碱性蛋白酶酶解藜麦芽制备多肽工艺的研究

为寻找开发藜麦蛋白，提高藜麦应用价值的最佳条件，本研究以白藜麦芽为原料，采用正交试验法优化碱性蛋白酶酶解藜麦芽制备多肽的最佳工艺条件。以碱性蛋白酶添加量、酶解pH、酶解时间、酶解温度和底物浓度这5个因素进行单因素试验，再通过正交试验分析，获得制备多肽的最佳酶解条件为：加酶量2000 U/g，酶解pH 10.0，酶解温度50 ℃，酶解时间3 h，底物浓度9％，在此条件下进行的验证试验，多肽含量达（0.4105±0.0021）mg/mL，表明该工艺稳定、可行，具有较高的应用价值。 [关键词] 藜麦|酶解|多肽|单因素试验|正交设计     

复合酶水解乳清蛋白制备抗氧化肽的工艺优化

以乳清蛋白为原料,采用酶法水解,分析酶解温度、pH值、底物浓度和酶底比对复合酶水解乳清蛋白的影响,通过单因素试验确定各因素的最适工艺参数,再通过正交试验及验证实验进一步确定乳清蛋白的最佳酶解条件。结果表明:根据单因素试验结果,并综合考虑水解度、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除率、超氧阴离子自由基清除率和铁离子螯合能力4项指标的正交试验结果,最终确定乳清蛋白的最佳酶解条件为酶解温度60℃、pH 8.5、底物质量浓度2.5 g/100 mL、酶底比3.5％。以上述最佳参数为酶解条件进行验证实验的结果表明,验证实验结果与正交试验结果相符,进一步验证了本研究确定的酶解条件为最佳条件。     

二次回归正交旋转组合设计优化羊软骨硫酸软骨素提取工艺

采用酶法提取羊软骨硫酸软骨素,通过单因素试验筛选影响因素和水平,在单因素试验的基础上采用二次回归正交旋转设计试验,根据回归分析确定最优提取工艺条件.结果表明最优工艺条件为:料液比0.9:1000、pH值8.3、酶解温度47℃、酶解时间170 min,在最佳条件下酶法提取硫酸软骨素得率15.87％.     

复合酶法提取松针粉挥发油的研究

本试验主要研究利用复合酶提取松针粉的有效成分挥发油,以建立一套行之有效的使用复合酶提取中草药方法,为推广应用复合酶法在提取中草药生产上提供理论依据.试验分为三部分,即常规蒸馏提取试验、单因子试验、多因子试验.其中单因子试验从酶解温度、酶解作用时间、pH、加酶量4个因素考察酶解对松针粉挥发油提取量的影响,多因子试验采用4因素（pH、酶解温度、酶解作用时间、加酶量）三水平做正交试验,确定复合酶法提取松针粉的最佳反应条件.由正交试验得出最佳酶解反应条件是：酶解温度为50℃,pH值为4.5,酶解时间为6h,加酶量为4%.最后对加酶和未加酶组进行t检验比较,结果显示复合酶法提取松针粉有效成分挥发油比常规的提取量高出37.9%,两种方法差异极显著,有效地证明了复合酶可以加大松针粉有效成分的提取量.     

红三叶寡肽酶解制备工艺研究

本试验以水解度为指标研究不同蛋白酶对红三叶叶蛋白的水解作用.通过单酶筛选试验确定了中性蛋白酶Ⅱ(来源于1398枯草芽孢杆菌)为最佳水解酶,进一步的单因素试验和正交试验结果表明,酶解最佳工艺条件为酶解温度40 ℃,pH值7.6,酶活添加量5000 U/g,底物浓度1%,酶解时间3 h.     

