牛链球菌Ⅰ型的分离与鉴定

2005年5月份,从石河子郊区某养殖场送检的以纤维素性腹膜炎为主要剖检变化的濒死蛋鸡中,分离到2株牛链球菌,现报道如下. 1方法 1.1细菌分离 无菌取濒死蛋鸡的肝脏、心血、脾脏,划线接种于5%兔血LB平板(按常规方法配制),37℃培养24 h,观察结果,并挑取单个菌落做纯培养.     

一例鸡源金黄色葡萄球菌的分离鉴定与耐药性分析

采集关节肿胀、关节囊内有浆液性渗出物患病鸡肝脏及骨髓进行细菌分离,对分离菌进行形态学观察、革兰氏染色、生理生化试验、PCR鉴定、16S rDNA序列测定和药敏试验。结果从病鸡样品中分离出一株在普通琼脂平板上形成湿润、表面光滑、隆起的圆形菌落,菌落在血琼脂平板上能产生β溶血;分离菌为革兰氏阳性,符合金黄色葡萄球菌生化培养特性;PCR检测结果显示金黄色葡萄球菌的耐热核酸酶基因呈阳性,细菌16S rDNA核酸序列Blast比对结果显示为金黄色葡萄球菌;分离菌对阿莫西林、四环素、青霉素G、氯霉素、复方新诺明和氨苄西林具有耐药性。结果为云南鸡源金黄色葡萄球菌病的临床诊断和防治提供了依据。     

病料中细菌分离培养方法和抗生素敏感性试验

正1细菌分离培养的常用方法细菌分离培养的常用方法有平板划线分离法、加热分离法和实验动物分离法。1.1平板划线分离法这是目前临床上最常用的分离接种方法。它可以从被检病料中通过划线分离而获得单个菌落,以便挑选可疑菌落作纯培养加以鉴定。具体操作:右手持接种棒,在酒精灯上火焰灭菌;待接种环冷却后,挑取被检料少许,左手持琼脂平板,以食指为支点,用拇指和无名指将平皿揭开一空隙。大约20℃时,迅速地将接种环轻轻地涂布在培     

猪链球菌病病原的分离鉴定及药敏试验

本试验对某猪场关节肿大疑似猪链球菌的仔猪进行剖检并无菌操作抽取关节液,对3份关节液进行细菌分离和鉴定,共分离到2株病原菌,对这2株病原菌进行革兰氏染色,结果都为G^＋球菌,多数成双,也有三五个一起,少数成长链;进一步通过生化鉴定、溶血现象观察和动物致病性试验,结果表明,其菌落形态、染色、培养特性及理化性质符合链球菌的特点,并都具有β溶血现象;通过药敏试验发现,2株菌株对许多种药物都产生了一定的耐药性,只有头孢唑啉和哌拉西林为高度敏感药物。综合该养殖场仔猪关节肿大的流行病学、临床症状、病理剖检、细菌分离、鉴定结果和临床用药效果,判定该场仔猪关节肿大的主要病原为关节炎型链球菌感染所致。     

徐闻县鸡大肠杆菌的分离鉴定与药物试验

1　试验材料1.1　收集徐闻县内不同养殖场的病、死鸡 ,解剖后主要呈现肝周炎、气囊炎、心包炎、腹膜炎等病理变化。1.2　按常规方法配制普通肉汤、普通琼脂平板、麦康凯琼脂平板 ;商品化药敏试验纸 13种。2　试验方法2 .1　细菌分离培养剖检病、死鸡 ,无菌取其肝、脾、心包液和腹水划线接种于普通琼脂平板上 ,3 7℃培养 2 4小时。同时涂片、革兰氏染色、镜检。挑取普通琼脂上圆形、微隆起、湿润、半透明、对光观察有光泽的单个散在菌落划线接种于麦康凯琼脂平板上 ,3 7℃培养 2 4小时。同时挑取普通琼脂平板上对光观察有光泽的单个菌落涂片、革兰氏染色、镜检 ,观察其形状及染色特性 ;获得 6株大肠杆菌菌株。将其接种于普通肉汤中纯培养后密封 ,4℃保存备用。2 .2　生化试验取上述纯培养菌进行葡萄糖、乳糖、蔗糖等糖发酵试验、吲哚试验、H2 S试验、甲基红 (MR)试验、V -P试验、枸椽酸盐利用试验、尿素分解试验。2 .3　动物试验取上述大肠杆菌肉汤培养液腹腔接种于三日龄健康小鸡 5只 ,接种量 0 5ml/只 ,另 5只三日龄健康小鸡皮下注射 0 5ml/只灭菌水作对照 ,记录死亡数。剖检观察病变 ,并对其肝脾...     

