异源四倍体鲫鲤及亲本ApoE的克隆及组织表达分析

载脂蛋白E(Apolipoprotein E,ApoE)作为胆固醇代谢过程中的关键因子,参与脂蛋白转运和性腺发育。为进一步了解该基因的作用,本实验克隆并测序了异源四倍体鲫鲤及其父母本ApoE基因的全长序列。异源四倍体鲫鲤、红鲫和鲤的ApoE全长分别为1393 bp、1384 bp和1396 bp,均编码281个氨基酸。序列对比表明,异源四倍体鲫鲤ApoE与父本鲤更为相似。另外有2个氨基酸位点发生了与父母本均不同的变异,证明异源四倍体鲫鲤除了有杂交特征外也产生了变异。通过Mega软件构建的哺乳动物ApoE进化树与系统分类相一致:鲤科鱼类的ApoE聚类在一起而分离于其它物种。Real time PCR分析表明,ApoE基因在3种鱼中的组织表达模式基本一致,所有组织均有表达,而在脾脏中表达最高。     

鲤鲫被锚头鱼蚤寄生的种间、种内差异性观察

锚头鱼蚤病是国内外流行的常见鱼病之一,该寄生虫对寄主专性寄生[尹文英,1963]。寄生在鲤、鲫上的为鲤猫头鱼蚤(Lernaea cyprinacea Linnaeus),但它对鲤、鲫鱼的寄生的差异性尚未见报道。 作者于1991—1992年研究鲤、鲫等鱼类的种质时,发现它们在种间和种内对锚头鱼蚤的自然感染具有明显差异。现将对白鲫、异育银鲫、彭泽鲫、方正鲫、荷包红鲤、散鳞镜鲤及鲤鲫杂交种(白鲫?×镜鲤?)的观察结果报道如下。     

彩鲫与建鲤杂交F_1体色的初步研究

利用建鲤和彩鲫正反交获得了鲤鲫F1(彩鲫♀×建鲤♂)和鲫鲤F1(建鲤♀×彩鲫♂)两个杂交群体,将两个杂交群体各分为两组,分别在室内水族箱和室外池塘中饲养6个月后,通过显微镜对鳞片黑色素细胞的数量进行统计,利用丙酮抽提液对鳞片红色素细胞的吸光值进行测定。结果发现,鲤鲫F1的红色素细胞吸光值与彩鲫接近(P0.05),黑色素细胞数值极显著低于建鲤(P0.01);鲫鲤F1红色素细胞吸光值极显著低于彩鲫(P0.01),黑色素细胞值显著低于建鲤(P0.05)。     

全省推广养殖“湘鲫”情况报导

1985年6月，由湖南省科委主持对鲫鲤杂交鱼进行了技术鉴定，鉴定会上把鲫鲤杂交第一代鱼简称为“湘鲫”，去年列入了省科委推广计划，在省鲫鲤杂交研究协作组的统一组织下，有关地县科委和水产主管部门积极支持，生产单位大力推广养殖，据年终“湘鲫”推广总结会上的不完全统计，1986年全省推广养殖“湘鲫”面积达18．63万亩，产“湘鲫”鲜鱼2803．9吨，     

高寒鲤、红鲫杂交F_1同亲本形态学特征比较

鲤鲫杂交F_1、高寒鲤、红鲫主要形态学特征:体高/体长比为39.60％、39.45％、41.81%;体厚/体长比为17.22％、18.27％、19.99％;眼径/体长比为5.16％、5.62％、5.79％;体厚/头长比为56.33％、57.22％、66.42％;眼径/头长比为16.90％、17.60％、19.28％。鳞式分别为31(5-6)/6 33、36(6-7)/(6-8)40、26(6-7)/(6-7)29。第一鳃弓左侧腮耙数分别为34.20、21.64、42.93。上述指标除体厚/体长、眼径/体长、体厚/头长、眼径/头长鲤杂交F_1比双亲低以外,其它指标均介于双亲之间。从上述三种鱼同塘饲养生长对照来看,鲤鲫杂交F_1分别比亲本高寒鲤、红鲫生长31.18％、96.60％。我们认为鲤鲫杂交F_1是一个极有前途的新的养殖对象。     

