生姜组织培养中增殖与生根同步培养技术研究

对生姜组织培养快速繁殖技术进行了研究,建立了生姜试管苗增殖与生根同步培养技术规程.结果:在培养基MS 6-BA 2.0～3.0mg/L NAA 0.5～1.0mg/L上,可以实现生姜增殖与生根诱导同步进行,以MS 6-BA 3.0mg/L NAA 1.0mg/L为最佳培养基,继代繁殖周期为25～30d,繁殖系数7以上,生根诱导率达100%;培养20 d后,将试管苗移栽到菜园土:河沙=1:1的混合基质中,保湿培养,移栽成活率达96.4%.     

紫叶酢浆草组培快繁技术研究

研究了紫叶酢浆草地下鳞茎初代培养、继代培养和生根培养3个技术环节的激素配比以及生根苗移栽试验。结果表明：以MS为基本培养基，初代培养激素配比以6-BA0.5mg/L+NAA0.5 mg/L+2,4-D0.1 mg/L为宜，诱导率达83%，增殖系数为2.6；在继代培养中，以6-BA0.5 mg/L+NAA0.1 m/L为宜，增殖系数达3以上；以1/2MS为基本培养基，生根激素以NAA0.1 mg/L为宜，可使生根率达92%；生根苗移栽基质为蛭石与细沙按1:1时移栽成活率达90%。     

欧报春上下胚轴再生体系的建立

以欧报春(Primula vularis)种子上下胚轴为外植体,通过外植体的消毒、丛生芽诱导和增殖、生根、炼苗和移栽等技术的研究,筛选出各阶段的最佳培养基配方,从而建立欧报春的再生体系。结果表明:欧报春种子上胚轴能诱导出不定芽,但下胚轴不能。欧报春上胚轴不定芽诱导最佳培养基为MS+NAA 0.4 mg/L+6-BA 0.6 mg/L,诱导率达21.67%;丛生芽增殖的最佳培养基为MS+NAA 0.6 mg/L+6-BA 0.5 mg/L,诱导率达62.96%;生根最佳培养基为MS培养基,诱导率达95.59%;最佳移栽基质为草炭:珍珠岩=3:1(体积比)的混合基质,移栽成活率可达96.67%。     

组织培养快速繁殖罗汉果种苗

以茎尖或茎段为外植体,MS为基本培养基,附加0.5～1.0mg/L6-BA及0.2mg/L的IAA、0.6%的琼脂、3%的白糖,培养15 d可以诱导出芽苗;此芽苗转接到MS 0.5 mg/L6-BA 0.1 mg/LIAA 0.1 mg/LIBA 0.6%琼脂 3%白糖的培养基中增殖,每20d继代1次,增殖倍数达8.5;继代芽苗转入MS 0.1 mg/LNAA 0.6%琼脂 3%白糖的培养基中培养30d,可诱导生根及壮苗.移栽基质为蛭石:珍珠岩:熟土=2:1:1,移栽成活率达90%以上.     

金边阔叶麦冬的组培快繁技术研究

旨在研究金边阔叶麦冬的组织培养与快速繁殖技术。分析了植物生长调节剂对金边阔叶麦冬地下茎芽和叶片愈伤组织诱导、芽分化及试管苗生根的影响。结果表明:MS+BA 1.0 mg/L+NAA1.0 mg/L为地下茎芽诱导愈伤组织最佳的培养基,诱导率达100%;MS+BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L为叶片诱导愈伤组织较为理想的培养基,诱导率为52%。地下茎芽形成的愈伤组织其芽诱导率、芽增殖倍数明显高于叶片,诱导率高者达100%,增殖倍数高者为4.6。金边阔叶麦冬试管苗生根的较为合适的培养基为1/2MS+IBA 0.5 mg/L和1/2MS+IAA 0.25 mg/L,生根率达100%,平均生根数量在5根以上。试管苗移栽苗成活率达90%以上。     

商陆组织培养及其快速繁殖研究

以商陆茎段为外植体,研究其离体培养再生途径。结果表明,MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.05 mg/L适合丛生芽诱导,诱导率达100%;MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.02 mg/L适合继代增值培养;1/2 MS+IBA 0.5 mg/L适合生根诱导,诱导率为86.7%;组培苗移栽成活率达100%。     

甜菜组培快繁及植株再生的研究

以甜菜8个品系种子、幼苗的茎节、茎尖、叶片(带叶柄)、腋芽等作外植体,对甜菜快繁、植株再生以及再生植株的移栽等技术进行了研究.结果表明,不同外植体在MS+6-BA 0.8～1.5mg/L+NAA 0.2～0.3mg/L培养基上,诱导效果最佳,而且幼苗生长健壮.生根培养在MS+NAA 1.0～1.5mg/L或MS+NAA 1.0～1.2mg/L+IBA0.2mg/L上,生根率可达85%以上,且根系发达,再生植株的移栽成活率达90%以上.建立了甜菜组培快繁及植株再生的技术体系,同时该再生体系可作为基因转化的受体系统.     

