宁夏滩羊体大品系遗传标记的研究

研究首先采用RAPD技术,利用混合基因池(DNA pool)法,对滩羊体大品系、普通品系进行DNA多态性分析。从100种具有10个碱基的随机引物中,筛选出84种引物在滩羊群体基因组中共扩增出358条带,其中22种引物扩增产物表现为多态(占22%),且扩增出32条有差异的条带,占总带数的8．94%(32/358);62种引物的扩增产物表现为单态(占62%)。滩羊体大品系的特异性条带5个,而普通品系的特异性条带7个。这些特异标记可以用来鉴定滩羊的2个品系。滩羊体大品系和普通品系间的遗传距离为0．136±0．087,表明2个品系之间的亲缘关系很近。     

宁夏滩羊体大类群选育及其分子遗传标记研究

1994年开展体大滩羊选育 ,1997年以“滩羊体大类群选育”列入国家科技攻关地方管理项目 ,并相继付诸实施。从 10 0种具有 10碱基的随机引物中筛选出 84种引物可在滩羊群体基因组中得到扩增 ,共扩增出 35 8条带 ,滩羊普通品系有六条 :PS - 10 7- 5 5 0 ,PS - 5 10 - 5 0 0 ,PS - 5 12 -45 0 ,PS - 10 1- 45 0 ,PS - 5 12 - 40 0 ,PS - 5 11- 40 0 ,PS - 12 - 370 ;体大品系有五条 :PS - 5 0 9- 875 ,PS - 5 15 - 875 ,PS - 10 6 - 75 0 ,PS - 10 0 8- 70 0 ,PS - 10 10 - 370 ;以上引物可作为区分两品系的标记引物 ,特征性条带可作为各自的分子标记来进行品系鉴定。肥胖基因 (ob)检测其结果 ,两个品系之间无基因型差异。体大品系公羊血清GH水平比裘皮系高 2 82ng/ml,体大群及快肥群母羊比裘皮系高 2 75和 2 6 0ng/ml;体大品系公羊血清IGF -I含量高于裘皮系 ,其中成年公羊比裘皮系高出...     

与多花黑麦草株高性状相关的RAPD标记分析

用4个多花黑麦草品种进行株高性状相关的RAPD标记分析。结果表明:用基因组DNA作为RAPD检测多花黑麦草株高性状位点的方法是可行的。从110条引物中筛选出23条引物对4个多花黑麦草品种的基因组DNA进行扩增,共扩增出174条带,其中166条带为多态性带,标记率为95.4%;检测出4个多花黑麦草品种基因组DNA的6个株高性状的标记(分布在5条引物中)。     

桑树变异株系基因组DNA扩增多态性(RAPD)研究

利用RAPD技术对新一之品系的二倍体 (新一之、薪一圆、凤尾一之 )、三倍体 (陕桑 30 5 )、四倍体(40 2 - 1、40 2 - 1A、40 2 - 9)和 70 7品系的二倍体 (70 7)、四倍体 (40 3- 2 )进行了基因组DNA多态性研究。在用 91个引物单独扩增和 5 7对引物混合扩增后 ,有 73个单引物、38对混合引物扩增出了条带。在新一之的二倍体和四倍体间没有条带的差异 ,在新一之相同倍数体的不同株系之间也没有发现条带的差异 ,新一之的三倍体陕桑30 5和二倍体、四倍体相比有 4条特异性条带。在 70 7的四倍体 40 3 - 2中 ,发现 1条不同于二倍体 70 7的条带。本试验为桑树的性状变异提供了分子水平的证据     

宁夏滩羊体大品系OB基因的RFIP检测

将PCR技术与RFLPs原理相结合而产生了PCR-RFIPsDNA分析方法,并运用了PCR-RFIPs方法,根据人和猪肥胖(ob)基因序列合成的特异性引物,对滩羊体大品系与普通品系的基因组进行多态性分析,表明其扩增产物对HinfI酶切结果出现了一种T等位基因,而无C等位基因,说明滩羊两品系在(ob)基因座位上无基因型差异.     

