铁线莲‘水晶喷泉’茎段组培再生体系的建立

本研究以铁线莲品种‘水晶喷泉’(Clematis Crystal Fountain’Fairy Blue’)的带芽茎段为初始外植体,通过研究灭菌时间、激素浓度配比、基础培养基类型等因素对茎段腋芽的诱导、增殖、再生苗生根的影响,从而建立该品种从外植体—腋芽诱导—不定芽增殖—生根得到完整的植株再生体系。结果表明：最佳灭菌条件为5%次氯酸钠溶液灭菌10 min,污染率为22.2%,成活萌芽率为44.5%;带芽茎段诱导腋芽最适培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L+蔗糖30 g/L pH值为6.0～6.2,6-BA/NAA比值为20,诱导率为100%,此时苗生长良好且株高较高;腋芽增殖最适培养基为DKW+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L+蔗糖30 g/L pH值为6.0～6.2,6-BA/NAA比值为40,增殖系数为5.6;最佳生根培养基为DKW+IBA 1.0 mg/L+蔗糖30 g/L pH值为5.7,生根率可达94.4%,本研究可为铁线莲品种‘水晶喷泉’的组织培养、规模化种植提供相关资料和遗传转化体系建立提供了科学依据。     

丰花月季YJ‘2004-2’组培快繁技术研究

以丰花月季YJ‘2004-2’带腋芽茎段为外植体,MS为基本培养基,通过不同浓度的激素研究丰花月季YJ‘2004-2’组培快繁技术,建立了丰花月季YJ‘2004-2’的快繁体系。结果表明:(1)芽的最佳诱导培养基是MS+6-BA2.0 mg/L+NAA0.01 mg/L;(2)芽的最佳增殖培养基是MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.1mg/L;(3)生根的最佳培养基是1/2MS+NAA0.1mg/L;(4)组培苗移栽到蛭石基质时,成活率高达83.3%。     

两种全缘组铁线莲花卉的组培快繁

铁线莲具有极高的观赏价值,是近年来最流行的花园植物之一,通过植物组织培养技术是实现该属植物无性繁殖和产业化生产的最佳途径。本研究以3年生的‘粉红欣喜’和‘灵感’铁线莲的带芽茎段为外植体,进行组培快繁的研究。结果表明,适于‘粉红欣喜’的初代培养基为MS+1 mg/L BA,腋芽萌发率为100%且新生枝条形态正常;增殖最佳培养基为MS+0.5 mg/L BA+0.02 mg/L NAA,增殖系数为4.54;生根最佳培养基为1/2MS+1.5 mg/L IBA+1 mg/L IAA,生根率高达76.92%。适于‘灵感’初代培养基为MS+1.5 mg/L BA,新生枝条形态正常且萌发率为100%;增殖最佳培养基为MS+1.5 mg/L BA+1 mg/L KT+0.2 mg/L NAA,增殖系数为5.76;生根最佳培养基为1/2MS+1.5 mg/L IBA+0.5 mg/L IAA,生根率高达92.31%。本研究建立了‘粉红颀喜’和‘灵感’铁线莲完整的组织培养技术体系,为铁线莲优良种质资源的推广应用提供了理论基础。     

濒危植物半枫荷Semiliquidambar cathayensis组织培养快繁技术研究

以当年生半枫荷带有腋芽的茎段和幼叶作为外植体,开展组织培养试验研究。结果表明,半枫荷叶片在初代培养基MS+BA 2 mg/L+NAA 0.5 mg/L上愈伤组织诱导率为92%,芽诱导率为16.7%;腋芽在初代培养基MS+BA 1 mg/L+NAA0.1 mg/L上腋芽诱导率为58%,茎段能直接诱导出芽,是半枫荷快繁的主要外植体。新生芽在继代增殖培养基MS+6 BA0.5 mg/L+NAA 0.05 mg/L上芽增殖系数为3.93,增殖培养基以MS+6 BA(1～0.5)mg/L+NAA(0.01～0.05)mg/L较好;丛生芽生根培养基以1/2 WPM+NAA 2 mg/L+活性炭0.2%为宜,生根率可达90%以上;松林腐殖土加珍珠岩(4∶1)比较适合半枫荷的生长,移栽成活率为100%,苗木长势好,叶色绿,可提供大量半枫荷优质种苗。     

山新杨组织培养快繁技术研究

山新杨冬季枝条经FC处理,选择萌发新枝的茎段和叶片为接种外植体;诱导茎段产生腋芽的培养基为1/2MS+6-BA0.2~0.5mg/L+NAA0~0.5mg/L,诱导叶片产生不定芽的培养基为1/2MS或MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.5mg/L;丛生芽快繁培养基MS+6-BA0.3mg/L+NAA0.3mg/L,每20天继代一次,繁殖倍数20左右;生根培养基为1/2MS或MS,附加0.1~0.5mg/L的多效唑,对生根有促进作用。     

