离体葡萄未成熟胚成苗途径研究

以巨峰葡萄剥离幼胚及红井川品种切喙胚球为外植体接种至含不同浓度２，４－Ｄ、ＮＡＡ与６－ＢＡ配比的ＮＮ－１９６９培养基中，诱导葡萄未成熟胚产生胚状体及实现胚萌发。两品种均是在含２，４－Ｄ０．５ｍｇ．ｌ＾－１、６－ＢＡ１．０ｍｇ．ｌ＾－１的培养基中诱导胚进入胚状体发生途径的；而在含ＮＡＡ（１．０、２．０ｍｇ．ｌ＾－１）与６－ＢＡ（０．２、１．０）或２．０ｍｇ．ｌ＾－１ＺＴ配比的培养基上幼胚进入胚萌发途     

单胚槾橘×多胚岩溪晚芦槿柑多胚种子的胚分离培养及后代的叶形态和SSR鉴定

继首次报道单胚清见与多胚桠柑杂交产生高比例多胚种子后,在单胚棱橘（Citrus tardiferax Hort．ex Tan）与多胚岩溪晚芦桠柑（Citrus reticulata Blanco）的杂交组合中,又发现高比例多胚种子,其比例一般为30％左右。为探明多胚来源,对多胚进行了分胚组织培养,获得同一种子来源的多胚...     

2,4-D对成熟与非成熟西洋参种胚体细胞胚发生的影响

以西洋参成熟种子及未成熟种子为试材,在无菌操作条件下剥取种胚,将其依次接种在不同2,4-D浓度的MS培养基中,在光照和暗培养条件下分别进行培养,研究2,4-D对西洋参种胚体细胞胚发生的影响.结果表明:成熟种胚在不同浓度2,4-D中皆可发生体细胞胚,最佳浓度为0.5 mg/L,光照可以促进体细胞胚发生;未成熟种胚不能形成体细胞胚.说明成熟种胚体细胞胚发生需要2,4-D诱导,未成熟种胚的表现与成熟种胚差异显著;西洋参种胚在发育控制上与人参存在明显不同.     

杧果幼胚发育阶段对离体培养物诱导效果的影响

【目的】明确幼胚愈伤诱导和胚抢救最佳时期,为杧果高效体胚发生体系构建及胚抢救技术有效利用提供依据。【方法】以'热农1号'杧果为材料,探讨幼胚不同发育时期和植物生长调节剂对愈伤组织诱导的影响,同时比较了幼胚不同发育时期对幼胚萌发的影响。【结果】授粉后25 d幼胚处于球形胚期,30 d处于心形胚期,35 d处于鱼雷胚期,40 d之后处于子叶胚期。授粉后40 d早期子叶胚愈伤组织诱导率显著高于其他时期;早期子叶胚在含有3.0 mg·L~(~(-1))2,4-D、1.0 mg·L~(~(-1))KT(或0.5 mg·L~(~(-1))KT及0.5 mg·L~(~(-1))ZT)培养基(PM3和PM4)中愈伤组织诱导率最高,为54.4%～62.2%,显著高于其他培养基。授粉后35 d鱼雷胚的萌发率最高,为47.2%,显著高于其他时期。愈伤组织能经体胚发生途径正常成苗,幼胚萌发后也能正常发育成苗。【结论】'热农1号'杧果幼胚愈伤诱导最适宜的时期是早期子叶胚,胚抢救最适宜的时期是鱼雷胚阶段。     

西洋参体细胞胚成熟萌发研究

以西洋参种胚诱导愈伤组织上的体细胞胚(胚状体)为试材,采用离体培养方法,研究胚状体自身发育阶段及用于成熟、萌发生长的培养基的组成因子对其成熟萌发的影响,以期确定最佳的胚状体成熟培养基和萌发培养基。结果表明:发育阶段为鱼雷形的胚状体,是进行成熟培养的最佳材料;胚状体成熟的最佳培养基是0.5M+0.4mg/L 6-BA+2mg/L NAA+5mg/L GA3+1%AC;在此培养基上胚状体生长变大,子叶生长展开,胚芽、胚根肉眼可见;成熟培养基中植物生长调节物质在活性炭作用下缓慢释放并作用于胚状体,达到形成大量正常、健壮、同步胚状体的目的;胚状体萌发的最佳培养基是0.5MA+0.4mg/L 6-BA+2mg/L NAA+5mg/L GA3;在此培养基上胚状体萌发生长,胚芽伸长真叶展开。     

