宁夏优质水稻品种D10高效再生体系的建立

为了利用基因沉默技术定向改良宁夏香稻品种,短期内建立可获得成苗的高效成熟胚再生体系,以宁夏优质水稻品种D10成熟胚作为外植体,通过植物组织培养的方法,研究了培养基、外源激素、光照和温度对外植体培养及再生的影响。结果表明：不同培养基对愈伤组织诱导率有着不同的影响,MS培养基最低,N6D培养基最高;32℃持续光照培养的愈伤组织明显优于30℃ 12 h/d光照培养;在分化培养基中添加TDZ,发现浓度为1 mg/L的TDZ与低浓度的IAA结合使绿苗分化率提高到100%;另外添加2 mg/L ABA的N6D培养基中愈伤组织诱导率为100%。最终该品种的最优再生体系为：32℃持续光照培养并添加ABA 2 mg/L的N6D培养基;分化培养基为B5+TDZ 1mg/L+IAA 0.2mg/L;生根培养基为1/2MS+KT 2 mg/L+NAA 0.2 mg/L+CH 2 g/L+Sorb 30 g/L。本研究建立了宁夏优质水稻品种D10成熟胚再生体系。     

贵州地方稻种香禾糯组织培养再生体系建立

本研究以贵州地方香禾糯从江黑禾和来拢为材料,研究了不同激素组合对丛生芽诱导和再生芽生根的影响。结果表明,在本研究条件下,MS培养基添加2.0mg/L 2,4-D和0.5mg/L 6-BA是从江黑禾最佳芽诱导培养基,在MS培养基添加4.0mg/L TDZ及0.5 mg/L IBA的培养基中培养10d后,转至添加4.0mg/L6-BA以及0.5mg/L NAA培养基继续培养,为从江黑禾茎尖诱导丛生芽最佳条件;以N6培养基添加1.0mg/L 2,4-D和0.1mg/L 6-BA是来拢最适芽诱导培养基,以MS培养基添加0.2mg/L NAA和2.0mg/L6-BA为来拢茎尖丛生芽诱导培养基。通过本研究建立的组织培养诱导再生技术,从江黑禾及来拢均获得移栽成活并能正常开花结籽的再生植株。     

活性炭对小白菜游离小孢子培养的影响

以24个小白菜品种为材料,通过在NLN培养基中添加不同浓度活性炭,研究其对游离小孢子培养的影响.结果表明:在NLN-13培养基中添加活性炭(0.5 g/L),有利于小孢子胚的诱导和形成,供试材料(N4,N8)添加活性炭处理胚诱导率较未添加活性炭的处理分别提高19,66.5倍.采用添加活性炭(0.5 g/L)的NLN培养基对24份小白菜品种进行游离小孢子培养,有20份材料诱导出胚,培养成功率为83.3%.表明添加活性炭的培养基对小白菜游离小孢子培养有较好的效果.不同基因型间胚诱导率差别较大,每花蕾诱导胚数为0.4～86.7个.依据胚诱导率的高低可将其分为极易诱导、易诱导、难诱导和不能诱导出胚4类.B5 6-BA 0.2 mg/L NAA 0.02 mg/L 活性炭0.5 g/L 3%蔗糖 1%琼脂培养基有利于幼胚长成植株.     

玉米幼胚再生体系的建立

为建立高效稳定的玉米再生体系,以玉米幼胚为受体材料,研究了基因型对胚性愈伤组织诱导率的影响以及适宜玉米幼胚生长的诱导培养基、继代培养基、分化培养基及生根培养基。结果表明,基因型可显著影响胚性愈伤组织诱导率,H99×A188的诱导率最高(45.28%);N6培养基适合用于胚性愈伤组织的诱导同时也适合继代培养;激素组合为MS+6-BA 1.0 mg/L+KT 2.0 mg/L的分化培养基出苗率和转化率最高,易成活;1/2MS培养基附加IBA1.0 mg/L和1.0 g/L活性炭适合于生根培养。     

小对叶植株再生及遗传转化体系构建

为了利用生物技术方法开发及改良水生植物小对叶,以小对叶（Bacopa monnieri）叶片为外植体,建立其组织培养再生体系及根癌农杆菌介导的遗传转化体系。结果表明：小对叶叶盘最佳愈伤组织诱导培养基是MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.02 mg/L;最佳分化培养基是MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.05 mg/L;最佳生根培养基是1/2MS+IBA 0.1 mg/L。最佳的根癌农杆菌介导的小对叶遗传转化条件是：外植体预培养2天,侵染菌液OD600为0.5,侵染时间7 min、共培养4天和延迟筛选4天,可获得最高转化率21.4%。     

