防治多种链霉菌引起的马铃薯疮痂病生防芽孢杆菌的筛选

马铃薯疮痂病（Potato common scab）是世界范围内普遍发生的土传病害,由致病链霉菌（Streptomyces spp.）引起。为筛选得到可较好抑制马铃薯疮痂病菌的芽孢杆菌（Bacillus spp.）,通过室内平板抑菌试验进行抑菌活性测定,利用邻接法建立基于gyrB序列的系统发育树进行种类分子鉴定。试验检测了13株芽孢杆菌对S. scabies HP4抑制作用,5株芽孢杆菌菌株BEV2、BAM7、GF3、BPU6和BMO8对S. scabies HP4抑菌圈直径均大于9.0 mm。系统发育树鉴定BEV2和GF3为贝莱斯芽孢杆菌（Bacillus velezensis）,BAM7为解淀粉芽孢杆菌（B. amyloliquefaciens）,BPU6为短小芽孢杆菌（B. pumilus）,BMO8为莫海威芽孢杆菌（B. mojavensis）。检测4种芽孢杆菌及其组合对3种致病链霉菌及其组合抑菌活性,其中BEV2+BAM7对致病链霉菌的抑菌圈直径至少达到（29.5±2.7）mm,当多种致病链霉菌同时出现时仍表现出较好抑菌效果,表明BEV2+BAM7对多种马铃薯疮痂病菌有稳定防...     

海南桑树青枯病病原菌鉴定及其分子鉴定

桑树青枯病是由青枯雷尔氏菌引起的细菌性病害,热带、亚热带地区发病严重,严重影响蚕桑产业的可持续发展。雷尔氏菌不同种间致病力和宿主各不相同,其防治策略也相应不同,准确地分离鉴定病原菌是青枯病有效防控的先决条件。本研究采集、分离了海南省琼中县桑青枯病发病桑园（‘桂桑优62’）桑树根部、茎部病原菌,并通过致病性、生理小种、生化变种测定,结合16S rDNA、特异性引物、复合PCR检测体系、序列变种等分子鉴定方法初步确定了病原菌的种类和分类地位。结果表明,引发海南省琼中县桑青枯病的病原菌属于青枯雷尔氏菌（Ralstonia solanacearum）、生理小种5（race 5）、生化变种Ⅴ（biovar Ⅴ）,病原菌遗传进化分析结果显示病原菌属演化型Ⅰ（phylotype Ⅰ）即亚洲分支菌株,序列变种12（sequevar 12）。这些结果将为海南桑青枯病的有效防控奠定基础。     

链霉菌剂种子包衣对小麦幼穗分化及生物学特性的影响

为探索链霉菌对小麦幼穗分化进程及生物学特性的影响，使用娄彻氏链霉菌（D74）和密旋链霉菌（Act12）混合菌对小偃22种子进行包衣和大田种植，研究了接种链霉菌对小麦穗分化发育进程、生物学性状、光合特性、生理生化指标、穗性状及产量相关性状的影响。结果表明：（1）适量链霉菌包衣可以加快小麦幼穗分化，增加小穗原基数量与小花原基数量，在二棱期至护颖分化期，T_2.5处理小穗原基数较对照增加了17.3%；在雌雄蕊原基分化期，T_2.5处理的小穗原基数、小花原基数、雌雄蕊原基数和顶端花原基数分别较对照增加了1.5%、3.4%、7.1%和11.1%。（2）适量链霉菌包衣对不同生育时期的植株鲜重、根系鲜重具有明显的促进作用，其中在分蘖期，T_2.5处理的植株鲜重及根系鲜重分别较对照显著增加（29.4%及50.0%）。（3）适量链霉菌包衣可影响小麦叶片内酶活性，在灌浆中期，T_2.5和₅包衣处理的叶片POD活性、PPO活性、可溶性蛋白和根系活力均较对照有所提高，而MDA含量均较对照有所降低，叶片硝酸还原酶活性较对照显著提高（44.4%和66.7%）。（4）在灌浆初期，T_2.5和₅包衣处理的净光合速率分别较对照提高了24.8%和41.6%，后者差异达显著水平（P＜0.05）。（5）适量链霉菌包衣可以促进小麦产量的形成，T_2.5处理的大、中和小型穗的穗粒数分别较对照提高了9.3%、2.2%和4.8%，产量较对照提高了4.9%。     