离体葡萄未成熟胚成苗途径研究

以巨峰葡萄剥离幼胚及红井川品种切喙胚珠为外值体接种至含不同浓度２，４Ｄ、ＮＡＡ与６－ＢＡ配比的ＮＮ－１９６９培养基中，诱导葡萄未成熟胚产生胚状体及实现胚萌发。两品种均是在含２，４－Ｄ０．５ｍｇ·１－１、６－ＢＡ１．０ｍｇ·１－１的培养基中诱导胚进入胚状体发生途径的；而在含ＮＡＡ（１．０、２．０ ｍｇ·１－１）与 ６－ＢＡ（０．２、１．０）或２．０ ｍｇ·１－１ＺＴ 配比的培养基上幼胚进入胚萌发途径成苗。由此讨论了培养基激素、胚发育时期对胚培养两种途径的诱导和控制。     

幼胚发育阶段对次郎柿胚抢救效果的影响

迄今对柿幼胚培养的最佳时期尚不完全明确。以完全甜柿品种次郎(Diospyros kaki Thunb.cv.Jirou)为试材,探讨了幼胚发育阶段对胚抢救效果的影响。结果表明,(1)授粉后40d幼胚处于球形胚期,50d处于心形或鱼雷形期,60d之后处于子叶形胚期;(2)接种授粉后40d幼胚的萌发率(29.3%)显著低于其它时期,其后不同取胚时期的萌发率均为100%,差异不显著;(3)接种授粉后60d幼胚的成苗率(92%)显著高于其它时期,再生植株苗高和生根数与其它时期无明显差异。因此,心形期至子叶期阶段是完全甜柿品种次郎幼胚的最佳培养时期,萌发率和成苗率分别为100%和86%～92%。该时期较前人报道的柿幼胚培养时期提早10￣20d。     

仙客来体细胞胚发生和发育过程中淀粉粒的动态变化

以仙客来(Cyclamen persicum Mill.)开花植株的新生叶片为外植体,诱导筛选胚性愈伤组织,并使其进一步发育成体细胞胚.组织切片观察结果表明:胚性愈伤组织由胚性和非胚性细胞组成,胚性细胞多以胚性细胞团的形式存在,胚性细胞团起源于诱导的胚性决定细胞.体细胞胚起源于单个胚性细胞,经多细胞原胚、球形胚、心形胚和鱼雷胚等时期发育成完整植株.在体细胞胚的发生发育过程中,淀粉粒出现4次积累高峰,分别为胚性细胞、球形胚、早期鱼雷胚和成熟胚发育成完整的小植株时期,淀粉代谢与体细胞胚发生、发育及小植株的形态建成密切相关.     

银杏幼胚离体培养再生植株的研究

 以佛手银杏幼胚为外植体, 研究了不同大小幼胚在不同培养条件下, 愈伤组织和胚状体的诱导发育情况。结果表明: 大于3 mm的幼胚, 在MK +NAA 1.0 mg·L ^{- 1} +BA 1.0 mg·L ^{- 1}培养基上胚状体诱导率最高, 达到53.6% , 最多的一块愈伤组织形成多达38个胚状体。暗培养不利于胚状体的发生。在MK培养基上添加10%椰汁对胚状体的生长发育有很好的促进作用, 有34.5%生长成苗。     

荔枝组织培养中胚状体产生的类型及分析

以荔枝２０—３０ｄ龄幼胚为外植体诱导产生愈伤组织，并筛选建立了幼胚胚性愈伤组织系。胚性愈伤组织在附加２，４－Ｄ的ＭＳ培养基上诱导胚状体分化，在附加ＮＡＡ和ＩＢＡ的培养基中促进胚状体的发育和成熟。在体外胚胎发生过程中，形成大量各种类型的胚状体，其中出现不少异常胚；胚性愈伤组织继代培养过程中存在大量的染色体变异，这可能是产生异常胚的重要原因之一。     

