中药黄芪多糖的免疫佐剂作用

分别将黄芪多糖提取物、白油-吐温、氢氧化铝作为佐剂制备金黄色葡萄球菌灭活苗混合免疫家兔和奶牛,观察家兔免疫前后血清抗体滴度变化以及攻毒后白细胞数目变化和淋巴细胞百分比变化。对奶牛免疫后测其血清抗体和乳汁中体细胞数变化,结果注射疫苗后乳汁中体细胞数都有所下降,黄芪多糖组较其它组下降较快,幅度较大。黄芪多糖和抗原混合物免疫动物后未见不良反应,且抗原免疫血清抗体比氢氧化铝和白油-吐温佐剂组的抗体滴度增加快,幅度显著增高且抗体维持一个较高水平,而攻毒后家兔白细胞数和淋巴细胞数也较氢氧化铝和白油-吐温佐剂组增加较多。因此黄芪多糖是一种有效的佐剂。     

几种猪繁殖与呼吸综合征病毒阳性血清制备方法的比较

比较评价几种猪繁殖与呼吸综合征病毒阳性血清制备方法,分析各种方法的优缺点及其适用范围,找到一种操作简便、效果理想的方法。方法:20只成年家兔随机分为4组,分别制订不同的免疫方案进行免疫,获取猪繁殖与呼吸综合征病毒阳性血清。通过比较发现,四足掌、皮下、后大腿肌肉混合免疫程序简单,操作方便,且抗原用量较少;皮下、后大腿肌肉混合免疫所需抗原量较大,但免疫途径最简单,可用于需求量较大的免疫血清的制备;而静脉、后大腿肌肉混合免疫因过敏反应较大,会造成动物机体的严重损伤,故基本不予采用。     

牛的血液型研究(Ⅰ)关于延边黄牛血型抗原的免疫

选择20头健康的延边黄牛,作为免疫群。用43种国际标准抗血清检查了牛的血型,确定了20对免疫组合。免疫实验采用了同种免疫方法,免疫间隔为7天,免疫次数为5次。第一次免疫后,20个免疫受体都产生了免疫抗体。用倍数稀释法测定了每次免疫注射后的抗体价。第一次免疫后,免疫血清的抗体价为1:32～1:512,平均1:204,8;第三次免疫后,免疫血清的抗体价为1:256～1:2,048,平均1:973.8;第五次免疫后,多价抗血清的抗体价为1:512～1:16,384,平均1:5,196.8。通过实验得知,已产生数十种抗体种类,抗体价随着免疫次数的增大而逐渐递增,其幅度随个体而异。产生抗体种类多的抗体价高,否则低。     

不同方法制备兔病毒性出血症高免血清效果比较

本试验采用两种方法制备兔病毒性出血症高免血清,并对其血清学效价进行了对比。结果,加福氏佐剂的灭活疫苗多次免疫注射获得的高免血清血凝抑制价(HI)为1:327 680,而注射甲醛灭活疫苗制备的高元血清 HI 仅为1:1280—1:2560。     

猪支原体肺炎活疫苗经肌肉注射的免疫效果评价

猪支原体肺炎活疫苗(168株)是一种以肺内注射途径免疫的弱毒活疫苗。为了拓展猪支原体肺炎活疫苗的免疫途径,评估猪支原体肺炎活疫苗(168株)配合佐剂以肌肉注射方式免疫猪群后的攻毒保护效果,选取20头7日龄猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp)阴性仔猪,将其随机平均分成4组,分别为健康对照组、感染对照组、肌肉注射免疫组和肺内注射免疫组。在免疫后采集血样并检测其中的Mhp IgG抗体,在首次免疫后42 d人工感染Mhp组织毒(JS株),攻毒28 d后评估肺脏的病变情况并测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中的Mhp含量。结果显示：免疫后肌肉注射免疫组动物产生了明显的Mhp特异性血清IgG抗体,而肺内注射免疫组动物在攻毒前未见明显的血清抗体;肌肉注射免疫组和肺内注射免疫组的攻毒保护率分别平均为88.89%和75.93%,且组间无显著性差异;感染对照组的BALF中Mhp单位含量极显著高于肌肉注射免疫组和肺内注射免疫组(P<0.01),2个免疫组间无显著性差异。结果表明：猪支原体活疫苗配合佐剂后经肌肉注射免疫可产生较好的免疫攻毒保护效果。本研究为猪支原体肺炎活...     

