不同贮藏条件下锥栗花粉生活力研究

为了解决锥栗杂交育种中的花期不遇问题,以‘华栗4号’花粉为试材,研究了在室温和4、-20、-80℃这4个贮藏温度条件下干燥处理和非干燥处理对锥栗花粉生活力的影响情况。结果表明:在不同贮藏温度条件下‘华栗4号’的花粉生活力和耐贮藏能力不同;花粉适宜的贮藏条件为非干燥、低温环境。花粉生活力随贮藏时间的延长而下降,室温干燥条件下贮藏的花粉其生活力下降最快,贮藏27 d后花粉活力基本丧失;4℃的温度条件较利于花粉的短期贮藏,贮藏30 d后其萌发率仍为32.6%;而-20和-80℃的温度条件均较利于花粉的长期贮藏,且-80℃下贮藏的效果最佳,-80℃下贮藏270 d后花粉仍有一定的生活力,而在-20℃下贮藏210 d后花粉的生活力已基本丧失。     

马银花花粉萌发和贮藏特性

采用不同培养液、不同培养温度不同贮藏时间和温度、-80℃超低温贮藏花粉不同解冻方法对马银花(Rhododendron ovatum)的花粉萌发特性及贮藏特性进行研究,结果表明:在25℃下,用100 g/L蔗糖+100 mg/L硼酸+100 mg/L GA3的离体培养液,培养4h花粉萌发率高,可达80%,GA3能促进花粉萌发和花粉管生长;各贮藏温度下的花粉贮藏15 d萌发率都保持在高水平,但室温贮藏花粉45 d失活,3.3℃贮藏花粉45 d萌发率可保持在36.11%,可作为生产应用的贮藏温度;-80℃贮藏的花粉采用30℃水浴解冻2 min效果较好。     

崇左金花茶花粉萌发及在不同贮藏条件下活力变化的研究

2015年7月,采集崇左金花茶Camellia chuangtsoensis S.Y.Liang et L.D.Huang花粉,分别置于室温25℃,4℃,-20℃和-80℃保存。采用离体液体培养基法筛选出最佳崇左金花茶花粉的萌发条件,在此基础上试验不同贮藏温度和不同贮藏时间对花粉萌发率的影响。结果表明,崇左金花茶花粉萌发的最适培养基为12%蔗糖+0.12%H3BO3。花粉-20℃条件下贮藏5个月时,花粉萌发率仍可达原来的(68.93%)25%;在-80℃条件下贮藏5个月时,花粉萌发率可达原来的32%,-80℃条件下保存的花粉其萌发率略高于-20℃。     

耐冬山茶花粉储藏条件及其活力的动态变化

以山东青岛耐冬山茶花粉为试验材料,采用离体培养基法研究了花粉的萌发特性,并探讨了不同贮藏温度与贮藏时间对花粉萌发率和超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)活性的影响.结果表明:耐冬山茶花粉萌发的最适宜培养基为:150 g·L-1蔗糖+0.05 g·L-1硼酸+100 mg·L-1GA3+ 900 g·L-1Ca(NO3)2;花粉最佳贮藏温度为-80℃;-80℃贮藏360 d后,花粉萌发率仍达到原来的58.19％,3种保护酶活性较高,花粉抗氧化、衰老能力较强;贮藏过程中,3种保护酶活性出现最高峰值前后花粉萌发率出现大幅度下降;不同贮藏温度下,3种保护酶的作用不同,室温下POD、CAT为敏感性保护酶,4℃下SOD为敏感性保护酶,-20℃、-80℃下CAT为敏感性保护酶;3种保护酶活性对花粉萌发率的影响依次为:SOD＞ POD＞ CAT.     

