牛乳乳酶的研究进展

哺乳动物的乳汁已经分离出60多种固有酶。乳酶是牛乳的重要组成部分,乳酶对泌乳形成和乳汁分泌过程起着重要的调节作用,乳酶还是乳中抗氧化过程和先天性免疫系统的重要组成部分。乳汁形成、泌乳过程、泌乳中止过程以及乳腺退化过程与机体诸多生理过程相互影响,与机体的消化系统、纤溶酶系统、纤溶酶激活物-纤溶酶原-纤溶酶为基础的负反馈体系等多种机制相互调节。本文对牛乳中的纤溶酶、N-乙酰基-1-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase)、黄嘌呤氧化还原酶(XO)、乳酸过氧化物酶和组织蛋白酶D等几种重要固有酶的研究进展进行了综述。     

肝素钠对颈总动脉搭桥术犬纤溶系统的影响

选取10条雄性健康犬，随机分成对照组和治疗组，每组5条。实验动物模型采用同侧自体颈静脉行颈动脉45°搭桥。术后均采取常规治疗，治疗组给予肝素钠。分别于术前及术后1、2、3天在颈静脉采血，检测D－二聚体、血清纤维蛋白（原）降解产物（FDP）、血浆血小板α颗粒膜蛋白（GMP－140）、纤溶酶原激活剂的抑制物－1（PAI－1）和组织纤溶酶原激活剂（t—PA）等纤维蛋白溶解系统（纤溶）指标的变化。结果：治疗组与对照组相比，D－二聚体、GMP－140、PAI－1显著降低（P〈0．05），t—PA显著升高（P〈0．05），FDP变化不显著（P〉0．05）。结论：肝素钠可改善血管搭桥术后纤溶系统，纠正血液高凝状态，恢复抗凝系统活性。     

动物凝血和抗凝血功能的检查及临诊意义

1止血和凝血机制 在生理状态下，血液中有少量纤维蛋白生成，并覆盖在血管内膜上，保护血管内皮，以维持血管的正常通透性，同时生成的纤维蛋白又被纤维蛋白溶酶所溶解，凝血与纤溶处于动态平衡状态，保持机体不出血，也无血栓形成，血液是流体状态而循环于全身。当这种平衡失调时，便可导致出血不止或形成血栓，即止血与凝血障碍。止、凝血障碍的机制十分复杂，其涉及微血管、血小板、各凝血因子、抗凝因子及纤维蛋白溶解系统等诸多因素。在正常时止、凝血系统与抗凝血和纤维蛋白溶解系统处于动态平衡状态，遂能既无出血也无血栓形成。若止、凝血活性减弱或抗凝血及纤溶活性增强则会引起低凝状态发生出血症状。相反会引起高凝状态或导致血栓形成。前者临床上统称为出血性疾病，后者统称为血栓性疾病。     

蚯蚓纤溶酶活性研究

蚯蚓是优质的蛋白质饲料,但蚯蚓体内含有纤溶酶等生物活性物质,大量使用会造成动物机体的损害。为了保证蚯蚓作为蛋白饲料在畜牧业生产中的应用安全,本研究采用琼脂糖-牛血纤维蛋白原平板测定了蚯蚓水解液在不同时间、不同pH值和不同温度下的纤溶酶活性。结果表明,随着pH值降低和温度的升高蚯蚓纤溶酶的活性逐渐降低,但直至pH值为1时或温度达到100℃时纤溶酶仍具有较强的活性。因此认为,蚯蚓纤溶酶在胃液的酸性条件下或通常的环境温度下难以完全灭活,把蚯蚓作为蛋白饲料或饲料添加剂使用时应严格控制动物的摄入量,以保证养殖业的安全生产。     

牛BLG／tPA和牛as1酪蛋白／tPA基因在家兔乳腺中的暂时表达

为鉴定和筛选用于制备tPA转基因动物乳腺生物反应器的高效表达载体，试验分别以1.1kb牛b-乳球蛋白（BLG）基因，1．0kb牛asl酪蛋白基因5'端侧翼调控序列与1．7kb经过改造的人组织纤溶酶原激活剂（tPA)cDNA融合，构建了pBLG-PA2和pasl-PA22个乳腺定位表达载体。载体经酶切鉴定正确后，用脂质体包裹，并用毛细玻璃管经乳头管导入妊娠中后期的家兔乳腺，进行暂时表达。分别于家兔分娩后1－15d采奶，采用琼脂糖平板溶圈法测定乳汁中tPA的含量和活性。结果2个载体均获得表达，且pBLG-PA2表达水平高于pasl-PA2。pBLG-PA2和pasl-PA2在家兔乳汁中的含量分别为200－850μg/Lt 50-250μg/L。     