异源四倍体鲫鲤肝组织线粒体DNA的研究

用密度梯度离心和DNaseI、RNase消化法从异源四倍体鲫鲤(R8)和鲫鲤F2肝组织中提取和纯化线粒体DNA(mtDNA).用9种限制性内切酶对异源四倍体鲫鲤和鲫鲤F2的mtDNA进行了分析,结果表明XbaI和BglⅡ两种限制性内切酶在异源四倍体鲫鲤mtDNA上存在酶切位点多态性.通过凝胶电泳测得异源四倍体鲫鲤mtDNA相对分子量平均约10.29×106道尔顿,分子大小为16.20kb;鲫鲤F2mtDNA相对分子量为10.18×106道尔顿,分子大小为16.02kb.根据单酶解和双酶解的片段数目和分子大小,构建了异源四倍体鲫鲤mtDNA的7种限制性内切酶(KpnI、PstI、SalI、XhoI、BglⅡ、BamHI和XbaI)酶切图谱.     

工程鲫（鲤）养殖技术

1工程鲫（鲤）的来历工程鲫、工程鲤（均为暂定名）是由中国工程院院士、湖南师范大学教授刘筠为主的协作组，经过多年的研究，运用细胞工程和有性杂交相结合的生物工程技术，生产出来的三倍体鲫鱼和鲤鱼。即由协作组培育的具有稳定遗传性状的四倍体新型鱼类种群为父本，与二倍体鲫鱼（母本）杂交所产生的后代，称之为工程鲫；而与二倍体鲤鱼（母本）杂交所产生的后代，则叫做工程鲤。2形态特征工程鲫是完全鲫鱼体型，头小体大，头部、鳞片及鳍条颜色一致，其鳞片与鲫鱼无明显区别，仅背鳍至尾鳍侧线上部的鳞片（特别在靠近尾鳍）排列较为紊…     

水晶彩鲫、红鲫、锦鲤、荷包红鲤杂交子代的生长和体色研究

利用人工授精的方法,进行水晶彩鲫、红鲫、锦鲤和荷包红鲤的相互杂交试验,测定各个杂交组合子代的成活率、生长速度和体色分离比例。结果表明：4种鱼能够相互杂交受精,孵出鱼苗。孵化率锦鲤自交最低为46．4％,其它组合为70％～80％;杂交鱼苗经28d的人工饲养,水晶彩鲫与荷包红鲤、锦鲤的正、反杂交,同其它杂交组合比较有明显的差别,其生长速度慢,个体之间差异大,成活率低;杂交子代的体型分为3类：鲫鱼型、鲤鱼型和鲤鲫型。鳞片反光组织(虹彩细胞或鸟粪素细胞)为2类：完全型、缺失型。体色分离复杂多样,水晶彩鲫与红鲫杂交是水晶彩鲫,红鲫与锦鲤、荷包红鲤杂交是青灰色鲤鲫杂种,水晶彩鲫与锦鲤、荷包红鲤杂交都会出现水晶彩色和青灰色鲤鲫杂种。     

池塘养殖湘云鲫（鲤）成鱼的方法

前几期我们已对湘云鲫、湘云鲤的来源、特点、繁殖、苗种培育进行了详尽的介绍,下面我们将对湘云鲫、湘云鲤的各种养殖方法进行介绍。本期我们主要对池塘养殖湘云鲫、湘云鲤成鱼进行探讨。池塘养殖是目前湘云鲫、湘云鲤成鱼养殖范围最广,养殖效果最佳的养殖方式。池塘养殖又包括单养和混养,其中又包括当年鱼苗直接养成商品鱼和春片鱼种养成商品鱼。鉴于湘云鲫、湘云鲤的养殖方法区分不大,我们特以湘云鲫为例介绍。1当年鱼苗直接养成商品鱼由于湘云鲫的生长速度快,耐低温、生长季节长,在我国南方各地均可将快速育成的大规格夏花鱼种投放到水…     

鲫鲤杂交制种关键因素研究

通过在不同环境条件下,开展彭泽鲫(♀)×兴国红鲤(♂)杂交试验,结果表明水温对鲫鲤杂交育种过程中的受精率和孵化率起决定性的作用。鲫鲤杂交育种最适水温在18-23℃之间,超过这个范围,鲫鱼亲种性腺发育受影响,难以获得理想受精率和孵化率;试验还发现在受精卵孵化过程中用0.03%的双氧水作为消毒剂浸浴15min和选择水浮莲作为孵化介质,可明显提高孵化率。     

