百合组织培养技术研究

以百合西伯利亚和索邦的茎尖、鳞片为试材,研究了培养基类型、激素浓度、活性炭对百合苗生长的影响。结果显示:茎尖分化的适宜培养基为MS+BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L和MS+BA1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L,诱导鳞片产生不定芽的适宜培养基为MS+BA 0.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L,西伯利亚的分化率高于索邦;百合继代增殖的适宜培养基为MS+BA 0.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L;添加活性炭可提高生根率。     

淡黄花百合丛生小鳞茎的诱导及快速繁殖

分别以淡黄花百合的鳞片、叶片、叶柄为外植体,“一步法”获得丛生小鳞茎及其再生植株,建立了淡黄花百合的快速无性繁殖体系。结果表明:鳞片为最佳外植体,MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.3 mg/L为小鳞茎最佳诱导培养基,诱导率最高达到95.0%,平均小鳞茎增殖系数最高可达8.6;叶片、叶柄最佳小鳞茎诱导培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L。     

微环境对‘青岛百合’生根的影响

以‘青岛百合’为试验材料,研究组培微环境中NAA、蔗糖、活性炭、矮壮素及光照/黑暗条件等因素对‘青岛百合’生根的影响.结果表明:蔗糖对‘青岛百合’鳞茎的膨大影响较大,添加60g/L蔗糖溶液时,鳞茎长势最好;黑暗处理或添加3g/L活性炭可创造根系生长的最佳黑暗微环境,有助于促进根原基的分化,能提前生根2～3d;2g/L矮壮素有助于鳞茎干物质含量的增加累积,提高增强组培苗抗性;1/2MS+0.1mg/L NAA+60g/L蔗糖溶液+3g/L活性炭或进行暗处理可在短时间内获得大量组培苗;1/2 MS+0.1mg/L NAA+60g/L蔗糖+2g/L矮壮素+光照培养可获得健壮的组培苗.     

正交试验法在牛蒡组织培养中的应用

应用正交设计法研究BA,NAA及蔗糖3个因子对牛蒡(Arctium lappa L.)组培苗的增殖率的影响,同时考察了NAA,BA及不同浓度的MS培养基3个因子对牛蒡组培苗生根培养的影响,各试验均按正交表L9(34)形成3因素、3水平的不同配比.试验结果表明:最佳的增殖培养基是MS+BA 2.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L+蔗糖30g/L,最适于生根的培养基是1/2MS+BA 0.1 mg/L+NAA 0.05mg/L+30g/L蔗糖.     

香水百合组织培养和快速繁殖条件的优化

以香水百合无菌试管苗小鳞茎作为外植体,从外植物体创伤、基本培养基、植物生长调节剂的配比以及培养基的物理状态等几个方面研究了百合鳞茎增殖的最优条件,并对百合组培苗的生根条件进行了优化。结果表明,一定的外植体创伤处理、氮元素含量较高的基本培养基和合适的植物生长调节剂浓度组合有利于鳞茎的增殖,香水百合鳞茎最佳增殖培养基配方为N6+0.2 mg/L NAA+2.0 mg/L 6-BA;在MS+1.5 mg/L 6-BA+0.4 mg/L NAA培养基中,液体培养的鳞茎增殖倍数极显著高于固体培养;香水百合小苗的最佳生根培养基配方为1/2MS+0.2 mg/L NAA+0.5 mg/L IBA。     