茶树炭疽病菌拮抗链霉菌的筛选及其抑菌特性研究

茶炭疽病菌刺盘孢菌（Colletotrichum camelliae）是引起茶树炭疽病的重要致病菌,为获得对C.camelliae具有拮抗作用的链霉菌,采用稀释涂布法和平板对峙法从茶园生境中分离筛选出对其具有明显拮抗作用的链霉菌菌株,并结合形态学观察、生理生化特征和16 SrRNA基因序列分析对其进行种属鉴定;开展基于链霉菌菌株的抗菌谱测定、茶炭疽病菌菌丝生长抑制试验和孢子萌发抑制试验;通过菌丝生长速率法测定其无菌发酵滤液对茶炭疽病菌的抑菌活性及其抑菌活性稳定性,并测定其产胞外降解酶能力、抗菌物质合成基因、挥发性与非挥发性代谢物抑菌活性。结果表明,筛选获得一株对茶炭疽病菌C.camelliae具有良好抑菌效果的菌株XS-4,对茶炭疽病菌的平板抑制效果为76.42%;结合形态学观察、生理生化特征,以及16 SrRNA基因序列分析,将菌株XS-4鉴定为多产色链霉菌（Streptomyces polychromogenes）;菌株XS-4对其他8种植物病原菌均具有较好的抑菌效果,抗菌性能具有广谱性。扫描电镜结果表明,菌株XS-4能抑制茶炭疽病菌菌丝生长。孢子萌发抑制试验发现,拮抗菌XS-4发...     

pBBR1MCS2-Tac-EGFP广宿主载体适宜标记Ralstonia solanacearum

利用标记基因追踪病原菌在植物体内的入侵和定殖,是研究病原菌-寄主互作的重要手段。本研究利用电转化法将广宿主载体pBBR1MCS2-Tac-EGFP导入青枯雷尔氏菌（Ralstonia solanacearum）GMI1000菌株中,获得了青枯雷尔氏菌带绿色荧光标记的转化子。转接试验结果表明,转化子的抗生素抗性和绿色荧光强度有良好的遗传稳定性。pBBR1MCS2-Tac-EGFP不影响GMI1000菌株的致病力,且EGFP蛋白能够在植物中稳定表达。灌根法接种试验结果表明,病原菌在第1天即完成对根系的侵染,并在第6天扩散至其他组织,随后造成植株萎蔫。研究结果表明所获转化子可用于后续的病原菌侵染机理等方面的研究。     

青枯雷尔氏菌在不同作物根际定殖与轮作防病

青枯病是芝麻和花生的重要病害之一。为探索合理的轮作防控模式，运用青枯雷尔氏菌（Ralstonia sola⁃ nacearum）抗利福平标记菌株JXS02-L土壤接种，测定菌株在芝麻、花生、甘薯、大豆、玉米和小葱等6种作物根际土 壤和根部的定殖与消长动态，分析了不同轮作模式对芝麻/花生青枯病发生程度的影响。结果表明：播种后3w，6种 作物根际土壤菌量均低于初始接种菌量；播种后6 w，芝麻、花生、甘薯根际土壤菌量已上升至初始接种菌量水平 （3.20 ×106~4.93×106 CFU·g-1），之后菌量持续上升，大豆、玉米根际土壤菌量则持续下降；播种后12 w，大豆、玉米根 际土壤菌量比芝麻、花生、甘薯根际土壤菌量低4个数量级，小葱植种后6 w~12 w，均未检测到病菌。播种后3 w~ 12 w，芝麻、花生和甘薯根部菌量持续上升，大豆和玉米根部菌量先升后降；至播种后12w，大豆和玉米根部菌量比 芝麻、花生和甘薯根部菌量低5个数量级，小葱根部则始终未检测到病菌。芝麻-大豆-小葱-芝麻、芝麻-大豆-玉 米-芝麻2种轮作模式芝麻青枯病病情指数比芝麻-花生-甘薯-芝麻轮作模式分别降低19.95%、12.87%；花生-大 豆-玉米-花生轮作模式花生青枯病病株率比花生-芝麻-甘薯-花生轮作模式降低11.63%。本研究结果对于了解 青枯雷尔氏菌的生态多样性，以及指导青枯病的科学防控具有重要意义。     