降低玉米成熟胚愈伤组织褐化的初步研究

本研究以k12、137等2个骨干自交系的成熟胚为外植体,以N6培养基为基本培养基,研究培养基中附加甘露醇、Vc、活性炭并辅以生长调节物质6-BA、2,4-D对玉米成熟胚愈伤组织褐化的影响。结果表明:培养基中附加甘露醇、Vc、活性炭对愈伤组织的褐化影响不同,其抗褐化能力为:甘露醇(20g/L)Vc(2mg/L)活性炭(2g/L)空白。辅助添加6-BA、2,4-D时防治褐化作用更加明显,且添加的浓度不同,防治效果也不同,其中N6培养基+20g/L甘露醇+0.2mg/L6-BA+4mg/L2,4-D效果最佳。另外,暗培养能显著减轻褐化的发生,有利于愈伤组织的形成。     

甜叶菊花药离体培养技术体系的建立

以‘皖甜1号’甜叶菊花蕾为试验材料,利用正交设计L9(34),分别以MS、B5和N6为基本培养基,研究了不同浓度的NAA、6-BA以及蔗糖和低温预处理、暗处理时间等条件,对甜叶菊花药愈伤组织诱导的影响以及不同培养基对甜叶菊花药愈伤组织分化影响。试验得出甜叶菊花药愈伤组织最佳诱导的培养基配方为MS+3 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+60 g/L蔗糖+6 g/L琼脂,低温预处理1 d、暗培养14 d有利于甜叶菊愈伤组织的诱导,甜叶菊愈伤组织分化诱导的最佳培养基配方为MS+1 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+30 g/L蔗糖+6 g/L琼脂,不定芽在不加任何植物生长调节剂的MS培养基上伸长后,接种在1/2 MS+0.1 mg/L NAA+20 g/L蔗糖+6 g/L琼脂培养基上生根效果好,生根率可达93.33%。该试验初步建立了甜叶菊花药离体培养技术体系,获得了甜叶菊花药培养再生植株,为甜叶菊新种质的创制和新品种的选育提供了帮助。     

宁夏主栽水稻品种高频再生体系的建立

通过对宁夏多个主栽水稻品种愈伤组织的培养,结果表明,诱导水稻愈伤组织的最适培养基是:N6+2mg/L 2,4-D+0.5/L水解酪蛋白+0.5g/L L-脯氨酸+8g/L琼脂+30g/L蔗糖;水稻愈伤组织最适分化培养基是:MS+2mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA;水稻的最适生根培养基为:MS+0.5mg/L NAA.筛选出了诱导愈伤组织和愈伤组织分化的最适激素浓度配比和最适分化条件.     

牛心朴子的组织培养与快速繁殖

1 植物名称 牛心朴子(Cynanchum komarovii ALIljinshi). 2 材料类别 无菌胚轴. 3 培养条件 种子萌发与生长培养基:(1)种子萌发培养基:MS培养基;(2)不定芽诱导培养基:MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L;(3)生根培养基:1/2 MS+IBA 0.5 mg/L.上述培养基均添加3%蔗糖和0.7%琼脂,pH 5.8～6.0.培养温度为23～26 ℃,光照时间为16 h/d,光照强度约34μmol/(m·s).     

马铃薯试管苗快繁培养基的优化研究

针对马铃薯试管苗快繁继代繁殖周期长和移栽后成活率低的实际问题,以马铃薯品种克新1号脱毒试管苗为试验材料,采用多因子正交试验L9(34)设计方法,以MS培养基中4种无机盐CaCl2、Ca(N03)2、KH2P04、KNO3为试验因素,研究不同无机盐浓度对马铃薯试管苗生长的影响。结果表明,在CaC12浓度为Ommol/L、Ca(N03)2浓度为20mmol/L,KH2P04浓度为6mmol/L、KN03浓度为18mmol/L条件下,克新1号马铃薯试管苗的株高、茎粗、根系、茎叶鲜重生长达到最好。本研究结果可为马铃薯组培快繁过程中培养基制备提供依据。     

