2株高产蛋白微藻细胞代谢物的比较

以2株新近分离出来的链带藻(Desmodesmus sp. QL96和Desmodesmus sp. QJ74)为研究对象,检测胞内主要细胞代谢产物组成及含量变化,找出优势细胞代谢产物。收集相同时间间隔下培养的2株微藻,经过冻干、研磨、复溶,制备成细胞溶解液,再进行逐级萃取,分级检测每个萃取步骤中所得细胞代谢产物的含量。结果表明:在BG11培养基中生长30 d,链带藻Desmodesmus sp. QL96和Desmodesmus sp. QJ74的最高蛋白含量分别达到细胞干重的71.68%和62.14%,其他代谢产物,如碳水化合物、脂质和色素,在2株微藻中的含量都没有超过20%。对比其他微藻的文献报道,链带藻Desmodesmus sp. QL96是目前发现的蛋白含量最高的藻株,其蛋白的表达模式和蛋白相关产品的开发具有研究价值。     

枯草芽孢杆菌CS16抑菌活性与胞外产物成分分析

通过测定枯草芽孢杆菌CS16菌株的抑菌活性,对其胞外代谢物活性与成分进行分析,以期开发有效的生防菌剂.结果表明:CS16菌株对多株植物病原真菌具有明显的抑制作用,对病原细菌的抑菌作用相对较弱;CS16发酵液中羧甲基纤维素酶、淀粉酶和木聚糖酶活力分别为509.58 U/mL、7 198.71 U/mL和1 853.68 U/mL;其发酵液经酸沉淀所得粗提物可明显抑制香蕉枯萎病菌丝生长,最小抑菌浓度为0.062 5 mg/mL;利用反相硅胶柱、Sephadex LH-20凝胶柱和正相硅胶柱分离纯化获得较纯的抑菌物质,经薄层层析和HPLC定性分析,初步认为其胞外抑菌物质中含有Iturin A.     

罗布麻茎叶粗提物及脱胶纤维的抑菌活性分析

文章研究了罗布麻茎叶粗提物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和黄曲霉的抑菌活性和最小抑菌浓度,并定性分析了脱胶后的罗布麻纤维对上述类型微生物的抑制效果。结果表明,罗布麻茎叶粗提物对黄曲霉和金黄色葡萄球菌的抑制效果较为明显,对大肠杆菌抑制效果稍差,其中,罗布白麻和罗布红麻对黄曲霉菌的最小抑菌浓度分别为5、7.5 mg/mL,对金黄色葡萄球菌最小抑菌浓度均为7.5 mg/mL,而对大肠杆菌的最小抑菌浓度分别为10、15 mg/mL;定性分析发现,经脱胶后的罗布麻纤维仍对细菌类的金黄色葡萄球菌和大肠杆菌具有一定的抑制作用,但对霉菌类的黄曲霉无明显抑制作用。     