大黄注射液对犬血管搭桥术后纤溶系统的影响

为研究大黄注射液对犬血管搭桥术后纤溶系统的影响,将20只犬随机分为高(0.8 g.kg-1)、中(0.4g.kg-1)、低剂量组(0.08 g.kg-1)及对照组,同侧自体颈外静脉重建颈总动脉,头静脉滴注大黄注射液,ELISA定量分析测定术前及术后1、2、3、5、7、14、21 d纤溶系统各指标的变化。结果显示,用药后血小板α颗粒膜蛋白、D-二聚体、纤溶酶原激活剂的抑制物-1显著降低,组织纤溶酶原激活剂显著升高,且成剂量依赖关系;血清纤维蛋白(原)降解产物无显著变化。结果表明,大黄注射液能纠正搭桥术后血液高凝状态,恢复抗凝系统活性,预防血栓形成。     

重组溶葡萄球菌酶对奶牛乳房炎的疗效研究

以85头患乳房炎奶牛共104个乳区为研究对象,随机分为4组,每组26个,分别用重组溶葡萄球菌酶粉低（200U／乳区）、中（400U／乳区）、高（800U／乳区）三个剂量,对照组为青霉素G钠（160万IU／乳区）,每天早晚挤奶后乳池灌注给药,共4d,研究不同剂量重组溶葡萄球菌酶对奶牛乳房炎的治疗效果。试验结果显示,低、中、高剂量重组溶葡萄球菌酶均能有效清除感染乳区的链球菌、葡萄球菌、化脓隐秘杆菌等G^＋菌,大幅降低牛奶中的白细胞数,提高日产奶量。其中低剂量组对隐性乳房炎、临床型乳房炎的有效率和治愈率略优于青霉素G钠（P〉0．05）;中、高剂量对隐性乳房炎、临床型乳房炎的有效率和治愈率显著优于青霉素G钠（P〈0．05）;中、高剂量的疗效相当（P〉0．05）。重组溶葡萄球菌酶是一种很好的治疗奶牛隐性乳房炎和临床乳房炎备选药物。     

绵羊血清α甘露糖苷酶活性测定

为了测定绵羊体内α甘露糖苷酶最适反应的pH,建立一种适合于绵羊血清α甘露糖苷酶活性的检测方法。根据对-硝基苯基-α-D-甘露糖苷在α甘露糖苷酶的作用下可水解产生对硝基酚和甘露的活性,用比色法测定产生的对硝基酚含量,与标准曲线对照,从而求出α甘露糖苷酶活性。试验对2份绵羊血清的α甘露糖苷酶活性在不同pH条件下进行了测定。研究表明,绵羊血清中α甘露糖苷酶在pH 3.8时活性比pH 4.6和pH5.0高,差异显著(P<0.05),初步推测绵羊体内α甘露糖苷酶最适反应的pH为3.8。     

如何利用DHI报告控制奶牛乳房炎

乳房炎是乳腺受到物理、化学、微生物学等因素刺激而发生的一种炎性反应。它不仅影响奶牛产奶量，给奶农造成经济损失，而且还会影响乳品质，危及人类健康。其特点是乳中体细胞特别是白细胞增多，乳中体细胞通常由巨噬细胞、淋巴细胞和嗜中性白细胞等组成，当乳腺受机械损伤被感染后，体细胞数就会上升。一般来说，体细胞数超过正常范围（20万～30万个／mL）是乳房受到感染的前兆。     

纳豆及纳豆激酶的研究进展

纳豆具有丰富的营养价值，并富含维生素K2等，可提高蛋白质的消化吸收率，在发酵过程中，可以产生纳豆激酶，降解纤维蛋白原，并可以将纤维酶原激活为纤溶酶，从而刺激产生纤溶酶原激活剂。纳豆激酶以安全、高效、稳定，且成本较低、易吸收、副作用小、作用时间长等优点，成为较为理想的保健及溶栓药物之一。本文对纳豆及纳豆激酶做了综述性研究．为更好的研究开发纳豆及纳豆激酶产品奠定基础。     

中草药饲料添加剂提高奶牛产奶量效果研究

选取同一胎次,健康正常的黑白花奶牛共36头随机分三组,对照组饲喂基础日粮,中草药Ⅰ组饲喂含5%黄芪日粮,中草药Ⅱ组饲喂党参-黄芪复合中药添加剂日粮,进行产奶量比对分析试验.结果证明,在奶牛的日粮中适当添加一定量的中草药添加剂 ,可以明显提高奶牛的奶产量(P＜0.01),产奶量可提高约12.88%左右,并能有效减少奶牛乳房炎的发病率.试验结果还证明,在日粮中添加单味中药添加剂,对奶产量的提高也有一定的影响,但实际效果不如中草药Ⅱ组显著.     