卷丹百合远缘杂交及杂种后代的鉴定

为培育抗性强、观赏性优良的卷丹百合新种质,采用液体培养基悬滴法测定3个观赏百合品种‘Black stone’‘Tresor’‘Sorbonne’ 的花粉生活力;用蕾期授粉、正常授粉、延迟授粉、切割柱头授粉方式分别与母本卷丹百合进行杂交,对获得的杂交后代进行胚珠培养及增殖扩繁,采用SSR分子标记的方法鉴定杂种的真实性。结果表明：‘Sorbonne’的花粉萌发率总体高于‘Black stone’和‘Tresor’;蕾期授粉的结实率最高,为14.44%;卷丹בBlack stone’ 组合获得蒴果数量最多,共得到了17个蒴果;对杂交蒴果进行胚珠培养,得到9株F1代杂种苗;筛选杂种苗增殖扩繁的较适培养基为MS+30 g/L蔗糖+0. 1 mg/L NAA+1 mg/L 6–BA+8 g/L琼脂;鳞茎膨大生根较适培养基为MS+80 g/L蔗糖+0.1 mg/L NAA+ 0. 05 mg/L 6–BA+0.75 g/L活性炭+6.5 g/L琼脂,最适培养环境为黑暗培养;通过4对引物鉴定证实卷丹בTresor’的2个杂种株系为真实杂种。     

百合试管小鳞茎高效再生体系的研究

以百合试管鳞茎诱导丛生芽,适宜诱导的培养基为MS+ 2.0 mg/L 6-BA+ 0.1 mg/L NAA+ 30 g/L蔗糖+5500 mg/L琼脂,光照强度1 500 ～2 000 lx.芽长至1～2 cm时,转入鳞茎分化培养基,适宜的鳞茎分化培养基为MS+1.0 mg/L NAA+ 90 g/L蔗糖+300 mg/L活性炭+5500mg/L琼脂,黑暗条件.提高培养基中的糖浓度可以提高百合再生小鳞茎的重量;在培养基中添加活性炭可提高再生小鳞茎形态的正常率.     

淡黄花百合离体快繁技术研究

采用正交试验方法,以珠芽为外植体,在MS固体培养基上研究不同浓度蔗糖、6-BA、NAA及KT对淡黄花百合芽增殖生长的影响.结果表明,芽增殖的最佳培养基为MS+ 1.5 mg/L 6-BA +0.05 ～0.10 mg/LNAA+0.2 ing/L KT+20 ～30 g/L蔗糖.     

山西野生卷丹百合鳞茎组织培养

以卷丹百合(Lilium lancifolium)鳞茎鳞片为外植体,探讨影响其分化的主要因素。正交试验结果表明,诱导卷丹百合鳞茎鳞片不定芽的最佳培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L,诱导鳞茎鳞片愈伤组织最佳培养基为MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L;继代培养中发现,小鳞茎在添加50 g/L蔗糖MS培养基中生长量最大,添加40 g/L蔗糖有利于愈伤组织生长,且小鳞茎生根率高,生根数量多。     

‘Siberia’百合再生体系的建立

以东方百合‘Siberia’离体鳞片为外植体,研究不同激素质量浓度对芽的诱导、增殖、小鳞茎形成、叶片和叶柄再生及生根的影响。结果显示:最适不定芽诱导培养基为MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.5mg/L,分化率85%;最适增殖培养基为MS+6-BA 0.7mg/L+NAA 0.2mg/L,芽增值系数为3.83;不定芽形成鳞茎的适宜培养基为:MS+6-BA 0.2mg/L+NAA 0.5mg/L+7%蔗糖,增值系数2.47。鳞片叶片的最适再生培养基为MS+6-BA 0.5mg/L+2,4-D 1.0mg/L,分化率为92.5%;叶柄的最佳再生培养基为MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.5mg/L,分化率为83.3%;暗培养对鳞片叶片及叶柄的再生无显著性的差异,分化率均在80%以上;最适生根培养基为1/2MS+NAA 0.2mg/L,生根率100%。     

亚洲百合组培快繁技术研究

研究了亚洲百合鳞片试管快繁技术。结果表明:亚洲百合诱导分化的适宜培养基为MS+BA1.0～3.0mg/L(单位下同)+NAA0.1～0.2,不定芽增殖最佳培养基为MS+BA2.0+NAA0.1,诱导生根的适宜培养基为MS+NAA0.2;同一鳞片下部的分化能力最强,上部最弱。     