附子茎段组培快繁体系的建立

为探讨附子丛生芽的诱导、增殖及不定根诱导条件。本研究以附子带腋芽茎段为外植体,以MS和1/2MS为基本培养基,添加不同浓度的6-BA、NAA、TDZ、IBA等植物生长调节剂,观察附子丛生芽的诱导、增殖、生根情况。结果发现,附子茎段经75%乙醇处理30 s后,0.1%Hg Cl2灭菌10 min,污染率为27.78%,存活率可达84.61%。附子第三个腋芽,诱导率为53.34%,死亡外植体少。丛生芽在MS+6-BA 2 mg/L+NAA0.3 mg/L条件时诱导率为86.67%,芽长1.947 cm,植株茎干粗壮。增殖培养时添加TDZ 2 mg/L+NAA0.3 mg/L,增殖系数达到4.029,苗粗壮,叶片浓绿。生根培养基条件为1/MS+IBA 0.5 mg/L时,15 d的生根率可达100%,平均根长0.906 cm,平均根数10.5条,叶色翠绿,生长旺盛。研究表明,最佳的取材部位为第三个腋芽,丛生芽诱导的最佳培养基为MS+6-BA 2 mg/L+NAA 0.3 mg/L,丛生芽增殖培养基中添加TDZ 2 mg/L+NAA 0.3 mg/L的增殖效果最好,适宜的生根培养基为1/2MS+IBA 0.5 mg/L。本研究为附子快繁体系的建立和工厂化育苗提供了理论依据。     

粉葛丛生芽诱导与增殖条件

为短期内获得大量优质的粉葛丛生芽,从而筛选粉葛丛生芽诱导的适宜条件。本研究以粉葛(Pueraria montana var. thomsonii)幼嫩带节茎段为外植体,探索外植体消毒条件,腋芽萌发培养基、丛生芽诱导培养基丛生芽增殖培养基。结果表明:(1)外植体最佳消毒条件为75%酒精浸泡30 s后,0.1%氯化汞溶液(加2滴吐温80℃)处理10 min,污染率为10.00%,腋芽萌发率为93.33%。(2)最佳腋芽生长培养基为MS+6-BA 0.2 mg/L+NAA 0.1 mg/L+活性炭0.2 g/L,腋芽萌发率达93.33%。(3) MS+TDZ1.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L+酸水解酪蛋白200 mg/L为最佳丛生芽诱导培养基,丛生芽诱导率达90.00%。(4) MS+IBA 0.2 mg/L+6-BA 1.0 mg/L+KT 1.0 mg/L为最佳丛生芽增殖培养基,增殖系数为1.77。本研究结果可为基于丛生芽诱导的粉葛离体快繁体系建立提供依据。     

‘卓锦’万代兰花梗诱导植株再生的研究

为建立‘卓锦’万代兰的组培快繁体系,研究植物外源激素和基本培养基对‘卓锦’万代兰花梗腋芽诱导、丛生芽增殖和生根的影响。结果表明：以花梗为外植体,在1/2MS+ NAA 0.5 mg/L+ BA 2.0 mg/L培养基上,腋芽诱导率可达65%,以花梗基部向上第3节花梗腋芽诱导率最高,可达80%;在6-BA 3.0 mg/L + NAA 0.2 mg/L的激素组合下,芽的繁殖系数最高可达5.3,低无机盐浓度且含全量元素的1/2MS基本培养基较利于‘卓锦’万代兰芽的诱导增殖;丛生芽高度为2 cm左右时,壮苗生根后移栽成活率可达99%。     

3个铁线莲品种组培快繁体系的建立

本试验以铁线莲‘卡西斯’(Clematis Cassis)、‘大河’(Clematis Taiga)、‘倾盆大雨’(Clematis Cloudburst)为外植体,研究在3、4月外植体的消毒最佳时长时间,结果表明,3、4月中,‘卡西斯’的最佳消毒时长分别是3 min和4 min,‘大河’的最佳消毒时间均为4 min,‘倾盆大雨’的最佳消毒时长分别为3 min和4 min;以‘卡西斯’、‘大河’、‘倾盆大雨’带芽茎段为外植体,以3种激素不同浓度配比实验,筛选出3个铁线莲品种增殖继代培养的最佳配方分别为:‘卡西斯’:1/2MS+0.2 mg/L 6-BA+0.01 mg/L NAA+0.1 mg/L VC+20 g香蕉;‘大河’为:1/2MS+0.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L KT+0.1 mg/L NAA+0.1 mg/LVC+20 g香蕉;‘倾盆大雨’为:1/2MS+1.0 mg/L 6-BA+0.05 mg/L KT+0.01 mg/L NAA+0.1 mg/L VC+20 g香蕉。2 mg/L的NAA可以显著提高生根率,但即使不进行生根诱导,培养时间超过30 d后各品种也会相继出现生根现象。     

