鲎血试剂抑制大肠杆菌内毒素致死效能的试验研究

在应用鲎血试剂检测肉品及蛋品中的细菌内毒素时,我们为验证内毒素对于动物的致死效能,和鲎血试剂在动物机体内对细菌内毒素的作用是增强还是减弱毒性?进行了如下的试验。     

葡萄糖酸钙注射液的细菌内毒素检查

目的：建立葡萄糖酸钙注射液的细菌内毒素检查方法。方法：根据2005年版《中国兽药典》一部附录细菌内毒素检查法进行试验。结果：当水为溶剂时,供试品对细菌内毒素检查法有干扰作用;改用稀释剂I作为溶剂,干扰预试验和干扰试验表明,供试品在2倍以上稀释浓度时可排除干扰。结论：葡萄糖酸钙注射液按限值L＝2.5Eu/mL进行细菌内毒素检查是可行的,可以用细菌内毒素检查法代替热原法检测葡萄糖酸钙注射液。     

鲎的人工养殖及鲎试剂的制备

鲎试剂可用来检测细菌内毒素或热原，具有操作简便、灵敏度高、特异性强、反应迅速等优点，受到普遍欢迎，应用范围日益广泛，尤其是抢救危急病人，检测、诊断，制药工艺流程中内毒素检测，食品工业、水质污染检测等。因此鲎试剂成为国际上价格昂贵，又十分热门的商品。 1鲎的生活习惯与繁殖 鲎生活在温暖的海洋中，冬季需到较深的海域越冬。每当春末夏初，水温上升之际，鲎从深海游向沿岸沙滩。雌雄抱合，在中潮带泥沙中挖穴产卵，受精卵依靠太阳能量孵化，经 5～ 6周时间，幼虫出膜，称三叶幼虫，雌鲎一生中要蜕皮 18次，雄鲎 19次，大约 …     

猪亚利桑那菌的毒素鉴定及其对小白鼠致病作用的病理学观察

将猪亚利桑那菌培养后离心、冷冻,以小白鼠为试验动物进行细菌毒素鉴定,结果确定猪亚利桑那菌仅有内毒素;用鲎试剂测得其细菌内毒素含量大约为0.125 EU/mL。取10只健康小白鼠观察猪亚利桑那菌对动物的致病性。小白鼠临床症状明显,眼内有脓性分泌物;病理组织切片结果发现,肝细胞界限不清,胞核大小差异较大;脾脏内有大面积出血区;肾小管上皮细胞肿胀,部分胞核消失;心肌纤维肿胀、断裂;由此可见猪亚利桑那菌对小白鼠有很强的致病性。     

细菌内毒素检查法与家兔法同步检测氟哌酸葡萄糖注射液热原的比较

目的：考察细菌内毒素检查法对氟哌酸葡萄糖注射液进行热原检测的可行性。方法：用细菌内毒素检查法对供试品进行干扰试验，以明确供试品对鲎试验是否有干扰作用．并用家兔法对细菌内毒素检查法的检测结果进行验证。结果：供试品对鲎试验无干扰作用．家兔法热原检测的结果与细菌内毒素检查法检测的结果极为吻合。结论：用细菌内毒素检查法检测氟哌酸葡萄糖注射液的热原是可行的。     

鲎素的研究及开发利用

鲎是一种栖生于海洋的低等无脊椎动物。鲎素为鲎血液中抗菌肽的总称,研究表明鲎素具有抗菌、抑病毒、检测内毒素等多种作用。鲎素对人胃癌BGC823细胞、人肝癌SMMC7721细胞、人肺腺癌SPCAi细胞、人早幼白血病HL60细胞的增殖都有明显的抑制作用。对鲎素的研究为细菌耐药性、药物残留和抗HIV等医学难题的解决提供了新途径。近年来,由于对鲎资源的过度开发利用,这一资源已濒临灭绝。现在,对鲎资源的保护工作正在展开。     

鲎C因子的研究进展

鲎C因子是鲎血细胞中一种对内毒素敏感的丝氨酸蛋白酶原,主要有6种结构域,能特异结合内毒素而被激活.对鲎C因子的结构与功能、基因工程研究及其应用前景进行了综述.     

