草莓茎尖培养脱毒效果研究

以草莓"丰香"品种为材料,利用匍匐茎剥取茎尖,以茎尖培养结合改良热处理、冷处理、二次脱毒等方法来进行草莓脱毒研究,用电镜及野生草莓小叶嫁接法进行鉴定,结果表明,草莓脱毒效果与剥取的茎尖大小有关,茎尖越小,脱毒效果越好.以0.5mm(毫米)大小剥取茎尖,直接剥取茎尖法不能够彻底清除病毒,而二次脱毒法、改良热处理 茎尖培养法、冷处理 茎尖培养法等获得的植株都没有检测到病毒,脱毒效果良好.其中改良热处理 茎尖培养法的茎尖成活率最高,达47.37%.因此最适宜的脱毒法为改良热处理 茎尖培养法,即先将草莓匍匐茎放在40℃热水中处理4h(小时),再剥取≤0.5mm(毫米)大小的茎尖进行培养,脱毒效果良好.     

草莓离体培养产生匍匐茎研究

在草莓茎尖脱毒增殖培养时使用５００ｍｌ罐头瓶作为培养容器，适当延长继代时间，试管苗能产生匍匐茎。茎尖分化与增殖培养都以ＳＤ１２基最好，分化率可达８０％以上，增殖系数达８．８７，且试管苗生长健壮、叶色浓绿叶柄粗壮。试管苗在１／２ＭＳ２基上２１０－１５ｄ既可１００％生根。匍匐茎的发生是与增殖培养基，每株试管苗的培养基占有量、培养容器及继代时间有关。     

苹果优良矮砧S18,S20微茎尖脱毒组织培养技术研究

通过对武乡海棠优良矮砧Ｓ１８、Ｓ２０两个单系的０．２ｍｍ微茎尖脱毒组织培养技术研究，解决了微茎尖切割、接种、分化及生根移栽等一系列技术难题，获得了Ｓ２０、Ｓ１８一批脱毒试管苗及移栽壮苗。分化数分别达２．０和３．６，生根率达７６．１％和９０．０％，平均根长２ｃｍ以上，平均根数５要，移栽成活率达７８％。     

大樱桃脱毒苗与普通苗对比观察

大樱桃脱毒苗与普通苗对比观察我们采用热处理结合茎尖分生组织培养，经多次重复后大樱桃脱毒率平均达９８％。１９９４年开始，对大樱桃脱毒苗和普通苗（由脱毒试管苗经温室多次摩擦接种各类病毒）进行了对比观察。大樱桃品种为斯坦勒、萨韦脱和佐藤锦，以２ｍ×３ｍ株行...     

不同苹果品种和砧木的热处理脱病毒效应

以１３个苹果品种、砧木为试材，采用热处理和茎尖培养相结合的方法脱除病毒。结果表明：Ｍ４及国光的脱病毒效果最好，热处理３０天以上，脱毒率为８３．３％；金矮生和长富２号经２１天热处理，脱毒率也可达８０％；北斗和新乔纳金的脱毒率稍低，但也比传统热处理绿枝接高３６．７％和３０．０％。另外，各试材热处理后的死苗率和死苗高峰期有较大差异，而且茎尖培养绿枝芽的分化反应也不同。     

不同苹果品种和砧木的热自理脱病毒效应

以１３个平果品种、砧木为试材，采用热处理和茎尖培养相结合的方法脱除病毒。结果表明：Ｍ４及国光的脱病毒效果最好，热处理３０天以上，脱毒率为８３．３％；金矮生和长富２号经２１天热处理，脱毒率也可达８０％；北斗和新矫纳金的脱毒率稍低，但也比传统热处理绿枝接高３６．７％和３０．０％。另外，各试材热处理后的死苗率和死苗高峰期有较大差异，而且茎尖培养绿枝芽的分化反应也不同。     

大蒜花叶病原病毒的鉴定和茎尖脱毒效果

用洋葱黄矮病毒（ＯＹＤＶ）等９种酶标抗体，以常规酶联夹心法检测国内外５７份大蒜品种带病毒状况，同时，以诱捕修饰免疫电镜技术复核酶联法进行检测，结果表明，被检的５７份大蒜品种带有：洋葱黄矮病毒，韭葱黄条病毒（ＬＹＳＶ），亚实基隆葱潜隐病毒（ＳＬＶ），马铃薯Ｙ病毒（ＰＶＹ），马铃薯Ａ病毒（ＰＶＡ），马铃薯Ｓ病毒（ＰＶＳ），马铃薯Ｍ病毒（ＰＶＭ），康乃馨潜隐病毒（ＣＬＶ）和烟草花叶病毒（ＴＭＶ）等９种病毒。 诱捕修饰免疫电镜图象表明，用上述９种病毒包被的电镜载网诱捕到大量的同源病毒粒子，这些病毒粒子又分别被同源抗体分子修饰，形成连续完整的抗体分子外套。用洋葱黄矮病毒等９种酶标抗体检测茎尖组织培养再生的８０株大蒜试管苗看出，完全脱掉９种病毒的试管苗占３０％，完全未脱掉病毒、带９种病毒的试管苗占５％其余的试管苗都程度不同地脱掉了所带的几种病毒。     

不同培养基及附加成分对大樱桃脱毒茎尖初分化的影响

不同培养基及附加成分对大樱桃脱毒茎尖初分化的影响用热处理结合茎尖分生组织培养，对已成话的大樱桃茎尖（长０．２～０．４ｍｍ，带１个叶原基）进行脱毒，然后以ＭＳ和Ｂ５为基本培养基，附加不同浓度的ＩＢＡ、６—ＢＡ及生长抑制剂ＰＰ３３３等诱导茎尖的初分化，每...     