太子参壮苗生根及驯化移栽技术研究

本试验旨在优化太子参壮苗生根和驯化移栽技术。试验以MS为基础培养基,添加NAA、6-BA和马铃薯淀粉,采用L94(3)设计进行壮苗生根试验,不同配比基质进行栽移试验。通过以MS+蔗糖30 g/L为基础培养基,调节pH5.8,添加NAA 0.1、0.3、0.5 mg/L,6-BA 0、0.5、1.0 mg/L和马铃薯淀粉0、10、20 g/L进行研究,当基础培养基+NAA0.3 mg/L+6-BA0 mg/L+马铃薯淀粉10 g/L时诱导生根数最高,平均达26.125;不同移栽基质对太子参移栽成活率的影响较大,采用全腐殖土和腐殖土50%+珍珠岩50%作为移栽基质,成活率分别达97.5%和92.5%。     

芦笋离体快速繁殖中嫩茎增殖培养对根分化的影响

本试验对芦笋组织培养中影响生根的培养基激素配比、嫩茎增殖培养中激素配比及嫩茎增殖次数等因素进行了研究。结果表明,嫩茎增殖培养基激素配比和嫩茎增殖次数等因素对后续的茎段生根有重要影响。芦笋组培再生完整植株优化培养过程为:芦笋外植体(茎段)在J2(MS NAA 0.2 mg/L BA 0.5 mg/L)培养中诱导出嫩茎后,再在嫩茎增殖培养基J3(MS NAA 0.2 mg/L BA 0.1 mg/L)或J9(MS NAA 0.05 mg/L BA 0.1 mg/L)增殖1次(嫩茎增殖次数对后续生根影响极大),然后取增殖1次后的茎段接种到生根培养基G4(MS IBA 0.5 mg/L BA 0.05 mg/L 2.0 mg/L PP333)中进行生根培养,最高生根率可达90%以上。芦笋组培苗移栽成活率主要受诱导出的根质量的影响。通过几个因素的优化,最终可使芦笋根诱导率达90%~100%,移植成活率达100%。     

驱蚊香草快繁体系的建立及工厂化育苗主要影响因素研究

以驱蚊香草的幼嫩叶片作外植体,在含不同激素的不同培养基上进行丛生芽的诱导、芽的继代增殖、芽生根与移栽研究,以快速获得再生植株。结果表明,丛生芽诱导培养基以MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L较好,诱导率为96%;增殖培养基以MS（B5）+6-BA0.5mg/L +NAA0.1mg/L较好,增殖系数达8倍以上,且增殖芽生长好;壮苗培养基为MS（B5）+6-BA0.1mg/L+NAA0.2mg/L为好;生根培养基以1/2MS+NAA0.1 mg/L和MS+IBA0.2 mg/L为最佳,生根率达100%,幼苗生长势旺。影响工厂化育苗的主要因素有激素浓度、继代次数和移栽管理     

‘黑珍珠’番茄植株再生体系的研究

为了研究‘黑珍珠’番茄植株再生,以‘黑珍珠’番茄幼嫩叶片为外植体诱导愈伤组织,通过愈伤组织诱导培养、愈伤组织分化培养、不定芽增殖培养、生根培养和试管苗移栽,建立高效快速的‘黑珍珠’番茄再生体系。结果表明：最适宜的诱导叶片愈伤组织的培养基为MS+ 1.0 mg/L 6-BA+ 0.1 mg/L NAA,叶片外植体愈伤组织诱导率最高可达98.2%;诱导出的愈伤组织在MS+ 1.5 mg/L 6-BA+ 0.2 mg/L IBA培养基上能很好的分化出不定芽;MS+4.0 mg/L KT+ 0.01 mg/L IBA 培养基可实现不定芽芽增殖;最适宜的生根培养基为1/2MS+ (0.05~0.08) mg/L NAA,试管苗移栽成活率达92%。     

金钻蔓绿绒愈伤组织诱导及再生体系的建立

通过诱导愈伤组织途径,建立其组培快繁体系。以金钻蔓绿绒根茎为试验材料,分析不同浓度6-BA、IBA、NAA组合对金钻蔓绿绒愈伤组织、不定芽诱导、不定芽增殖、生根的影响。结果表明:金钻蔓绿绒的出愈率最高可达85.55%;当6-BA浓度为1 mg/L时增殖系数达到最高,达17.3,经金钻蔓绿绒植株再生体系扩繁的组培苗生根率达100%,移栽成活率为100%。愈伤组织诱导培养基:MS+1 mg/L 6-BA+0.2 mg/L IBA;不定芽诱导及增殖培养基:MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA;生根最佳培养基为:1/2 MS+0.5 mg/L NAA。将植株种植于草炭和珍珠岩3:1基质中,成活率达100%。     