鸭疫里氏杆菌鸭源致病性大肠埃希氏菌和鸭沙门菌的RAPD研究

以4株不同血清型的鸭疫里氏杆菌、5株不同血清型的鸭源致病性大肠埃希氏菌和5株同一血清型的鸭沙门为研究对象，分别提取基因组DNA，利用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术对其基因组DNA进行了分析。结果，从20条随机引物中筛选出了38条能在这3种菌中有较好多态性的随机引物，8个有效引物共扩增出了102个DNA片段，其中14个菌株共有的谱带仅有1条，显示多态性的片段有101个，占99．0％；对RA的4个菌株扩增出的谱带数为51条，共同片段有12条，多态性片段39条，占76．5％；对沙门菌的5个菌株扩增出的条带数为46条，共同片段为13条，多态性片段33条，占71．79／6；对大肠埃希氏菌的5个菌株扩增出的条带数为48条，共同片段4条，多态性片段44条，占91．7％。在8条引物中进一步筛选出1条引物G12，其图谱中535bp的条带为鸭疫里氏杆菌所特有，330bp的条带为沙门菌所特有，1227bp的条带为大肠埃希氏所特有，表明G12可作为分子标记用来鉴别这3种细菌。     

中国美利奴羊(新疆型)四个品系的RAPD分子标记研究

选用120条随机引物分别对中国美利奴羊（新疆型）毛质好、体格大、毛密和超细4个品系的混合DNA进行RAPD扩增，共筛选出3条特异性多态引物，占产生扩增产物引物总数的3，0％，说明各品系问的遗传变异程度较小。用其中的特异性引物OPF15分别对4个品系的部分个体样品进行分析，同样表现出多态性，并出现混合DNA样品RAPD分析结果中未出现的谱带。其中超细型有94．12％的个体（16／17）都产生一条特异的相同谱带，大小约为826bp，而其他3个品系混合DNA及个体的扩增产物均未获得此大小扩增片段，由此，可将该扩增片段作为中国美利奴羊（新疆型）超细型的一个特征性RAPD标记。     

滩羊体大品系生长激素基因的RFLPs的检测

研究运用了PCR－RFLPs方法，根据羊生长激素基因序列合成的特异性引物，对滩羊两个品系的基因组进行多态性分析。结果表明，其扩增产物的PVU Ⅱ酶切结果分别出现了两种基因型。并对两个品系滩羊生长激素基因检测结果进行了基因型和基因频率的初步分析，结果显示，BB基因型频率，滩羊普通品系显著高于体大品系（P＜0．05）；AB基因型频率，体大品系极显著的高于普通品系（P＜0．01）。而基因频率，两个品系之间无差异（P＞0．05）。     

4个绵羊品种随机扩增多态DNA分析

本研究利用RAPD技术研究了小尾寒羊、大尾寒羊、洼地绵羊、滩羊 4个绵羊品种的亲缘关系。从 10 0条引物中筛选出的 16条引物 ,共扩增出 14 6条带 ,其中 94条表现出多态性 ,占 6 4 .4 %。它们间遗传距离较小 ,小尾寒羊与大尾寒羊、洼地绵羊、滩羊的遗传距离分别为 0 .0 6 4 9、0 .0 6 73和 0 .10 2 8,用UPGMA法构建了树状聚类图。结果显示 ,小尾寒羊、大尾寒羊和洼地绵羊首先聚一起 ,说明它们亲缘关系较近 ,起源于共同的原始祖先。据推测滩羊也起源于蒙古羊 ,但它生活在陕西、宁夏等省 ,与山东环境条件差别较大 ,在自然选择的作用下发生了变异 ,这可能是滩羊与其它绵羊间遗传距离大的主要原因。在本研究过程中还发现了各品种的分子标记     

20个黑麦草品系的SRAP遗传多样性分析

利用SRAP分子标记技术对20个黑麦草品系的遗传多样性进行了分析。结果发现,53个引物组合共扩增出765条带,其中多态性带共597条,多态性比率为78.95%。平均每对引物扩增出的带数和多态性条带数分别为14.4和11.2条。各黑麦草品系间的遗传相似系数在0.485～0.727,平均为0.627。从UPGMA聚类分析的结果来看,以阈值0.63可将这20个品系分为4类。2个多花黑麦草品系并不聚在一类,而是分散在18个多年生黑麦草品系中。另外,UPGMA聚类结果与这些品系的来源基本一致,这说明SRAP标记适用于黑麦草品系间的遗传多样性研究。     