索邦和西伯利亚百合的离体再生体系建立

【目的】确定索邦（Sorbonne）和西伯利亚（Siberia）百合的离体再生体系适合的诱导培养基、增 殖培养基、生根培养基以及最佳转化受体系统。【方法】选用索邦和西伯利亚百合的鳞茎球作为外植体,比较 它们在添加不同激素配比的培养基中的生长状况,得出两种百合诱导愈伤组织和不定芽、继代增殖、诱导生根 培养基和对卡那霉素敏感的最适条件。【结果】索邦百合最佳诱导培养基是 MS+2,4-D 1.5~2.0 mg/L,西伯利亚 百合最佳诱导培养基为 MS+2, 4-D 1.0~1.5 mg/L;两种百合的最佳继代增殖培养基均为 MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L：两种百合的最佳生根培养基为 1/2MS+NAA 0.2 mg/L、1/2MS+IBA 0.2 mg/L;筛选转化植株时,质量浓度为 150 mg/L 的卡那霉素足以抑制非转化细胞或细菌的生长。【结论】为东方百合品种种球工厂化生产及遗传转化再 生体系充实理论依据。     

不同菊花品种的组培扩繁技术

以盆栽菊花品种带芽茎段为外植体,以MS为基本培养基,探讨了不同的植物生长调节剂及其组合对不定芽的诱导、增殖及生根的影响.结果表明:(1)在诱导培养基MS+ 6-BA 2.0 mg/L +NAA 0.1 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂7.0 g/L的诱导下,11份菊花品种的诱导效果显著不同,‘Breeze Ivory’诱导效果最好,诱导率为91.7％; (2)‘Breeze Ivory’适宜的增殖培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L +NAA 0.1 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂7.0 g/L,增殖系数达12.1;(3)‘Breeze Ivory’适宜的生根培养基为1/2 MS+NAA 0.1 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂7.0 g/L,生根率达100％,平均每株根数为12.6;(4)‘Breeze Ivory’适宜的移栽基质为河沙,成活率可达98％.     

龙牙百合增殖培养及鳞茎生长发育研究

以龙牙百合为材料,筛选适宜的增殖培养基,并研究根块茎膨大将军和芸苔素内酯(BR)对其鳞茎膨大发育的影响。结果表明:龙牙百合丛生芽在培养基MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.25 mg/L中的增殖系数明显高于其他配方,达到7.3,地上部长势表现良好。以1/2MS+IBA 0.27 mg/L+NAA 0.3 mg/L+IAA 0.3 mg/L+6%蔗糖为基本培养基,龙牙百合丛生芽在加入1.0 ml/L BR的处理中生长最好,全株重量和鳞茎重量均最高,达到1.65 g/株和1.33 g/个,高于对照和其他处理。2.0 g/L根块茎膨大将军和1.0 mL/L BR喷施龙牙百合幼苗后,鳞茎鲜重分别为14.65 g/个和14.91 g/个,是对照的108.8%和110.7%,氨基酸含量分别是对照的108.0%和108.5%,蛋白质含量分别是对照的114.4%和113.0%。龙牙百合最适宜的增殖培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.25 mg/L,2.0 g/L根块茎膨大将军和1.0 mL/L BR喷施能提高鳞茎产量及氨基酸和蛋白质含量。     

绿花百合组培芽增殖与试管鳞茎膨大的影响因素研究

为优化绿花百合组培芽增殖与试管鳞茎膨大的条件,分析了培养基中蔗糖含量、激素浓度及其配比、硫酸腺嘌呤及水解酪蛋白对绿花百合组培芽增殖的影响,以及蔗糖含量、激素浓度及其配比对试管鳞茎膨大的影响。结果表明:在(23±1)℃和12 h/d光照培养条件下,MS培养基附加0.2 mg/L TDZ、0.2 mg/L NAA、30 mg/L硫酸腺嘌呤、200 mg/L水解酪蛋白和30 g/L蔗糖,有利于绿花百合增殖,增殖系数为5.59;适宜绿花百合鳞茎膨大的最佳培养基为MS附加0.5 mg/L 6-BA、0.3 mg/L NAA及60 g/L蔗糖。因此,蔗糖浓度及温度过高或过低均不利于绿花百合组培芽增殖,光培养下绿花百合组培芽增殖系数高于暗培养,添加适宜浓度的水解酪蛋白对不定芽的分化有良好的促进作用,并且细胞分裂素和生长素协同作用对组培芽增殖和鳞茎膨大有显著的促进作用。     