穴位注射V_(B2)注射液治疗牛前后肢跛行

牛前后肢跛行为常见病，多因牛负重上坡，奔走失脚，跌倒打碰或劳役过急，四肢肌肉或筋腱门挫所致。1995年，笔者采用穴位注射VB2治疗此类病牛32例，马2例，均获治愈。1治疗方法是：牛前肢跛行的取抢风穴注射VB2注射液30ml，后肢跛行的取百会、大胯、小胯三穴分别注射VB215ml，其后根据病情轻重2－3日重复一次。2肌肉注射：安痛定50—100ml，青霉素G钾1600万单位，链霉素500万单位，充分稀释，分点注入。3配合应用阶行镇痛散3009，加酒精100ml为弓l，开水冲调，一次灌服，2－3日重复一次。采用上述疗法效果甚佳，2－3日即可全愈。穴位注…     

不同佐剂免疫原对猪施毛虫病的免疫保护作用比较研究

采用７日龄旋毛虫成虫可溶性抗原与弗氏完全佐剂，白油－司班佐剂，ＩＳＡ２０６佐剂和蜂胶佐剂乳化制备免疫原，对试验猪腹腔注射免疫３次，每次间隔７ｄ，每头猪的免疫剂量为０．５ｍｇ。最后一次免疫后７ｄ攻击感染旋毛虫肌虫２００条／ｋｇ体重。于感染后第３５ｄ和第１２０ｄ剖杀试验猪，用消化法检查计算每克肌肉的荷虫数。     

不同佐剂大肠杆菌疫苗对免疫效果的影响

采用培养后大肠杆菌菌液、大肠杆菌与矿物油佐剂及氢氧化铝佐剂分别制备免疫原。对兔间隔14 d皮下免疫注射2次,每只兔的免疫剂量为1 ml/kg。最后一次免疫注射后20 d,取兔血清进行凝集试验测其抗体效价。结果表明：加矿物油佐剂苗的抗体效价最高（1∶256）,不加佐剂苗的抗体效价次之（1∶128）,加入氢氧化铝佐剂苗的抗体效价最低（1∶64）。     

卡那霉素与其他药物治疗猪气喘病的效果比较

迁安市某猪场气喘病病例达到 1 30头 ,外来病例 50头 ,共计 1 80头。死亡猪只 53头 ,剩余的猪只1 50头进行了猪气喘病治疗的比较效果观察 :1 50头猪只分成 3组 ,每组 50头。A组用卡那霉素肌肉注射 ,B组用卡那霉素肺部注射 ,C组用土霉素碱加植物油腰背深部肌肉注射。报告如下。卡那霉素肌肉注射 :每公斤体重 4万 IU,每天 1次 ,5天为一个疗程。其特点是方法简单易行 ,但只能控制病情发展 ,治愈率低 ,在 5天内 50头猪只60 %气喘病情缓解 ,达不到彻底治疗 ,40 %猪只还有临床症状 ,没有治愈。卡那霉素肺部注射 :猪只横卧保定 ,注射部位在肩关节…     

