土壤中木霉的分离纯化以及对植物病原真菌的拮抗研究

从土壤中分离纯化获得3个木霉集合种:哈茨木霉(Trichoderma harzianum),绿色木霉(Trichoder-ma viride)和绿木霉(Trichoderma virens)。用这3种木霉菌分别与小麦纹枯病菌(Rhizoctonia solania)和番茄灰霉病菌(Botrytis cinerea)作平板对峙培养及显微观察,测定木霉菌对病原菌的抑制作用。结果表明:3种木霉菌对供试的2种病原菌抑菌强度不同,其中绿木霉对小麦纹枯病菌和番茄灰霉病菌都具有较好的拮抗作用;显微观察到木霉菌对病原菌菌丝的缠绕、使病原菌菌丝细胞质变稀薄、菌丝解体等现象。     

白苏乙醇提取物及挥发油抑菌活性研究

分别采用溶剂浸提和水蒸汽蒸馏法对白苏叶进行提取,并用生长速率法分别测定2种白苏叶提取物对7种植物病原真菌的抑制作用。测定结果表明,在0.1 g干样/mL下,白苏叶乙醇提取物在3~5 d的培养时间内能够完全抑制辣椒疫霉病菌的生长,对番茄灰霉病菌的生长抑制率高于60%。白苏叶挥发油在测定中对植物病原真菌也表现出较强的抑菌活性。白苏叶挥发油在0.5 mg/mL时能够完全抑制供试7种供试病菌的生长。白苏挥发油对7种供试植物病原真菌的测定表明,挥发油对水稻纹枯病菌和番茄灰霉病菌具有较强的抑制作用,EC50分别为0.0677mg/mL和0.1050 mg/mL。     

百里香酚抑菌活性初探

本研究采用抑制菌丝生长速率法、抑制孢子萌发法、组织测定法和盆栽试验法系统测定了百里香酚对植物病原真菌的抑制作用。结果表明,在离体条件下百里香酚对供试的10种植物病原真菌菌丝生长均有一定的抑制作用,其中,对番茄灰霉病菌的抑制作用最强,EC50为0.012 g?L-1;对番茄灰霉病菌、烟草赤星病菌和玉米大斑病菌孢子萌发有较强的抑制作用,EC50分别为0.028、0.032和0.064 g?L-1;盆栽试验结果表明百里香酚对番茄灰霉病菌具有很好的保护和治疗作用,在供试浓度为0.75 g?L-1时,对番茄灰霉病的保护和治疗作用分别为72.01%和60.28%,与对照药剂速克灵无显著性差异。     

茵陈蒿提取物对几种番茄病害病原真菌的抑制效果

采用生长速率法测定了茵陈蒿乙醇提取物对番茄灰霉病菌、番茄枯萎病菌、番茄叶霉病菌、番茄早疫病菌和番茄晚疫病菌等5种植物病原真菌菌丝生长的抑制作用,并采用活体组织法测定了其对番茄灰霉病和番茄晚疫病的药效。结果显示,茵陈蒿乙醇提取物对以上5种病原真菌具有较高的抑制作用,其中对番茄叶霉病菌的抑制活性最好,EC50为0.98g/L;在质量浓度为100g/L时,对番茄灰霉病的保护效果为74.00%,对番茄晚疫病的保护效果和治疗效果分别为66.21%和60.01%。     

烟草病原菌及其生防菌株对烯酰吗啉的敏感性

为明确烟草疫霉(Phytophthora nicotianae)等主要土传病原真菌与哈茨木霉(Trichoderma harzianum)等供试生防菌株对烯酰吗啉的敏感性,采用菌丝生长速率法测定了烯酰吗啉对烟草疫霉、瓜果腐霉(Pythium aphanidermatum)、立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)、茄病镰刀菌(Fusarium solani)、哈茨木霉菌丝生长的抑制作用,采用孢子抑制法测定了烯酰吗啉对烟草疫霉孢子囊形成、哈茨木霉分生孢子分化的抑制作用,采用稀释涂布平板法分别测定了烯酰吗啉对枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、金黄垂直链霉菌(Streptomyces aureoverticillatus)的抑制作用。结果表明,烯酰吗啉对烟草疫霉菌丝生长及孢子囊形成有显著抑制作用,对烟草疫霉菌丝生长的EC_(50)为0.467 6μg/mL;对哈茨木霉菌丝生长及分生孢子分化抑制作用较低;对瓜果腐霉、立枯丝核菌、茄病镰刀菌和枯草芽孢杆菌、金黄垂直链霉菌无明显抑制作用。因此,烯酰吗啉可以与供试生防菌株混合施用防治烟草黑胫病。     