贮藏温度和时间对马尾松花粉保护酶活性及萌发率的影响

研究室温,4,-10和-20℃4种贮藏温度和0,72,144,216,286和358天6种贮藏时间对马尾松花粉萌发率及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)活性的影响。结果表明:马尾松花粉的最佳贮藏条件为:室温72天,4℃216天,-10℃和-20℃286天,此时的花粉保持较高的萌发率和较强的抗氧化抗衰老能力;在贮藏过程中,3种酶出现最高峰值前后花粉萌发率出现大幅度下降;不同贮藏温度下,3种保护酶的作用不同,室温和4℃贮藏温度下,CAT为敏感型保护酶,SOD和POD为非敏感型保护酶;-10和-20℃贮藏温度下,POD为敏感型保护酶,SOD和CAT为非敏感型保护酶。     

油松花粉离体萌发培养基及花粉贮藏条件研究

花粉生活力对油松杂交育种至关重要。为筛选油松花粉离体萌发培养基,探讨不同温度贮藏下花粉的生活力,采用正交试验设计,研究不同水平蔗糖、硼酸和pH值对油松花粉离体萌发的影响;测定不同温度贮藏下油松花粉萌发率随时间的动态变化。结果表明:油松新鲜花粉在蔗糖100 g·L~(-1)、硼酸0.10 g·L~(-1)、琼脂8 g·L~(-1)、pH值6.5的培养基上萌发效果最好,萌发率高达93.12%。不同贮藏温度下油松花粉生活力存在明显差异,-80℃贮藏15 d和30 d的花粉萌发率分别为92.93%和91.27%,萌发率下降不显著;-20℃和4℃贮藏15 d,花粉萌发率下降不显著,但贮藏30 d的花粉萌发率与初始萌发率相比均极显著下降,萌发率分别为88.65%和86.84%;常温25℃贮藏15 d、30 d的花粉萌发率分别为90.27%、82.66%,与初始萌发率均达到极显著差异;由此可见,贮藏温度越低,越有利于花粉生活力的保持。此研究可为油松花粉生活力检测提供一种可靠方法,并为花粉贮藏提供参考依据。     

不同贮藏方法对华顶杜鹃花粉活力的影响

研究了华顶杜鹃Rhododendron huadingense花粉活力水平及不同贮藏方法对其活力的影响。结果表明,新鲜华顶杜鹃花粉的萌发率高达98.1%;室温存放的新鲜花粉在3 d内可保持较高的活力,3 d后其活力下降迅速;4℃贮藏7 d后的花粉萌发率仍保持在85.5%的较高水平,贮藏15 d时的萌发率仍高于50%,可作为华顶杜鹃花粉的短期(15 d内)保存方法;-20℃贮藏40 d后的花粉萌发率仍能达到87.4%,基本可满足实际需求;-80℃下贮藏60 d后萌发率依旧维持在95.2%,可用于华顶杜鹃花粉的长期保存。本研究结果说明花粉活力不是导致华顶杜鹃濒危的生物学原因。     

西南桦花粉低温贮藏试验初报

从花粉干燥、真空和低温等方面对西南桦花粉贮藏进行了初步研究,结果表明:西南桦花粉属干燥敏感型花粉,干燥易使其失活,其含水量约为20%,用硅胶稍微干燥至含水量约18%后即可用于低温贮藏;西南桦新鲜花粉在室温下仅可存活4 d,干燥花粉和新鲜花粉在3℃下贮藏约1个月即失去活力,而在-10℃和-20℃条件下应用干燥花粉真空贮藏,83 d后花粉萌发率仍在20%以上,是西南桦花粉贮藏的最佳方案;在-10℃和-20℃下贮藏的花粉在室温(18~30℃)下解冻0.5 h即可检测其萌发率。     

金花茶花粉贮藏特性

采用花粉离体培养法,研究不同含水量、贮藏温度对金花茶花粉生活力的影响。结果表明:花粉生活力随贮藏时间的延长而降低,随贮藏温度的降低而延长。在室温条件下,花粉干燥处理萌发率高于非干燥处理,室温非干燥条件下,花粉生活力下降最快,10 d左右基本丧失生活力;在4℃和-20℃低温条件下,贮藏一定时间的花粉活力仍可达50%以上。花粉最佳的贮藏条件为冷冻干燥(-20℃)。     