猪伪狂犬病活疫苗(Bartha-K61株,传代细胞源)最小免疫剂量的研究

为了确定猪伪狂犬病活疫苗(Bartha-K61株,传代细胞源)的最小免疫剂量,本研究将3批猪伪狂犬病活疫苗(Bartha-K61株,传代细胞源)分别稀释成10TCID_(50)/mL、102.0TCID_(50)/mL、103.0TCID_(50)/mL,每批疫苗各个稀释度分别免疫仔猪1.0 mL/头,并设攻毒对照组和阴性对照组。免后10 d连同攻毒对照组用伪狂犬病病毒GD1株进行攻毒保护试验,阴性对照组不攻毒。结果表明,10TCID_(50)/头和102.0TCID_(50)/头的免疫剂量在免疫后10 d依然无法提供完全的免疫保护,保护率为20%～80%(1/5～4/5);103.0TCID_(50)/头的免疫剂量能够保护仔猪抵抗PRV强毒的攻击,保护率为100%(5/5);攻毒对照组发病率为100%(5/5),死亡率为80%(4/5);阴性对照组全部健活。由此确定猪伪狂犬病活疫苗(Bartha-K61株,传代细胞源)最小免疫剂量为103.0TCID_(50)/头。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒NADC30(SY株)不同佐剂灭活疫苗免疫效果的研究

为研究利用不同佐剂制备的猪繁殖与呼吸综合征病毒NADC30(NADC30-PRRSV)SY株灭活疫苗的免疫效果,本研究对由ISA201VG和ISA70VG佐剂分别制备的2种NADC30-PRRSV SY株疫苗的免疫效果进行比较研究。本研究选用35日龄PRRSV抗体和抗原均为阴性的健康仔猪15头,随机分为3组:ISA201VG免疫组、ISA70VG免疫组和未免疫攻毒组。免疫组首免107.0TCID50/头,间隔21 d后以相同剂量进行二次免疫,采用ELISA法检测PRRSV血清抗体,结果显示,免疫后第35 d,ISA70VG免疫组5头试验猪PRRSV抗体阳转率达100%,ISA201VG免疫组5头试验猪PRRSV抗体阳转率达40%。二免后14 d采用NADC30-PRRSV SY株攻击试验猪,攻毒剂量为1×10~(5.0)TCID_(50)/mL,检测各组猪体温度化,结果显示,ISA70VG免疫组试验猪从攻毒后第8 d起体温超过40℃,持续6 d;ISA201VG免疫组5头试验猪只有1头体温超过40℃;未免疫攻毒对照组5头猪攻毒后第11 d~13 d体温升至40℃持续3 d。各组猪增重检测显示,ISA70VG佐剂免疫组与未免疫感染对照组相比较,体重呈现负增长且体重减少均在5%以上,而ISA201VG与未免疫感染组相比较,体重呈现正增长且增长均在7%以上。对PRRSV感染后两个实验组肺组织病理观察均可见肺脏呈局限性间质性肺炎和淤血,并伴有血栓、部分肺泡隔增宽,支气管周围有淋巴细胞浸润伴有间质性肺炎,但ISA70VG组比ISA201VG组组织病变更加严重。本实验表明ISA201VG佐剂效果更好,同时首次证实类NADC30-PRRSV(SY株)也能导致严重抗体依赖增强效应,不益作为疫苗株。     

羊源致病性柠檬酸杆菌4种佐剂灭活疫苗的免疫效果比较

为筛选羊源弗氏柠檬酸杆菌灭活菌体疫苗的合适佐剂,本研究以灭活羊源弗氏柠檬酸杆菌LK-1株为抗原分别制备其矿物油疫苗、铝胶疫苗、GEL疫苗和ISA201疫苗。将4种不同佐剂疫苗分别背部皮下免疫小鼠(0.2 mL/只)和颈部肌肉免疫羊(2 mL/只)进行疫苗安全性试验。用4种不同佐剂疫苗分别背部皮下免疫小鼠(0.2 mL/只)两次后使用3 LD50的LK-1株进行腹腔攻击;颈部肌肉免疫羊(2 mL/只)两次后使用2个致死剂量的LK-1株进行耳静脉攻击,比较4种不同佐剂疫苗对小鼠和羊的保护率并对小鼠和羊免疫血清进行微量凝集抗体检测。疫苗安全性试验结果显示,矿物油疫苗导致接种动物出现严重的精神沉郁、食欲减退、以及接种部位发生肿胀坏死和疫苗残留等不良反应;其它3种佐剂疫苗不良反应较轻微。动物免疫试验结果显示,4种佐剂疫苗对小鼠的攻毒保护率分别为85%、50%、80%、100%,对羊的保护率分别为100%、75%、0、100%。4种佐剂疫苗综合比较,ISA201疫苗使接种动物产生最轻微的副反应,而且能产生较高的抗体水平和最强的保护力。本研究为进一步开发羊柠檬酸杆菌病的灭活疫苗奠定基础。     