重庆市部分养殖场金黄色葡萄球菌耐药性分析及ESBL基因检测

为了解重庆市部分养殖场动物源性金黄色葡萄球菌的耐药及携带超广谱β-内酰胺酶(extended-spectrumβ-lactamases,ESBLs)基因情况,从重庆部分养殖场采集共1 371份样品,经前处理、增菌,划线接种,挑取疑似菌落,PCR扩增金黄色葡萄球菌特异性nuc基因,对分离鉴定的金黄色葡萄球菌进行药物敏感性试验,并检测菌株中携带的ESBL基因。结果显示:从1 371份样品中分离到89株金黄色葡萄球菌,包括25株猪源菌株、32株鸡源菌株、6株牛源菌株、10株羊源菌株和16株兔源菌株。89株菌对青霉素类药物耐药最为严重,其次为四环素类、大环内酯类和喹诺酮类。除2株兔源菌株外,其余分离菌均为多重耐药,耐药数量从2种到21种不等,猪源菌株的多重耐药最为严重。ESBL基因检测结果显示共有86株细菌携带blaTEM-1a基因,携带率高达96.6%。分离的金黄色葡萄球菌菌株耐药严重,且广泛携带TEM-1a型ESBL基因。     

重庆市动物源性金黄色葡萄球菌的分离鉴定及药物敏感性分析

为了解重庆市部分区县动物源性金黄色葡萄球菌的耐药情况,采集重庆市北碚区、合川区、荣昌县部分养殖场466份畜禽粪便样品,将样品划线接种于Mueller-HInton高盐平板,挑取可疑菌落接种LB液体培养基,提取基因组后,通过PCR扩增金黄色葡萄球菌特异性nuc基因,对鉴定的金黄色葡萄球菌进行23种临床常用抗菌药物的药物敏感性试验。结果从466份样品中分离出25株金黄色葡萄球菌,包括17株鸡源菌株和8株猪源菌株。25株临床分离株对23种抗菌药物均有不同程度耐药,对氨苄西林、青霉素G、四环素、强力霉素、林可霉素耐药严重,耐药率超过60%,对阿米卡星、呋喃唑酮、万古霉素只有1株细菌耐药。所有分离菌均为多重耐药。表明分离菌的耐药性严重。本试验结果为重庆市养殖场的临床用药提供了参考,为研究重庆市动物源性金黄色葡萄球菌的耐药基因、耐药机制和耐药传播规律奠定了基础。     

金黄色葡萄球菌小菌落突变株体外感染奶牛乳腺上皮细胞的研究

为了研究金黄色葡萄球菌小菌落突变株对正常奶牛乳腺上皮细胞的侵袭作用,试验采用普通光学和扫描电子显微镜观察的方法对临床分离的一株金黄色葡萄球菌小菌落突变株及金黄色葡萄球菌质控菌株ATCC25923体外感染培养的奶牛乳腺上皮细胞引起的细胞形态变化及细菌侵入细胞的过程进行了研究。结果表明:金黄色葡萄球菌分离菌株与质控菌株ATCC25923在体外感染乳腺上皮细胞3 h后出现凋亡现象,表现为细胞体积缩小,核质浓缩,核膜核仁破碎,胞膜有小泡状形成。说明金黄色葡萄球菌小菌落突变株对奶牛乳腺上皮细胞具有致病性,但致病力远低于金黄色葡萄球菌质控菌株ATCC25923,金黄色葡萄球菌小菌落突变株可以在奶牛乳腺上皮细胞中持续存在,在细胞中有一定存活,与金黄色葡萄菌株质控菌株ATCC25923相比对细胞的侵袭能力较低。     

犊牛大肠杆菌药敏试验

1材料 1．1供试菌株的分离签定与培养 1．1．1菌株分离 从我县中兴农牧奶牛场因腹泻死亡的病犊一头,取肝脏作细菌分离,接种于普通营养琼脂平板,37℃培养24小时,挑取表面光滑、边缘整齐、灰白色、半透明的小菌落,接种于麦康凯琼脂平板,37℃培养24小时,再从麦康凯琼脂平板上挑取孤立的红色菌落。     

黑颈鹤禽副伤寒的诊断

某动物园一只成年黑颈鹤发生急性死亡，经剖检、细菌分离培养、动物试验、血清学检查等，诊断为由鼠伤寒沙门氏菌引起的禽副伤寒，现报告如下：１　剖检变化肝、脾稍肿大，肝脏呈灰黄色，上有坏死灶，肠粘膜上有密集出血点，心、肾未见异常。２　实验室检查２－１　细菌分离　采取肝、肾接种血斜面，３７℃２４ｈ后观察，均培养出小菌落，该菌落不溶血、光滑、湿润、圆整、隆起、色灰白、半透明，涂片镜检为两极浓染小杆菌，无荚膜、无芽孢。２－２　小动物致病试验　用该菌１８ｈ肉汤培养物的原液、１０倍、１００倍稀释各０－２ｍｌ腹腔注…     

