牦牛乳酪蛋白酶解产物二肽基肽酶-Ⅳ抑制活性和特性分析

以牦牛乳酪蛋白为原料,利用碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶和胰蛋白酶制备酪蛋白酶解产物,研究其二肽基肽酶-Ⅳ(dipeptidyl peptidase-Ⅳ,DPP-Ⅳ)抑制活性和理化特性.以DPP-Ⅳ抑制率为指标,研究水解时间和蛋白酶的种类对酶解产物DPP-Ⅳ抑制活性的影响,以水解度、三氯乙酸氮溶解指数(trichloroacetic acid-nitrogen soluble index,TCA-NSI)、溶解性和灰分含量为指标,评价酶解产物的理化特性.结果表明:对于相同水解时间点获得的酶解产物,木瓜蛋白酶酶解产物的DPP-Ⅳ抑制活性显著高于其他2种蛋白酶的酶解产物(P＜0.05).利用木瓜蛋白酶水解0.50 h的酶解产物具有最高的DPP-Ⅳ抑制活性(抑制率可达(53.95±1.57)％)、较高的水解程度以及最低的灰分含量.说明利用蛋白酶水解技术能够使牦牛乳酪蛋白中具有DPP-Ⅳ抑制活性的多肽释放,木瓜蛋白酶酶解产物可作为功能性乳基料用于功能性食品的开发.     

天然丝胶蛋白的生物学活性

丝胶由18种氨基酸组成,其中有8种是人体必需氨基酸,还有高含量的甘氨酸、丙氨酸、丝氨酸和酪氨酸。从缫丝、丝织、绢纺 制棉等生产和加工过程的废液中回收的丝胶蛋白,经降解、水解或酶解处理后,获得的不同分子量的水溶性丝胶肽及其水解物,具有多种已知 的和未知的生物学活性功能。     

2种分子质量的丝胶蛋白对间充质干细胞黏附活性的探究

为探究从桑条吐精炼液中回收的2种分子质量的丝胶蛋白对间充质干细胞(mesenchymal stem cells, MSC)黏附活性的影响,利用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法(SDS-PAGE法)测定通过膜过滤方法从桑条吐精炼液中回收制备的高分子量丝胶蛋白(HS)和低分子量丝胶蛋白(LS)的相对分子量,采用噻唑盐(MTT)比色法探究HS和LS等2种丝胶蛋白样品对间充质干细胞的细胞黏附活性。结果表明:利用膜过滤技术制备的HS的分子量主要分布在31.0～97.4 kD之间,LS的分子量主要分布在7.8～31.0 kD之间;所提取的2种丝胶蛋白均表现出良好的细胞黏附活性。     

天然彩色丝胶茧家蚕品种的培育现状及应用展望

随着经济的快速发展和社会的不断进步,市场对蚕丝产品的需求呈现多元化的趋势,彩色丝胶茧家蚕品种应运而生。概述了目前我国天然彩色茧和彩色丝胶茧家蚕品种的培育现状,介绍了丝胶蛋白具有的良好水溶性、促细胞增殖活性、抗氧化活性和酪氨酸酶抑制活性等优点,以及丝胶蛋白在生物医学、化妆品和食品等领域中的最新应用,展望了天然彩色丝胶茧家蚕品种的应用前景。     

蚕丝蛋白制备方法的研究

以废蚕茧丝为原料,将脱胶丝素通过盐解、酶解、碱解等方法,制备了溶液状、粉末状丝素蛋白。以沸水提取丝胶蛋白,采用二次水解、碱解等方法,制备了溶液状、粉末状丝胶蛋白。采用SDS-PAGE蛋白质凝胶电泳和红外光谱等检测分析了蚕丝蛋白的结构特征,探讨了制备方法对蚕丝蛋白结构和产率的影响。结果表明,不同方法制备的丝素蛋白、丝胶蛋白具有不同的分子量分布和不同的产率,其分子结构以无规卷曲为主。     

丝胶蛋白固定化L-天冬酰胺酶的特性研究

以丝胶蛋白粉为载体，戊二醛为交联剂制备固定化L-天冬酰胺酶。研究表明丝胶蛋白固定化L-天冬酰胺酶的活性高，性能稳定，其最适pH值为7.0。最适温度为60℃。丝胶蛋白固定化L-天冬酰胺酶具有较高的操作稳定性，抗胰蛋白酶水解的能力强。     

牛乳铁蛋白酶解产物抗菌特性的研究

采用胃蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、酸性蛋白酶、中性蛋白酶和碱性蛋白酶酶解乳铁蛋白,通过对酶解产物抗菌活性的测定,确定了胃蛋白酶酶解产物具有较强的抗菌活性。并研究了不同pH值条件和热处理对酶解产物抗菌特性的影响,结果表明,在pH值4.0～8.0范围内和80～121℃加热15min对胃蛋白酶酶解产物抗菌活性的影响均不明显。     

大米蛋白酶解产物的血管紧张素转化酶抑制活性及其分子质量分布

本文采用碱性蛋白酶酶解大米蛋白,研究了不同时间酶解产物的血管紧张素转化酶(ACE)抑制活性,大米蛋白水解度,酶解产物中蛋白质含量及多肽分子质量分布与酶解产物ACE抑制活性的关系。结果表明:大米蛋白的水解度在15 min内呈现线性增长,60 min后逐渐趋于平缓;75 min酶解产物的ACE抑制率最高(63.27%),但与60、90 min的ACE抑制率无显著差异(P0.05);酸溶蛋白和总蛋白含量随着酶解时间的延长,均呈现上升的趋势;多肽分子质量分布在200~1000 Da的比例最高。     

酶解蚕蛹蛋白制备血管紧张素转换酶抑制肽的工艺优化

采用碱性蛋白酶水解蚕蛹蛋白,制备血管紧张素转换酶(angiotensin-converting enzyme,ACE)抑制肽,是蚕蛹蛋白深度开发的途径之一。以ACE抑制率为响应值,用响应面分析法研究酶解温度、酶解pH和加酶量等因素对酶解产物的ACE抑制活性的影响,优化制备工艺。结果表明,各因素对制备ACE抑制肽的活性影响程度由大到小依次为酶解pH、酶解温度、加酶量。获得碱性蛋白酶水解蚕蛹蛋白制备ACE抑制肽的最佳工艺条件为:酶解温度50.8℃,酶解pH 9.0,加酶量3 500 U/g。在此条件下,蚕蛹蛋白酶解产物对ACE的理论抑制率最高可达96.67%,验证值为96.49%±1.75%,IC50值为0.102 mg/mL,预测模型可靠性高,可应用于蚕蛹ACE抑制肽的酶法制备。     

绢纺精练液中丝胶蛋白的氨基酸组成、相对分子量及溶解性的测定

利用氨基酸自动分析仪对从桑蚕丝条吐精炼液中回收的丝胶蛋白的氨基酸组成进行分析,采用聚丙烯凝胶电泳法对其相对分子质量进行测定,利用紫外分光光度计对其溶解性进行探究。结果表明:丝胶蛋白含有18种氨基酸,其中极性氨基酸占80.39%,丝氨酸占27.52%,天门冬氨酸占15.91%,苏氨酸7.41%;丝胶蛋白的相对分子质量集中分布于17~75 KD;丝胶蛋白溶解性优于大豆分离蛋白。