蜂蜜花粉酒发酵工艺的研究

酶解破壁后的莲花蜂花粉液,绢布过滤和离心处理分别得到的花粉浆、浊液和清汁,用蜂蜜调节糖浓度,用葡萄酒酵母、耐高温酿酒高活性干酵母、专用酿酒高活性干酵母和实验室筛选的酵母4种菌种发酵性能比较,通过单因素试验和正交试验确定蜂蜜花粉酒的最佳酿制工艺。结果表明:花粉浊液最适合用于蜂蜜花粉酒的酿造,葡萄酒酵母为蜂蜜花粉酒发酵的最适菌种,并确定其最佳接种量为1‰。主发酵的最佳条件为:初始糖度26%,SO2添加量100 mg/L,花粉浓度20 g/L,发酵温度25℃。     

羊小肠黏膜蛋白酶解工艺条件研究

试验以探讨确定羊肠膜蛋白粉生产小肽适宜酶解工艺条件为目的。以羊小肠黏膜为原料,利用碱性蛋白酶对其进行酶解试验,采用正交试验对酶解条件(酶添加量、酶解时间、酶解温度和pH)进行优化,以小肽和水溶蛋白为检测指标,探讨最佳酶解工艺条件。结果表明:羊肠膜蛋白粉最佳酶解条件为温度60℃、酶加量5 000 IU/g、pH 10和水解时间4 h。     

以豆粕为原料制备反刍动物饲用肽的研究

本文通过正交试验,选用碱性微生物蛋白酶,研究得出酶解法制备大豆肽的最佳工艺参数:豆粕预处理条件为90℃水浴加热10min,酶解条件为底物浓度5%(W/V)、加酶量5万单位/g蛋白质、温度50℃、pH值10、酶解时间5.5h。蛋白质水解率达到25%,平均肽链长度为4.0。制得大豆肽粗蛋白质含量66.83%(DM)。并对制得大豆肽和原料豆粕的氨基酸含量进行分析。     

微波协同酶法提取甜地丁槲皮素的工艺研究

采用微波协同酶法提取甜地丁槲皮素,分别利用单因素试验和正交试验设计优化提取工艺参数条件。结果表明,酶解pH值对槲皮素得率有显著性影响,微波协同酶法的最佳酶解工艺条件为:酶解pH值4.5,酶解温度50℃、酶解时间70 min、复合酶(纤维素酶∶果胶酶=2∶1)用量0.8%,在此条件下槲皮素得率达到1.20 mg/g。优化得到的微波协同酶法提取工艺稳定、可行,可作为甜地丁槲皮素提取的一种有效手段,为工业化生产提供参考。     

酶解法提取山豆根多糖的工艺优化

为建立高得率的山豆根多糖提取工艺,试验以山豆根为原料,采用木瓜蛋白酶酶解法提取多糖。通过单因素试验和正交试验研究最佳提取工艺,采用苯酚-硫酸比色法测定多糖含量。结果表明:4个因素对山豆根多糖提取率的影响依次为酶浓度酶解温度酶解时间酶解pH值。山豆根多糖最佳提取工艺条件为酶浓度2%、酶解温度55℃、酶解时间3 h、酶解pH值5,山豆根粗多糖含量为88.48%,多糖的提取率为5.11%,明显高于水提醇沉法提取的粗多糖得率(3.54%)。该方法简便、成本低、提取率高,适用于山豆根多糖的提取。     