硫藤黄链霉菌St-79对水稻白叶枯病的防效和促生作用

【目的】水稻白叶枯病是水稻的主要细菌性病害之一，严重影响水稻生产。本研究获得一株有效防治水稻白叶枯病的放线菌菌株，探索其对白叶枯病的防效和促进水稻生长的作用，为生防菌的开发利用提供科学依据。【方法】利用梯度稀释涂布法、共培养法和牛津杯法筛选拮抗水稻白叶枯病菌(Xanthomonas oryzae pv. oryzae, Xoo)的放线菌菌株；通过形态特征、生理生化反应、16S rDNA序列和系统发育树分析对其进行分类鉴定；利用共培养法分析目标菌株的抗菌谱；通过96孔板微量稀释法、扫描电子显微镜、微生物粘附碳氢化合物法等探究目标菌株的抑菌作用；通过发酵滤液浸种与菌液喷洒土壤的方法探究其对水稻生长的促进作用；利用盆栽试验探索目标菌株发酵滤液对水稻白叶枯病的防治效果。【结果】从不同生境土壤中分离出140株放线菌菌株，最终筛选得到一株对Xoo具有强拮抗活性的放线菌菌株St-79，其发酵滤液抑菌圈直径为64 mm，并鉴定其为硫藤黄链霉菌(Streptomyces thioluteus)。菌株St-79对水稻细菌性条斑病菌(Xanthomonas oryzae pv. oryzicola)、大豆细菌性斑疹病菌(Xanthomonas axonopodis pv. glycines)、油菜黑腐病菌(Xanthomonas campestris pv. campestris)和番茄细菌性叶斑病菌(Pseudomonas syringae pv. tomato)均有拮抗作用。其乙酸乙酯粗提物具有良好的抑制Xoo生长的效果，粗提物对Xoo的最低抑菌浓度为8 μg/mL，最低杀灭浓度为32 μg/mL；扫描电镜观察结果显示，粗提物对Xoo细胞有很强的损伤作用；粗提物还能改变Xoo细胞内膜通透性，降低Xoo细胞的疏水性。促生试验结果显示，菌株St-79发酵滤液能够促进水稻幼苗的生长。盆栽试验结果显示，菌株St-79发酵滤液对水稻白叶枯病有良好的防治效果，在日本晴、甬优15、甬优1540上的相对防效为65.95%~87.23%，病斑抑制率为69.85%~95.8%，且预防效果优于治疗效果。【结论】获得一株有效防治水稻白叶枯病的放线菌，其对水稻白叶枯病菌有明显的抑制作用，并且可以促进水稻种子的萌发与幼苗的生长。     

苦丁茶冬青粗多糖的分离表征及其抗化活性研究

水提醇沉法分离制备苦丁茶冬青粗多糖样品,对其进行初步分离表征(包括总糖、糖醛酸、蛋白质、氨基酸含量和红外光谱分析)和体外抗氧化活性(清除DPPH·自由基、·OH自由基清除能力和还原能力)研究.结果表明,苦丁茶冬青粗多糖中总糖含量为30.67％、糖醛酸含量为12.72％、蛋白质含量为9.35％;含有16种氨基酸成分,总含量为7.72％,其中含有7种人体必需氨基酸,占氨基酸总量的40.41％;红外光谱显示该粗多糖样品中含有α-吡喃糖环结构;此外,苦丁茶冬青粗多糖具有较强的体外抗氧化活性,且其抗氧化活性与多糖浓度之间存在良好的量效关系.     

芒果果实内蛋白质、维生素C和氨基酸的含量

九个芒果品种中果实的蛋白质含量范围在0.98～3.27克/百克,维生素C含量范围14—57毫克/百克.在所有品种中,游离氨基酸的浓度不定,但都含有丙氨酸、谷氨酸、组氨酸、异亮氨酸、脯氨酸和缬氨酸;都含有蛋白结合氨基酸,其中有丙氨酸、天门冬氨酸、精氨酸、胱氨酸、谷氨酸、甘氨酸、组氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、丝氨酸、苏氨酸,酪氨酸和缬氨酸等.品种和生长条件对果实成份无明显影响.     

苦丁茶冬青粗多糖的分离表征及其抗氧化活性研究

水提醇沉法分离制备苦丁茶冬青粗多糖样品,对其进行初步分离表征（包括总糖、糖醛酸、蛋白质、氨基酸含量和红外光谱分析）和体外抗氧化活性（清除DPPH·自由基、·OH自由基清除能力和还原能力）研究。结果表明,苦丁茶冬青粗多糖中总糖含量为30.67％、糖醛酸含量为12.72％、蛋白质含量为9.35％;含有16种氨基酸成分,总含量为7.72％,其中含有7种人体必需氨基酸,占氨基酸总量的40.41％;红外光谱显示该粗多糖样品中含有α-吡喃糖环结构;此外,苦丁茶冬青粗多糖具有较强的体外抗氧化活性,且其抗氧化活性与多糖浓度之间存在良好的量效关系。     

