鹰嘴豆愈伤组织诱导及培养条件的初步探索

为了研究鹰嘴豆愈伤组织诱导的培养条件,确定了种子消毒方法为75%乙醇处理3 min,5%次氯酸钠溶液处理8 min,无菌水清洗后播种;鹰嘴豆萌发培养基为1/2MS;成苗培养基为1/2MS+0.5 mg/L IBA;外植体茎段长度为0.8 cm较为合适;2,4-D和6-BA激素浓度比例为1∶1时对愈伤组织形成有利,添加过多有抑制作用,诱导愈伤组织形成的培养基为B5+1 mg/L 2,4-D+2 mg/L 6-BA。     

棉花雄性不育材料的组织培养初探

利用组织培养方法繁殖棉花不育系。通过优化培养基组合程序研究,对污染较严重的棉花不育系单株材料,先用70%酒精浸泡10~15 s,倒出后马上用无菌水冲洗,加入0.1%升汞灭菌8 min,用无菌水冲洗5~6次。愈伤组织诱导培养基诱导效果最佳的是MSB 2,4-D 0.1 mg/L IAA 0.1 mg/L KT 0.1 mg/L,最适合愈伤组织分化的培养基为MSB IAA 0.1 mg/L 2-IP 3.0 mg/L CM 100 ml/L AC 2.5 g/L。     

续随子愈伤组织诱导与不定芽分化探讨

为建立续随子的高频再生体系,从续随子外植体除菌方案与外植体选择、愈伤组织诱导以及不定芽分化等多方面进行了探索.结果显示,70%乙醇处理15s+无菌水冲洗3次+4%次氯酸钠处理5 min+无菌水冲洗5次为最佳外植体灭菌方案;根、茎和叶中,仅有叶片能诱导出愈伤组织;虽然多个激素组合可以诱导续随子叶片产生愈伤组织,但在MS培养基,TDZ 0.2 mg/L或0.4 mg/L以及TDZ/NAA(0.5/0.1 mg/L)组合,光下培养时,愈伤组织诱导率达到100%,且出愈时间短、愈伤生长速度快;新鲜愈伤组织只有在MS培养基,TDZ 0.4 mg/L或TDZ/NAA (0.5/0.1 mg/L)才可分化出单个不定芽(无丛生芽),且分化率也仅为25%和15%.     

三角梅外植体消毒和愈伤组织诱导研究

[目的]探索三角梅的最佳消毒时间和最佳愈伤组织诱导培养基。[方法]采用不同消毒时间对三角梅的7种外植体进行灭菌,并用不同激素与浓度组合的培养基诱导愈伤。[结果]三角梅的最佳外植体为半木质化茎段;最佳消毒方法为先用浓度75%酒精溶液灭菌30 s,无菌水冲洗5次,再用浓度0.1%升汞溶液消毒9 min,最后用无菌水冲洗7~8次;最佳诱导培养基为MS＋2.0 mg/L 6-BA＋1.0 mg/L NAA。[结论]获得了三角梅外植体的最佳消毒方式和最佳愈伤组织诱导培养基,为三角梅组织培养体系的建立奠定了基础。     

长寿花叶片离体快繁技术研究

以长寿花幼嫩叶片为外植体,研究不同灭菌时间对长寿花幼嫩叶片再生能力的影响以及不同激素配比对愈伤组织诱导、不定芽诱导和生根诱导的影响。结果表明:长寿花幼嫩叶片最佳的灭菌方式为75%酒精消毒30 s,无菌水冲洗4次,再用0.1%升汞消毒7 min,无菌水冲洗5次;愈伤组织诱导的最适培养基配方为MS+6-BA 0.5 mg/L+2,4-D 0.2 mg/L;不定芽诱导分化的最适培养基配方为MS+6-BA2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L;不定芽诱导生根的最适培养基配方为1/2 MS+IBA 0.2 mg/L。     

