温度对奶牛冻精解冻后活力的影响

本研究对奶牛冻精解冻后在4℃,15℃,25℃温度下分别保存2 h,4 h,6 h,8 h,10 h的活力进行了测定。结果表明,4℃和15℃保存到10 h精子活力0.381±0.0170和0.379±0.0197,与初解冻接近(P0.05);25℃保存随时间延长精子活力呈下降趋势,和初解冻相比,6 h为0.349±0.0223(P0.05),8 h和10 h分别为0.302±0.0215和0.263±0.0287(P0.01)。牛冻精解冻后在4℃和15℃保存10 h以内,精子活力仍然维持在一个较高水平,符合输精要求,在此温度和时间范围内进行长距离携带,对精液质量影响小,可以达到预期的输精效果。环境温度在25℃左右时,冻精解冻后宜于4 h以内进行输精。     

奶牛细管冻精解冻后低温保存可提高受胎率

奶牛细管冻精输精具有污染少、使用简便、受胎率高的优点，正取代奶牛颗粒冻精及低温精液成为奶牛人工授精用精液的主要剂型。但由于细管冻精的甘油含量高，解冻后在常温下不易保存。据我们实验观察，甘油在低温下对精子有一定的保护作用，但随着温度的升高，甘油对精子产生明显的危害作用。细管冻精和颗粒冻精解冻后不同温度保存的保存效果就能说明不同甘油浓度与温度对精子的危害程度，见表1。注：冷冻精液为我站生产，细管冻精为03ml剂型，颗粒冻精解冻液为葡萄糖50g、柠檬酸钠03g、乙二胺四乙酸二钠01g、双蒸馏水100ml。从表1可…     

黄牛细管冻精输精技术的应用

通过细管冻精输精的受孕率高于颗粒冻精输精后的受孕率，认为应当推广细管冻精这一新技术，通过细管冻精快速解冻后的精子活力，受胎率高于常温和手温效果，认为应当采用５０℃高温１０秒钟快速解冻细管精液。     

牛细管冻精解冻后常温保存对受胎率的影响试验

[目的]为测试牛细管冷冻精液解冻后在常温水中的保存时间对精子活力的影响,为非定点配种寻求有效简便的冻精携带方法,观察精子在不同解冻温度下的存活时间及受胎率。[方法]选择5个解冻温区及不同时间解冻肉牛细管冻精,解冻后置于常温水(17℃~19℃)中保存,观测解冻温度和精子存活时间对受胎率的影响。[结果]50℃、60℃、70℃、解冻后精子的保存时间差异不显著,保存至72h时精子活力均低于0.35;受胎率差异不显著;随保存时间延长,受胎率呈下降趋势,在48h以内情期受胎率和总受胎率分别维持在61.8%~67.1%和91.9~95.8。[结论]70℃各时间段解冻后保存效果最佳,60℃解冻组次之,二者在精子活力≥0.35时情期受胎率和总受胎率达到63.0%、92.5%,略高于当地黄牛两项受胎率的平均值61.1%、91.7%,解冻后细管精液置于常温水中携带到较远的区域输精对精子活力、母牛受胎率无影响。     

公牛塑料细管冻精制作方法与应用效果的研究

本试验就细管冻精和颗粒冻精的冷冻效果和受胎情况进行了对比分析。结果表明，采用设定的工艺流程制作的细管冻精与颗粒冻精，其精子的解冻活率和复苏率没有显著差异（ｐ〉０．０５），采用水平冻结方式和垂直冻结方式生产的细管冻精，其精子的解冻活率和复苏率也无显著差异（ｐ〉０．０５）。但细管冻精的情期受胎率和一次输精受胎率却显著高于颗粒冻精。表明细管冻精的应用效果优于颗粒冻精。     

多浪羊细管冷冻精液制作技术的研究

为保存和利用优秀地方品种多浪羊的遗传资源,试验在多浪羊原产地进行了细管冻精制作试验.用采集的多浪羊种公羊精液,比较5种冻精保存液配方的细管冻精冷冻效果,测定解冻后精子活力.结果表明:4.83%乳糖保存液解冻后精液的活率平均为36% ,优于其它4种保存液,且差异极显著(P<0.01),解冻后精子的畸形率也均低于其它4种稀释液,差异极显著(P<0.01).表明4.83%的乳糖保存液配方是理想的绵羊细管冻精稀释液.     