牛生长激素抗独特型抗体促生长作用机理研究：兔抗牛生长激素抗？…

选用８只新西兰白兔来制备牛生长激素抗独特型抗血清，初次免疫以及弗氏佐剂乳化抗原，加强免疫用不完全弗氏佐剂乳化，最后一次加强注射后１０ｄ采血，采用酶联免疫吸附试验来测定抗血清滴度和血清阻断率。     

马鼻肺炎诊断方法的研究——Ⅰ补体结合试验

关于马鼻肺炎的补体结合试验,国内尚未见报道。国外的报道虽然不少,但方法各不相同,如在抗血清的制备方面,Kawakami等(1962)采用脑内及腹腔免疫法;Kerny(1970),用静脉结合肌肉注射的方法;Bunous等(1972),用加佐剂的抗原反复肌肉注射的方法;还有经鼻腔接种免疫的方法(Gutekuns)等等(1978)。在抗原制备上曾有用超速离心,高速高心、乙醚处理以及超声波处理等方法。就我国分得的马鼻肺炎病毒(EHV_1—0102毒株)来说,究竟采用什么方法较好?尚不清     

硫酸化黄芪多糖对IBD疫苗接种雏鸡免疫水平的影响

200只14日龄雏鸡随机均分为9组,6个试验组分别肌肉注射高、低剂量的3种硫酸化黄芪多糖（SAPS）,即SAPS40、SAPS50和SAPS60。2个多糖对照组注射高、低剂量的未修饰黄芪多糖（APS）,无佐剂对照组注射等量生理盐水,每天1次,连续3天,第4天用鸡传染性法氏囊病（IBD）疫苗免疫,2周后二免。分别于首次免疫后第7,14,21,28天翼静脉采血,用琼脂扩散法测定血清抗体效价;于首次免疫后第14,21,28和35天心脏采血测定T淋巴细胞增殖。结果表明,3种修饰多糖均能显著提高血清抗体效价。     

牛生长激素抗独特型抗体促生长作用机理研究--兔抗牛生长激素抗体纯化与鉴定

选用８只新西兰白兔来制备牛生长激素抗独特型抗血清，初次免疫以完全弗氏佐剂乳化抗原，加强免疫用不完全弗氏佐剂乳化，最后一次加强注射后１０天采血，采用酶联免疫吸附试验来测定抗血清滴度和血清阻断率：３只兔血清抗体滴度分别为１１２８０００，１５１２０００和１１２８０００，而血清阻断率在血清稀释率为１２０００到１２５６０００时处于２７．７％到９２．９％范围。随后用硫酸铵沉淀结合ＤＥＡＥ纤维素层析对血清抗体进行了纯化，醋酸纤维素薄膜电泳试验结果表明ＩｇＧ成分获得了纯化。     