中华槭花粉活力探究

以中华槭为研究对象,研究了中华槭花粉离体培养萌发最佳测定时间,中华槭花粉活力快速测定的方法,蔗糖、硼酸、氯化钙浓度以及不同贮藏温度(室温、4℃、-20℃)对中华槭花粉活力的影响。试验结果表明:中华槭花粉离体培养16h后,再进行其花粉活力的测定较为适宜;用离体培养萌发法测定的花粉活力,最接近于中华槭花粉的真实活力。适于中华槭花粉萌发的蔗糖、硼酸、氯化钙浓度分别为:100g/L、50mg/L、50mg/L。中华槭花粉在4℃下可以存活60d,在-20℃下可以保存120d,在室温下仅可以存活7d。     

大花黄牡丹花粉萌发及贮存特性

【目的】明确大花黄牡丹花粉萌发准确测定的方案,比较不同贮存条件和处理温度对花粉寿命的影响,确定花粉短期、中期、长期贮存的适宜温度,阐明不同温度下花粉程序性死亡的生理原因,为杂交育种、种质资源保存提供试验及理论依据。【方法】以西藏特有的大花黄牡丹花粉为材料,采用扫描电镜(SEM)观察分析花粉的形态,利用离体培养法研究花粉的萌发特性,并探讨不同贮存温度对花粉寿命,超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)活性,及丙二醛(MDA)和抗坏血酸(AsA)含量的影响。【结果】大花黄牡丹自然环境下花粉饱满率高,畸形率仅为5.6%,具有较强的有性生殖能力;影响大花黄牡丹花粉萌发的因子依次为蔗糖硼酸CaCl_2GA_3;室温下贮存花粉寿命仅为24天,4℃下花粉寿命80天左右,-20℃花粉寿命为120～184天,-80℃下花粉的寿命超过1年,-196℃花粉贮存1年后萌发率无显著变化;花粉保护酶、丙二醛含量、AsA含量剧烈变化前后花粉萌发率出现快速下降,-196℃贮存期间,SOD、CAT、POD、AsA含量保持稳定,清除活性氧能力较强,无细胞凋亡现象发生;相关分析结果显示,SOD活性是贮存期间影响大花黄牡丹花粉寿命的最主要生理因子,膜质过氧化是导致花粉死亡的主要生理因素;室温下POD为敏感性保护酶,4℃下SOD、CAT是敏感性保护酶,-20℃、-80℃下,SOD为敏感性保护酶; 3种保护酶活性及AsA含量对花粉萌发率的影响次序为SODCATAsA含量POD。【结论】大花黄牡丹花粉饱满率与萌发率具有相关性;适宜大花黄牡丹花粉萌发率检测的培养基为120 g·L~(-1)蔗糖+45 mg·L~(-1)硼酸+55 mg·L~(-1)GA_3+30 mg·L~(-1)CaCl_2,花粉萌发率达92.10%;室温适合大花黄牡丹花粉24天以内的短期贮存,4℃、-20℃适合杂交时间间隔在80～120天花粉的中期贮存,-80℃适合花粉的跨年贮存,-196℃适宜花粉的长期贮存;-196℃下贮存后花粉细胞内代谢处于平衡状态,细胞膜系统稳定是花粉保持高萌发率的生理响应;花粉在室温、4℃、-20℃、-80℃下贮存后,活性氧、自由基过度积累造成的细胞膜质过氧化、损伤是花粉萌发率降低的主要原因。     

小菊花粉生活力及贮藏力的研究

采用液体培养基法对几种小菊花粉生活力及贮藏力进行了研究。结果表明,小菊花粉在常规的硼、钙培养基上很难萌发,添加PEG后可显著提高花粉萌发率,在15%蔗糖+20mg/L硼酸+10mg/L CaCl2+15%PEG6000培养基上萌发率最高,可达38.4%。小菊花粉贮藏时不宜干燥,贮藏时间随着温度的降低而延长,在-80℃不干燥条件下,花粉活力可以保持60d以上。     