甜叶菊离体培养快繁体系的建立

本试验以大田甜叶菊为试验材料,通过研究不同外植体、不同激素种类和浓度配比对丛生芽诱导、增殖培养及不定根诱导的影响,建立了甜叶菊组培快繁体系。结果表明:带腋芽茎段是甜叶菊组培快繁最适外植体;诱导丛生芽的最佳培养基为MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L,平均诱导率为88.1%;继代增殖培养基为MS+6-BA 0.5 mg/L+KT 4.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L+GA30.2 mg/L,单芽平均增殖个数为4.1;不定根最适诱导培养基为1/2 MS+NAA 0.2 mg/L,生根率为95%;组培苗移栽成活率达70%以上。本试验研究结果为甜叶菊组培苗的产业化生产提供了一定的理论基础。     

山新杨组织培养快繁技术研究

山新杨冬季枝条经FC处理,选择萌发新枝的茎段和叶片为接种外植体;诱导茎段产生腋芽的培养基为1/2MS 6-BA0.2~0.5mg/L NAA0~0.5mg/L,诱导叶片产生不定芽的培养基为1/2MS或MS 6-BA0.5mg/L NAA0.5mg/L;丛生芽快繁培养基MS 6-BA0.3mg/L NAA0.3mg/L,每20天继代一次,繁殖倍数20左右;生根培养基为1/2MS或MS,附加0.1~0.5mg/L的多效唑,对生根有促进作用。     

湄潭苔茶良种组培快繁技术初探

为探索贵州茶树组培快繁技术,采用湄潭苔茶地方良种带腋芽茎段为外植体,通过不同培养基、激素和浓度配比试验,得到适宜芽诱导的培养基配方为1/2MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.1mg/L+Vc1.0g/L+AC1.5g/L,芽诱导率可达68%;适宜芽增殖的培养基配方为MS+6-BA0.2mg/L+NAA0.1mg/L+GA33.0mg/L。     

北苍术组织培养与快繁技术研究

为缓解北苍术种苗短缺以及保护种质资源,本试验采用组培快繁技术建立了北苍术快速繁殖技术体系。以北苍术幼嫩带芽茎段为外植体,研究消毒方法及激素类型对北苍术组培苗快繁影响。结果表明:使用75%酒精消毒30s,0.1%氯化汞加吐温20消毒15min,消毒效果最好;不定芽增殖最适培养基为MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.25mg/L;最适宜的伸长培养基是MS+GA30.8mg/L+IBA 0.1mg/L+NAA 0.1mg/L,组培苗伸长高度、长势均为最好;MS培养基即可作为北苍术茎段组培苗生根培养。     

树状月季‘2004-4’的组织培养及快繁体系的建立

以树状月季‘2004-4’的茎段为外植体,MS为基本培养基,研究不同组合及浓度的植物生长调节剂对树状月季快繁体系建立及不同配比的基质对组培苗移栽成活的影响。结果表明:(1)芽的最佳诱导培养基:MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.2mg/L;(2)芽的最佳增殖培养基:MS+6-BA 2.5mg/L+NAA 0.1mg/L;(3)生根的最佳培养基:1/2MS+NAA 0.05mg/L;(4)组培苗移栽到东北山土和珍珠岩比例为2∶1的混合基质时,成活率高达74.2%。     

荷兰菊不同外植体组织培养快繁体系

本试验分别以荷兰菊茎段、花托、叶片为外植体,通过不同的处理方式,建立其高频再生组培快繁体系。结果表明:茎段诱导丛生芽最佳培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.3 mg/L+GA30.5 mg/L,平均诱导不定芽数为4.95个;花托诱导不定芽最佳培养基为MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.6 mg/L,诱导率最高为75%;叶片诱导不定芽最佳诱导培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 1.0 mg/L,诱导率67.4%;最佳增殖培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.4 mg/L,其增殖倍数为8.3倍,且幼苗生长情况优于其它处理;最佳生根培养基为1/2 MS+NAA 0.4 mg/L。该研究建立了荷兰菊稳定高效的组培再生体系,为工厂化育苗与大面积推广奠定了基础。     