解冻温度和保存时间对牛细管冻精精子活率的影响

本试验采用4组解冻温度,每组解冻温度设计了2个不同的解冻时间,观察不同解冻温度、解冻时间及解冻后常温保存时间对牛细管冷冻精液精子活率的影响。结果显示,4组解冻温度以80℃（3s）精子活率最高,为48．77％,20组（2（80s）精子活率最低,为30．02％,两者差异极显著（P〈0．01）。各组精液解冻后保存1h检查精子活率明显高于解冻时镜检活率（P〈0．05）,80℃解冻后间隔5h精子活率仍达到30％。     

复合添加剂对解冻后奶牛性控冻精质量及受胎率的影响

【目的】试验旨在研究以褪黑素和地诺前列腺素组成的复合添加剂对奶牛性控冻精解冻后精子质量及奶牛人工授精后受胎率的影响。【方法】30份奶牛性控冻精样均分为2组：试验组和对照组,试验组添加由24 ng/mL褪黑素、1.5 mg/mL地诺前列腺素及精液稀释液组成的250 μL复合添加剂,对照组添加250 μL精液稀释液,试验组和对照组均与解冻后的奶牛性控冻精按照1∶1（V/V）进行混合,室温孵育0、2及4 h,通过免疫荧光染色分析精子活率、顶体完整率、高能线粒体活性精子比率;对216头青年奶牛和82头头胎奶牛输精后通过28 d早孕检测来确定受胎率情况。【结果】与对照组相比,经复合添加剂处理0 h的性控冻精活率、顶体完整率及高能线粒体活性精子比率均无显著变化（P＞0.05）;经复合添加剂处理2 h的性控冻精活率、顶体完整率、高能线粒体活性精子比率均显著升高（P＜0.05）;经复合添加剂处理4 h的性控冻精活率和顶体完整率均无显著变化（P＞0.05）,高能线粒体活性精子比率显著升高（P＜0.05）。在输精试验中,试验组青年奶牛和头胎奶牛中的受胎率分别为65.22%和48.21%,均显著高于对照组（P＜0.05）。【结论】以褪黑素和地诺前列腺素组成的复合添加剂可以促进解冻后奶牛性控冻精精液品质以及青年奶牛和头胎奶牛输精后的受胎率。     

牛冻精改良受胎率的影响因素分析及对策措施

<正>1影响母牛冻改受胎率的因素1.1人为因素1.1.1冻精贮藏不当(1)冻精保存在液氮罐内,液氮没有淹没冻精,造成精子死亡。(2)解冻后的精子使用超过了3 h,未及时给母牛输精;或因长时间的携带,造成精子死亡。1.1.2解冻方法不科学在解冻过程中,提倡解冻的水温以35℃~40℃为宜,解冻时间5~8 s,解冻方面不科学影响了受胎率。1.1.3发情判断不准确发情判断不准确,影响了适时输精,而适时输精是人工授精     

组织培养液M199在庆阳驴细管精液中的应用

为了研究M199对庆阳驴细管鲜精和细管冻精活力及保存时间的效果影响。在鲜精稀释液中,添加不同浓度的M199,在低温保存下,观察不同时间段精子活力;在冻精稀释液中,添加1%的M199,采用液氮熏蒸制作冻精,解冻后观察冷冻效果。结果显示,在低温保存中,稀释液中添加1%的M199,48h后精子活力仍然在0.35以上,与其他试验组和对照组差异极显著(P0.01)。在冻精稀释液中添加1%的M199,试验组与对照组冻后精子活率分别为30.83%和31.33%,两者之间差异不显著(P0.05),但试验组精子有效存活时间显著高于对照组。通过在庆阳驴精液稀释液中添加M199,均能很好的延长精子保存时间。     

Tris-柠檬酸添加不同植物蛋白粉冷冻奶牛精子实验研究

本文研究了Tris-柠檬酸缓冲液中添加大豆蛋白粉、花生蛋白粉、大豆和花生蛋白粉混合物,替代卵黄稀释液冷冻奶牛精子的效果。做了两方面的实验研究:(1)用3种Tris-柠檬酸蛋白粉和对照Tris-柠檬酸卵黄稀释液超低温细管冷冻奶牛精子,观察超低温冷冻奶牛精子活力的冷冻试验;(2)超低温冷冻奶牛细管冻精解冻后在4℃环境中保存的存活实验。研究结果表明,4种不同稀释液超低温冷冻奶牛精子后精子活力差异不显著(P0.05);4种不同稀释液冷冻细管冻精解冻后于4℃冷藏并连续观察,每天的精子活力变化差异显著(P0.05),第5天Tris-柠檬酸大豆和花生混合蛋白粉稀释液的活力最好,并且在显微镜下观察视野要比对照Tris柠檬酸卵黄稀释液清晰,不易滋长细菌。因此,混合大豆蛋白粉和花生蛋白粉的植物源稀释液可以替代动物源稀释液。     