海带渣添加比例及其酶解产物对凡纳滨对虾生长、消化和非特异性免疫力的影响

为探究海带渣添加比例及其酶解产物对凡纳滨对虾生长、消化和非特异性免疫力的影响,本试验进行了如下2个试验:海带渣适宜添加比例试验和海带渣酶解产物应用效果试验。海带渣适宜添加比例试验(试验1):采用单因素试验设计,配制海带渣添加比例分别为0(对照组)、0.5%、1.0%、2.0%、3.0%、5.0%的6种饲料(分别记为D1~D6组),投喂初始体重为(1.00±0.10)g的凡纳滨对虾49 d后,对对虾的生长性能指标以及胃消化酶、血清非特异性免疫酶的活性进行测定。每组3个重复,每个重复35尾对虾。海带渣酶解产物应用效果试验(试验2):在试验1得出海带渣适宜添加比例为3.0%的基础上,以试验1中添加3.0%海带渣饲料作为海带渣对照组(A组),再分别用β-葡聚糖酶酶解海带渣(B组)和蛋白酶酶解海带渣(C组)等量替代A组饲料中的海带渣,投喂初始体重为(1.00±0.1)g的凡纳滨对虾56 d,试验结束后测定对虾的生长性能指标以及胃消化酶、血清非特异性免疫酶的活性。每组3个重复,每个重复35尾对虾。试验1结果显示:D4、D5组对虾的特定生长率、增重率显著高于对照组(P0.05),D5组对虾的饲料系数显著低于对照组(P0.05);随着海带渣添加比例的增加,胃中胃蛋白酶及血清中酚氧化酶、超氧化物歧化酶的活性呈现先升高后下降的趋势,上述3种酶的活性均以D5组最高,且D5组血清中酚氧化酶、超氧化物歧化酶的活性显著高于对照组(P0.05)。试验2结果显示:与未经酶解的海带渣相比,海带渣经β-葡聚糖酶酶解后可显著提高对虾的增重率和特定生长率(P0.05),并能显著降低饲料系数(P0.05),海带渣经蛋白酶酶解后可显著提高对虾的成活率(P0.05);B和C组对虾的胃中纤维素酶活性较A组显著降低(P0.05);B和C组血清中酸性磷酸酶、酚氧化物酶活性以及C组血清中超氧化物歧化酶活性显著高于A组(P0.05)。由此得出,凡纳滨对虾饲料中海带渣的适宜添加比例为3.0%。海带渣经β-葡聚糖酶酶解后可促进凡纳滨对虾生长,提高其非特异性免疫力;而海带渣经蛋白酶酶解后可提高凡纳滨的非特异性免疫力,对其生长无促进作用。     

Comparison of the antibacterial activity of honey from different provenance against bacteria usually isolated from skin wounds

The antibacterial activity of honey samples provided by apiarists and honey packers was tested against microorganisms usually isolated from skin wounds. The antibacterial activity was tested using the well-agar diffusion assay. The honey samples were tested without dilution, and at 75, 50, 30, and 10% (w/v) dilution. Most of the undiluted honey samples inhibited the growth of Staphylococcus aureus and Staphylococcus epidermidis. Some honey samples provided by apiarists also inhibited the growth of S. aureus even at 50% dilution. Undiluted honey samples also inhibited the growth of Staphylococcus uberis, Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli, and Klebsiella pneumoniae, although to a lesser extent. No inhibition of Micrococcus luteus and Enterococcus faecalis growth was detected. The diameters of the inhibition zones generated by honey samples provided by apiarists were larger than those generated by honey samples provided by honey packers. This observation may be explained by considering the provenance of the honey samples.     