圆锥绣球‘北极熊’组培快繁体系的建立

为了探索木本花卉圆锥绣球的组培快繁体系的建立,本研究以‘北极熊’品种的幼嫩的茎尖和带腋芽的茎段为外植体,探索了适宜的外植体的采集时间、预处理及消毒方法、适宜的启动培养、增殖培养、生根培养基及培养方法。结果表明:适宜的茎段外植体采集时间为4月份;预处理及消毒方法为:将枝条先用75%百菌清1 000倍液浸泡约10 min后冲洗,再用洗衣粉溶液浸泡约5 min,然后流水冲洗1～1.5 h,然后在超净工作台内,用75%酒精浸泡消毒60 s,无菌水冲洗3～5遍后,再用0.1%～0.2%HgCl_2消毒(4+4) min,然后用无菌水反复冲洗3～5次,其成活率达76.7%。启动培养的最佳配方为MS+6-BA0.5 mg/L+NAA 0.06 mg/L,诱导率可达84.2%。较适宜的增殖配方为:MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L,附加蔗糖30 g/L,增殖系数达6.0。适宜的生根培养基为:1/2MS+IBA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L,附加蔗糖20 g/L,生根率达83.3%,平均根长2.7 cm。本研究结果对圆锥绣球‘北极熊’的组培快繁提供了技术支持。     

铁皮石斛组织培养及快繁技术研究

为建立铁皮石斛快繁技术体系,给生产提供参考,研究了铁皮石斛组织培养过程中的灭菌方法、腋芽诱导、原球茎的诱导、增殖与分化的最佳培养基配方。以铁皮石斛成熟茎段为外植体,探讨1/2MS培养基或MS培养基中添加不同浓度的激素对铁皮石斛组织培养过程中各生长、分化阶段的影响。研究表明,腋芽诱导最适宜培养基的配方为MS+ 6-BA 2.0 mg/L+ NAA 0.5 mg/L,诱导率达91.28%,平均芽数达2.34;原球茎诱导的最适宜培养基为1/2MS+ 6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L+2,4-D 1.0 mg/L,诱导率可达66.67%;原球茎增殖最佳培养基为1/2MS+ 6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.3 mg/L,原球茎分化最适宜培养基为1/2MS+ NAA 1.0 mg/L+ 6-BA 3.0 mg/L+ KT 1.0 mg/L,最适宜生根的培养基配方为1/2MS+NAA 2.0 mg/L+ AC 0.5 g/L。     

‘中黄1号’茶树带腋芽茎段组培快繁体系建立

本研究以‘中黄1号’茶树带腋芽茎段为外植体,探索外植体的取样时间和消毒条件、最佳萌发和增殖培养基、生根和壮苗培养基配方以及炼苗移栽条件。结果表明:最佳外植体取样时间为4月份,茎段经75%酒精浸泡60 s,0.1%升汞浸泡12 min,外植体存活率为91.3%,污染率为2.7%,以MS+2 mg/L 6-BA+1 mg/L GA_3作为腋芽萌发培养基,培养40 d出芽率为91.7%,以MS+4 mg/L 6-BA+1 mg/L IBA作为增殖培养基,培养45 d增值系数可达3.8。以MS+1 mg/L 6-BA+0.5 mg/L IBA作为壮苗培养基进行壮苗,经45 d可培养至约4～5 cm后诱导生根,在50 mg/L IBA无菌溶液中浸泡5 min后,转至1/2MS+1.5 mg/L IBA生根培养基中,生根率可达82.5%。自然光条件下开瓶室温炼苗5 d,移栽到以营养土和蛭石2∶1比例基质中,成活率最高,移栽成活率为66.7%。本研究建立‘中黄1号’带腋芽茎段组培快繁体系,为‘中黄1号’茶树工厂化育苗提供技术支持。     

吐烟花的组织培养

以吐烟花茎段为试验材料,研究其表面消毒方法和不同激素配比的培养基对吐烟花愈伤组织诱导、丛生芽扩繁以及幼苗生根的影响。研究结果表明,外植体表面消毒以70%酒精消毒15 s,无菌水漂洗1次,0.1%升汞浸泡6 min,无菌水漂洗1次后,再用0.1%升汞浸泡6 min,无菌水漂洗4次的效果最佳;同时筛选出吐烟花植株再生的较好激素浓度配比的培养基：MS+3.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA适合愈伤组织诱导,MS+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA对丛生芽诱导与扩繁效果较好,MS+0.3 mg/L NAA有利于生根,移栽成活率达91%,且植株生长良好。     

四季凤仙的组织培养及快繁体系的建立

以四季凤仙的幼嫩茎段为外植体,MS为基本培养基,对四季凤仙的组织培养及快繁技术进行了研究。结果表明:最佳的外植体除菌方式为5%的NaClO处理5min;四季凤仙的最佳不定芽诱导培养基为:MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.10mg/L+GA30.01mg/L;芽的最佳增殖培养基为:MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.5mg/L;最佳生根培养为:1/2MS+IAA1.0mg/L。