不同培养条件对黄檗快速繁殖的影响

以黄檗幼嫩的茎尖和茎段为材料建立外植体，以MS培养基为基本培养基进行黄檗的组培快繁，研究不同培养条件对黄檗快速繁殖的影响。结果表明：75%的酒精消毒8 s+0.1%HgCl₂消毒4 min对外植体消毒效果最好；以6-BA 0.7 mg/L+NAA 1.0 mg/L的MS培养基对黄檗茎段的诱导效果最好；以NAA浓度为0.7 mg/L的MS培养基生根效果最好；黄檗组培苗在培养30 d后进行转培对黄檗组培苗的生长最好。     

环状芽孢杆菌产β-甘露聚糖酶的产酶条件及粗酶性质研究

为确定环状芽孢杆菌WXY-100的最佳摇瓶培养工艺,采用了L9(34)正交试验对培养基成分以及培养条件进行了优化.结果表明,最佳培养基成分为:酵母抽提物20g/L,魔芋粉20g/L,(NH4)2SO4 2g/L,KH2PO4 1g/L,MgSO4·7H2O 1g/L.最佳培养条件为:种龄8～12 h,接种量为6%,装液量为25 mL,pH 7.5,培养温度40℃,培养时间25 h.该酶在pH 4～8和60℃以下稳定,作用最适条件是pH 5.0和60℃,Cu2 和Co2 对酶有较显著的激活作用,而Hg2 对酶有强烈的抑制作用.     

耐寒美国红枫的组织培养体系的建立

本试验以美国红枫带芽茎段为外植体,通过筛选外植体消毒方式,筛选出适宜的初代诱导培养、继代增殖培养、壮苗培养、生根培养的培养基,建立美国红枫组织培养体系,从而为美国红枫工厂化育苗提供技术支持。研究结果表明：最佳的消毒处理方式是先后用75%酒精消毒30 s及10%次氯酸钠消毒10 min,平均存活率为64.15%;适宜的腋芽诱导培养基为改良MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L IBA。在改良MS培养基中添加0.005 mg/L TDZ+0.1 mg/L 6-BA+0.1 mg/L GA₃+0.1 mg/L IBA适用于美国红枫继代增殖培养,增殖系数为6.91;筛选最佳的壮苗培养基为MS+1.0 mg/L ZT+0.3 mg/L IBA;生根培养基为1/2MS+1.0 mg/L GA₃+2 mg/L 2,4-D,平均生根数量为5条。     

马齿苋离体培养再生体系的建立

以马齿苋幼嫩叶片和茎段为试验材料,对外植体灭菌、愈伤组织诱导、不定芽分化和试管苗生根的最佳条件进行研究,以期建立马齿苋再生技术体系,并为马齿苋的规模化繁殖和遗传改良等研究奠定基础。结果表明,最佳外植体灭菌方法为：用0.1%的升汞溶液浸泡8 min;最佳愈伤组织诱导培养基为MS+2,4-D 0.5 mg/L+6-BA 0.5 mg/L;最佳不定芽分化培养基为MS+6-BA 5.0 mg/L+NAA 0.4 mg/L;最佳生根培养基为1/2MS+IBA 2.0 mg/L。     

笔筒树孢子无菌培养体系的构建

通过笔筒树孢子的无菌培养试验,以筛选出笔筒树孢子无菌培养各过程的最佳条件,建立一套系统、高效、完整的笔筒树的无菌培养技术体系,最终实现笔筒树种苗的工厂化生产。本研究用即采的成熟的离叶黑褐色孢子为材料,用75%酒精处理10 s后再用0.1%升汞处理6 min结合进行笔筒树孢子的表面消毒,诱导孢子萌发的最适培养基为1/2 MS+6-BA 0.1 mg/L+IBA 0.2 mg/L,增殖培养基为MS+6-BA 0.05 mg/L+IBA 0.05 mg/L,分化培养基为MS+6-BA 0.2 mg/L+IBA 0.2 mg/L,生根培养基为MS+6-BA 0.05 mg/L+IBA0.05 mg/L,培养温度(25±2)℃,日光灯光源,光照时间12 h/d,光照强度2 000 lx。     

糯玉米的成熟胚培养

以糯玉米成熟胚为外植体作离体培养,研究在培养基中添加植物激素,硝酸银及有机物等对玉米愈伤组织的诱导和胚性愈伤继代生长的影响。结果表明：在诱导培养阶段,N6+6-BA 0.2mg/L+2,4-D 2mg/L的培养基诱导率最高,愈伤质量好;在继代培养阶段,MS+6-BA 0.2mg/L+2,4-D 2mg/L +AgNO310mg/L或CW (Coconut Water) 10%的培养基可改善胚性愈伤的质量。     