云南松胚性愈伤组织诱导研究

以未成熟云南松种子为研究材料,选择合适的消毒方法,进行合子胚发育状态观测,从外植体类型、采果母树基因型、培养基种类3方面探讨其对胚性愈伤组织诱导的影响,并鉴定了胚性愈伤组织。结果表明:75%乙醇消毒30 s,无菌水冲洗2次,2%氯酸钠浸泡15 min,无菌水冲洗4～5次为种子最佳消毒方案;不同外植体类型对出愈率影响不显著,但对胚性愈伤组织的形成具有极显著影响,取带胚乳的合子胚作为外植体的胚性愈伤组织诱导率可达34.3%,而合子胚作为外植体时诱导率为14.3%;采用14种培养基接种,平均诱导率在2.2%～17.6%之间,其中接种于MLV+2, 4-D 2.0 mg/L+6-BA 1.0 mg/L+KT 1.0 mg/L+肌醇0.1 g/L,1/2LM+2, 4-D 2.2 mg/L+6-BA 1.1 mg/L+AgNO3 3.4 mg/L+肌醇0.1 g/L,DCR+6-BA 0.63 mg/L+KT 0.61 mg/L+NAA 2.0 mg/L+肌醇0.2 g/L+麦芽糖15 g/L培养基的胚性愈伤诱导率分别为17.6%、17.6%、16.5%,表明该3种培养基适合于云南松的胚性愈伤诱导;8株云南松优株未成熟带胚乳合子胚的胚性愈伤组织平均诱导率为5.1%～19.4%,最高的是076号云南松,最低的是075号云南松,表明基因型对胚性愈伤组织诱导具有极显著的影响。     

黑芝麻愈伤组织的诱导及分化的初步研究

以黑芝麻(Sesamum indicum DC)成熟种子无菌苗的子叶、子叶节、下胚轴作为外植体,选用MS基本培养基,并设置4种蔗糖浓度作愈伤组织诱导培养基,以2,4-D、6-BA、IAA、KT组成16种生长调节剂浓度配伍的分化培养基,对愈伤组织的形成及分化进行了研究.结果表明,蔗糖浓度30 g/L时对子叶、子叶节愈伤组织诱导较为有利,蔗糖浓度40 g/L时对下胚轴愈伤组织诱导较为有利,分化培养基为MS 6-BA 2.0 mg/L IAA 1.5 mg/L时,子叶愈伤组织的分化率达30.0%,其效果较好.     

苜蓿胚性愈伤组织诱导及植株再生研究

以苜蓿5～7 d苗龄无菌苗的子叶和下胚轴为外植体,研究培养基中不同激素和浓度配比对苜蓿愈伤组织诱导和分化的影响。结果表明,MS+2,4-D 2.0 mg/L+6-BA 1.0 mg/L愈伤组织诱导率达100%,且愈伤组织状态良好,增殖速度快。MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.05 mg/L为苜蓿胚性愈伤组织诱导的适宜培养基,诱导率为37.8%。胚性愈伤组织分化成苗培养基为MS+6-BA0.2 mg/L+NAA 0.01 mg/L,生根培养基为1/2MS+NAA 0.02 mg/L+蔗糖10.0 g/L。     

两种大花萱草组织培养繁殖的研究初探

「目的」提高大花萱草的繁殖效率。「方法」以花梗花蕾为材料用70%酒精浸泡30s,然后用0.1%的升汞水浸泡10min,无菌水冲洗5次,消毒处理后切成3～5mm的切片接种于以MS为基本培养基添加6-BA、KT、NAA等外源激素的培养基中,研究了不同条件对愈伤组织诱导芽形成和芽继代增殖,生根和移栽效果的影响。「结果」以MS为基本培养基,添加6-BA1.0～1.5(mg/L)和NAA0.1(mg/L)为较适宜的外植体诱导愈伤组织和愈伤组织诱导芽的培养基。增殖培养基,紫风以6-BA1.0(mg/L)和NAA0.025～0.05(mg/L)为佳;祥和以6-BA0.5～1.0(mg/L)和NAA0.05(mg/L)为佳。生根培养基以1/2MS添加NAA0.8(mg/L)为佳。组培苗移栽后45d成活率达到98%。     