地被菊花粉萌发及花粉活力的研究

用ME的盐类和维生素附加16％聚乙二醇4000(PEG4000)和15％蔗糖对野菊及新红、塞旗红、玫瑰红的花粉进行培养。结果表明，萌发率分别为80．2％、85．3％、61．3％和46．5％。PE‰对菊花萌发有明显促进作用。但庶糖的作用不能被PEG所取代。菊花花粉萌发较合适的温度为10-20℃，在4-8℃时，萌发率及速度迅速降低，35℃萌发虽快。但花粉管短且破裂。在4℃条件下花粉可贮藏4-14d。但不宜干燥贮藏。     

‘高原红’海棠花粉特性与生活力测定研究

以5年生观赏海棠‘高原红’嫁接苗为试验材料,采用扫描电镜、花粉离体培养、荧光显微技术等研究了‘高原红’花粉的形态、生活力及贮藏特性,分析了花粉离体培养基成分、离体与活体萌发的区别及花粉贮藏过程中活力的变化。探讨了花粉萌发及贮藏特性,旨在为揭示花粉萌发特性、建立花粉贮藏体系提供理论依据。结果表明:硼酸与蔗糖溶液均对‘高原红’花粉萌发有显著的影响,单因素最佳培养基为10%蔗糖溶液;离体与活体花粉在萌发时间上有一定程度的差异,离体萌发较快于活体萌发,且活体萌发中花粉管在授粉后第8—12 h为快速伸长期;花粉贮藏过程中,室温(17—20℃)下贮藏的花粉活力急速下降,花粉管长度与4,-20℃及-70℃时差异显著,4℃下贮藏的花粉离体萌发率同样呈急速下降的趋势,与-20,-70℃时差异显著,而-20℃与-70℃下贮藏的花粉其离体萌发率之间与花粉管长度之间差异均不显著。     

黄连木花粉形态和萌发条件研究

研究了花粉的形态、数量与花粉萌发及贮藏条件。结果表明:黄连木花粉为单粒,球形或近球形,花粉粒大小整齐,平均直径为28.7μm;饱满花粉粒达95%以上;每花药平均花粉量为1.17×105粒。黄连木花粉萌发培养基中蔗糖浓度15%,硼酸为100mg/L,温度为25℃时萌发率最高,为79.43%;蔗糖浓度20%时,萌发率降低到77.27%。分别在4℃、-20℃、-40℃下干燥贮藏15d的花粉萌发率分别为78.74%、38.22%、27.20%,花粉管长度分别为126μm、230μm、293μm;贮藏25d的花粉萌发率分别为0、22.84%、2.00%,花粉管长度分别为0μm、195μm和132μm。     

香椿花粉离体萌发与花粉生活力研究

[目的]探究香椿花粉最佳离体培养条件,花药大小、含水率与花粉萌发率的关系及花粉生活力随低温贮藏时间的变化的规律。[方法]以3个不同基因型(XC5、XC22、ZJ26)香椿花粉为试验材料,观测不同培养温度(20、22、25、28℃)、培养时间(4、6、12、18、30、42 h)下,花粉离体培养的萌发率,获得香椿花粉最佳培养条件。对香椿的花药含水率、花药长、宽进行测量,分析其与花粉萌发率的关系。基于最佳培养条件,检测香椿花粉-20℃低温贮藏10、25、40 d的萌发情况,分析花粉生活力随低温贮藏天数的变化趋势。[结果]香椿花粉在20℃的萌发率均显著高于其余3个培养温度,花粉萌发率随培养时间的延长而增大,培养30 h后,花粉萌发率均无显著变化。低温贮藏10 d的花粉萌发率与花药长度显著正相关,与花药宽度显著负相关,相关系数分别为0.529 6、-0.739 9。随着低温贮藏时间的延长,香椿花粉萌发率显著降低,含水率高的XC22降幅最大,低温贮藏10、25 d的花粉萌发率分别为89.2%、3.3%。[结论]检测香椿花粉生活力的最佳离体培养条件为20℃培养30 h;香椿花粉萌发率与花药长度、宽度以及含水率可能作为筛选花粉高萌发率的指标;低温贮藏可能对含水率高的香椿花粉生活力影响大。     