3种辣椒超临界提取物的抑菌评价研究

以红辣椒、青线椒和黄灯笼辣椒的超临界二氧化碳提取物为原料,进行体外抑菌试验,比较分析以上3种辣椒油树脂对鸡的大肠杆菌、沙门氏菌和金黄色葡萄球菌的抑菌作用。试验结果表明：海南黄灯笼辣椒提取物对大肠杆菌和沙门氏菌的抑菌效果均优于青辣椒和红辣椒;对金黄色葡萄球菌的抑菌作用与红辣椒相当,但低于青辣椒。青辣椒提取物的丙酮溶液对大肠杆菌、沙门氏菌和金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度分别为0.75、0.6和0.9 mg/mL,最低杀菌浓度分别为0.9、0.75和1.2 mg/mL;海南黄灯笼辣椒提取物的丙酮溶液对大肠杆菌、沙门氏菌和金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度分别为0.6、0.45和1.2 mg/mL,最低杀菌浓度分别为0.75、0.6和1.5 mg/mL;红辣椒提取物的丙酮溶液对大肠杆菌、沙门氏菌和金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度分别为0.9、0.9和1.2 mg/mL,最低杀菌浓度分别为1.2、1.2和1.5 mg/mL。     

尖孢镰刀菌古巴专化型4号生理小种的磷酸化应激诱导蛋白1（FoSTIP1）基因的克隆及表达分析

本研究克隆了尖孢镰刀菌古巴专化型4号生理小种（Fusarium oxysporum f. sp. cubense race 4, Foc4）转录因子FoSkn7一个候选的下游基因,结果表明该基因cDNA编码序列全长1737 nt,编码一个含578个氨基酸残基的蛋白质。对其编码的蛋白进行了结构域和进化分析,结果表明该蛋白质含有胁迫诱导蛋白（stress-in-ducible protein-1, STI1）结构域和多个三角形4肽重复序列结构域（tetratricopeptide repeat, TPR）。该蛋白质与尖孢镰刀菌番茄专化型的磷酸化应激诱导蛋白1（STIP1）亲缘关系最近,因此初步将其确定为Foc4的磷酸化应激诱导蛋白并命名为FoSTIP1。采用相对荧光定量PCR方法分析了该基因在野生型B2菌株入侵香蕉苗根部及在外源H₂O₂诱导情况下的表达变化,也分析了FoSKN7基因缺失突变体中该基因在外源H₂O₂诱导情况下的表达。结果表明在入侵香蕉苗根部及在外源H₂O₂诱导情况下,B2菌株中的FoSTIP1表达均有上调,而FoSKN7基因缺失突变体中FoSTIP1即使有H₂O₂诱导,其表达也远低于B2菌株中的FoSTIP1。推测FoSTIP1可能是FoSkn7的靶基因并参与了Foc4抗外源氧化胁迫。     

植物生长调节剂2,4-D和GA3对微茫藻18A8(Micractinium sp.)生长和油脂积累的影响

实验室分离到1株含油量高并且生长迅速的微茫藻18A8(Micractinium sp.)藻株,将其培养在高碳培养基TAP上,研究了不同浓度的植物激素2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)和赤霉素(GA3)对其生物量和油脂积累的影响。结果表明：分别添加2,4-D(2 μmol/L)和GA3(1 μmol/L)对藻株的生长有明显的促进作用,其最大生物量比对照组分别增加75.26%和47.41%,但其油脂含量与对照组相比却有所降低,分别降低了23.49%和29.89%;而当增加2,4-D和GA3浓度为10和5 μmol/L时,对藻株的生长表现出明显的抑制作用,其最大生物量比对照组减少了72.83%和60.70%,但其油脂含量与对照组相比显著增加,分别增加149.45%和95.75%。同时,分别添加2,4-D(10 μmol/L)和GA3(5 μmol/L)的实验藻种的蛋白质和总糖含量较对照组有所降低,此外叶绿素含量和光合效率也降低。     

Amino Acid Profiles and Biopotentiality of Hydrolysates Obtained from Comb Penshell (Atrina pectinata) Viscera Using Subcritical Water Hydrolysis