大花金挖耳无菌外植体的获得及愈伤组织诱导的初步研究

以大花金挖耳(C arp esium m acrocepha lum F ranch.et Sav)种子为材料,进行了种子消毒和愈伤组织诱导及继代的初步研究。结果表明,对大花金挖耳种子进行消毒的最佳条件为,以体积分数70%的乙醇消毒5 m in后,再用50%的N aC lO3处理30 m in。在大花金挖耳无菌苗的根形成愈伤组织的正交试验中,基本培养基对愈伤组织诱导率的影响最大,NAA次之,6-BA影响最小,对愈伤组织诱导的较优组合是B5+NAA 3.0 m g/L+6-BA 0.2m g/L,诱导率为100%;在优化诱导愈伤组织的激素浓度配比试验中,B5+NAA 2.0~3.0 m g/L+6-BA 0.2~0.4m g/L对大花金挖耳愈伤组织的诱导率为100%,且产生的愈伤组织多为淡黄色、质地疏松、生长势极好、褐化时间长,适合于大花金挖耳愈伤组织的诱导。在培养基中分别添加500 m g/L VC和10 000 m g/L PVP能抑制大花金挖耳愈伤组织的褐变,且有利于愈伤组织的继代。     

意大利生菜组织培养体系的建立

[目的]建立意大利生菜组织培养体系。[方法]以意大利生菜(Lactuca sativa L.var.ramosa Hort.)种子为试验材料,用不同有效氯含量(0、0.5%、1.0%、2.0%、4.0%)的漂白水灭菌,于MS培养基上培养无菌苗。取4~5 d苗龄的无菌幼苗子叶,在添加不同浓度激素的MS培养基上诱导愈伤组织,并进一步诱导生芽、生根,筛选最佳诱导激素配比及激素浓度。[结果]意大利生菜种子经有效氯含量1.0%的漂白水处理,于MS培养基上培养可获得意大利生菜无菌苗。无菌幼苗子叶在MS+0.5 mg/L 6-BA+0.20 mg/L NAA+30 g/L蔗糖+7 g/L琼脂的培养基上,可以得到理想的意大利生菜愈伤组织;在MS+0.25 mg/L 6-BA+0.20 mg/L NAA+30 g/L蔗糖+7 g/L琼脂的培养基上,最有利于意大利生菜愈伤组织不定芽的发生且对后期生根有良好的诱导作用。[结论]配合使用一定浓度的6-BA和NAA可有效建立意大利生菜组织培养再生体系,为进一步建立意大利生菜遗传转化体系奠定基础。     

盆栽小菊组培快繁体系的建立及玻璃化研究

以盆栽小菊“子午线”的花瓣作为外植体，研究不同消毒时间对外植体污染率的影响，以及不同激素浓度对花瓣诱导愈伤组织和不定芽分化的影响；以及对缓解玻璃化苗方法的探讨。结果表明，当使用次氯酸钠处理花瓣时，7 min是最佳处理时间。MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA1.0 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂5 g/L是诱导花瓣愈伤组织的最佳培养基，诱导率达98%。不定芽分化最适培养基为MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂5 g/L,分化率达90.30%。培养基MS+6-BA 0.2 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂5 g/L是缓解菊花玻璃化现象的最佳配方，转化为正常苗的转化率最高，可达98.36%。     

南方型紫花苜蓿Millennium组织培养及其再生

以南方型紫花苜蓿Millennium种子发育5~7 d无菌苗的子叶、下胚轴为外植体,对紫花苜蓿愈伤组织诱导和植株再生进行了研究。结果表明,在愈伤组织诱导中,下胚轴为最佳外植体材料,出愈率随着2,4-D质量浓度的增加呈明显的升高趋势,最佳愈伤组织诱导培养基为2,4-D 2 mg/L+6-BA 0.5 mg/L,诱导率达到100%。紫花苜蓿诱导最佳愈伤组织的分化培养基为MS+KT 1.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L,下胚轴愈伤组织分化率达到58%,子叶愈伤组织分化率达到40%。将苗切下转接到1/2 MS+20 g/L蔗糖质量浓度时,培养6 d即可诱导生根,诱导生根率达到100%,完成植株再生仅需60~70 d。成功地建立了南方型Millenni-um紫花苜蓿子叶和下胚轴的离体培养再生途径,并获得了再生植株。     