青枯病菌研究进展

细菌性青枯病是由茄科雷尔氏菌(Ralstonia solanacearum)引起的一种世界范围的细菌性土传病害,广泛分布于热带、亚热带及部分温带地区。青枯病菌寄主广泛,可侵染50多个科的200余种植物,给作物生产带来巨大损失。充分了解青枯病菌是进行青枯病防治的重要前提。本文从青枯病菌的菌群分类、基因组结构、致病机制与致病途径、病菌检测等方面做了系统的阐述,并对基于青枯病菌及寄主植物基因组序列信息,研究和探讨青枯病菌致病机制与青枯病防治进行了展望。     

链霉菌和壳聚糖对淮山土壤微生物活性与群落的影响

为探究链霉菌30702和壳聚糖对淮山土壤微生物活性与群落的影响,采用比色法和滴定法观测土壤酶活性的变化,采用高通量测序技术和Trimmomatic等软件,分析土壤微生物群落中细菌和真菌的发展变化。结果表明,链霉菌、壳聚糖、土壤原始微生物和培养时间等4个因素对淮山土壤的脲酶和过氧化氢酶活性均有显著影响,壳聚糖浓度在0~10.0 g/kg内,土壤酶活性随壳聚糖浓度的增大而提高;随时间的延长,先升再降;壳聚糖与链霉菌之间存在交互效应。链霉菌和壳聚糖能增加淮山土壤细菌的物种丰度,减少细菌的多样性,增加艾德昂菌属（Ideonella）和纤维弧菌（Cellvibrio）等有益菌属的相对丰度,而对真菌的物种丰度和多样性的影响较小,与对照之间的差异不显著,土壤优势菌属为腐质霉属（Humicola）、枝孢属（Cladosporium）、鞘氨醇单胞菌属（Sphingomonas）和uncultured_bacterium_ c_Subgroup_6。其中,链霉菌与2.5 g/kg壳聚糖复合处理的细菌物种丰度最大,细菌多样性最少。     

红壤连作花生青枯病发病规律及病原菌分离

以中国科学研究院红壤生态实验站花生连作障碍长期施肥试验为平台,研究了经过连续12年不同施肥处理后连作花生病害的发病规律,并分离其病原菌。结果表明,所有施肥处理的连作花生都有不同程度的发病。施用化肥的处理（F）花生发病率最高,到结荚期时已达68%,而有机肥＋有效菌剂的处理（BM）发病率在8%左右,这表明有机肥及配施有效菌剂能够有效抑制连作花生土传病害的发生。通过分离和鉴定,发现青枯病是连作花生主要病害,其病原菌是青枯雷尔氏菌（Ralstonia solanacearum）。     

3-蒈烯对铜绿假单胞菌的抑菌活性及机理初探

为了开发一种新的食品防腐保鲜剂,本文初步研究了3-蒈烯对铜绿假单胞菌的抑菌活性及机理。通过肉汤稀释法测定最小抑菌浓度（MIC）和最小杀菌浓度（MBC）,评价了3-蒈烯的抑菌活性,考察了3-蒈烯对细菌生长曲线、细胞形态、细胞膜通透性、膜电位及呼吸链脱氢酶等的影响。结果表明：3-蒈烯对铜绿假单胞菌的MIC为20 mL/L,MBC为40 mL/L。3-蒈烯可以抑制铜绿假单胞菌的生长,破坏细胞的正常形态,提高细胞膜的通透性,造成蛋白质、电解质的外泄。3-蒈烯能够降低铜绿假单胞菌菌体的膜电位,干扰细胞正常代谢活动,还能抑制细胞内呼吸链脱氢酶的活性。综上所述,3-蒈烯通过破坏铜绿假单胞菌细胞膜,抑制细菌正常生长,导致细菌细胞死亡。     