32种植物提取物的离体抑菌活性测定

用琼胶平板法和悬滴法,测试了32种植物丙酮提取物对小麦赤霉病菌(FusariumgraminerumSchw)、苹果炭疽病菌(Glomerellacingulata(Stonem)Schr.etSpauid)、辣椒疫霉病菌(PhytophthoracapsiciLeon.)、番茄灰霉病菌(BotrytiscinereaPers.)和玉米大斑病菌(ExserohilumturcicumPass.)等5种病原真菌的离体抑制活性。结果表明,在供试质量浓度为干样0.1g/mL时,对2种或2种以上供试菌种菌丝生长的抑制作用达60%以上的植物样品有铁杆蒿(叶)、蒙古蒿(茎叶)、小白酒草(叶)、紫苞风毛菊、牛蒡、太白山蟹甲草和苦参(根)等7种,其中紫苞风毛菊和苦参(根)对4种供试病菌的菌丝生长有明显的抑制作用,蒙古蒿(茎叶)对小麦赤霉病菌和番茄灰霉病菌孢子萌发有较高的抑制活性,值得进一步研究。     

哈茨木霉对几种植物病原真菌拮抗作用及其抗药性的室内测定

室内通过对峙培养法测定了在不同的温度处理下哈茨木霉TH-1对棉疫病菌PB-1、番茄枯萎病菌TF-5、棉花枯萎病菌WF-3、西瓜枯萎病菌SF-1和水稻恶苗病菌FF-2的拮抗作用。结果表明,不同的温度处理下．哈茨木霉对供试植物病原茵的抑制作用不一,其中,以30℃黑暗条件哈茨木霉对病原菌菌丝生长的抑制作用最强,对峙培养72h后,木霉菌TH-1对PB-1、TF-5、WF-3、SF-1和FF-2的抑制率分别达到81．1％、74．1％、77．8％、65．7％和60％;25℃条件下次之;10℃、15℃和35℃条件下木霉菌菌丝扩散速度较慢,且孢子产生量少,不能有效地压制病原菌菌丝的扩展。表明环境温度过高或过低对木霉菌菌丝的生长及分生孢子的产生均有较大影响。试验还镜检了木霉菌与病原菌在培养基中菌丝间的相互作用．主要表现为营养及空间的竞争、菌丝间的缠绕以及抑茵物质的影响。同时,哈茨木霉TH-1对多菌灵、扑海因和甲霜灵的敏感性测定结果显示,TH-1对多茵灵极敏感,而对甲霜灵具有很强的抗性．表明该木霉菌可与甲霜灵混用降低化学药剂的使用量,延缓病菌抗药性的产生。     

哈茨木霉TR-12对番茄褐斑病菌的拮抗作用

PDA平板拮抗试验表明,哈茨木霉对番茄褐斑病菌有强烈的拮抗作用,其孢子悬浮液的含孢量为105~108个/mL时,对番茄褐斑病菌的抑制率高达82.5%。比较测定了哈茨木霉菌液和4种药剂对番茄褐斑病菌的抑制效果。哈茨木霉对番茄褐斑病菌的抑制作用较50%速克灵WP和50%退菌特WP相对较差,哈茨木霉菌孢子悬浮液含孢量106个/mL的抑制效果与75%百菌清相近,含孢量108个/mL的抑制效果与70%甲基托布津相当。     

5种木霉对番茄灰霉病拮抗作用的测定

2011年6月-8月在商丘菜区根际土壤中共分离到18个木霉菌株,根据培养性状和形态学特征鉴定出5种木霉,分别是哈茨木霉(T.harzianum Rifai)、绿色木霉(T.viride PerexFx)、康宁木霉(T.koningii Oudem)、拟康氏木霉(T.pseudokoningii Rifai)、长枝木霉(T.longibrachiatum Rifai).将上述木霉和番茄灰霉病菌(Botrytis cinerea)做对峙培养的试验,测定5种木霉种对番茄灰霉病都有不同程度的抑制作用.结果表明:5种木霉菌对病原菌抑菌强度不同,其中绿色木霉和哈茨木霉对番茄灰霉病菌都具有较好的拮抗作用.     