尖萼耧斗菜外植体消毒及愈伤组织诱导的研究（摘要）

[目的]研究尖萼耧斗菜外植体消毒及愈伤组织的诱导。[方法]采用不同消毒剂种类和浓度,对尖萼耧斗菜种子进行消毒处理,研究其污染率和污染速率,寻找建立无菌苗培养系最适宜的方法;以尖萼耧斗菜种子获得的无菌苗的根、茎、叶片为外植体,通过在MS基本培养基中附加不同激素配比,筛选最佳外植体和最佳培养基配方。[结果]外植体材料最适宜的灭菌处理方法为：先将外植体在75%酒精中浸30s,用无菌水冲洗5遍,再将其用0.2%升汞液浸泡2min,再用无菌水冲洗5遍。该消毒方法使污染率最低、发芽率最高,并且获得的无菌苗长势最好;诱导尖萼耧斗菜胚性愈伤组织的最佳外植体为幼根;诱导胚性愈伤组织的最佳培养基为MS0.6mg/L2,4-D＋0.5mg/L6-BA。[结论]该研究为尖萼耧斗菜的大规模生产提供了技术支持,并为其药用和观赏价值的最大发挥作出了贡献。     

尖萼耧斗菜外植体消毒及愈伤组织诱导的研究(摘要)(英文)

[目的]研究尖萼耧斗菜外植体消毒及愈伤组织的诱导。[方法]采用不同消毒剂种类和浓度,对尖萼耧斗菜种子进行消毒处理,研究其污染率和污染速率,寻找建立无菌苗培养系最适宜的方法;以尖萼耧斗菜种子获得的无菌苗的根、茎、叶片为外植体,通过在MS基本培养基中附加不同激素配比,筛选最佳外植体和最佳培养基配方。[结果]外植体材料最适宜的灭菌处理方法为:先将外植体在75%酒精中浸30s,用无菌水冲洗5遍,再将其用0.2%升汞液浸泡2min,再用无菌水冲洗5遍。该消毒方法使污染率最低、发芽率最高,并且获得的无菌苗长势最好;诱导尖萼耧斗菜胚性愈伤组织的最佳外植体为幼根;诱导胚性愈伤组织的最佳培养基为MS0.6mg/L2,4-D+0.5mg/L6-BA。[结论]该研究为尖萼耧斗菜的大规模生产提供了技术支持,并为其药用和观赏价值的最大发挥作出了贡献。     

尖萼耧斗菜外植体消毒及愈伤组织诱导的研究

[目的]研究尖萼耧斗菜外植体消毒及愈伤组织的诱导。[方法]采用不同消毒剂种类和浓度,对尖萼耧斗菜种子进行消毒处理,研究其污染率和污染速率,寻找建立无菌苗培养系的最佳方法;以尖萼耧斗菜种子获得的无菌苗的根、茎、叶片为外植体,通过在MS基本培养基中附加不同激素配比,筛选最佳外植体和最佳培养基配方。[结果]外植体材料最适宜的灭菌处理方法为：先将外植体在75%酒精中浸30 s,用无菌水冲洗5遍,再将其用0.2%升汞液浸泡2 min,再用无菌水冲洗5遍。该消毒方法使污染率最低、发芽率最高,且获得的无菌苗长势最好;诱导尖萼耧斗菜胚性愈伤组织的最佳外植体为幼根;诱导胚性愈伤组织的最佳培养基为MS＋0.6 mg/L2,4-D＋0.5 mg/L6-BA。[结论]为尖萼耧斗菜的大规模生产提供了技术支持,并为其药用和观赏价值的最大发挥作出了贡献。     