奶牛乳房炎诊断和防治

在奶牛生产中．奶牛的三大疾病，肢蹄病、繁殖疾病、乳房炎。乳房炎作为三大疾病之一，也是常见病，乳房炎是奶牛场危害最大、投入药费最多、防治最难的疾病之一？当牛感染乳房炎后．机体产生大量的白细胞用于消灭病原菌和修复损伤的组织，大量的白细胞聚集存一起，堵塞了部分乳腺管道．使其分泌的乳汁无法排出．从而导致泌乳细胞总量的减少．而且有的还会影响奶牛的发情和妊娠，影响整个胎次甚至终生产奶量，一些发达国家的奶牛专家经过测定得卅如下结论：奶样里所含细胞数量与奶量损失成正相关，一些病重患牛因产乳量明显减少或失去泌乳能力而被淘汰。现对乳房炎的诊断、治疗以及预防进行初步分析，供同仁参考：     

乳乐玢治疗奶牛乳房炎的临床试验观察

奶牛乳房炎是奶牛常见的多发病．是奶牛乳腺受到物理、化学、微生物的刺激发生的一种炎性变化。奶牛乳房炎使奶产量下降10-15％,患有乳房炎的奶牛所产的牛奶营养成分较差。此外,在治疗奶牛乳房炎的过程中由于使用了大量抗生素,残留在奶中,给人类造成一定的危害。     

CXCR1基因在正常和患临床型乳房炎绵羊乳腺中的表达及功能预测分析

CXCR1基因作为G蛋白偶联受体之一,可与其配体IL-8特异性结合,在炎症反应、肿瘤发生及转移等方面发挥关键调控作用。研究以正常和患临床型乳房炎绵羊(Ovis aries)(共6只,各3只)的乳腺组织作为研究对象,首先采用HE染色法比较观察其组织形态学差异,随后采用荧光定量PCR(qRT-PCR)检测CXCR1 mRNA的相对表达量,并通过相关生物信息学分析软件对CXCR1基因的靶向miRNAs、涉及到的通路及调控网络等进行预测。HE染色结果显示,与正常乳腺组织(对照组)相比,在患临床型乳房炎乳腺组织(试验组)中结缔组织大量增生,腺泡数量变少且发生萎缩,上皮细胞脱落、腔内有大量炎性细胞浸润。qRT-PCR结果显示,试验组中CXCR1 mRNA的表达量较对照组极显著上调(P0.01)。GO和KEGG分析结果表明,CXCR1基因主要涉及趋化因子-受体相互作用、趋化作用等过程。靶向预测调控绵羊CXCR1基因的miRNAs结果显示,其表达可能受到miR-541-3p、miR-1193-3p等的调控。结果表明,在绵羊临床型乳房炎发生发展过程中,CXCR1基因可能在相关miRNAs的作用下表达上调,进而通过与其配体IL-8结合,趋化炎性细胞向绵羊乳腺感染部位迁移以发挥相应的作用。本研究为进一步深入探究CXCR1基因在绵羊临床型乳房炎发生发展过程中的分子机制提供了参考资料。     

牛磺酸对乳房链球菌侵染乳腺上皮细胞所致炎性变化的缓解作用

为探讨乳房链球菌(Streptococcus uberis)感染乳腺上皮细胞后产生的炎症变化及牛磺酸对炎性变化的缓解作用,以小鼠乳腺上皮细胞系Ep H4-Ev和乳房链球菌0140J为研究对象,检测二者共孵育后细胞产生的炎性变化;在此基础上探究牛磺酸对乳房链球菌对Ep H4-Ev黏附及其造成的炎性损伤的影响。结果表明:牛磺酸处理对乳房链球菌的黏附有一定的抑制作用,但不同浓度牛磺酸处理差异不显著(P0.05)。乳房链球菌感染Ep H4-Ev 2 h后,细胞培养上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)mRNA表达水平及N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase)的活性显著提高(P0.01);4 h后乳铁蛋白(LF)mRNA表达水平显著上升(P0.01)。牛磺酸处理小鼠乳腺上皮细胞3 h,可显著降低TNF-α、IL-1β和IL-6的表达水平和NAGase活性(P0.01)。研究表明:牛磺酸可以减弱因乳房链球菌感染而引起的小鼠乳腺上皮细胞的炎性变化,该作用可能与其降低乳房链球菌对Ep H4-Ev的黏附有关。     