磷酸钙作为O型口蹄疫多肽疫苗佐剂的研究

为了探索磷酸钙(calcium phosphate,CaP)作为多肽疫苗佐剂的可行性,本研究以O型口蹄疫多肽疫苗为抗原,采用共沉淀法制备CaP-多肽复合物,测定包封率。将制备好的疫苗,分别在0、14、28 d腹腔注射免疫Wistar大鼠,尾静脉采血检测口蹄疫抗体水平。结果显示,CaP可包裹一定量的O型口蹄疫多肽,包封率达到50%,免疫大鼠后油佐剂组抗体效价在14 d达到26,42 d增至210并可维持35~42 d;CaP组在21 d后陆续产生抗体,抗体水平较油佐剂低,为27~28。结果表明,CaP作为佐剂相对游离多肽可以提高O型口蹄疫多肽疫苗免疫效果,但抗体水平相对油佐剂低。     

适用于蛋鸡免疫的猪源ETEC菌毛蛋白佐剂的筛选

为筛选卵黄抗体的优良佐剂,以3株猪源致病性大肠杆菌(ETEC)菌毛蛋白为模式抗原,分别与6种佐剂制备多价菌毛蛋白疫苗,免疫海兰褐壳蛋鸡。结果显示,3次免疫后,所有试验组蛋鸡产蛋率均有不同程度下降,但SPA、ISCOMs、弗氏佐剂、蜂胶佐剂组的产蛋率下降程度较为轻微;对鸡体血清抗体和制备获得的卵黄抗体的效价检测结果均显示:SPA和ISCOMs组虽较SPB、SPC、弗氏佐剂组抗体水平略低,但持久度较好,且通过对蛋鸡外观形态和注射部位组织变化情况的观察显示,两者不会刺激鸡体热反应或炎症反应,无任何表观副作用。因此,更适合作为蛋鸡制备猪源ETEC卵黄抗体的优良佐剂。     

不同佐剂免疫原对猪旋毛虫病的免疫保护作用比较研究

采用７ 日龄旋毛虫成虫可溶性抗原与弗氏完全佐剂（ＦＣＡ） 、白油司班佐剂、ＩＳＡ２０６佐剂和蜂胶佐剂乳化制备免疫原，对试验猪腹腔注射免疫３ 次，每次间隔７ｄ ，每头猪的免疫剂量为０５ｍｇ。最后一次免疫后７ｄ 攻击感染旋毛虫肌幼虫２００ 条／ｋｇ 体重。于感染后第３５ｄ 和第１２０ｄ 剖杀试验猪，用消化法检查计算每克肌肉的荷虫数。结果４ 种佐剂免疫猪肌幼虫的减虫率分别为９６１２ ％ 、８７９７ ％ 、８９８４ ％ 和９５１５ ％ ，其中以ＦＣＡ 和蜂胶佐剂免疫组的保护作用最好。表明４ 种佐剂均具有免疫增强作用，而蜂胶佐剂在乳化程序、注射、价格及免疫增强作用等方面都优于其它佐剂，更具有开发应用前景。     

膜分离法纯化浓缩的猪细小病毒灭活疫苗效果研究

为了研究纯化浓缩的猪细小病毒灭活疫苗的免疫效果,应用微滤/超滤管式陶瓷膜分离系统对猪细小病毒细胞收获液进行纯化浓缩,使浓缩液病毒平均含量由10~(4.7)TCID_(50)/mL提高到10~(6.5)TCID_(50)/mL;将纯化浓缩的病毒液经检验合格后,进行甲醛灭活,与注射用矿物白油佐剂制成油包水灭活疫苗;按照猪细小病毒灭活疫苗的质量标准,对制备的灭活疫苗进行检验与免疫效果试验。结果显示:纯化浓缩的猪细小病毒液杂蛋白去除率平均达到71.6%左右;制备的三组灭活疫苗检验均合格;免疫至63 d时,免疫猪体内抗猪细小病毒抗体(HI)水平分别为:纯化浓缩的灭活疫苗平均高达9.62 log_2稀释倍数,常规疫苗平均为8.78log_2稀释倍数,差异显著(P0.05)。试验表明:疫苗病毒细胞收获液进行膜纯化技术处理后,免疫效果显著优于未经纯化的常规灭活疫苗。