贴梗海棠花粉生活力的测定

以贴梗海棠初开花朵为试验材料,研究了TTC、碘-碘化钾2种染色剂测定花粉生活力的效果,离体培养时葡萄糖对花粉萌发的影响和3种不同温度(15、20、25℃)条件下的花粉萌发的变化规律,3种贮藏条件(常温、4℃、-23℃)对花粉贮藏的影响。结果表明:不同染色剂测定的花粉生活力差异显著,TTC染色法(76.26%)显著优于碘-碘化钾染色法(42.46%)。在一定范围内,培养基葡萄糖浓度和萌发温度提高能促进花粉的萌发,超出范围后抑制萌发。试验证明:最佳的葡萄糖浓度为10%,最佳的萌发温度为20℃。贮藏温度对花粉生活力的影响显著,其中最佳的贮藏条件是冷冻干燥,但综合考虑成本、便捷性等因素,实际应用中一般选择4℃。     

日本栗花粉生活力研究

快速测定日本栗花粉的生活力,可保证人工杂交育种的有效开展.为此,笔者采用萌发法测定了日本栗3个栽培品种混合花粉萌发的适宜温度,同时进行不同温度贮藏实验.结果表明:日本栗花粉萌发的适宜温度为32～35℃.不同贮藏方式和贮藏时间对花粉的生活力影响差别大,4℃和-20℃的低温条件更适宜花粉保存.     

贮藏温度对枫香种子耐贮性的影响

[目的]以枫香种子为试材,研究不同贮藏温度下种子活力随时间的变化规律,为枫香种子的贮藏方法提供理论依据。[方法]将枫香种子阴干至含水量为10.54%,然后分别贮藏于室温(25±2)℃、4℃、-20℃和-70℃的温度条件下,于贮藏0、60、180、300、360、520、730 d分别测定种子的丙二醛含量和相对电导率,并将种子于室内播种,测定发芽势、发芽率及播种1个月后萌发幼苗的苗高和根长。[结果]随着贮藏时间的延长,4种温度下种子的发芽率、发芽势、幼苗苗高与根长均逐渐降低,丙二醛含量和相对电导率逐渐升高;贮藏至360 d时,4种温度均能较好地保持种子活力,相互之间差异不明显;至730 d时,4℃、-20℃和-70℃的贮藏效果明显优于室温,-70℃的贮藏效果最佳。[结论]枫香种子在含水量10.54%时,若贮藏时间在360d以内,则室温贮藏即可有效保持种子活力;若贮藏时间进一步延长,则需要采用低温进行贮藏;贮藏730d时,4℃、-20℃和-70℃均可有效保持种子活力,其中,-70℃的贮藏效果最佳。     

贮藏温度对4种观赏桃花粉贮藏特性的影响

为解决观赏桃杂交育种中花期不遇的问题,以‘粉花山碧’‘合欢二色’‘满天红’‘元春’4种观赏桃品种的花粉为材料,采用离体培养法,研究其在4、-20、-60、-80℃及室温环境下,随着贮藏时间的延长花粉生活力及培养2h花粉管长度的变化。结果表明:贮藏温度对花粉的生活力有显著影响,但对培养2h花粉管长度的影响不显著;5个贮藏温度中,4个品种均以-80℃为最佳贮藏温度,在其他温度下不同品种花粉的贮藏特性在不同贮藏阶段存在差异,差异主要表现在4和-20℃贮藏时,并不都符合温度越低,贮藏效果越好的规律。4个观赏桃品种间花粉耐贮性存在显著差异,按照耐贮性由强到弱排序,各品种依次为‘满天红’‘元春’‘合欢二色’‘粉花山碧’。