不同规格细管对冷冻猪精复苏质量的比较研究

当前，人工授精技术在养猪行业中得到普遍使用，优秀个体间的基因交流通过猪精来实现，猪精作为基因的载体，在种猪育种和商品化生产中占据重要的地位。猪精保存方式共分为三种，常温液态保存、低温液态保存和超低温固态保存。常温液态保存的猪精行业使用率已达到90%以上，而超低温固态保存的猪精使用率只有1%左右，这主要与猪精对温度的敏感性以及冻精操作方法的复杂性等因素有关。猪精超低温固态保存通常使用细管进行，以0.25 mL和0.5 mL细管居多，小容量细管冻精在批量配种时会暴露出诸多的问题，需要多次解冻数支冻精细管来进行输精，延长输精时间的同时增加了劳动强度，使用大容量细管冷冻猪精是推广冻精配种技术的重要措施之一。本研究比较了0.5 mL和5 mL细管冻精解冻后的冷冻效果，在此基础上对解冻后精子处在38℃环境下的耐受性做进一步比较，为大容量细管冻精研究提供试验依据。     

利用血细胞计数板检测牛冻精活精子百分率和活力的效果分析

使用血细胞计数板对牛细管冻精的活精子百分率和活力进行了检测。结果表明：在检测活精子百分率时,血细胞计数板与台盼兰染色两者差异不显著（P〉0.05）;解冻后1 h、2 h和3 h,用计数板方法连续检测解冻后精子活力,检测数据重复性较好。使用血细胞计数板直接检测冻精的活精子百分率和活力方便有效。     

猪0.5 mL细管冻精不同解冻方法精子质量的研究

利用计算机辅助精子分析系统(CASA)结合顶体完整率(NAR)的检查,研究了长白猪0.5 m L细管冻精4种解冻程序后精液的质量,综合评价不同解冻方法。结果表明:1)精子冷冻-解冻后在曲线速度(VCL)、直线速度(VSL)、平均路径速度(VAP)、直线性(LIN)、前向性(STR)、鞭打频率(BCF)以及A+B类精子比例的检测性状上降低,差异极显著(P0.01);精子头侧摆幅度(ALH)也显著减小(P0.05),活率(Motile rate)变化差异不显著(P0.05);2)四组解冻程序中,38℃20 s解冻组的活率(Motile rate,MR)、VSL、VCL、STR、A+B精子比例指标均极显著(P0.01)优于42℃20 s、50℃15 s、62℃5 s解冻组,VAP、LIN与NAR差异不显著(P0.05);3)Topsis综合评价的结果表明38℃20 s组在孵育2 h、4 h、6 h之后检测性状优于其他解冻组。由此推论,虽然解冻后精子在运动参数发生较大变化,但是38℃20 s的解冻效果优于其他解冻条件。     

不同稀释方法对小型宠物犬精液冷冻效果影响

为了研究Tris-果糖稀释液在不同稀释方法下对小型宠物犬精液冷冻的效果,选取常见的3个小型宠物犬品种共计6只犬进行试验,精液稀释过程分别采用一步稀释法和两步稀释法。结果表明:冷冻精液解冻后各组犬精液的同一剂型间的精子活力差异均不显著(P0.05);一步稀释法中的颗粒冻精与0.25 mL细管冻精和0.50 mL细管冻精相比,解冻后精子活力差异均显著(P0.05),而0.25 mL细管冻精与0.50 mL细管冻精的解冻后精子活力差异极显著(P0.01);采用两步稀释法的颗粒冻精、0.25mL细管冻精及0.50 mL细管冻精的解冻后精子活力组间差异均不显著(P0.05)。用Tris-果糖稀释液稀释精液时,使用两步稀释法对不同冻精剂型的精子活力影响不明显。     