湘云鲫 湘云鲤 大规格鱼种培育试验报告

<正> 湘云鲫(鲤)是中国工程院院士刘筠教授等经过多年研究培育的三倍体鲫(鲤)鱼,是生物工程的成果。它具有生长速度快自身不育、食性广、耐低氧、抗病力强、饲料系数低、起捕率高等诸多优点,为了增加我市淡水养殖的新品种,1998年5月邢台市鱼种场从湖南引进湘云鲫、湘云鲤乌仔各4万2400m~2,池塘最大水深1.2m,多年失修,渗漏严重,多年未清淤,淤泥较厚,水源为深井水。     

湘云鲫（鲤）肌肉生化成分和氨基酸组成分析

应用生化分析方法对湘云鲫（鲤）肌肉中的营养成分和氨基酸含量进行了定量分析,结果显示：湘云鲫（鲤）鲜肌肉水分含量为７７．８２％（７７．１０％）,粗蛋白含量为１８．５８％（１７．７０％）。粗脂肪含量为２．７６％（３．１６％）。磷分含量为０．９９％（１．１７％）。湘云鲫（鲤）股肉中含有１７种氨基酸,总量为７６０．２９ｍｇ／ｇ（７０５．０１ｍｇ／ｇ）,其中人体必需氨基酸含量为２５９．８３ｍｇ／ｇ（２０８．     

湘云鲫、湘云鲤消化道的组织学研究

采用石蜡切片法和显微测量法研究了新型三倍体鱼－湘鱼鲫（Carassius auratus Triploid)，湘云鲤（Cyprinus carpio Triploid)消化道的组织结构，并探讨了消化道组织结构和食性之间的关系，结果表明：湘云鲫，湘云鲤食道和肠道壁均由粘膜层，粘膜下层，肌层，浆膜层4层组成，缺乏粘膜肌，二者消化道的组织结构与其各自的食性一致，二者食道粘膜上皮由单层柱状细胞和杯状细胞组成，这与其它鱼类的不同，湘云鲫比湘云鲤具有对食物更强的消化吸收能力；／湘云鲫，湘云鲤肠道可分为前肠，中肠，后肠3段。     

湘云鲫、湘云鲤高效养殖探讨

湘云鲫、湘云鲤是世界上目前唯一能大规模用于商品鱼生产且不可自然繁殖的优良三倍体淡水鱼类养殖品种，已推广到除西藏以外的全国各省市养殖。为充分发挥湘云鲫、湘云鲤养殖效益，现将养殖过程中出现的一些影响养殖效益的问题归纳如下。     

湘云鲫、湘云鲤的苗种培育

由于湘云鲫、湘云鲤均是由四倍体鱼父本与二倍体鲫鱼和鲤鱼母本通过人工杂交生产出来的三倍体鲫、鲤鱼,所以生产湘云鲫、湘云鲤鱼苗需要专业技术人员和专门设备进行生产。目前我国湘云鲫、湘云鲤都是由拥有湘云鲫、湘云鲤自主知识产权的湖南湘云生物科技有限公司所属苗种基地统一生产供应,广大生产者需谨防购进假冒伪劣苗种影响生产。湘云鲫、湘云鲤抗病力强,耐低温低氧较易养殖,按四大家鱼常规方法培育苗种即可。但苗种珍贵,如何提高苗种的成活率至关紧要,同时湘云鲫、鲤苗种培育阶段正值早春低温多雨季节,给苗种培育带来较大困难,必须结合…     

芙蓉鲤鲫

芙蓉鲤鲫（原名芙蓉鲫。品种登记号：GS-02—001—2009）,以散鳞镜鲤为母本、兴国红鲤为父本进行鲤鱼品种间杂交,获得芙蓉鲤。芙蓉鲤再与红鲫进行属间远缘杂交,即是芙蓉鲤鲫。它是运用鱼品种间杂交、属间远缘杂交和系统选育相结合的综合育种技术培育成的新型杂交鲫鱼。     