The recovery of amino acids and other important bioactive compounds from the comb penshell (Atrina pectinata) using subcritical water hydrolysis was performed. A wide range of extraction temperatures from 140 to 290 °C was used to evaluate the release of proteins and amino acids. The amount of crude protein was the highest (36.14 ± 1.39 mg bovine serum albumin/g) at 200 °C, whereas a further increase in temperature showed the degradation of the crude protein content. The highest amount of amino acids (74.80 mg/g) was at 230 °C, indicating that the temperature range of 170–230 °C is suitable for the extraction of protein-rich compounds using subcritical water hydrolysis. Molecular weights of the peptides obtained from comb penshell viscera decreased with the increasing temperature. SDS-PAGE revealed that the molecular weight of peptides present in the hydrolysates above the 200 °C extraction temperature was ≤ 1000 Da. Radical scavenging activities were analyzed to evaluate the antioxidant activities of the hydrolysates. A. pectinata hydrolysates also showed a particularly good antihypertensive activity, proving that this raw material can be an effective source of amino acids and marine bioactive peptides.     

大孔树脂纯化白背天葵多酚及其体外抗氧化研究

为了分离纯化白背天葵多酚,并探讨其体外抗氧化活性,本研究比较了8种大孔树脂对白背天葵多酚的静态吸附和解吸能力,优选出D101为最适宜纯化白背天葵多酚的树脂,并对其分离纯化的工艺进行了优化。采用DPPH和ABTS法评价其抗氧化活性。结果表明,D101树脂最佳纯化工艺为上样液浓度1 mg/mL、pH 3.1、上样液流速2 mL/min,解吸的乙醇体积分数70%、体积60 mL、流速2 mL/min;白背天葵多酚的含量由14.73%提高到45.21%;其清除DPPH及ABTS自由基的能力为 Vc>纯化物>粗提物。研究结果为进一步开发利用白背天葵多酚提供了数据支持。     

乙酰化蛋黄果多糖及其抗氧化活性研究

蛋黄果（Lucuma nervosa A. DC）乙酰化修饰多糖的抗氧活性优于未修饰多糖,通过分析乙酰化蛋黄果多糖的乙酰化度、红外光谱和形貌特征,阐明引起抗氧活性提升的原因。试验采用超声波辅助法提取蛋黄果果肉粗多糖,用三氯乙酸法除去蛋白质得到多糖。选取3份0.50 g多糖加入20% NaOH溶液溶解,分别加入1、3、5 mL乙酸酐,得到3种取代度（0.237±0.05、0.275±0.07、0.228±0.04）的乙酰化蛋黄果果肉多糖,评价其清除DPPH自由基、OH自由基和ABTS自由基的能力。结果表明,乙酸酐添加量由少到多时,蛋黄果多糖乙酰基取代度先显著升高,后趋于平缓下降。乙酰化蛋黄果多糖的红外光谱显示了3417 cm^-1（-OH）、2950 cm^-1（-CH）处的伸缩振动和1636 cm^-1处的（-OH）转动振动,1738 cm^-1处出现酯基C=O的伸缩振动吸收峰,表明乙酰化已经成功接入。扫描电镜结果显示,未经乙酰化的蛋黄果多糖表面相对光滑平整,呈片状结构;乙酰化修饰多糖分子间交联增强,构象发生了变化,变为表面形状不规则,出现很多空隙且表面粗糙。3种乙酰化蛋黄果多糖中DHG-Ac2（3 mL醋酐）清除效果最好,在浓度1.0 mg/mL时,DPPH清除能力、ABTS自由基清除率、OH自由基清除率分别为91.37%、58.73%、56.36%,分别高于蛋黄果多糖10.0%、43.7%、25.3%。这是引入的乙酰基能活化多糖链中的异头碳,使多糖的供氢能力提升,继而提升乙酰化蛋黄果多糖的抗氧化作用。本研究为海南产蛋黄果多糖的深入开发与抗氧化应用提供了基础研究数据。     