3种紫苏属植物鲜叶的挥发性物质的异质性分析

紫苏属植物的叶具多种生物活性,且有特异性香气。为探究紫苏属不同植物鲜叶挥发性物质异同,以紫苏、白苏和柠檬紫苏为研究对象,采用固相微萃取进行富集提取,运用气相质谱对鲜叶挥发物进行分离鉴定。结果表明：（1）紫苏属植物鲜叶的挥发物存在较显著差异。通过主成分分析,3种紫苏属植物的样本点分别独自聚为一类;（2）3种紫苏属植物高匹配（匹配度≥90%）、高相对含量（相对含量≥2%）的挥发物存在不同。柠檬紫苏为柠檬醛、顺式-柠檬醛和蘑菇醇等,紫苏为α-石竹烯、β-石竹烯和洋芹脑等,白苏则包括β-石竹烯、蘑菇醇和芳樟醇等;（3）3种紫苏属植物存在各自特异性挥发物。柠檬紫苏叶片中检测出特异性挥发物19种,为柠檬醛、β-柠檬醇等。紫苏有8种,如洋芹脑等。白苏有6种特异性挥发物,为芳樟醇等;（4）3种紫苏属植物同时存在4个共有挥发物,分别为β-榄香烯、大根香叶烯、β-石竹烯和蘑菇醇;（5）以所测挥发物为指标,通过聚类分析得到白苏和紫苏的样本聚为一个类群,而柠檬紫苏的样本单独聚为另一类群。本研究为紫苏属植物资源的进一步开发和利用提供依据。     

入侵害虫芒果壮铗普瘿蚊对5种芒果挥发物的电生理反应和行为选择

芒果壮铗普瘿蚊（Procontarinia robusta）是我国外来危险性入侵害虫,坚硬的瘿壳导致药剂防治困难。植食性昆虫主要通过触角接收植物挥发物选择寄主,本研究采用触角电位联用仪（EAG）和“Y”型嗅觉仪观察瘿蚊成虫对芒果叶片挥发物成分（α-蒎烯、3-莰烯、α-石竹烯、异松油烯、乙酸乙酯）的电生理反应和行为选择,结果显示：EAG反应值大小排序依次为α-蒎烯>3-莰烯>α-石竹烯>异松油烯>乙酸乙酯,α-蒎烯处理组显著高于其他挥发物。虽然雌虫对于α-蒎烯、3-莰烯、α-石竹烯3种物质的EAG反应值比雄虫的高,但是雌雄之间对同一挥发物差异不显著（P<0.05）。行为选择结果显示：对瘿蚊吸引率高低依次为：3-莰烯>乙酸乙酯>α-石竹烯>α-蒎烯>异松油烯;3-莰烯对瘿蚊的吸引率最高,达到74.20%,显著高于α-蒎烯和异松油烯,乙酸乙酯吸引率次之,达到66.07%;异松油酯的趋避性最高,达到74.25%,显著高于其他挥发物。实验中也显示浓度阈值现象,α-蒎烯在浓度0.5 mL/L和1 mL/L浓度范围内有显著的趋避效果,在高于或低于此范围内的其他浓度引诱率和趋避率差异不显著。α-石竹烯高浓度（1.0 mL/L and 2.0 mL/L）对芒果壮铗普瘿蚊有显著引诱作用,3-莰烯和α-石竹烯处理组随着浓度的升高对瘿蚊的引诱率增加。研究结果为阐释瘿蚊入侵机理提供理论依据,为开发引诱剂或趋避剂提供技术支撑。     

Effect of residual distillation water of 15 plants and three plant hormones on Scotch spearmint (Mentha × gracilis Sole)

Distillation waste water is a byproduct from steam distillation of aromatic crops, and is currently discharged into streams and rivers. We evaluated distillation waste water (extract) from 15 essential oil crops plus three plant hormones (methyl jasmonate, MJ; gibberellic acid, GA3; and salicylic acid, SA) as foliar spray for Scotch spearmint (Mentha × gracilis Sole). GA3 and Achillea millefolium extract decreased essential oil content. Hypericum perforatum extract increased α-pinene, whereas SA decreased it. H. perforatum extract increased β-pinene and sabinene concentrations relative to hormones but was not different from the control. H. perforatum also increased l-limonene, while SA and GA3 decreased myrcene and MJ and SA decreased l-limonene. Application of MJ and SA increased l-carvone concentration relative to the control and most other treatments. The sulfur concentration in plant extracts was positively correlated to β-caryophyllene. None of the residual distillation waters showed significant antimicrobial or antimalarial activity. The distillation waste water from essential oil crops may serve as a modifier for Scotch spearmint essential oil.     