重组猪抑制素蛋白质中毒素残留检测及其理化稳定性

为探索纯化的重组猪抑制素蛋白质毒素残留情况以及重组猪抑制素蛋白质稳定性,本研究利用鲎试剂、气相色谱和SDS-PAGE方法对重组猪抑制素蛋白质中的细菌内毒素、β-巯基乙醇的残留量及其蛋白质在不同温度、极端p H值和反复冻融条件下的稳定性进行检测。结果显示,经过3次等电点沉淀洗涤后,重组猪抑制素蛋白质中细菌内毒素和β-巯基乙醇的残留量大幅减少。通过在不同温度下的处理发现,重组猪抑制素蛋白质在4℃环境下较稳定,可以长期保存;但在37℃时,稳定性快速下降,随着温度上升而降解加速。通过极端p H值和反复冻融试验发现,重组猪抑制素蛋白质对极端p H值和反复冻融具有较好的耐受性。     

注射用炎琥宁细菌内毒素检测方法的建立

为建立注射用炎琥宁细菌内毒素检查方法,参照中国药典2005年版二部附录XIE细菌内毒素检查法进行试验.结果表明,供试品在0.33mg·mL-1稀释浓度下无干扰作用,这种方法准确、快捷、影响因素小,说明注射用炎琥宁的检查可用细菌内毒素法代替家兔法.     

从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究

目的 建立从鲎试剂生产废料中纯化鲎素的方法.方法 用酸处理和sephdexG-50凝胶层析法从鲎试剂生产废料中提纯鲎素.结果 经凝胶层析纯化样品在SDS-PAGE中显示单一蛋白质条带.鲎素分子量约3kD左右.提取的鲎素能显著抑制大肠杆菌的生长,IC50为3.9mg/L.进一步研究显示,提取到的鲎素不仅抑制普通大肠杆菌的生长,而且可以显著抑制耐氨苄青霉素或耐卡那霉素的大肠杆菌的生长.结论 本文建立的方法可成功地从鲎试剂生产废料中提取到纯化的鲎素.     

鲎源抗菌肽对大肠杆菌基因组DNA和RNA作用的分子机制

为了探讨鲎素对细菌基因组DNA和RNA作用的分子机制,采用琼脂糖凝胶阻滞电泳、荧光和紫外光谱的方法研究了鲎素对细菌基因组DNA和RNA的影响,结果表明鲎素能够与大肠杆菌基因组DNA发生作用,并呈浓度依赖关系,浓度越高对细菌基因组DNA损伤越大;鲎素也能与基因组DNA和RNA结合,抑制其迁移。鲎素与基因组DNA的结合方式有待进一步研究,此结果为在分子水平上深入了解鲎素的杀菌机制提供重要的理论依据。     

细菌内毒素的研究进展

本文从细菌内毒素的化学组成、生物学活性、致病机理、内毒素的制备与检测及内毒素抗体的作用５个方面,对细菌内毒素的研究进展进行了综述,并对本领域的研究方向及前景进行了讨论。     

鲎人工饲养技术的初步研究

鲎属海洋底栖的节肢动物，生活在浅海区，在繁殖季节洄游到潮间带挖穴产卵。过去主要把它作为食用，随着鲎试剂研制成功、并广泛应用于医药卫生、食品检验等方面。因此，对鲎的需要量越来越大。但鲎的生活史很长，如用杀鲎取血制备试剂，不仅不能满足常年生产的需要，而且会破坏资源。所以在大规模研制试剂的同时、开展人工饲养技术的研究就显得很有必要。本文从生态学的角度出发、探讨了盐度、放养密度、耗氧量、抽血量、抽血间隔时间和摄食量等因素对鲎的变形细胞数量和存活率的影响，为人工饲养管理和适时适量抽血提供了理论依据。     

细菌内毒素简易检测法

为了快速准确检测出市场出售的肉品是否含有细菌内毒素,快速检出不合格的肉品,文章采用细菌毒素简易检测法—细菌内毒素呈色氧化反应法,对天津市四个市场采集的48份肉样进行了检测。结果表明,检出阳性11份,阳性率为22.9%,该方法省时省力,敏感快速,简便准确,是检验肉品细菌内毒素的一种好方法。     

3种金银花提取物抗细菌内毒素的作用研究

为研究金银花3种不同提取物对细菌内毒素清除效果。采用水、乙醇和石油醚3种提取方法得到金银花提取物,再分别与大肠杆菌标准内毒素作用后,通过鲎试验法检测3种提取物中细菌内毒素的残留含量,对比分析3种金银花提取物清除细菌内毒素的作用。结果表明：金银花水提物、乙醇提取物、石油醚提取物中绿原酸含量分别为11.536±0.036 μg/mL、12.347±0.099 μg/mL、11.752±0.047 μg/mL,说明乙醇提取物中绿原酸含量最高;与标准细菌内毒素作用后,金银花水提物、乙醇提取物、石油醚提取物中内毒素残留的含量分别为0.799±0.005 EU/mL、0.164±0.001 EU/mL、0.175±0.002 EU/mL,即水提取液、乙醇提取液、石油醚提液对细菌内毒素的清除率分别为84.02±0.10%,96.71±0.02%,96.50±0.04%。说明金银花乙醇提取物对细菌内毒素的清除作用效果最佳。本试验结果为后续金银花抗细菌内毒素的作用机制研究提供前期基础。     