‘凤丹’离体快繁工厂化技术研究

杨山牡丹‘凤丹’(Paeonia ostii T.Hong et J.X.Zhang var.lishizhenii B.A.Shen)抗逆性强,适应性广,主要用作观赏、药用和新型油料作物。‘凤丹’种子繁殖的个体差异大,组织培养不定芽增殖系数低,生根困难,移栽驯化难以成活,严重制约良种繁育和新品种培育。本研究以‘凤丹’鳞芽探究鳞芽表面消毒最佳方式;生长调节剂、蔗糖浓度、继代周期、防褐化剂对不定芽扩繁的影响;不定芽珍珠岩基质容器化扦插生根、活性炭(AC)-吲哚丁酸(IBA)集成诱导不定根发生和移栽驯化。初步建立组织培养工厂化育苗技术体系,鳞芽以有效氯1%的二氯异氰尿酸钠水溶液处理20 min,去污染成活率高达66.0%;不定芽在6-苄氨基嘌呤(6-BA)0.5 mg/L、吲哚-3-乙酸(IAA)0.05 mg/L的改良WPM培养基上增殖系数最高达2.73;蔗糖浓度为20 g/L、继代周期为35 d有利于不定芽分化;培养基中添加维生素C(VC)15 mg/L、核黄素(VB2)20 mg/L抗褐化效果最佳。AC-IBA集成诱导不定芽生根,AC 0.5 g/L、AC培养时间为15 d、IBA 15 mg/L诱导生根率53.3%,小植株移栽驯化成活率26.7%;不定芽珍珠岩基质容器化扦插,IBA 20 mg/L诱导生根率40%,驯化成活率97.8%。优化的‘凤丹’组织培养体系为工厂化良种繁育奠定技术基础。     

不同生长调节剂对金丝梅组培快繁的影响

本研究以云南野生金丝梅(Hypericum patulum)带休眠芽的茎段为外植体,研究了不同植物生长调节剂对其离体培养的影响,以建立金丝梅离体快繁技术体系。研究结果表明,腋芽诱导的适宜培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L,诱导率可达90%;适合腋芽增殖的培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+GA30.1 mg/L,增殖系数可达5.12;最佳生根培养基为1/2MS+IBA 0.5 mg/L+活性炭0.1 g/L,生根率为96.69%。炼苗移栽到草炭土∶珍珠岩=2∶1的基质中,成活率达100%,移栽到苗圃后成活率为100%。研究结果为金丝梅高效快速繁殖以及优良品种选育提供科学依据。     

勿忘我组织培养繁殖技术的研究

选用勿忘我蓝、紫花色的种子为材料,采用L9(34)正交试验筛选适宜勿忘我丛生芽诱导的培养基,采用两因素随机区组设计筛选适宜勿忘我生根培养基,并对移栽基质也进行了初步试验。试验结果表明:勿忘我蓝紫2个品种适宜的丛生芽诱导培养基为0.2 mg/L ZT+0.4 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA,丛生芽的增殖倍数为9.2和8.8,4种因素对勿忘我丛生芽的诱导作用的顺序为6-BA>ZT>NAA>KT;适宜的生根培养基为1/2MS+NAA 0.45 mg/L,生根率达到80%;适宜炼苗的培养基质为草炭∶珍珠岩=1∶1,成活率达88%。     

泽林考兰薄层细胞的再生体系

为建立泽林考兰薄层细胞的再生体系,以其试管苗茎尖薄层细胞为外植体,研究了不同激素浓度配比对其类原球茎诱导、增殖、分化及生根的影响。结果表明,茎尖薄层细胞在1/2MS+6-BA 2.0 mg/L+TDZ2.0 mg/L+NAA 0.1mg/L培养基上的类原球茎的诱导率最高,达53.3%;类原球茎在1/2MS+6-BA 2.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L培养基上培养40 d后,增殖系数为9.6,类原球茎在1/2MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.15 mg/L培养基上培养40 d后分化出小苗,分化率为89.7%;小苗在1/2MS+NAA 0.2 mg/L+AC 0.5 g/L培养基上生根培养40 d后,生根率达94.2%;小苗驯化移栽成活率达90%以上,长势良好。本研究通过以泽林考兰试管苗茎尖薄层细胞为外植体诱导出类原球茎,建立了泽林考兰薄层细胞再生体系,为泽林考兰试管苗产业化生产提供了新的途径。     

