黄花石斛HPLC指纹图谱研究

为提供黄花石斛药材质量标准的依据,采用HPLC法建立黄花石斛药材指纹图谱。色谱条件为Spher-i-5-RP-18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相为甲醇-水,梯度洗脱,流速1.0mL/min,检测波长260nm。采用中华人民共和国药典委员会出版的中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件(版本:2004A)进行数据分析,最终建立了黄花石斛的HPLC指纹图谱,并标定了14个共有指纹峰;方法学考察结果符合指纹图谱技术要求,可用于建立黄花石斛药材的指纹图谱。     

黔产金钗石斛生物碱组成的HPLC指纹图谱建立

[目的]建立黔产金钗石斛生物碱组分的HPLC指纹图谱。[方法]流动相组成（水-乙腈）,梯度洗脱条件0～50min（5％-80％B）、50～60min（80％B）,流速1．0ml／min,检测波长240nm,测定贵州4个产地金钗石斛色谱图。[结果]建立了贵州4个产地金钗石斛生物碱组分指纹图谱,所建立的指纹图谱可用于贵州金钗石斛产地和质量的鉴别。[结论]该方法稳定,重现性好,可为贵州金钗石斛质量控制提供参考。     

管花肉苁蓉HPLC指纹图谱研究

[目的]建立管花肉苁蓉药材的HPLC指纹图谱,为其药材质量评价提供依据.[方法]以松果菊苷为参照物,采用高效液相色谱法,对管花肉苁蓉药材进行了指纹图谱分析.色谱条件如下:Waters xterra RP18(250 mm×4.6 mm、5 μm)色谱柱;乙腈-0.2;磷酸溶液梯度洗脱;流速 1.0 mL/min;检测波长 330 nm.[结果]该方法精密度高、重现性好,所测组分均达到基线分离,共分离了19个共有指纹峰,相似度在0.92～1.0.[结论]不同来源的管花肉苁蓉药材的内在质量存在差异,该方法可用于管花肉苁蓉药材的质量控制.     

市售五指毛桃药材HPLC指纹图谱的研究

[目的]建立五指毛桃药材的HPLC指纹图谱。[方法]采用高效液相色谱法,甲醇-水作为流动相,流速为1 m l/m in,检测波长为246 nm,检测时间为90 m in,柱温为室温。[结果]五指毛桃的指纹图谱共确定了8个共有峰,结果稳定,重复性好。[结论]建立的五指毛桃药材的指纹图谱,对五指毛桃药材的质量控制是可行的。     

北五味子药材指纹图谱研究

[目的]建立北五味子药材的HPLC指纹图谱,为北五味子药材的质量控制提供保证。[方法]采用RP-HPLC分析,利用中药指纹图谱相似度评价系统(2004A版)对不同批次北五味子药材HPLC图谱进行分析比较。[结果]建立了北五味子药材的HPLC指纹图谱,以五味子醇甲、五味子甲素、五味子酚、五味子乙素为参照峰确立了北五味子药材指纹图谱中的35个共有峰。[结论]建立的指纹图谱重现性及稳定性均较好,可用于北五味子药材的质量管理规范。     

北柴胡药材的HPLC指纹图谱研究

[目的]建立北柴胡药材的HPLC指纹图谱研究方法。[方法]采用Zorbax SB-C18(250 mm×4.6 mm ID,5μm)色谱柱,在柱温25℃、检测波长220 nm、流速为1.0 ml/min的条件下,以乙腈-0.05%磷酸水溶液为流动相对9个不同产地的柴胡样品进行梯度洗脱,分析其指纹图谱。采用国家药典委员会出版的《中药色谱指纹图谱相似度评价》(2004年A版)软件,对9个不同批次的北柴胡药材指纹图谱进行相似度分析。[结果]各批北柴胡药材中均有11个特征峰,各峰分离度良好,各批次药材间共有峰的相对保留时间RSD均<1.0%,药材间相似度均>90%。[结论]该研究采用HPLC法,以柴胡皂苷a为内参比峰,建立了北柴胡药材的HPLC指纹图谱,方法稳定、重现性好,可有效控制北柴胡药材的质量。     