香丹注射液对家兔内毒素性肾脏DIC的影响

旨在研究香丹注射液对家兔内毒素性肾脏DIC的防护作用及其作用机理.静脉注射大肠埃希菌O111B4内毒素生理盐水溶液制作DIC肾脏模型,注射香丹注射液观察其对DIC家兔肾脏的防护作用,及其对内毒素的体内、外降解作用.病理组织学观察结果表明,香丹注射液能够明显减轻内毒素所致肾脏的损伤,和对照组相比,香丹组家兔的DIC肾小球的检出率、肾小球纤维素密度指数、上皮细胞变性坏死以及管型形成肾小管的检出率均显著或极显著降低(P<0.05,P<0.01).鲎试验的结果显示香丹注射液对内毒素具有微弱的降解作用,表明香丹注射液对家兔内毒素性肾脏DIC有良好防治效应,机理可能是香丹注射液通过改善肾小球毛细血管血流,对抗血栓的形成,进而减轻肾小管上皮细胞变性、坏死和管型的形成,达到维护肾小管的功能.     

多效蒸馏器蒸馏水不合格原因分析

多效蒸馏器蒸馏水不合格原因分析钟智，胡万方，吴雪梅，陈赛红（广东医学院附属医院药剂科，湛江５２４００１）１９９５年７月，我们对多效蒸馏器蒸馏水进行全检，各项指标均符合规定，但用鲎试剂法检查热原时，却显阳性反应；同时，用此蒸馏水制备无氨蒸馏水时，却意外...     

生物制品中内毒素的危害及其去除方法的研究进展

细菌内毒素是革兰氏阴性菌细胞壁的脂多糖成分,在细菌死亡或分解后释放出的内毒素残存于各种生物制品中,作用于机体内的单核巨噬细胞并产生多种细胞因子,适量的细胞因子对机体有益,过量则可引起机体严重的病理反应,严重时会危及生命。因此,细菌来源的生物制剂必须进行彻底纯化,去除或达到药品规定的内毒素含量后方可使用。本文将从内毒素的结构特征、生物制品中的危害及其去除方法做一综述。     

胰酪胨大豆培养基和改良马丁培养基药品无菌检查效果的比对研究

目的：比较药品无菌检查用的胰酪胨大豆培养基(TSB)和改良马丁培养基(MM)对细菌和真菌的检测灵敏度和促生长能力。方法：选用3株细菌和3株霉菌试验菌株,分别采用中国药典无菌检查法规定的培养基适用性检查中半定量检测方法和以平板菌落计数法为基础计算试验菌株生长率的定量方法, 分别测试培养基对试验菌株的促生长能力和检测灵敏度。结果：6株试验菌株在不同生产厂家的受试TSB和MM培养基中,其生长管数和生长率的比较,经统计学分析,差异均无显著性(P＞0.05),灵敏度可达到＜0.1CFU/mL;不同生产厂家间两受试培养基对6株试验菌株的促生长能力和检测灵敏度差异也无显著性(P＞0.05)。结论： 在一定的接种和培养条件下,TSB培养基可替代MM培养基用于药品无菌检查中的需氧菌和真菌检测。     

两种中药注射液对内毒素性肾衰家兔空肠黏膜和肝脏组织结构的影响

细菌内毒素的毒性核心是革兰氏阴性菌细胞壁中的脂多糖(LPS)与蛋白质的复合物,可导致人和动物全身性炎症反应综合症(SIRS)、多脏器功能衰竭综合症(MODS)[1-3].西药中抗菌药物能杀死细菌,但不能拮抗菌体溶解后产生的内毒素,杀灭的细菌越多,产生的内毒素也越多.关于内毒素所致多器官功能衰竭已有许多研究,郭德玉等[4]就内毒素导致的大鼠肾功能变化做过试验.次秀丽等[5]观察了肿瘤坏死因子(TNF)和内毒素致休克模型大鼠肠黏膜损伤情况以及"促动合剂"(以大黄、厚朴为主药组方)对休克大鼠肠黏膜损伤的治疗作用.