眼镜蛇腐皮病病原菌分离鉴定与药敏试验

为了研究眼镜蛇腐皮病的致病菌,试验采用细菌分离培养的方法,在无菌条件下,从患腐皮病眼镜蛇皮肤溃烂处挑取少许内容物划线接种于普通琼脂平板、兔血平板、SS琼脂平板及真菌培养基上,继而选取优势菌落进行分离、纯培养。结果表明:得到9种细菌,没有发现真菌。根据细菌形态、菌落生长特征和生化特性得出,这9种细菌分别为:黏质沙雷菌1株、奇异变形杆菌3株、铜绿假单胞菌3株、克氏耶尔森菌1株、肺炎克雷伯菌1株、雷极普鲁威登斯菌1株、嗜麦芽假单胞菌1株、金黄色葡萄球菌1株和腐生葡萄球菌3株。经致病性试验证实,奇异变形杆菌、铜绿假单胞菌、克氏耶尔森菌、雷极普鲁威登斯菌、嗜麦芽假单胞菌和金黄色葡萄球菌具有致病性,黏质沙雷菌、肺炎克雷伯菌和腐生葡萄球菌无致病性。药物敏感性试验证实:在15株致病菌中,除克氏耶尔森菌外,均对妥布霉素和庆大霉素高度敏感;嗜麦芽假单胞菌对妥布霉素不敏感,对庆大霉素高度敏感;除金黄色葡萄球菌外,均对阿米卡星高度敏感;15株致病菌均对头孢类抗生素不同程度敏感;哌拉西林、氨曲南和卡那霉素对大部分菌有抑制作用。说明眼镜蛇腐皮病主要由致病性细菌引起,敏感药物治疗后有良好效果。     

禽源金黄色葡萄球菌的分离鉴定及耐药性分析

金黄色葡萄球菌病给我国家禽养殖业带来的危害越来越大.通过对2013年9～12月家禽肿眼和关节脓肿的病例进行临床症状和剖检病理变化的观察及病原菌分离与鉴定,确诊40株为致病性的金黄色葡萄球菌感染,并对其选用10种广谱抗菌素进行药敏试验,选用高敏药物进行治疗.     

从进口雏鸡分离链球菌的鉴定

1992年4月,西安某鸡场从荷兰引进一批父母代雏鸡6600只,于3日龄时空运到达西安临时检疫隔离场,4日龄时在鸡群中少数弱鸡出现精神沉郁、拒食、拉黄色稀粪症状,伴有脐炎,个别鸡卧地不起,到6日龄共出现病鸡60多只,死亡4只.取死亡鸡3只,病鸡3只剖检,主要表现为全良消瘦,肛门糊有稀粪,卵黄吸收不良并有脐炎表现,肠道有轻度卡他性肠炎,其中2只鸡肝充血肿大,腺胃粘膜水肿,取剖检鸡(3只)的心血、卵黄和肝脏,分接种到营养琼脂和肉汤,37℃培养24小时,在琼脂平板中可见针炎大灰白色菌落,肉汤混浊。涂片镜检,两种培养基上的菌落均为单纯革兰氏阳性球菌,多数成对排列.挑取可疑菌落分别接种血清肉汤、鲜血琼脂,37℃培养     

鹅源金黄色葡萄球菌分离鉴定及其诊治分析

为确诊昆明市东川区某养鹅场疑似葡萄球菌感染鹅群的致病原因,采集发病鹅的脑组织、肿胀关节脓液及肝脏等病料进行细菌分离鉴定。结果显示,从病料中分离到1株细菌,分离菌在普通营养琼脂平板上形成光滑、湿润、无色、表面凸起的圆形菌落,在血琼脂平板上能产生β溶血,镜检呈革兰氏阳性葡萄串状;生化鉴定结果符合金黄色葡萄球菌反应特征;分离菌16S rRNA扩增序列分析表明,其匹配度最高的均是金黄色葡萄球菌各株系的16S rRNA序列,综合研判分离菌株为鹅源金黄色葡萄球菌。药敏试验显示,该菌株对头孢噻肟、阿米卡星等敏感,对强力霉素、庆大霉素等中度敏感,对氨苄西林、大观霉素等具有耐药性;该分离菌株接种试验小鼠具有较强的致病性。结果表明,金黄色葡萄球菌是引起该场鹅群感染的致病因素之一,该分离菌对多种抗菌药具有耐药性,应引起重视。研究结果为该地区鹅病的临床诊治提供参考。     