七种杀虫剂对哈茨木霉菌丝生长和产孢量的影响

通过常规真菌生物量测定的方法,检测了新乡地区7种常见杀虫剂对哈茨木霉(Trichodermaharzianum)菌丝生长和产孢量的影响。室内毒力测定结果表明,7种杀虫剂对哈茨木霉的菌丝生长与产孢量均有一定的抑制作用,且随着药剂浓度的增加抑制作用越明显,不同的药剂对哈茨木霉的毒力不同。     

麦冬、丹参、川芎根腐病的发生及生物防治研究

调查表明,麦冬、丹参、川芎等中药材根腐病的一般发病株率为15.2%~67.5%,重病地高达80%以上。通过采取染病植株进行室内分离、纯化鉴定,3种中药材根腐病的病原,属尖孢镰刀菌及腐皮镰刀菌。利用筛选出的哈茨木霉T23生物制剂,对麦冬、丹参、川芎等中药材根腐病防治试验,结果以每公顷施用7.5 kg的剂量最佳,防治效果分别为74.5%、71.2%及70.9%,显著优于多菌灵粉剂农药处理,产量比对照增产14.2%~24.5%。大面积防治示范,防病增产效果一致。     

木霉菌对五种植物病原真菌的重寄生作用

研究了哈茨木霉（Trichoderma harzianum)T88菌株和深绿木霉（T.atroviride）T95菌株对立枯丝核菌（Rhizoctonia solani）、杨树料皮病菌（Valsa sordida）、杨树水泡溃疡病菌（Botryosphaeria ribis）、苹果树腐烂病菌（V.ceratosperma）、贝伦格葡萄座腔菌梨生专化型（B.berengeriana f.sp.piricola）的重寄生作用。对峙培养的结果可观察到，多数情况下，接种后2d内木霉与病原菌接触，随后覆盖或侵入病菌菌落，抑制其生长。光学显微镜和扫描电镜观察结果表明，木霉对不同的植物病原真菌重寄生作用方法不同。可观察到木霉菌缠绕病原菌的菌丝，或沿着病原菌的菌丝平行或波浪式生长，或产生铯状分枝、吸器或附着胞吸附于病原菌的菌丝上，或穿透病原菌的菌丝，最终使病原菌的菌丝细胞原生质浓缩，菌丝断裂等现象。     

哈茨木霉菌诱导烟草抗黑胫病代谢差异的研究

为研究哈茨木霉菌对NC89接种烟草疫霉菌前后抗病相关代谢途径的影响,以烟草品种NC89为试验材料,设置四个处理：接种清水（NC89CK）、接种烟草疫霉菌谷（NC89_P）、接种哈茨木霉菌（NC89_T）、接种哈茨木霉菌后接种烟草疫霉菌谷（NC89_T_P）,利用超高效液相色谱与质谱联用技术（liquid chromatography-mass spectrometer,LC/MS）比较各处理抗病相关代谢通路的变化差异。结果表明,哈茨木霉菌对烟草疫霉菌有着较好的生防作用。代谢组学分析表明,筛选到893个差异代谢产物及其富集的代谢通路,涉及抗病相关的代谢途径20条;各处理间脂肪酸及其衍生物、黄酮和类黄酮、萜类、苯丙氨酸及其次生代谢物和泛酸等物质的含量存在显著差异,为进一步探究哈茨木霉菌对烟草疫霉菌的抑制机理奠定了基础。     

木霉菌在生物防治上的应用及拮抗机制

简了拮抗木霉菌在生物防治上的应用前景。许多木霉种群如哈茨木霉、绿色木霉、钩状木霉、长枝木霉等都是植物病原真菌的拮抗菌。木霉菌的作用机制多种多样，包括产生抗生素、重寄生作用、溶菌作用，竞争作用等。     

Advances in biocontrol mechanism and application of Trichoderma spp. for plant diseases

Trichoderma spp.is a filamentous soil fungus known as an effective biocontrol agent of a range of important airborne and soilborne pathogens,it has universal distribution and economic importance.This article reviewed the researches on biocontrol mech- anism for plant diseases and application of Trichoderma spp.,especially Trichoderma harzianum in recent years.     

哈茨木霉C184菌株对喀麦隆香蕉及大蕉根部病原菌的体外拮抗作用(英文)

体外测定了新近分离自喀麦隆香蕉及大蕉田间的哈茨木霉(Trichoderma harzianum)菌株C 184对香蕉和大蕉根部病原菌柱枝孢(Cylindrocladium pteridis)及茄镰孢(Fusarium solani),尖镰孢(Fusarium oxysporum)和曲霉 (Aspergillus sp.) 的拮抗作用. 在对峙培养中上述病原菌菌丝生长均受到明显抑制;在赛咯酚分层培养中木霉菌株对上述病原菌菌丝生长的抑制率为67%～88%;木霉菌株培养滤液对上述病原菌菌丝生长的抑制率为52%～87% .电镜下观察到木霉菌株对柱枝孢及镰孢霉的寄生过程,认为这可能是主要拮抗机制之一; 此外木霉菌株在液体培养中产生的抗生素及细胞壁降解酶也可能是抑制病原菌菌丝生长的主要原因.     