微波真空干燥对铁皮石斛品质特性影响的研究

本研究以新鲜铁皮石斛为原料,采用微波真空干燥方法干燥,通过测定铁皮石斛的多糖含量、色泽、多酚氧化酶（PPO）、水分分布状态、组成氨基酸以及多酚的DPPH?和?OH清除率,研究微波真空干燥对铁皮石斛品质特性的影响。结果表明：相比于新鲜样品,当微波强度为9 W/g,干燥后样品的多糖含量最高可达52.21%;氨基酸分析仪分析结果表明,微波真空干燥后铁皮石斛的总游离氨基酸和风味氨基酸含量显著提高。在微波强度9 、12 、15 W/g下,微波真空干燥的铁皮石斛的PPO活性分别在干燥16、12、6 min后不再存在,表明微波真空干燥能够在较短时间内钝化铁皮石斛的PPO活性,且微波强度越大时间越短。干燥过程的非酶促褐变主要由Maillard反应引起。低场核磁共振结果表明,自由水驰豫时间T₂₃和A₂₃均显著降低。自由基清除能力研究结果表明,铁皮石斛多酚仍具有较强的羟基自由基清除能力。通过观察干燥后样品的微观结构发现,随着微波功率密度的增大,样品孔状结构受到更严重破坏,微波强度越大,铁皮石斛的复水特性越好。     

肉桂木栽培6种食用菌氨基酸特性及营养评价

为了评价肉桂木栽培食用菌的营养特性,本研究测定了采用肉桂（Cinnamomum cassia Pres1）生产中废弃物肉桂木栽培的金顶侧耳（Pleurotus citrinopileatus）,秀珍菇（Pleurotus geesteranus）,刺芹侧耳（Pleurotus eryngii）,黑皮鸡枞（Oudemansiella raphanipes）,黄伞（Pholiota adiposa）和猴头菌（Hericium erinaceus）的营养成分及氨基酸组成,通过主成分分析、蛋白质营养价值评价及聚类分析对其蛋白质的营养价值进行评价与分类。结果表明,6种肉桂栽培食用菌的膳食纤维、多糖和蛋白质含量范围分别为24%~46%、4~15 mg/g和19%~43%。主成分1（PC1）和主成分2（PC2）一共解释了92.46%的差异,苏氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、缬氨酸共同决定了PC1,赖氨酸决定了PC2。氨基酸评分发现,肉桂木栽培的6种食用菌中,蛋氨酸+半胱氨酸（Met+Cys）含量均过剩,与其他5种食用菌相比,秀珍菇的Met+Cys含量过剩较少,与WHO/FAO模式值相近。聚类分析结果与肉桂木栽培的食用菌的Met+Cys含量有关,黄伞与金顶侧耳距离最近,秀珍菇的Met+Cys含量与其他5种差异较大,聚类距离较远,与WHO/FAO模式值距离较近。综上表明,肉桂木栽培食用菌氨基酸含量丰富,种类比较齐全,是理想的蛋白质来源,但是由于肉桂木栽培食用菌Met+Cys含量偏高,仍需要与其他日常膳食搭配以达到人体氨基酸的平衡供给。     

16种含马兜铃内酰胺衍生物类中药甲醇提取物对家蝇和埃及伊蚊活性筛选

寻找和开发安全有效的植物性杀虫剂,以丰富植物源农药的来源,填补化学农药禁限用留下的空白。甲醇冷浸提取法制备辽细辛、石楠藤、金狮藤等16种中草药的提取物,采用无限量取食法,测定了对家蝇成虫的活性,采用幼虫浸液法,测定了对埃及伊蚊四龄幼虫的活性。结果表明:在10mg/mL浓度下,处理家蝇48h后,辽细辛、石楠藤、金狮藤、单叶细辛校正死亡率分别为100%、100%、100%和98.33%,LC₅₀值分别为0.1483、0.1544、3.5277和2.4292mg/mL,三叶鱼藤LC₅₀值为0.9080 mg/mL;在0.5 mg/mL浓度下处理埃及伊蚊四龄幼虫48 h,辽细辛、石楠藤、金狮藤、单叶细辛、厚朴校正死亡率分别为100%、100%、100%、100%和100%,LC₅₀值分别为0.0046、0.0094、0.0570、0.0658和0.0504 mg/mL,三叶鱼藤为0.1194 mg/mL。辽细辛、石楠藤、单叶细辛、金狮藤对两种试虫均表现出优良的杀虫活性,均优于或接近三叶鱼藤活性。     