黔产吴茱萸的UPLC-MS/MS指纹图谱分析

为了对吴茱萸的质量控制、研究开发和应用提供科学依据,采用ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(1.7μm,100mm×2.1mm),以水(A,含0.05%甲酸)-乙腈(B)为流动相,梯度洗脱;柱温40℃,流速0.4mL/min,进样量2μL,利用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004A版)对其进行相似度评价。结果:建立了吴茱萸UPLC-MS/MS指纹图谱的共有模式,确定了27个共有峰,并根据对照品和参考文献指认了11个共有峰,对20批不同产地和品种的吴茱萸药材相似度进行分析,其相似度在0.90以上。结论:首次建立了吴茱萸药材UPLC-MS/MS指纹图谱分析方法,该分析方法快速、灵敏、简便,可为吴茱萸药材各品种的质量控制提供依据。     

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为了对吴茱萸的质量控制、研究开发和应用提供科学依据,采用ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(1.7μm,100 mm×2.1 mm),以水(A,含0.05％甲酸)-乙腈(B)为流动相,梯度洗脱;柱温40℃,流速0.4 mL/min,进样量2μL,利用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004A版)对其进行相似度评价.结果:建立了吴茱萸UPLC-MS/MS指纹图谱的共有模式,确定了27个共有峰,并根据对照品和参考文献指认了11个共有峰,对20批不同产地和品种的吴茱萸药材相似度进行分析,其相似度在0.90以上.结论:首次建立了吴茱萸药材UPLC-MS/MS指纹图谱分析方法,该分析方法快速、灵敏、简便,可为吴茱萸药材各品种的质量控制提供依据.     

不同产地防己药材HPLC 指纹图谱的研究

建立防己药材的高效液相色谱指纹图谱,为评价及有效控制其质量提供参考。利用HPLC方法,测定了14个不同产地防己药材样品,选用Ultimmate XB C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为甲醇(A)- 0.1%甲酸(B),设定流速0.8 m L/min、柱温30℃、检测波长282 nm。采用国家药典委员会的"中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004A版)"进行评价,并对各产地防己药材进行聚类分析。结果表明,14个产地防己药材的HPLC指纹图谱有9个共有峰,所有产地指纹图谱相似度均在0.9以上,不同产地防己质量相似性较好。     

以绿原酸为参照物的杜仲叶HPLC指纹图谱

[目的]用绿原酸为参照物建立杜仲叶的指纹图谱。[方法]使用ZORBAX SB-C18(150 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,0.1%磷酸—乙腈梯度洗脱;流速1.0 ml/min;检测波长254 nm。[结果]所得的色谱图各色谱峰分离较好,图谱参数符合《中药注射剂指纹图谱研究的技术要求(暂行)》的规定。[结论]方法准确,可用于杜仲叶指纹图谱的建立以及控制杜仲叶药材的质量。     

铁皮石斛组织培养研究进展

为建立铁皮石斛的快速繁殖体系,实现其利用与保护的可持续发展,从外植体、培养基、培养条件和品质鉴定等方面综述了近年来铁皮石斛组织培养的研究概况,并对铁皮石斛组织培养发展进行了展望。     

铁皮石斛原球茎增殖培养基配方的优化

[目的]获得铁皮石斛（Dendrobium candidum Wall.ex Lindl.）原球茎组织培养的最佳培养基配方。[方法]用正交试验筛选出6-BA、NAA、KT最佳的浓度配比,并考察各因素对铁皮石斛原球茎增殖率的影响。[结果]铁皮石斛原球茎增殖的最佳培养基配方为1/2MS＋2.0 mg/L 6-BA＋0.5 mg/L NAA＋1.0 mg/L KT。[结论]该研究为工业化生产铁皮石斛原球茎及其有效成分,推进铁皮石斛工厂化育苗奠定了基础。     

不同石斛的生物学特性及主要成分比较研究

研究不同石斛的生物量和在不同月份的多糖及总生物碱含量,为确定最佳采收期提供指导,为评价不同石斛品质和人工种植的前景提供依据。以上一年生长的石斛茎为材料,采用苯酚浓硫酸法测定多糖含量,酸性染料比色法测定总生物碱含量,以株高乘以茎粗粗略估计生物量。结果表明,不同石斛的多糖含量均在3月时较高,但不同年份具有一定的差异,不同石斛生物碱含量最高的时期各不相同;在3月份采收时,铁皮石斛的多糖含量最高,束花石斛的生物碱含量最高,紫瓣石斛和金钗石斛二者的多糖和生物碱含量均较高,且其生物量也较大。以多糖含量为主的石斛类药材在广州种植时3月份进行采收较佳;以多糖含量来评价石斛品质时,铁皮石斛最佳;以总生物碱含量来评价石斛品质时,束花石斛最佳;而以多糖、总生物碱和生物量来综合评价时,紫瓣石斛具有良好的应用前景。     