姜瘟致病菌的分离与鉴定及其拮抗菌的筛选

以湖南省江永县姜瘟病重病区的土壤为材料，对土壤中的主要致病菌进行分离和鉴定，并筛选抑制致病菌的木霉菌。结果表明：姜瘟病重病区土壤中的主要致病菌有2种，分别为G1、H2，其中G1致病性较强，经过菌株形态观察和16S rDNA序列鉴定，发现H2为欧式杆菌(Erwinia spp.)，G1为劳尔氏菌(Ralstonia slanacarum)；通过对峙实验分析发现，编号为23的哈茨木霉菌(Trichoderma harzianum)对致病菌G1和H2具有较强的拮抗作用，可应用于姜瘟病的生物防治。     

木霉菌对灰葡萄孢菌的拮抗作用

对采自宁夏14个市县的170份土样及其它材料进行分离,得到96个木霉菌株,采用形态分类方法鉴定出9种木霉菌以及2种未知名菌种．它们分别为哈茨木霉（Trichoderma harzianum）、绿色木霉（T．viride）、长枝木霉（T．longibrachiatum）、康氏木霉（T．koningii）、拟康氏木霉（T．pseudokoningii）、项孢木霉（T．fertile）、黄绿木霉（T．aureoviride）、深绿木霉（T．atroviride）、钩状木霉（T．hamatum）以及T．sp1和T．sp2。拮抗作用和抑菌活性测定结果表明：11种木霉菌对葡萄、番茄和黄瓜灰霉病的致病菌——灰葡萄孢菌（Botrytis cinema Petssp．）均有不同程度的拮抗作用,其中哈茨木霉、绿色木霉、黄绿木霉、钩状木霉和T．sp1对病原菌的拮抗作用及抑菌活性显著,其生长速度比病原菌平均快1．1～3．0倍：在对峙培养中拮抗系数达Ⅰ级或Ⅱ级．其抑菌率高迭98．78％。     

哈茨木霉TH-1处理土壤对辣椒生长的影响

研究哈茨木霉TH-1处理土壤对辣椒的促生长作用及其机制.结果表明,含哈茨木霉TH-1的处理中,辣椒的长势明显优于未含哈茨木霉TH-1处理;相对不含哈茨木霉TH-1的处理来说,舍哈茨木霉TH-1的处理中辣椒的鲜重及叶绿素的含量均显著增加,增加幅度均在22.26%以上;辣椒叶片的硝酸还原酶活性也显著提高,提高幅度高达68.12%;含哈茨木霉TH-1的未灭茵土中辣椒的长势明显优于含哈茨木霉TH-1灭菌土壤中的辣椒的长势.同时,相对含哈茨木霉TH-1灭茵土,含哈茨木霉TH-1的未灭菌土中辣椒的鲜重、叶绿素的含量及硝酸还原酶的活性显著提高,分别增加了18.42%、15.9%和26.28%.土壤中施加哈茨木霉TH-1后,放线茵、乳酸杆菌和光合细菌数量分别增加64.71%、77.27%和58.62%,酵母的数量降低了52.94%.     

木霉菌对杂交水稻生长影响差异的研究

[目的]通过比较哈茨木霉（Trichoderma harzianum）抗药性标记菌株TUV-13和野生型菌株T2-16对水稻生长影响的差异,筛选出对水稻生长有更好促进作用的菌株,进一步推动木霉生防菌株在水稻上的应用。[方法]采用不同浓度的TUV-13和T2-16孢子悬浮液对水稻进行人工接种（浸种处理）,确定最适浸种浓度;室外盆栽试验采用常规方法测定水稻各个生长势指标。[结果]确定TUV-13和T2-16最适浸种浓度均为1×105个/ml;用此浓度的孢子悬浮液浸种均能提高种子活力,且TUV-13对水稻萌发的促进作用更显著,幼苗鲜重比经T2-16浸种处理增加4.85%,活力指数提高5.96%。盆栽试验显示,2个处理均能促进水稻植株根系和地上部分的生长,经TUV-13孢子悬浮液浸种的效果最显著。[结论]TUV-13对T优6135的生长具有更显著的促进作用,显示出TUV-13在水稻应用上的巨大潜力。