不同剂型及稀释精液平衡时间对藏獒冻精品质的影响研究

为了探讨每剂含不同前进运动精子数(≥1 000万个和≥2 000万个)和稀释精液不同平衡时间(1 h、2 h、3.5 h)对藏獒冻精品质的影响,试验比较了0.25 m L细管剂型藏獒冻精解冻后精子活力、精子顶体完整率、精子畸形率、精子37℃存活时间。结果表明:每剂含前进精子数≥2 000万个与≥1 000万个相比,藏獒冻精解冻精子活力、精子顶体完整率、精子畸形率差异不显著(P0.05);而每剂含前进运动精子≥2 000万个组的藏獒冻精解冻后37℃存活时间优于每剂含前进运动精子数≥1 000万个组,且差异显著(P0.05)。藏獒稀释精液平衡2 h组的冻精活力显著高于平衡1 h组和3.5 h组(P0.05),而平衡1 h组和3.5 h组间差异不显著(P0.05)。冻精顶体完整率以平衡2 h组最高,为(41.00±1.47)%,与平衡3.5 h组间存在显著差异(P0.05)。平衡2 h组的冻精畸形率低于平衡1 h组和3.5 h组。说明藏獒0.25 m L细管剂型以每剂含前进运动精子数≥2 000万个,稀释精液平衡时间以2 h为宜,可获得较好的冷冻效果。     

维生素C对荷斯坦公牛X精子冻后品质的影响

试验旨在研究维生素C（VC）对荷斯坦公牛性控精液冻后品质的的影响。在精液稀释液中分别添加0,2.0,4.0,6.0,8.0 mg/mL的VC进行试验。将装有X精子的细管冻精解冻（37.5 ℃,30 s）后分析0～3 h精子活率及0～4 h质膜完整率和顶体完整率的变化情况。结果表明,当添加量为6.0 mg/mL时,解冻后0 h精子活率与对照无差异显著,解冻后1、2、3 h精子活率与对照组差异显著（P<0.05）。当VC的添加量为4.0 mg/mL时,解冻后0 h时X精子质膜完整率显著高于对照组(P<0.05),解冻后1 h与对照相比差异不显著（P>0.05）,但数值依然高于对照组。解冻后存放2、3、4 h与对照组相比差异显著。添加量为6.0 mg/mL时,解冻后0 h时X精子顶体完整率显著高于对照组(P<0.05),解冻后1、3 h精子顶体完整率与对照组相比差异显著（P<0.05）,2、4 h与对照相比差异不显著（P>0.05）,但顶体完整率高于对照组。在冷冻精液稀释液中VC的适宜添加量为4～6 mg/mL,此浓度下可有效提高荷斯坦公牛X精子解冻后活率、质膜完整率及顶体完整率。     

提高波尔山羊受胎率的措施

１．冻精质量 冻精质量合格标准主要从精子活力、精子畸形率来考虑，通过镜检，精子活力必须不小于０．３、畸形率小于１４％方可使用。在购进冻精和临输精前必须进行镜检，如发现精子质量不合格，必须重新调换，以防受胎率下降。 ２．配种技术 （１）正确使用冻精。正确使用冻精要求“三快”：①从液氮罐里取出冻精要快。要求５～１０ｓ；②解冻时必须控制在１０ｓ内，解冻液必须控制在３８～４０℃；③解冻后及时输精。 常见的冻精有颗粒冻精和细管冻精两种，目前以细管冻精为主。在使用细管冻精时一定要在细管封口端剪齐并保持圆管外形。…     

中卫山羊细管冻精制作与种质资源保存初步研究

为了中卫山羊种质资源的保护、利用,试验采用细管冷冻技术对宁夏地方品种中卫山羊进行了冻精制作和保存,比较了稀释液、冷冻保护剂类型和浓度、稀释倍数及不同稀释法等对中卫山羊精液冷冻保存品质的影响。结果表明:解冻后的精液品质,3号稀释液精子活率高于1号、2号稀释液,差异极显著(P0.01);相同浓度的甘油和二乙醇,解冻后的精子活率甘油高于二乙醇,差异极显著(P0.01),当甘油浓度为5%时,解冻后精子活率显著(P0.05)高于3%和6%;2倍稀释解冻后精子活率最高,5倍稀释解冻后精子活率最低,但不同稀释倍数解冻后精子活率差异不显著(P0.05)。     

长时间现地保存解冻牛细管冻精检测研究

[目的]本文为了对条件差的养牛场(现地)解冻的细管冻精能长时间保存。[方法]做了2方面的实验研究:实验1:建立对解冻后的精子活力和细菌数2个关键检测指标方法的建立研究;实验2:设计冰水混合物及室温2种保存环境在不同时间对解冻后精子活力和菌落数的影响。[结果]表明:在室温保存2h精子活力差异不显著,2h后差异显著;解冻后精子在冰水混合物里保存4h活力和细菌数差异不显著,4h后细菌数增多,活力下降,差异显著。[结论]牛场要将解冻后精液保存在放到有冰袋的水里效果更好。