鼓槌石斛研究进展

在系统查阅相关文献的基础上,对鼓槌石斛的研究进行了综述,着重介绍了野生鼓槌石斛资源分布与现状、种苗繁育、化学成分、药理作用与活性几方面的研究情况。     

石斛象甲蜡蚧轮枝菌生物学特性·毒力及其可湿性粉剂的研究

[目的]探讨石斛象甲蜡蚧轮枝菌的生物学特性及其毒力。[方法]以从石斛象甲上分离出的蜡蚧轮枝菌为研究对象,研究温度对该菌菌落生长和菌落产孢量的影响以及该菌对烟蚜的毒力及其可湿性粉剂对烟蚜的毒力。[结果]该菌菌丝生长和产孢的最适温度为30℃。该菌株对烟蚜有较高的毒力,随着浓度升高,杀虫效果明显增强,120h菌株的致死中浓度降到最低,为3．27×10^5孢子／ml。用固体培养法制成的粉剂悬浮率为74．65％,润湿时间为3．08min,在28℃培养48h可湿性粉剂的萌发率可达到85．8％。室内毒力测定表明该制剂对烟蚜具有较高的毒力。[结论]该研究为进一步开发利用石斛象甲蜡蚧轮枝菌防治害虫提供了依据。     

石斛种植工艺及其机械化生产技术体系探讨

石斛是传统名贵中药材,具有很高的药用价值,在此介绍了石斛的特性、云南石斛的种植概况、种植特点及工艺流程,根据石斛的种植工艺特性,分析了目前石斛种植存在的问题,针对石斛规模化和标准化发展的趋势,提出了石斛机械化生产的建议.     

金钗石斛菌根、茎和叶内生真菌的分离与鉴定

[目的]分离鉴定铁皮石斛不同组织内生真菌,以期为提高其组培苗的大田定植成活率提供试验依据。[方法]以改良PDA-抗生素酸性培养基为基础分离培养基,分别从金钗石斛菌根、茎和叶中分离内生真菌,利用切片法对分离得到的菌株进行纯化,并观察其菌落形态。[结果]通过菌落形态观察,初步鉴定所纯化的6个内生菌株分别为:NJJG-1,NJJG-2,NJJR-1,NJJR-2,NJJR-3和NJYJ-1。试验结果表明材料表面消毒条件和方法以及分离培养基的选用,均直接影响真菌的分离纯化效果和分离得到的内生菌的多样性,其中以75%酒精处理30 s,再用0.1%升汞处理7 min的表面消毒效果稳定,再配合改良的PDA-抗生素酸性培养基分离内生菌,可以分离出较多的内生菌种类。[结论]该研究结果为铁皮石斛不同组织内生真菌的分离鉴定提供了指导方法,同时为提高其组培苗的大田定植成活率提供了试验依据。     

铁皮石斛组织培养研究进展

近年来,对铁皮石斛的需求日趋增加,而野生资源难以满足市场需求,组织培养技术使大规模人工栽培成为可能。从种子萌发、原球茎分化、生根与壮苗、原球茎增殖等方面阐述了近年来关于铁皮石斛组织培养技术的研究概况,并展望了发展前景。     

药用石斛花粉生活力的研究

［目的］探讨药用石斛不同时期、不同贮存时间的花粉生活力。［方法］以玫瑰石斛、鼓槌石斛、细茎石斛和金钗石斛4个药用石斛种为材料,对蕾期、初花期、盛花期和谢花期4个时期,在白天平均温度25℃、夜间平均温度13℃的自然干燥条件下放置1、5、12、24、48h的花粉生活力进行测定。［结果］4个种之间花粉生活力差异不大,均以初花期花粉生活力最强,盛开期次之,蕾期第3,谢花期最低;初花期和盛花期的花粉放置1~48h均有良好的生活力。［结论］该研究为药用石斛人工辅助授粉、有性杂交育种工作的开展提供理论依据。     

不同种类石斛园昆虫群落特征的研究*

 系统调查了4种不同种类石斛园昆虫群落组成及结构,应用群落特征参数分析方法分析了石斛园昆虫群落组成和结构的变化、群落特征及时间格局。结果表明,鼓槌石斛园昆虫群落结构不稳定,各物种数量、个体数量、群落多样性、丰富度及均匀度等指数随时间的变化波动较大;球花石斛园、束花石斛园和叠鞘石斛园昆虫群落结构相对较稳定。研究结果为石斛害虫综合治理和生态调控措施的制定及实施提供了理论依据。