随机扩增多态DNA（RAPD）技术在鹅育种上的应用

本文用4种引物（OPH5、OPH13、OPH16和OPF4）对隆昌鹅、太湖鹅和新太湖鹅进行基因组DNA、RAPD分析。结果表明：三种鹅都有特异性的条带,扩增DNA条带都表现为多态性,条带数为3-12条,大小范围在0.36-0.38kb之间,多态频率为72.14%;RAPD标记可作为一种辅助手段来比较鹅群体的遗传变异性,太湖鹅遗传变异性大于隆昌鹅;OPF-04很可能用作区分隆昌鹅与太湖鹅的标记性引物。     

以随机扩增多态性DNA(RAPD)技术筛选意大利蜜蜂重要农艺性状遗传标记

为了获得意大利蜜蜂重要农艺性状的分子遗传标记 ,本研究以 30种RAPD随机引物对平湖浆蜂、美意、澳意、苏意等 4个在产浆、采蜜和抗病性上存在较大差异的意蜂品系的基因组DNA进行RAPD_PCR扩增筛选。试验结果显示 ,随机引物W 1 8(5′_CGGACGGCGG_3′)和W2 3(5′_GTACCGCCCG_3′)的扩增图谱呈多态性。其中 ,在引物W 1 8所扩增出的 9条片断中 ,2 35 2bp和 36 4bp条带为美意所特有 ,表明可将之用于鉴别美意 ;2 0 92bp条带仅出现于蜂蜜高产的美意和澳意中 ,意味着该条带为一个蜂蜜高产性状的遗传标记 ;而 6 32bp条带在王浆高产品系平湖浆蜂中出现的频率 (0 91 )显著高于 (P <0 0 1 )美意(0 0 4 )、澳意 (0 0 2 )和苏意 (0 0 0 ) ,说明 6 32bp条带可能为王浆高产性状的一个遗传标记。在W2 3引物扩增条带中 ,6 5 1bp条带为澳意所特有 ,可用于澳意鉴别     

南江黄羊体重体尺性状的RAPD分析研究

选用4种扩增多态性良好的RAPD引物,对45只南江黄羊基因组DNA进行PCR扩增,对多态标记结果应用SPSS统计之星软件进行统计分析。结果表明:南江黄羊基因组多态频率为84%。RAPD多态标记条带与体重紧密连锁的标记有CY0816引物扩增的ABCF片段和F09引物扩增的ABDF片段,这两种标记组合对体重的贡献率分别为32.6%和28.9%;与体长(A1)、胸围(A3)和胸深(A5)紧密连锁的标记有CY0816引物扩增的ABF片段和F09引物扩增的ABEF片段,其贡献率均在24.2%～28.9%之间。     

四川9个山羊品种(群体)与岩羊RAPD分析

以两组40个随机引物,筛选出16个重复性好的多态引物,对四川9个山羊品种(群体)和岩羊共计113只个体,进行随机扩增多态DNA(RAPD)分析.结果表明16个引物扩增出67条带,其中54条带呈现多态,多态率为80.60%.山羊各群体共有条带为23条,山羊和岩羊共有条带为13条,岩羊有4条特异带.不同引物所扩增出的片段在各群体中分布频率不同.山羊群体间相似系数为0.821 6～0.936 2,其中安哥拉山羊与建昌黑山羊杂交后代F2和F3之间相似系数最大,为0.936 2.山羊各群体与岩羊相似系数为0.499 6～0.506 4.山羊群体间的遗传距离为0.063 8～0.178 4.山羊各群体与岩羊的遗传距离为0.493 6～0.540 3.高原型藏山羊与山谷型藏山羊间的遗传距离小(0.1005)、相似系数大(0.899 5),序列为TTCCGAACCC引物扩增出的片段为750bp,仅在高原型藏山羊中出现,可作为区分这两个生态类型的遗传标记.     