草莓病毒脱除方法的比较与评价

以感染病毒的草莓品种宝交早生为试材,利用多重RT-PCR同时检测SMoV和SMYEV技术,对茎尖培养、热处理、抗病毒药剂处理3种脱毒方法进行了比较和评价,以期为草莓脱毒苗培育提供重要参考.结果表明,0.2mn茎尖和0.5 mm茎尖都能够有效地脱除SMoV和SMYEV;热处理能够脱除草莓试管苗中的SMoV,但不能脱除SMYEv,39℃恒温处理30 d,SMoV脱除率达到63.0%;利巴韦林不能清除草莓植株体内的SMov和SMYEV.综合脱毒率和茎尖分化成苗率2个指标,认为0.5 mm茎尖培养是适宜的草莓病毒脱除方法.     

苹果试管苗热处理脱毒法的研究

苹果褪绿叶斑病毒（简称ＣＬＳＶ）、茎沟病毒（简称ＳＧＶ），是感染苹果的两种重要的潜隐性病毒，在苹果上通常引起慢性衰退症。当用感病材料嫁接时，往往导致衰退病急性暴发，给生产造成毁灭性损失。ＣＬＳＶ和ＳＧＶ均是通过嫁接传染，目前尚无有效的预防和治疗方法，而采用脱毒方法杜绝苗木带毒，把好育苗关，是防治病毒的根本出路。热处理是脱除苹果病毒的主要方法，这在国内已有较多的报道。但直接对试管苗进行热处理脱毒，尚未见报道。本试验系统研究了茎尖培养的试管苗，在光照培养箱内直接进行热处理的方法及优点，并采用酶联免疫…     

草莓组培苗的病毒检测与其果实品质分析

以2种不同大小的草莓茎尖分生组织为试材,进行组织培养,分别获得再生小植株并进行病毒检测,利用上述脱毒母株和农家自留种苗分别繁育匍匐茎子苗,研究了2种子苗的病毒发生率与果实品质,以期通过草莓脱毒试验为脱毒苗的应用推广提供参考依据。结果表明：不同草莓品种的病毒含量有差异,并且病毒外壳蛋白表达量与其核酸转录量一致。切取草莓匍匐茎约5 mm茎尖分生组织进行第一次脱毒,其部分再生小植株仍然携带了低浓度病毒。与之相比,再切取试管苗约0.5 mm茎尖组织进行第二次脱毒,其再生率虽然仅为31%,但是二次脱毒株均为无毒苗。利用已鉴定的脱毒母株和农家自留种苗分别繁育匍匐茎子苗,经过定植后发现2种子苗的病毒病发生率差异极显著。二次脱毒母株繁育的子苗果实可滴定酸含量显著低于农家自留种苗(P<0.05),而可溶性总糖等品质参数差异不显著。综上所述,以0.5 mm茎尖分生组织为外植体进行草莓组织培养,可以获得优质的脱毒母株,相关研究成果有助于未来草莓良繁体系建设。     

梨树苹果茎沟病毒的脱毒技术研究

１９９３—１９９６年,采用热处理材料茎尖培养及试管苗热处理方法,对１３个梨品种及矮化砧材料进行苹果茎沟病毒脱毒试验的结果表明,二者对茎沟病毒的脱除率分别较单纯茎尖培养高５７．０％和６２．４％。脱毒苗生根率和移栽成活率分别达７０％和８０％。     

通过玻璃化超低温处理脱除草莓轻型黄边病毒(SMYEV)研究

以草莓品种明宝为材料,取茎尖做初代培养,继代扩繁5次后,取2mm左右的茎尖,利用玻璃化超低温技术对SMYEV进行脱除,并利用结合内标的多重RT-PCR技术对再生植株进行病毒检测。结果表明,在病毒脱除过程中,预培养蔗糖浓度为0.5mol/L,处理3d;装载处理为25℃,60min;玻璃化处理为0℃,120min;液氮处理60min后,进行40℃水浴2min,草莓茎尖的存活率为76%,而草莓轻型黄边病毒的脱除率为95%。只有通过液氮处理才可以脱除该病毒,液氮处理前的玻璃化处理脱毒率为0。利用超低温脱毒法可以简便有效地脱除SMYEV。     

