cDNA转基因小鼠(Mus musculus)中收集2个品系(PCL25和AP)的乳汁.采用凝胶过滤层析法提取重组人乳铁蛋白(rhLF).通过SDS-PAGE电泳.Western blot和ELISA鉴定并检测提取物中rhLF含量,按不同浓度rhLF作琼脂扩散抑制大肠杆菌(Eschenchia coil)和沙门氏菌(Salmonella)试验.结果表明,PCL25和AP转基因小鼠乳汁提取物中的rhLF含量为7-8 mg/mL;rhLF分子量为78 kD,与天然人乳铁蛋白分子量一致;对大肠杆菌和沙门氏菌均具有明显的抑菌作用.     

固氮斯氏假单胞菌铵载体amtB基因的功能和结构分析

固氮斯氏假单胞菌(Pseudomonas stutzeri)A1501是分离自水稻根际的联合固氮细菌,属变形细菌γ亚族。全基因组序列分析表明该菌含有2个紧密连锁的的铵载体蛋白编码基因amtB1和amtB2,位于同一个操纵子中glnK基因下游。铵载体蛋白AmtB1和AmtB2分别包含12和11个跨膜结构域。为研究amtB的功能,构建了amtB极性双突变株(PKOB1)。amtB极性双突变导致菌株生长缓慢;在铵浓度分别为3.3和10mmol/L条件下,其固氮酶活仍保持在0.01mmol/L的最佳固氮条件的87%和74%,而野生型已经基本尚失固氮能力。以硝酸盐为唯一氮源时,突变株细胞培养液的铵浓度可达到3.4mmol/L,而野生型并未检测到铵,表明AmtB可能参与了P.stutzeriA1501的铵离子转运,并与固氮酶活和氮代谢相关。     

满江红在不同培养条件下的生产性能及其与营养成分变化的关系

用人工配制的霍格兰改良培养液以及天然的地下水和池塘水对满江红进行了生产性能的测定并对水体中若干营养成分指标进行了监测。满江红在3种溶液培养条件下繁殖能力随时间的变化均呈增长、平衡、消落趋势,与二次曲线显著拟合。人工培养液中满江红的繁殖系数、固氮酶和过氧化物酶(POD)活性显著高于其它2种水体培养,而超氧化物岐化酶(SOD)的活性差异却不显著。相关分析发现,3种酶活性均同满江红的生产性能呈显著相关:固氮酶和POD酶活性呈正相关,SOD酶呈负相关。随着满江红的繁殖,溶液中若干营养成分含量也发生变化。除pH值外,其余所测定的指标在3种环境中的变化趋势基本一致,即电导率以及硝态氮、磷酸盐含量呈下降趋势,铵态氮维持在一定的低水平内;而水中的化学需氧量(COD)呈上升趋势。满江红繁殖力与溶液环境中成分变化的相关分析看出,环境中的离子态氮含量、化学需氧量的变化对满江红生产性能影响较小,而满江红的生产性能受溶液中的酸碱度、电导率及磷含量的制约。     

4份低植酸铁蛋白转基因水稻花培系的生物学特征观察

在获得31份集外源铁蛋白基因（Fer）和低植酸突变基因（lpa）于一体的水稻花培纯系基础上,选取4份稻米铁含量明显较高的花培代表系（Fer34-HIPj1-1、Fer34-HIPj1-2、 Fer65-HIPj2-1和 Fer65-HIPj2-2）,以秀水11和秀水110为亲本对照,对铁蛋白和低植酸双基因表达水稻的生物学特性进行观察。结果表明,与对照相比,这些双基因纯系均有较为明显的发芽起始滞后、幼苗早期生长缓慢、灌浆前期速率较慢等迹象,最终致使单株产量下降。此外,还发现成株期叶片的叶绿素含量和组成与对照相仿,但其净光合速率比对照快,这种光合生理特性是否与铁蛋白转基因或低植酸突变有关还有待进一步研究。     

几株固氮芽孢杆菌的分离与鉴定

摘要： 从小麦（Triticum aestivum）、玉米（Zea mays）、黑麦草（Lolium sp.）和柳树（Salix sp.）的根际土壤中分离得到能在无氮培养基上生长的29株芽孢杆菌（Bacilli），通过固氮酶活的测定以及固氮酶结构基因 nifH 的PCR扩增得到7株固氮芽孢杆菌。对这7株固氮菌株进行了生理生化性状测定、16S rDNA序列分析(GenBank accession No. AY373358, AY373360,~AY373364和AY376876)、G+C mol%含量的测定及DNA-DNA杂交实验，结果表明，其中5株菌属于芽孢杆菌，另外2株菌属于类芽孢杆菌。在这7株被鉴定的菌株中，菌株T1被鉴定为Bacillus cereus；菌株G1、C4和C5被鉴定为B. megaterium；菌株W5的生理生化性状、16S rDNA和G+C mol%与Bacillus marisflavi 相近；G2的生理生化性状和16S rDNA 与Paenibacillus polymyxa 接近，但在基于16S rDNA的系统发育树中却与P. durus 聚在最小的分支内；T7可能是Paenibacillus属中的一个新种。