SRAP标记对8份假俭草材料的鉴定分析

应用SRAP分子标记技术对6个假俭草(Eremochloa ophiuroides)优良品系和2个引进品种进行扩增扫描,从分子的角度对8份材料进行鉴定。结果表明:31对SRAP引物在8份材料中扩增出576条清晰的谱条,其中多态性条带359个,多态性比率为62.33%,8份材料间的遗传相似系数变异范围为0.6962~0.8177,平均遗传相似系数为0.7388。31对SRAP引物中有1对引物Mel8Em17可以将所有材料区分开来,应用该引物的扩增谱带构建了参试材料的DNA指纹图谱,可将不同材料从DNA水平上加以区分。     

奶牛性别鉴定的研究与应用

选取牛雄性性别决定基因SRY (sex region of Y chromosome),根据基因序列设计特异引物,应用PCR技术对5头荷斯坦奶牛DNA样品进行扩增,鉴定其性别;并对设计的引物灵敏度进行检测;对已有的公、母各20头荷斯坦奶牛DNA样品进行PCR盲检,获取奶牛高灵敏度特异性引物,用于奶牛性别鉴定。结果表明,4头公牛DNA样品可以扩增出目标条带(66 bp),1头母牛DNA样品无法扩增出条带,阴性对照扩增无条带;最佳引物灵敏度为1.6 pg/μL,可以很好地满足性别鉴定需要。40头个体中,20头个体DNA样品可以扩增出条带,其余20头个体DNA样品无法扩增出条带,检测结果与实际性别对比准确率为100%。试验结果表明,设计的引物灵敏度比较好,能够满足奶牛性别鉴定的需要。     

甘肃省小麦条锈病主要流行小种的RAPD分析及Su11-4小种SCAR标记建立

本研究应用RAPD标记技术对甘肃省小麦条锈菌主要流行的8个生理小种进行多态性标记分析,旨在寻找小麦条锈菌不同生理小种的特异性标记,共选用220条10碱基随机引物进行筛选,其中有147条可得到稳定清晰的扩增条带。研究结果显示,通过使用147条引物对甘肃省流行的8个条锈菌的生理小种进行RAPD分析,发现各致病小种间遗传变异丰富,其中引物S301在条中33号中扩增得到约507bp的特异条带;引物S39在条中32扩增得到长度约183bp的特异条带;引物S36在Hybrid46-8扩增得到约510bp的特异条带;引物S2140在Su11-4扩增得到约317bp的特异条带。另外,本研究还对扩增得到的特异片段进行回收并进行测序分析,其中依据小麦条锈菌生理小种Su11-4特异条带的测序结果设计特异引物,成功将其转化为对Su11-4小种特异的SCAR标记,这对不同条锈菌生理小种的快速准确检测具有重要意义。     

四川蚕区23个主栽桑树品种基于ISSR分子标记的亲缘关系分析

采用ISSR分子标记从分子水平分析四川蚕区23个主栽桑树品种的遗传多样性。从100条ISSR引物中筛选出12条特异性引物,对23个桑树品种的基因组DNA模板进行扩增,共得到116条清晰条带,其中多态性条带有93条,占总条带数的比率为80.24%;平均每个ISSR引物扩增所得条带数为9.7条,其中多态性条带数为7.8条。分析23个桑树品种的遗传相似系数为0.60~0.89,23个品种明显分为2大类,聚类结果与品种的地理分布和所属桑种没有明显的相关性。其中,粤椹大10和农桑14号之间的遗传相似系数最小(为0.51),亲缘关系最远;而桐乡青和新一之之间的遗传相似系数最大(为0.89),相对于其他品种二者的亲缘关系最近。研究结果对于科学、合理利用四川蚕区桑树品种资源有一定参考价值。     

扁穗牛鞭草种质遗传多样性的ISSR分析

用ISSR标记对来自中国西南地区(四川、重庆、贵州)的28份扁穗牛鞭草材料的遗传多样性进行了检测。从96个ISSR引物中共筛选出13个多态性明显、反应稳定的引物。28份材料的DNA共扩增出129条谱带,平均每个引物扩增出9.9条带,多态性条带比率达84.2%。材料间遗传相似系数为0.466~0.980,表现出丰富的遗传多样性。通过聚类分析和主成分分析,将28份扁穗牛鞭草分为两大类,同一地区的扁穗牛鞭草品种(系)基本聚在同一类,呈现出一定的地域性分布规律。     

AFLP标记检测大足黑山羊地方类群遗传多样性的研究

利用AFLP标记技术,从15对引物中选取11对扩增效果较好的引物,对17只大足黑山羊个体DNA进行扩增。结果共扩增出766个条带,其中59条为多态条带,平均每对引物扩增出69．6个条带,平均多态率为5．36％.