不同越冬饲料对蜜蜂中肠消化酶活性、组织发育状态以及抗氧化酶基因表达的影响

本试验旨在研究不同越冬饲料对蜜蜂中肠消化酶活性、组织发育状态以及抗氧化酶基因表达的影响,以便为广大蜂农选择越冬饲料提供参考。在2015年10月底选取群势相当的本地意大利蜜蜂(Apis mellifera L.)越冬蜂群(群内无储备越冬饲料脾)9群(5框蜂/群),随机分为3个试验组(3群/组),从11月2号开始分别以蜂蜜(蜂蜜组)、果葡糖浆(果葡糖浆组)和白砂糖水(白砂糖∶水=2∶1,蔗糖组)为越冬饲料进行饲喂,饲喂至11月下旬蜂群进入越冬期。整个试验期为2015年10月底至2016年3月初。分别于越冬前(11月初)、越冬中期(1月初)和越冬后(3月初)采集蜜蜂中肠,测定中肠消化酶(淀粉酶、蔗糖酶和蛋白酶)活性,在越冬中期采集蜜蜂中肠用于中肠组织发育状态和抗氧化酶基因[超氧化物歧化酶1(Sod1)、超氧化物歧化酶2(Sod2)和过氧化氢酶(CAT)]相对表达量等指标的检测。结果表明:在越冬中期,果葡糖浆组和蜂蜜组的蜜蜂中肠内淀粉酶活性显著高于蔗糖组(P0.05)。在越冬中期和越冬后,饲喂不同越冬饲料的蜜蜂中肠内蔗糖酶活性差异不显著(P0.05)。在越冬中期,果葡糖浆组的蜜蜂中肠内蛋白酶活性显著高于蔗糖组和蜂蜜组(P0.05)。蜂蜜组和蔗糖组的蜜蜂中肠肠壁厚度极显著大于果葡糖浆组(P0.01),且蜂蜜组和蔗糖组的蜜蜂中肠隐窝深度也极显著大于果葡糖浆组(P0.01)。在越冬中期,蔗糖组的蜜蜂中肠Sod1基因的相对表达量显著高于蜂蜜组和果葡糖浆组(P0.05)。由此得出,蜂蜜能够提高越冬蜂中肠消化酶活性,蜂蜜和白砂糖有利于越冬蜂中肠组织的发育,而且白砂糖能够提高越冬蜂中肠抗氧化酶基因的表达。因此,蜂蜜和白砂糖比果葡糖浆更适合作为蜜蜂的越冬饲料。     

龙眼蜂蜜抗体鉴定技术的开发

龙眼蜜为台湾特色蜂蜜,备受消费者喜爱。然而,市面上充斥以糖浆调制的人造龙眼蜜,不仅侵害了消费者的权益,也影响正规龙眼蜜的产销,损害了台湾蜂农的利益。本研究针对龙眼蜜含有花粉粒的特性,利用酵素免疫分析的技术,开发龙眼蜂蜜的鉴定方法。采取确定来源的龙眼蜜稀释后离心取沉淀,以Na—bicarbonate冰温萃取花粉成分,经透析浓缩后作为抗原,用Freund完全佐剂乳化,免疫BALB／c雌性小鼠,每隔3-4周再补强注射。补强免疫后10-14天采血分离血清,以ELISA测抗体力价。结果显示,龙眼蜜的花粉萃取液能有效诱发小鼠免疫反应,产生的多源抗体能区别真蜜与合成蜜。     

Effects of chemical hydrogenation of supplemental fat on relative apparent lipid digestibility in finishing swine

Four experiments were conducted to evaluate lipid digestibility in finishing swine fed chemically hydrogenated fats. Dietary chromic oxide was used as an inert marker to measure the apparent digestibility of supplemental fat (SF) that consisted of fully hydrogenated (FH), partially hydrogenated (PH), or PH products blended with other fat sources. In Exp. 1, diets containing 5% SF (as-fed basis) comprising 100, 66.7, 33.3, or 0% FH animal fat (iodine value = 2.5), with the balance contributed by soy oil, were fed to gilts (n = 24). Apparent digestibility increased linearly (-12.0, 26.0, 61.2, and 72.6%; P < 0.001) as the amount of FH fat in the diet decreased, suggesting the digestibility of FH to be near zero. Experiment 2 (2 x 4 factorial; n = 48) evaluated diets containing 5% (as-fed basis) blended fat (FH tallow and yellow grease) to achieve iodine values of 20, 30, 40, or 50 compared with PH tallow with identical iodine values. Digestibility of diets formulated with PH tallow was greater than those containing blended fat (73.4 vs. 67.2%; P < 0.01), especially at lower iodine values (interaction; P < 0.10). In Exp. 3, digestibility was measured in pigs (n = 96) fed 5% (as-fed basis) PH choice white grease with iodine values of 20, 40, 60, or 80. Increasing iodine value did not alter digestibility (66.2, 69.2, 68.2, and 69.7%). Experiment 4 investigated digestibility (n = 32) of diets formulated with 8% (as-fed basis) PH fat (iodine value 20 or 50) with 0.10% lysolecithin as an emulsifier. Lipid digestibility was 14.5% greater in the 8% SF diet with an iodine value of 50 compared with the diet with an iodine value of 20 (79.15 vs. 69.12%; P < 0.001), but lysolecithin was without effect. These experiments indicate that partial hydrogenation is superior to blending unsaturated fat with saturated fat sources and that digestibility is not greatly affected by decreasing the iodine value via partial hydrogenation.     