早熟甜樱桃新品种‘泰山蜜脆’

山东农业大学于1999年取自然授粉的‘抉择’品种的种胚进行胚培养,共获得杂种胚培苗207株,2000年春定植于泰安横岭育种基地选种圃。     

仙客来体细胞胚发生和发育过程中淀粉粒的变化

 以仙客来（Cyclamen persicum Mill.）开花植株的新生叶片为外植体，诱导筛选胚性愈伤组织，并使其进一步发育成体细胞胚。组织切片观察结果表明：胚性愈伤组织由胚性和非胚性细胞组成，胚性细胞多以胚性细胞团的形式存在，胚性细胞团起源于诱导的胚性决定细胞。体细胞胚起源于单个胚性细胞，经多细胞原胚、球形胚、心形胚和鱼雷胚等时期发育成完整植株。在体细胞胚的发生发育过程中，淀粉粒出现4次积累高峰，分别为胚性细胞、球形胚、早期鱼雷胚和成熟胚发育成完整的小植株时期，淀粉代谢与体细胞胚发生、发育及小植株的形态建成密切相关。     

油松未成熟合子胚离体培养诱导胚性愈伤组织

研究了油松未成熟合子胚不同发育时期和不同植物生长调节剂组合对油松胚性愈伤组织诱导的影响。结果表明:在沈阳地区,油松未成熟合子胚诱导胚性愈伤组织的最佳采种时间为7月10日左右;以DCR为基本培养基,添加较低浓度的KT和较高浓度的2,4-D有利于油松胚性愈伤组织的诱导,其中以添加2,4-D 2mg/L和KT 0.5mg/L时诱导率最高,可达88.3%。     

番木瓜均质胚性细胞悬浮系的建立和高效植株再生

【目的】提高番木瓜体细胞胚发生的同步性及其植株再生率,为番木瓜大量快繁、细胞工程和分子育种技术研发提供技术基础。【方法】以紫晖110～120 d果实的未成熟合子胚为外植体,经胚性愈伤组织诱导、液体悬浮培养和体细胞胚发生过程,建立均质胚性细胞悬浮系和高效植株再生技术体系,重点比较了不同质量浓度2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-Dichlorophenoxyacetic acid,2,4-D)对胚性愈伤组织诱导、不同质量浓度6-苄基氨基嘌呤(6-Benzylaminopurine,6-BA)+萘乙酸(1-naphthlcetic acid,NAA)组合和活性炭(activated carbon,AC)对子叶期体细胞胚萌发与生根的影响。【结果】4 mg·L^-12,4-D可诱导62.86%未成熟合子胚形成胚性愈伤组织。经5个继代周期的筛选培养,可建立由单细胞和小细胞团组成的均质胚性细胞悬浮系。采用液体培养方式能诱导大量球形胚的形成,被转移至含5 g·L^-1AC的半固定培养基成熟培养30 d后,可获得大量子叶期体细胞胚。在含0.4 mg·L^-1<...     

葡萄原胚团的诱导、保存、扩繁及其细胞学观察

【目的】通过诱导、保存和扩繁葡萄原胚团,为葡萄外源基因转化及基因编辑研究提供受体材料。【方法】以4个欧亚种葡萄品种和1个野生种葡萄的花器官为材料,比较不同外植体在3种培养基上胚性愈伤组织的诱导率,通过二次再生途径诱导、保存和扩繁次生原胚团并利用改良苯酚品红染色法对其进行细胞学观察。【结果】‘无核白’葡萄的雄蕊接种在PIV培养基上胚性愈伤组织诱导率最高(10.8%);初生原胚团细胞核大、染色深且具有旺盛分裂能力,二次再生途径诱导的次生原胚团具有同样的细胞学特征且可以正常成苗。【结论】葡萄体细胞胚诱导受基因型、外植体类型影响显著;二次胚再生途径可以长期诱导、保存和扩繁原胚团,能为葡萄遗传转化持续提供受体材料。     