Repellency of selected Psidium guajava cultivars to the Asian citrus psyllid,Diaphorina citri

Huanglongbing (HLB) is the most devastating disease of citrus worldwide. It is caused by bacteria of the genus ‘Candidatus Liberibacter’ and transmitted by two psyllid species, the Asian citrus psyllid (ACP) Diaphorina citri, and the African citrus psyllid Trioza erytreae. Considerable research has been conducted toward developing and implementing HLB and ACP management strategies. With respect to ACP control, of interest is that reports indicate guava, Psidium guajava, can be repellent to ACP. We conducted research to further evaluate repellency of guava to ACP. In one set of experiments, guava oil from five Brazilian guava cultivars (‘J3’, ‘Pedro Sato’, ‘Século XXI’, ‘Thailand’ and ‘Paluma’) was extracted from leaves (immature and mature) by hydro-distillation in a Clevenger-type apparatus and evaluated for psyllid repellency. In a second set of experiments, repellency of guava leaves to ACP was investigated using leaves (immature and mature) from two guava cultivars in Florida, ‘Pink’ and ‘Thai White’. In each set of experiments, repellency was evaluated by releasing ACP adults into a cage with two large vials, one containing a young flush shoot (= immature leaves) of Murraya exotica (a favored host plant of the psyllid, the flush of which is highly attractive to ACP) and one with M. exotica flush and the test material of interest (guava oil, immature guava leaf or mature guava leaf). The adults were free to move throughout the cage and into the vials, and the number of psyllids in each vial was counted after 24 h. The results showed that all guava materials tested had at least some repellency to ACP. Mature leaves tended to have a greater repellent effect than immature leaves. Each of the five oils exhibited repellency. A report in the literature suggested that sulfur compounds associated with guava may be responsible for ACP repellency. Interestingly, the five guava oil extracts we studied were repellent to ACP but none contained any sulfur compounds. Identification of the constituents responsible for repellency could lead to new ACP management tactics.     

4种沉香树叶片挥发油化学成分GC-MS分析

比较3个白木香良种'热科1号'(Aquilaria sinensis' Reke 1')、'热科2号'(A.sinensis' Reke 2')、'热科3号'(A.sinensis' Reke 3')及国外引种的印度沉香(A.agallocha Roxb.)植物叶片挥发油成分的异同,旨在为其进一步开发利用提供依据.采用...     

蛋黄果种子营养成分分析与评价

为了进一步开发和利用蛋黄果种子的潜在价值,对其主要营养成分、挥发油成分进行分析和检测,并研究了挥发油对5种细菌的抑制作用。结果表明：种子中淀粉、多糖、粗脂肪、多酚、灰分等成分含量较多,分别为13.89、8.04、6.27、2.58、2.22 g/100 g;Vc、黄酮、粗蛋白、氨基酸的含量分别为0.002、1.90、1.12、2.295 g/100 g。从种子挥发油中鉴定出22种化合物,主要成分为油酸、棕榈酸、邻苯二甲酸单（2-乙基己基）酯、芥酸酰胺,其相对百分含量分别为10.466%、8.158%、6.643%、4.216%。研究还证实蛋黄果种子挥发油对四联球菌、蜡状芽孢杆菌、白色葡萄球菌、大肠杆菌有抑制作用,其中对四联球菌和蜡状芽孢杆菌的抑制作用较强。鉴于蛋黄果种子的营养和药用价值丰富,建议大力开发和利用。     

Phytotoxicity of lemon-scented eucalypt oil and its potential use as a bioherbicide

The effect of volatile oil from leaves of Eucalyptus citriodora against some plant species viz. Triticum aestivum, Zea mays, Raphanus sativus, Cassia occidentalis, Amaranthus viridis and Echinochloa crus-galli was investigated. In a laboratory bioassay seed germination of test plants was significantly reduced in response to the different concentrations of the eucalypt oil. Maximum germination inhibition was observed with A. viridis, whereas least effect was seen on R. sativus. Based on the germination response, dose-response curve was generated and LC₅₀ values were calculated. It was maximum for R. sativus whereas minimum for A. viridis. Further, seedling growth of the test plants and the chlorophyll content in the treated seedlings was significantly reduced at concentrations 0.12 and 0.3 mg/l. Not only the initial growth, but also the spray treatment on the 4-week-old mature plants of two weedy species viz. C. occidentalis and E. crus-galli adversely affected the chlorophyll content and cellular respiration, thereby indicating the adverse effect of eucalypt oil on the photosynthetic machinery and the energy metabolism of the target plants. Based on the study, it is concluded that volatile oil from E. citriodora is phytotoxic and could be utilized as bioherbicide for future weed management programmes.     