无病毒草莓良种繁育技术体系的建立

利用茎尖分生组织（０．３ｍｍ）培养技术，在ＭＳ附加１．３２μｍｏｌ６－苄基嘌呤的培养基上培养，获得了早美光、矮丰、瑞星、奇妙、北斗和全明星６个草莓品种的无病毒苗。将微体繁殖技术与大田生产相结合，建立了６个草莓品种从无病毒组增“原原种”苗到“生产”用苗的良繁技术体系，年内增殖可达数万倍以上，比传统的热处理脱毒、网室繁育提高了效率。     

草莓脱病毒技术的研究与应用浅析

综述了几种脱除草莓病毒的方法及效果,包括热处理、茎尖培养、热处理结合茎尖培养、花药培养及病毒抑制剂结合茎尖培养。热处理与茎尖培养相结合可使草莓脱病毒率达72.7%～100%,效果稳定,是较理想的脱病毒方法。花药培养脱病毒率达94%～100%,若能控制其在脱病毒中很少发生的变异问题,将会成为应用前景很好的草莓脱病毒技术。     

草莓热处理脱病毒的研究

试验研究了草莓盆栽苗及茎尖组培苗热处理的脱毒效果,并对盆栽苗热处理致死原因作了初步探索。结果表明,影响草莓盆栽苗热处理寿命的一个重要因素是根际温度。采用根系保护变温法(39℃/18℃昼/夜),由于根际温度变低(29℃/14℃/昼/夜),“绿色种子”品种苗寿命达30—90天。经90天热处理后,脱毒率达66％。热处理期间,分期取母株上原有的匍匐茎进行茎尖培养(外植体为1.0毫米),其组培苗脱毒效果(y)与热处理天数(x)呈极显著的正相关(y=24.45+1.33x,r=0.9388匍匐茎最长寿命达30天,相应的茎尘组培苗脱毒率为88.9％。采用茎尖组培苗进行热处理脱毒,“女峰”39℃/18℃变温30天结合38℃恒温30天;“明晶”,“女峰”38℃恒温46天的脱毒率均达到100％;“80—9—4”,“女峰”39℃/18℃变温60天,脱毒率分别为82％和88％。     

马哈利樱桃离体茎尖超低温保存的研究

用玻璃化法超低温保存马哈利樱桃；切取经５℃低温驯化３０d的离体茎尖置于固体培养基 （ＭＳ＋０．７mol/Ｌ蔗糖）预培养２４h，在含１mＬ５０％甘油＋５０％蔗糖的保护液中处理８０min后浸入液氮。２５℃水浴快速化冻２min，然后接种到标准培养基上。２１d后调查，茎尖存活率达８４．６％。     

采用“顶接法”培育柑桔无病毒苗

本试验主要对常规的柑桔茎尖嫁接脱毒技术进行了改进，将传统的“Ｔ”法茎尖嫁接改为顶端横切面直接嫁接。结果表明，改进的顶接法操作简便、迅速，成活率较高，达５１．０４％，较倒“Ｔ”法成活率３２．９７％净增１８．０４％，且新法嫁接苗的生长速度明显快于倒“Ｔ”法，试验还得出不同的培养基质对茎尖嫁接苗的成活成有差异，采用ＭＳ液体培养基试管内培养成活率为３５．７％，而在营养土内培养成活率达４９．５％。     

“男恋姬”苹果的茎尖培养与快繁

以日本早熟苹果 新品种“男恋姬”为试 材，研究苹果茎尖离体培养与快繁，结果表明，起始培养以 Ｍ Ｓ＋ Ｂ Ａ１ ＋ Ｉ Ａ Ａ０２ ＋ Ｇ Ａ０１ ＋ Ｖ Ｃ８ 为 最佳。继代 增殖阶段以 Ｍ Ｓ［（ Ｎ Ｈ４） ２ Ｓ Ｏ４６４９］ ＋ Ｂ Ａ１ ＋ Ｉ Ｂ Ａ０２ 为最佳。生根培养以１／２ Ｍ Ｓ＋ Ｉ Ｂ Ａ０２ ＋ Ｎ Ａ Ａ０１ 效果最好。试管苗移栽前经强光闭瓶炼 苗２０ｄ ，移 栽后气 温控制 在２０ ℃～２８ ℃，空气相 对湿 度在 ９０ ％ 以上， 光强 在 ２００００ Ｌ Ｘ时，并经 常 喷 药 剂 保 护 防 止 根 颈 发 病， 成 活 率 可 达８０ ％ 。     

芋脱毒快繁技术研究

对不同激素类型、激素浓度对芋茎尖组织分化的影响进行了研究，利用双抗夹心酶联免疫法检测芋茎尖分生组织分化的再生植株带病毒情况，并进行脱毒试管芋大田评比试验。结果表明：茎尖分化培养基为MS＋6-BA2．0mg·L^-1＋NAA0、2mg·L^-1＋3．0％蔗糖，小茎尖的脱毒效果最好，脱毒率达100％，脱毒试管芋种植大田较其常规种芋增产20.14％。