核果类果树胚培养研究进展和育种成效

综述了国内外核果类果树胚培养研究进展。重点分析了培养基对桃、杏、李和梅胚培成苗的影响,对在核果类果树胚培养中常用的培养基类型进行了讨论。同时也分析了低温处理和胚龄对胚培成苗的影响,即核果类果树胚培养需要一定量低温处理,胚龄越长胚培成苗率越高(胚败育除外)。最后阐述了应用胚培养技术在桃和杏品种选育中所取得的成效。     

大车前合子及原胚发育的超微结构研究

利用透射电镜技术研究了大车前（Plantago major L.）合子及其原胚发育特点。结果如下：大车前胚胎发育类型为柳叶菜类型。合子发育过程中,合点端的细胞壁逐渐形成,合子体积增大,极性增强,质体内贮藏淀粉。合子分裂通常发生在初生胚乳核分裂之后,第1次横分裂形成基细胞和顶细胞。基细胞经多次分裂形成单列细胞构成发达的胚柄;顶细胞多次分裂形成胚体,胚体细胞核大,核仁明显,细胞器的种类与数量多,呈现旺盛分生能力,具有很高的代谢活性。原胚发育过程中,小球胚初期,胚胎发育的营养物质主要来自合子储存的以及胚柄吸收并转运的营养物质;小球胚至中球胚期,胚柄组织迅速发育,依赖发达的胚柄自珠被组织吸收营养物质并转运至胚体;大球胚后期,胚柄开始解体,胚体外围细胞吸收胚乳的降解物作为胚胎发育所需营养物质。     

败育型葡萄胚抢救技术及胚败育机理研究进展

综述早熟葡萄、无核葡萄和三倍体葡萄胚抢救技术及胚抢救机理研究进展，分析了胚抢救技术存在的缺陷与不足，提出了几个胚抢救机理可研究方向。     

菠萝愈伤组织中体细胞胚起源过程的组织细胞学观察

以菠萝（Ananas comosus）‘神湾’品种为材料,采用石蜡切片法对其愈伤组织中球形胚形成过程进行了组织细胞学观察。结果表明,非胚性愈伤组织转入到MS + 4.0 mg · L-1 2,4-D + 0.5 mg · L-1 6-BA培养基培养后,愈伤组织中先出现一些胚性细胞;然后单个胚性细胞分裂形成一个由多细胞组成的原胚。原胚细胞分生能力强,与周围的母体组织之间形态差异显著,界限明显,其下部形成一个类似胚柄的结构。随着原胚不断生长,其形状由长椭圆形发展成倒卵形,最后逐渐形成表面较光滑、外观近球形的球形胚,并在‘胚柄’基部与母体组织连接处形成离层。与此同时,球形胚内出现细胞分化。菠萝体细胞胚发生具有内、外两种起源方式,另外愈伤组织中体细胞胚发生普遍存在着不均匀、不同步和次生胚等现象。     

麦草畏、水杨酸对西洋参成熟种胚体细胞胚发生的影响

以西洋参成熟种胚为试材,以不加激素和添加0.5mg/L 2,4-D的MS培养基为对照,研究了不同浓度(0.05~2.00mg/L)麦草畏、水杨酸对西洋参体胚发生的影响。结果表明:未添加激素的空白培养基没有愈伤和体胚发生;在附加2,4-D的培养基中愈伤和体胚发生率为100%;5个浓度的麦草畏和水杨酸均能诱导出体胚,其中1.00mg/L麦草畏的效果最佳,体胚发生率为56.60%,水杨酸处理下体胚发生率最高为7.50%;在各种浓度的水杨酸中种胚生长量比对照小且褐化严重。说明麦草畏、水杨酸均可诱导西洋参成熟种胚体细胞胚发生,诱导能力2,4-D麦草畏水杨酸;水杨酸对种胚生长有抑制作用。