亚洲百合‘红色警报’组培快繁研究

通过对亚洲百合‘红色警报’鳞片进行组织培养,研究了不同激素浓度对外植体、不定芽分化、增殖及诱导生根的影响。结果表明:最佳启动培养基为MS+1.0mg/L6-BA+0.1mg/LNAA,分化率为76.67%;最佳增殖培养基MS+BA2.0mg/L+NAA0.5mg/L,繁殖系数3.85,苗高2.4cm,生长势强;小鳞茎在生根培养基1/2MS+0.3mg/LNAA中的生根率为94%,组培苗驯化移栽在基质草炭∶蛭石∶珍珠岩=2∶1∶1表现最佳,出苗率最高,为85%。     

水晶布兰卡百合花器官的组织培养

以水晶布兰卡百合的花器官子房、花瓣、花丝为外植体,研究不同培养基配方对水晶布兰卡百合不同花器官对小鳞茎诱导、愈伤组织分化及小鳞茎增殖的影响。试验结果表明,培养基MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L较适合于初代培养,此时子房小鳞茎的诱导率达58.3%;MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L适合于不同花器官愈伤组织的分化;MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L有利于小鳞茎的增殖。     

黄冠梨组织培养与快繁技术研究

以黄冠梨的茎段为外植体,探讨3种基本培养基(MS、AS、1/2MS)及6-BA、NAA、GA3用量对黄冠梨组织苗增殖的影响.试验结果表明:对黄冠梨组培苗增殖率的影响由大到小依次为6-0BA＞NAA＞GA3＞基本培养基;最佳的增殖培养基为MS+6-BA2.0 mg/L+NAA 0.2mg/L+GA3 0.1 mg/L,黄冠梨组培苗增殖系数可达5.1.     

植物生长调节物质及有机添加物对春兰根状茎增殖与分化的影响

以春兰‘宋梅’为试验材料,研究了植物生长调节物质及有机添加物对春兰根状茎的增殖与分化的影响,结果表明适合春兰根状茎增殖的培养基为:1/2MS+3~5 mg/L NAA+0.1 mg/L BA+10%椰子汁+30 g/L蔗糖+6.8 g/L琼脂;最适合根状茎芽分化的培养基为:1/2MS+0.5 mg/L NAA+3 mg/L BA+10%椰子汁+30 g/L蔗糖+6.8 g/L琼脂。     

韭莲组培快繁及其石蒜碱和加兰他敏积累的研究

以韭莲组培苗鳞茎为试验材料,通过正交试验筛选出最佳的小鳞茎增殖培养基:MS+6-BA O.5 mg/L+NAA 1.5 mg/L+蔗糖50 g/L.将诱导得到的小鳞茎苗转入添加了不同激素和蔗糖浓度的1/2MS培养基上,得到最适生根培养基为1/2MS+NAA 0.5 mg/L+蔗糖15 g/L,移栽成活率100%.利用RP-HPLC法测定组培苗和野生苗鳞茎中石蒜碱和加兰他敏的含量,韭莲组培苗鳞茎中石蒜碱和加兰他敏的含量分别为204.83μg/g,98.7μg/g;野生苗鳞茎中石蒜碱和加兰他敏的舍量分别为225.36 μg/g,63.72 μg/g.组培苗鳞茎中加兰他敏的含量是野生苗鳞茎的1.55倍.