链带藻Desmodesmus sp. QL96蛋白质的营养价值评价与生理活性研究

链带藻Desmodesmus sp. QL96是从我国西藏地区分离的一株链带藻,前期研究表明其含有丰富的蛋白质。本文对这株链带藻的主要细胞组分的含量进行了检测,并采用改进的TCA-丙酮法提取其蛋白质,分析了蛋白粗提物的氨基酸组成及其体外抗氧化和抑菌活性。结果表明：链带藻Desmodesmus. sp. QL96的蛋白质平均含量为(56.65±3.76)%,蛋白粗提物中含有17种氨基酸,其中7种人体必需氨基酸含量占总氨基酸含量的26.86%;Desmodesmus sp. QL96蛋白质具有一定的自由基清除能力,对•OH和DPPH•的半数清除浓度（IC₅₀）分别为0.18、7.88 mg/mL;Desmodesmus sp. QL96蛋白质具有一定的抑菌作用,对化脓性链球菌、大肠杆菌和鼠伤寒沙门氏菌的最小抑菌浓度（MIC）分别为1.56、3.13、1.56 mg/mL。本研究为该链带藻进一步开发功能性蛋白提供了依据与参考。     

刚果12号桉对4种豆科植物的化感作用

采用室内生物检测的方法研究了刚果12号桉叶片自然释放的挥发性物质、叶片水抽提物、叶片经水蒸气蒸馏所得的桉油、含挥发性水溶性物质的冷凝水和含水溶性非挥发性物质的渣汁3个组分以及桉树根际土壤水浸液对绿豆、大豆、柱花草与大翼豆4种受体植物的化感活性。结果表明：刚果12号桉叶片释放的挥发性物质对4种受体植物种子的萌发有强烈的抑制作用：桉叶水抽提物与根际土壤水浸液对绿豆、大豆、柱花草与大翼豆4种受体植物种子萌发与幼苗生长不但有一定抑制作用，而且土壤水浸液对绿豆、大豆和柱花草幼苗的根生长还有不同程度的促进作用，处理分别比对照高出13％、2％、23％。从桉油、冷凝水与渣汁3个组分的化感活性来看，渣汁的最强，桉油次之，冷凝水最低，即单位叶片中水溶性物质的化感活性比挥发性的高。这表明水溶性化感活性物质可能是刚果12号桉的主要化感作用物质。     

山地五月茶提取物对乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖的抑制活性研究

为深入了解海南岛热带野生植物的保健功能及其活性成分,用CCK-8法检测山地五月茶（Antidesma montanum）果和叶的乙醇提取物对MDA-MB-231乳腺癌细胞增殖的抑制活性。结果表明,山地五月茶果和叶的乙醇提取物作用72 h对细胞的半数抑制浓度（IC₅₀）分别为483 μg/mL和306 μg/mL。叶的乙醇提取物分别经石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取,比较各有机溶剂萃取相及剩余水相对乳腺癌细胞抑制增殖活性,结果显示乙酸乙酯相表现出较高的活性,其处理细胞72 h的IC₅₀为150.5 μg/mL。划痕实验和Transwell检测结果表明,乙酸乙酯相提取物具有抑制MDA-MB-231细胞迁移和侵袭的能力。流式细胞仪检测结果表明,乙酸乙酯相提取物能够使MDA-MB-231细胞周期S期显著延长。UPLC-MS/MS分析结果显示,乙酸乙酯相含有穗花杉双黄酮活性成分。穗花杉双黄酮处理MDA-MB-231细胞72 h的抑制增殖IC₅₀为192.6 μg/mL,表明其是山地五月茶抑癌活性成分之一。