“保乳皇”治疗奶牛乳房炎的效果观察…

乳房炎是奶牛的一种常见病、多发病,该病以细菌性感染为主。乳房炎主要引起奶牛产奶量减少和牛奶品质下降,奶牛发生乳房炎后,一般使用抗生素进行治疗,因此会导致牛奶出现抗生素残留而弃奶,使牛场直接减产、降低经济收入。如果治疗不及时或用药不当,严重病例可明显破坏乳腺组织．造成奶牛乳头报废,甚至导致奶牛被迫淘汰。或者出现败血症而导致奶牛死亡,从而给牛场造成更大的经济损失。     

乳头管灌注金黄色葡萄球菌对家兔血清中酶活性的影响

检测和分析乳头管灌注金黄色葡萄球菌前后家兔血清酶活性的动态变化,筛选奶牛乳房炎早期诊断指标。18只健康的怀孕家兔于产后7 d经第4对乳腺乳头管灌注金黄色葡萄球菌建立乳房炎模型。在灌注前2 h与灌注后6、12、24、48、72 h分别采血测定血清中碱性磷酸酶(ALP)、乳酸脱氢酶(LDH)、过氧化物酶(LP)和髓过氧化物酶(MPO)的活性并同时采集乳腺组织观察病理学变化。结果显示,血清酶ALP、LDH和MPO活性在灌注后6～48 h时显著升高(P0.05),LP活性在灌注后12～48 h时显著升高(P0.05),4种酶活性均在灌注后24 h时达到峰值;LDH活性变化与不同时相之间的拟合度(R2=0.9704)均大于其他3种酶与不同时相之间的拟合度;LDH活性与乳腺组织损伤程度密切相关。研究结果提示,LDH可以作为乳房炎早期诊断候选指标进一步研究。     

中草药饲料添加剂提高奶牛产奶量效果研究

选取同一胎次,健康正常的黑白花奶牛共36头随机分三组,对照组饲喂基础日粮,中草药组饲喂含5%黄芪日粮,中草药组饲喂党参—黄芪复合中药添加剂日粮,进行产奶量比对分析试验。结果证明,在奶牛的日粮中适当添加一定量的中草药添加剂,可以明显提高奶牛的奶产量(P<0.01),产奶量可提高约12.88%左右,并能有效减少奶牛乳房炎的发病率。试验结果还证明,在日粮中添加单味中药添加剂,对奶产量的提高也有一定的影响,但实际效果不如中草药组显著。     

多个顺式作用元件调控t-PAcDNA乳腺定位表达

由牛 β-酪蛋白 ( β-Casein)启动子与大鼠乳清酸蛋白 ( WAP)启动子融合及串联构建成 2个组织纤溶酶原激活剂 ( t-PA) c DNA乳腺定位表达载体 p SVL-βΔWAP-PA和 p SVL-WAPβ-PA。将这 2种表达质粒分别注入怀孕家兔乳腺导管中 ,溶圈试验结果显示 ,2种质粒均能在家兔乳腺中表达 ,且以分娩后第 5天的乳汁中表达水平最高 ,分别为 70 0 μg/ L和 50 0 μg/ L。本试验为进一步研究 t-PA基因乳腺定位表达调控和建立 t-PA乳腺生物反应器奠定了基础     

奶牛金黄色葡萄球菌性乳房炎检测的敏感指标探讨

奶牛乳房炎是奶牛场最常见、最重要的疾病之一.即使是在饲养管理与环境条件较好的情况下,奶牛乳房炎仍会经常发生（赵德明等,1999）.据统计,美国由于奶牛乳房炎的发生所造成的直接经济损失预计年约20亿美元,其中60%的损失是由于奶牛泌乳受到抑制所造成的（Shuster 等, 1993）.我国每年因乳房炎所造成的经济损失超过了3.16亿元（李宏胜等,2004）.这种泌乳抑制的病因与被感染乳腺的炎性反应是密切相关的.乳房炎的发生会造成奶牛奶产量及品质下降,牛奶废弃,严重时使奶牛失去泌乳能力等.Rajala-Schultz 等（1999）研究表明,患乳房炎的奶牛每个泌乳期平均产奶量将减少110～552 kg,并且即使治愈,患牛亦常不能达到其正常时的生产水平。