番茄种子消毒方法及愈伤组织诱导的初步研究

以大红番茄、大黄番茄及红牛奶番茄为材料,研究了不同种子消毒方法和基因型对番茄种子萌发的影响,以及激素配比对愈伤组织诱导的影响。结果表明,种子消毒的最好方法是采用3%的次氯酸钠灭菌3min。大红番茄的发芽率最高(86.25%),红牛奶番茄的发芽率较低(38.75%),表明各基因型之间发芽率差异较大。大红番茄和红牛奶番茄最佳的子叶愈伤组织诱导培养基为MS+0.50mg/L IAA+1.0mg/L BA,愈伤组织诱导率分别为81.25%、50.00%;大黄番茄子叶愈伤组织诱导最佳培养基为MS+0.20mg/L IAA+1.00mg/L BA,愈伤组织诱导率为68.75%;大红番茄、大黄番茄及红牛奶番茄茎段愈伤组织诱导最佳培养基均为MS+0.50mg/L IAA+1.00mg/L BA,其愈伤组织诱导率分别为75.50%、68.75%、37.50%。     

马铃薯新品种青薯9号高效再生体系的建立

为了建立马铃薯新品种青薯9号的遗传转化体系,以青薯9号无菌苗为材料,通过对其茎段和叶片再生体系的筛选,优化了培养基添加的最佳植物激素配比浓度.试验结果表明:无菌苗的茎段比较适合诱导愈伤组织并且愈伤组织的诱导需要光照.青薯9号马铃薯茎段外植体愈伤组织诱导的最佳基础培养基为:MS无机成分+蔗糖25 g/L+琼脂6 g/L+肌醇100 mg/L+烟酸2mg/L+盐酸吡哆醇(维生素B6)0.5 mg/L+盐酸硫胺素(维生素B1)0.4 mg/L+叶酸0.25mg/L+生物素0.05 mg/L.愈伤组织诱导丛生芽分化的最佳基础培养基是:MS培养基+蔗糖25 g/L+琼脂8 g/L+酪蛋白的酶水解物1 g/L.最佳愈伤组织诱导培养基激素配比为:2.0 mg/L NAA +6.0 mg/L 6-BA;最佳分化培养基激素配比为:0.1 mg/L NAA+ 3.0 mg/L 6-BA+ GA3 3.0 mg/L+ ZTR 1.0 mg/L.     

花叶良姜离体再生体系的建立

【目的】建立花叶良姜高频高效离体再生体系,为其种苗周年规模化生产提供新方法。【方法】以花叶良姜种子为材料,开展无菌萌发、愈伤组织诱导、愈伤组织分化及生根培养研究。【结果】花叶良姜种子依次经75%乙醇处理60 s、0.1%升汞处理10 min、5%次氯酸钠处理3 min,污染率仅5.00%,萌发率为75.83%;适宜花叶良姜愈伤组织诱导的培养基为MS+1.50 mg/L 6-BA+0.30 mg/L 2,4-D,适宜花叶良姜愈伤组织分化的培养基为MS+2.00 mg/L TDZ+0.10 mg/L 2,4-D,分化系数达10.03;花叶良姜组培苗最佳生根培养基为1/2MS+1.00 mg/L ABT1号生根粉,生根率为98.00%。【结论】通过愈伤组织途径可建立花叶良姜的离体再生体系。     

叉叶茅膏菜组培快繁的研究

以叉叶茅膏菜花序为试验材料,利用器官脱分化再分化发生途径,对影响叉叶茅膏菜快繁体系的关键环节进行了研究,结果表明:叉叶茅膏菜外植体最佳消毒处理方式:先用洗衣粉水清洗1遍,在自来水下冲洗15～20 min,75%酒精处理30 s后用0.15%氯化汞溶液消毒8 min,最后用0.5%次氯酸混合液处理15 min;诱导愈伤组织的最佳培养基:MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+蔗糖30 g/L、MS+KT 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L;最适宜的愈伤组织分化培养基:MS+ZT 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L,分化出的芽健壮,芽数较多。