鳜鱼、青鱼、草鱼、鲤、鲫、鲢消化酶活性的研究

鳜鱼、青鱼、草鱼、鲤、鲫、鲢肝脏蛋白酶活性低于肠蛋白酶。肠蛋白酶活性，鳜鱼最高，其余依次为青鱼、鲤、鲢、草鱼、鲫。鳜鱼、鲢的肠蛋白酶活性由前肠向后肠递减；而青鱼、鲤、草鱼的则由前肠向后肠递增；鲫则中肠活性最低。六种鱼不同组织的脂肪酶活性因鱼而异。青鱼、鳜鱼、鲤、鲢肝脏中脂肪酶活性低于肠脂肪酶活性（Ｐ＜０．０１）；而草鱼和鲫肝脏中脂肪酶活性与肠脂肪酶活性差异不明显（Ｐ＞０．０５）。六种鱼肝脏中脂肪酶活性由高到低依次为鳜鱼＞鲢＞鲫＞草鱼＞青鱼＞鲤；肠脂肪酶活性顺序为鳜鱼＞鲢＞青鱼＞鲤＞草鱼＞鲫。脂肪酶活性与鱼类食性无明显相关性。不同组织间淀粉酶活性存在差异。鳜鱼的肝脏和肠均有较高淀粉酶活性，青鱼和鲫肝脏中淀粉酶活性低于肠中的；草鱼、鲤和鲢肝脏中淀粉酶活性高于肠中的，但差异不显著。六种鱼中鳜鱼的肝脏淀粉酶活性明显高于其它五种无胃鱼，它们的淀粉酶活性顺序依次为鳜鱼＞鲢＞鲤＞草鱼＞青鱼＞鲫；肠淀粉酶活性顺序为鳜鱼＞鲫＞鲤＞青鱼＞鲢＞草鱼。     

鲤鲫粘孢子虫病防治技术

1987～1990年对辽宁省鱼病调查结果表明,主养鲤、鲫塘粘孢子虫病呈上升趋势。为此于1996～2000年在沈阳和辽阳两市部分主养鲤、鲫池塘进行了防治试验。试验采取室内外相结合的方法,对粘孢子虫病的种类、寄生部位和药物及剂量进行了对比试验。结果表明,泼洒0.3×10-6～0.4×10-6敌敌畏乳剂(80%),同时投喂孢子散或0.2‰～0.3‰的敌敌畏药饵3～5d,并适当更换池水,可有效地防治鲤鲫体内外的粘孢子虫病。     

山东省岸堤水库鱼病调查及防治

岸堤水库位于山东省蒙阴县城东部,是山东省第二大水库,2003年鲤养殖网箱(5m×5m)500个,鲫养殖网箱200余个,鲢等滤食性鱼养殖网箱近9 000个。笔者于2003年4—9月,走访调查了岸堤水库的铁城、石桥、重山、石宝玉等村庄23户鲤、鲫养殖户,调查网箱253个,统计分析了这6个月内岸堤水库吃食性鱼类鲤和鲫的发病情况,并对鲤粘孢子虫病和2龄鲫营养障碍症进行了防治探讨,以期为今后水库网箱养鱼的防病和治病工作提供参考。     

雌核发育二倍体鲫鲤及其他倍性鱼cdc2基因cDNA全序列克隆及表达分析

为研究雌核发育二倍体鲫鲤产生二倍体卵子的分子机制,实验采用PCR和cDNA末端快速分离法,克隆获得了雌核发育二倍体鲫鲤第三代(G3)、二倍体红鲫、三倍体湘云鲫和四倍体鲫鲤的细胞周期相关基因——cdc2基因cDNA全序列.结果显示,4种不同倍性鱼cdc2基因均编码含有302个氨基酸蛋白,而且编码的蛋白都含有与其他CDK激酶相当保守的序列PSTAVRE;同源性分析发现,4种鱼cdc2基因编码的氨基酸序列之间的相似度大于97.6％,说明Cdc2蛋白在这4种不同倍性鱼中具有高度保守性.采用实时荧光定量PCR(real-time PCR)对cdc2基因在G3、二倍体红鲫、三倍体湘云鲫及四倍体鲫鲤早期卵巢中的表达进行分析,结果发现,G3cdc2基因比普通二倍体红鲫和三倍体湘云鲫表达要高,比四倍体鲫鲤的表达水平低.该研究从分子水平证明了G3早期性腺中存在着大量的多倍体卵原细胞.同时,研究表明,cdc2基因在雌核发育二倍体鲫鲤早期卵巢的高表达暗示着G3多次进入S期却不经历M期导致二倍体配子的产生.