薄荷叶片离体再生体系的建立

本试验以薄荷试管苗叶片为外植体,研究了激素、光照、褐变抑制剂对不定芽诱导的影响,进而筛选出合适的生根培养基。研究结果表明:薄荷叶片最佳不定芽诱导的培养基为MS+1.4 mg/L TDZ+0.2 mg/L NAA+30 g/L蔗糖+5.5 g/L琼脂,诱导率达27.78%;暗培养20 d后再转接一次,叶片不定芽诱导率提高至64.29%,褐化率低至11.90%;最佳生根培养基为MS+0.1 mg/L NAA+20 g/L蔗糖+5.5 g/L琼脂,生根率达97.50%;再生苗经生根、炼苗后移栽,植株成活率达100%。本试验建立了薄荷叶片离体再生体系,为薄荷无菌苗生产和遗传转化研究提供了技术支撑。     

欧美杨"山地1号"组织培养再生系统的建立

欧美杨“山地1号”是美洲黑杨与欧洲黑杨(P.deltoides×P.nigracv.,‘shandis1’)杂交培育成功的杨树优良品种。本研究以叶片作为外植体进行组织培养,建立了欧美杨“山地1号”组织培养再生系统。分别用植物生长调节剂α-萘乙酸(NAA)和细胞分裂素6-苄氨基嘌呤(6-BA)诱导芽的分化,促进侧芽生长;用3-吲哚丁酸(IBA)诱发根生长,使根多而长,本研究筛选出诱导率最优的培养基和激素浓度:分化培养阶段——以1/2MH培养基(6-BA0.5mg/L与NAA0.05mg/L)诱导分化获得再生芽;继代培养阶段——以MH培养基(6-BA0.5mg/L与NAA0.05mg/L)进行继代培养获得丛生芽;抽茎培养阶段——以MH培养基(6-BA0.1mg/L与NAA0.05mg/L)进行抽茎培养获得丛壮无根苗;生根培养阶段——以1/2MH培养基(IBA0.3mg/L)诱导生根。然后,选择根系发达、主茎高达2～3cm且木质化程度高的幼苗移栽到塑料大棚中,约14d后长出新根即可成活,移栽成活率达90%。本欧美杨组织培养再生系统可用于基因的遗传转化。     

濒危植物半枫荷Semiliquidambar cathayensis组织培养快繁技术研究

以当年生半枫荷带有腋芽的茎段和幼叶作为外植体,开展组织培养试验研究。结果表明,半枫荷叶片在初代培养基MS+BA 2 mg/L+NAA 0.5 mg/L上愈伤组织诱导率为92%,芽诱导率为16.7%;腋芽在初代培养基MS+BA 1 mg/L+NAA0.1 mg/L上腋芽诱导率为58%,茎段能直接诱导出芽,是半枫荷快繁的主要外植体。新生芽在继代增殖培养基MS+6 BA0.5 mg/L+NAA 0.05 mg/L上芽增殖系数为3.93,增殖培养基以MS+6 BA(1～0.5)mg/L+NAA(0.01～0.05)mg/L较好;丛生芽生根培养基以1/2 WPM+NAA 2 mg/L+活性炭0.2%为宜,生根率可达90%以上;松林腐殖土加珍珠岩(4∶1)比较适合半枫荷的生长,移栽成活率为100%,苗木长势好,叶色绿,可提供大量半枫荷优质种苗。     

五种药用石斛快速繁殖的研究

为解决石斛的快速繁殖和提高组培苗的成活率,以MS为基本培养基,把<中华人民共和国药典(2000版)>(以下简称中国药典)收载的5种药用石斛的茎段作为外植体进行了组培和快繁,并根据石斛的生物学特性,配制了多种基质进行炼苗.结果表明:不同种类的石斛在诱导侧芽萌发时所需培养基不同,但是在增殖、壮苗生根以及炼苗移栽时所需基质却具有相似性.环草石斛、铁皮石斛、束花石斛、马鞭石斛和金钗石斛在诱导侧芽萌发时的最适培养基分别为:MS NAA 0.1 mg/L 6-BA 1.0mg/L、MS NAA 0.1 mg/L 6-BA 1.5 mg/L、MS NAA0.5 mg/L 6-BA 2.0mg/L、MS NAA1.0mg/L 6-BA 2.0 mg/L、MS NAA0.1 mg/L 6-BA 2.0 mg/L.这5种石斛增殖、壮苗生根的最适培养基分别为:MS NAA 0.1 mg/L 6-BA 3.0 mg/L、1/2MS NAA 0.7 mg/L.移栽最适基质为:碳酸盐小石子:木屑=1:2,再覆盖1 cm厚的苔藓,幼苗移栽成活率达95%以上.本文首次报道了在实验室里获得马鞭石斛和束花石斛这两个种的组培苗,并初步解决了石斛试管苗脱瓶移栽成活率低的问题,使下一步进行大面积人工栽培成为可能.