蜂蜜的真实性检测方法

蜂蜜的真实性包括蜂蜜的品质、品种、产地来源的真实性及是否掺假等。受经济利益的驱使,目前我国蜂蜜市场存在严重的掺杂使假现象,对蜂蜜产业的健康发展和消费者的权益造成了严重的影响。本文综述了蜂蜜真实性的检测方法,包括:感官检测方法、稳定性碳同位素比值分析法、酶活性测定法、色谱分析法、光谱分析法、差示扫描量热法和核磁共振法等。     

高效液相色谱-电喷雾串联质谱法直接测定蜂蜜中脯氨酸

建立了高效液相色谱一电喷雾串联质谱法直接测定蜂蜜中脯氨酸的方法。蜂蜜样品用去离子水溶解后,过0．45μm水相微孔滤膜,高效液相色谱一电喷雾串联质谱进行分析检测。以Phenomenex C18（100mmx4．6mmx2．6μm）色谱柱为分析柱,乙腈和0．1％（v／v）甲酸-5mmol／L乙酸铵水溶液为流动相进行梯度洗脱,在电喷雾正离子多反应监测模式下进行检测,外标法定量。通过加标验证,该方法检测低限可达25mg／kg,脯氨酸在0．5～10．0μg／mL浓度范围内线性关系良好,相关系数大于0．99。在25、50和100mg/kg三个加标水平下,蜂蜜中脯氨酸平均回收率为83．7～109．6％,相对标准偏差（RSD）为2．4～10．9％。该方法样品处理简单、快速,结果准确,灵敏度高,可以作为日常蜂蜜中脯氨酸的检测方法。     

蜂蜜花粉汁、蜂蜜酒和蜂蜜花粉酒的香气成分比较

采用GC-MS技术对蜂蜜花粉汁、未加花粉的蜂蜜酒和蜂蜜花粉酒进行了香气成分分析。蜂蜜花粉汁鉴定出91种,蜂蜜酒87种,蜂蜜花粉酒105种香气成分,相对含量分别是86.45%、82.80%和86.59%。这些挥发性成分主要包括醇类、酯类、烷类、烯类、酸类、醛类、酮类、醚类和胺类等。在蜂蜜花粉汁中,醇类和烷类化合物居多;在发酵酒里,醇类和酯类化合物较多。蜂蜜花粉酒与蜂蜜花粉汁有27种共同香气物质,蜂蜜花粉酒与蜂蜜酒有38种共同香气物质。     

西红柿蜂蜜奶酪制备工艺研究

研究西红柿蜂蜜奶酪的制备工艺,得到最佳的制备西红柿蜂蜜奶酪的工艺条件是：基底蜂蜜椴树蜜的加入量为87％,晶种蜂蜜油菜蜜的加入量为5％,浓度均为40波美度。番茄浆的加入量为8名,结晶温度为11℃,结晶压力为0．3MPa,结晶时间为5d。此工艺制备的西红柿蜂蜜奶酪具有很好的口感、色泽和组织状态。     

蜂蜜酶值（DN）快速检测法——标准参考比色板法

蜂蜜中淀粉酶活性值（酶值ＤＮ）是评定蜂蜜质量的一项重要指标,新鲜的蜂蜜其酶值较高,营养好。本文在传统检测方法,度管碘反应目测法和分光光度比色法的基础上,结合两者的优点,采用标准参考比色板法,该方法具有方便、易行、快速可靠等优点。