动物园部分动物舍内外环境中常见病原菌的调查

为了解动物园动物及其环境中常见病原菌的分布情况,采用菌落计数、细菌分离培养及动物致病性试验等方法,对南京市红山森林动物园的部分动物生存环境的空气、土壤、水共126份样品进行检测.结果表明,各种动物舍内菌落总数均大于舍外菌落总数.从126份样品中分离到16个菌种127个菌株,其中葡萄球菌有69株,占54.33%(69/127);肠杆菌有51株,占40.16%(51/127);链球菌有7株,占5.51%(7/127).通过动物试验得知,分离得到的金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、臭鼻克雷伯氏菌、粘质沙雷氏菌、假结核耶氏菌、福氏志贺氏菌1-5型、聚团肠杆菌和血链球菌等8种致病性较强,松鼠葡萄球菌、表皮葡萄球菌、解糖葡萄球菌和变异链球菌等4种致病性较弱,耳葡萄球菌、头葡萄球菌、施莱福葡萄球菌和唾液链球菌等无致病性.动物舍内外环境中葡萄球菌是主要污染菌.     

种鸭化脓性关节炎病原分析

试验通过对湖北崇阳某种鸭场送检的患有关节炎的种鸭进行病理剖检,病变组织细菌分离,以及对分离菌的培养特性、生化特性和16 S rRNA核苷酸序列进行细菌鉴定,并对分离菌的致病性进行观察。结果显示:患病种鸭病理剖检眼观病变为化脓性关节炎,自病变关节分离并鉴定5种细菌,分别是化脓隐秘杆菌、葡萄球菌、大肠杆菌、乳房链球菌和粪肠球菌,其中除乳房链球菌外,其余4种细菌均可引起雏鸭关节炎。结果表明,该批种鸭由于化脓隐秘杆菌、葡萄球菌、大肠杆菌、粪肠球菌的混合感染而导致严重的化脓性关节炎。     

一例竹鼠大肠杆菌病的实验室诊断

为查明某养殖场竹鼠发病的原因,通过剖检观察病理变化;采集病料进行细菌分离培养,分离菌通过生化试验、16S rDNA基因序列同源性分析鉴定及致病性试验进行综合诊断。结果:剖检病死竹鼠可见皮下严重出血,心脏肿大,心包有明显积液,心脏表面血管充血,肝脏淤血、肿大、边缘呈锯齿状、颜色为暗黑色,肾脏肿大伴有点状出血;从病料中分离的细菌经鉴定为大肠杆菌(命名为GZ-SS),并能致实验小鼠死亡,具有致病性。结论:综合诊断竹鼠发病死亡的原因为致病性大肠杆菌感染。     

种鸡场后备公鸡暴发细菌性关节炎的诊断

广西某种鸡公司的灵山土鸡后备公鸡,近来连续多批次出现跛行、关节肿大变形、不能行走等症状,多在50日龄开始发病,主要表现为关节肿胀、跛行、瘫卧,其中一群(2 500羽)于70日龄送检时累计发病率达50%、死亡率为1%。解剖病鸡发现关节囊增厚,关节腔内有清亮关节液。从病变关节液或者组织中分别取样进行细菌及支原体的分离培养以及病毒性关节炎病毒的PCR检测。结果分离到大肠杆菌(3/6)、沙门氏菌(2/6)、葡萄球菌(4/6),支原体分离检测和病毒性关节炎病毒检测均为阴性(0/6)。根据鸡群发病情况、临床症状、剖检病变和实验室病原的检测,确诊本病例为多种细菌混合感染引起的细菌性关节炎。     

某蛋鸡场金黄色葡萄球菌和沙门菌的分离鉴定及药物敏感性分析

为了解某蛋鸡场金黄色葡萄球菌和沙门菌对抗菌药物的耐药情况,采集重庆市某蛋鸡场48份羽毛样品、123份肛拭子样品,将羽毛样品经MH高盐培养液增菌后划线接种于MH高盐平板,将肛拭子样品经沙门菌增菌液增菌后划线接种于S.S.平板。将疑似菌落接种LB液体培养基培养后提取基因组,PCR扩增金黄色葡萄球菌特异性nuc基因和沙门菌特异性invA基因片段。对分离鉴定的金黄色葡萄球菌和沙门菌进行药物敏感性试验。最终共分离鉴定出9株金黄色葡萄球菌、6株沙门菌。药敏试验结果表明,分离的金黄色葡萄球菌和沙门菌耐药严重,且存在多重耐药。本研究基本摸清了该蛋鸡场金黄色葡萄球菌和沙门菌对常见抗菌药物的敏感性,为该蛋鸡场的临床用药提供了参考。     

羔羊大肠杆菌的药敏试验

<正>1材料(1)供试菌株的分离鉴定与培养。从丰宁县乐拓牧业公司羊场因腹泻死亡的羔羊中取1只进行试验研究,取肝脏做细菌分离,接种于普通营养琼脂平板,37℃培养24小时,挑取表面光滑、边缘整齐、灰白色、半透明的小菌落,接种于麦康凯琼脂平板,37℃培养