水稻植株再生与农杆菌介导的遗传转化研究

本研究以不同籼稻品种的成熟胚为材料，研究了不同培养基对愈伤组织诱导、分化和植株再生的影响，并研究了利用农杆菌介导bar基因和ipt基因的遗传转化技术。结果表明，采用NBD(N6salts B5Vitamin casamino acids 500mg／L proline 500mg／L glutamine 300mg／L mannitol 36．4g／L sucrose 30g／L 2，4-D 2mg／L 6-BA 0．2mg／L phytagel 2．5g／L，pH 5．8)为诱导培养基，MSD(MS casamino acids 500mg／L proline 500mg／L glutamine 300mg／L mannitol 36．4g／L sucrose 30g/L 2，4-D 2mg／L 6-BA 0．2mg／L phytagel 2．5g／L，pH 5．8)与NBD培养基交替继代培养，籼稻愈伤组织诱导率高、质量较好；采用MSR3^e(MS casamino acids 500mg／L glutamine 300mg／L proline 500mg／L mannitol 36．4g／L maltose 30g／L TDZ 0．2mg／L phytagel 5g／L pH 5．8)为分化培养基，愈伤组织分化率均在90％以上。本研究利用农杆菌介导，将Act启动子驱动的抗除草剂基因(bar)和异戊烯基转移酶基因(ipt)构建的融合基因表达载体对水稻进行遗传转化。初步确定了愈伤组织筛选及分化培养基附加除草剂(glufosinate ammoniun)4mg／L、头孢霉素300mg／L，愈伤组织预培养2-3天，共培养基中加入乙酰丁香酮浓度为39mg／L，共培养2-3天。通过上述培养条件，已获得移栽成活的水稻转基因植株。     

应用正交设计法优选台湾金线莲快繁培养基

以台湾金线莲试管苗顶芽为外植体,研究基本培养基、6-BA、NAA、蔗糖4个因素对不定芽增殖培养与生根培养的影响,应用L9(34)正交试验设计优选出台湾金线莲快繁培养基。结果表明,4个因素对不定芽增殖与生根培养均有极显著影响。对不定芽增殖培养的影响为：6-BA>蔗糖>NAA>基本培养基。对生根培养的影响为：蔗糖>6-BA>基本培养基>NAA。最适宜的增殖培养基为：MS+6-BA 3.0 mg/L+ NAA 0.3 mg/L+蔗糖20 g/L。最适宜的生根培养基为：1/2MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.6 mg/L+蔗糖40 g/L。     

两种观赏水草的离体培养

本试验以两种观赏水草为供试材料,进行离体培养研究。试验结果表明：红波（Alternanthera bettzickiana）以叶片为外植体,愈伤组织诱导采用MS+6-BA0.5 mg/L (单位下同)+NAA0.2的培养基,芽诱导采用MS+6-BA2.0 +NAA0.05+AD10的培养基,茎尖芽诱导采用MS+6-BA2.0+NAA0.05培养基,继代培养采用MS+6-BA1.0 +NAA0.05的培养基,根诱导采用1/2MS+IBA0.5的培养基;金钱草（Lysima chiachristinae Hance）以茎尖为外植体,芽诱导采用MS+6-BA0.5+NAA0.02的培养基,继代培养用MS+6-BA0.5+NAA0.05的培养基,根诱导采用1/2MS+IBA0.5的培养基,上述培养基中均含有30 g/L蔗糖和6g/L琼脂,PH5.6,在培养温度25℃、光照强度1800Lx、光照时间12h/d的培养条件下,均能培育出完整植株。     

生长调节剂对油茶离体诱导及增殖的影响

以油茶"渝良油A1"为外植体试验材料,通过正交试验研究外源激素对油茶茎段诱导及增殖的影响。结果表明:玉米素可提高油茶诱导率,油茶外植体诱导的最佳培养基是1/2MS+IBA 2.5mg/L+6-BA2.5mg/L+ZT7mg/L+CH 600 mg/L;ABT-6号生根粉可促进油茶增殖培养,油茶增殖培养的最佳培养基是1/2MS+ABT-6号4mg/L+IBA1mg/L+KT1mg/L。