辣木籽多糖的超高压辅助提取工艺及其抗氧化活性分析

超高压辅助提取技术是一种天然产物新型绿色高效提取技术,在保证提取效率的同时能最大限度保持天然产物的生物活性。为探究超高压辅助提取技术对辣木籽多糖的提取效果及其抗氧化活性的影响,本研究以辣木籽为原料,通过超高压辅助提取技术提取辣木籽中的水溶性多糖,以多糖得率为考察指标,以提取压力、提取时间、料液比、粉碎度作为单因素,在单因素试验基础上,采用正交试验设计方法优化辣木籽多糖的超高压辅助提取工艺,并通过测定总抗氧化能力、清除DPPH自由基（DPPH•）和羟自由基（•OH）的能力来分析辣木籽水溶性多糖的抗氧化活性。结果表明,辣木籽多糖最佳的超高压辅助提取工艺条件为：提取压力100 MPa、保压时间6 min、料液比（g/mL）1:15、粉碎度100目筛,在最佳提取工艺条件下辣木籽多糖最大提取得率为0.346%;在测试范围内辣木籽多糖清除DPPH自由基能力随多糖浓度的增加而增加,并有较好的线性关系,清除率达到50%时对应的浓度（IC₅₀）为0.0439 g/L,但是其抗氧化能力低于相同浓度的Vc,在测试范围内清除羟自由基能力也随辣木籽多糖浓度的增加而增加,也有较好的线性关系,IC₅₀为0.1666 g/L,其抗氧化能力与同浓度的Vc较接近,辣木籽多糖的总抗氧化能力为0.0482 mmol/L（以硫酸亚铁的当量浓度表示）。与热水提取方法相比,超高压辅助提取方法能够缩短提取时间,提取温度大大降低,提取效率显著提高;而且提取的辣木籽水溶性多糖具有较好的抗氧化能力,可以作为天然抗氧化剂进行开发利用。本研究结果可为天然抗氧化剂的开发、辣木资源的综合开发及高值化利用提供技术支持和参考。     

艾纳香MYB转录因子家族生物信息学分析

MYB转录因子是植物中庞大的转录因子家族之一,在植物体内有着广泛的生物学功能。基于艾纳香全长转录组数据库,利用DNAMAN 6.0、MEGA 5.05软件以及ProtParam、WebLogo和SOPMA在线网站分析艾纳香MYB转录因子家族蛋白的分类、理化性质、氨基酸序列高级结构、保守结构域、系统进化等。结果表明,挖掘到127个BbMYB基因,预测47条具有MYB转录因子保守结构域的蛋白序列;根据结构域可分为1R-BbMYB和R2R3-MYB 2个亚类,其中R2-BbMYB与R3-BbMYB基序中都含有3个保守的色氨酸,而R1-BbMYB基序只有2个保守的色氨酸;艾纳香MYB家族蛋白均为亲水性蛋白,热稳定性较高且富含碱性氨基酸,大部分蛋白以无规则卷曲为主,其中R2R3-BbMYB3、R2R3-BbMYB4与1R-BbMYB15蛋白是以α-螺旋为主;与拟南芥MYB转录因子家族共同构建的进化树发现,艾纳香MYB家族在进化上包括2个大类,6个亚类,通过艾纳香与拟南芥MYB蛋白序列相邻或是进化关系近可以预测艾纳香MYB基因功能,为进一步对艾纳香MYB家族基因研究及其功能鉴定提供科学依据。